白蛋白的测定

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实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41

实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41

实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)一、实验目的与要求1 了解血清白蛋白(albumin)在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。

2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。

二、实验原理在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。

最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。

三、实验仪器与试剂1 仪器(1) AT648半自动生化分析仪1台;(2)四孔恒温水浴锅1个;(3)振动摇床1台。

2 分组与仪器2人一组,每组仪器包括:(1)试管架1个;(2) 2ml试管10个;(3)可调微量加样器1个;(4) 1ml移液管1个;(5)吸耳球1个;(6)搪瓷盘1个;(7)微量加样滴头;(8)吸水纸。

3 本试剂盒内含2种试剂:(1)溴甲酚绿试剂100ml×3瓶;(2)白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。

四、实验步骤1 于一系列试管中,按下表加入各溶液:表141系列反应管中所加溶液的量空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.002 以上各管充分混匀,室温放置10min。

3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。

五、实验结果与分析A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度(g/L)=血清白蛋白(g/L)线性范围:在0~60g/L范围内线性良好。

六、实验报告参照《营养学》、《生物化学》原理分析。

七、注意事项1 试剂为空白对照;2 每组样品做2~3个平行实验;3 正常参考范围: 55~75g/L。

白蛋白测定的临床意义

白蛋白测定的临床意义

白蛋白测定的临床意义白蛋白(ALB)是存在于体内的主要蛋白质之一,对维持正常机体功能具有重要作用。

ALB测定可以为临床医生提供关于患者营养状态、肝功能、炎症反应和肾脏功能等方面的有用信息。

下面将详细介绍ALB测定的临床意义。

1.营养状态:ALB是体内最丰富的营养蛋白,其水平可以反映机体的营养状况。

营养不良、消瘦、肌肉萎缩、低蛋白血症等情况会导致ALB水平下降。

因此,ALB测定可以用于评估患者的营养状态,及时发现和处理营养不良,指导合理的营养支持治疗。

2.肝功能:肝脏是合成和分解ALB的主要器官,肝功能异常会导致ALB水平的变化。

肝炎、肝硬化、肝癌等疾病都可能引起肝功能受损,从而导致ALB水平下降。

因此,ALB的测定可以作为评估肝功能的重要指标之一,可以帮助医生判断肝脏是否正常工作,并指导相应的治疗。

3.炎症反应:炎症状态会引起ALB的合成减少和分解增加,从而导致ALB水平下降。

因此,ALB水平的变化可以反映患者是否存在炎症反应,且与炎症的程度相关。

临床上,ALB常用于评估炎症性疾病的严重程度,例如感染、风湿性疾病、急性胰腺炎等,也可以用于判断疾病的预后。

此外,ALB的降低还与体内的白细胞介素-6和肿瘤坏死因子等炎症介质的水平升高相关。

4.肾脏功能:肾脏是清除和排泄ALB的重要器官,肾功能损害会导致ALB的丢失增加,从而引起低蛋白血症和水肿等临床表现。

因此,ALB测定可以用于评估肾脏功能的损害程度。

尤其在肾病患者中,ALB的测定可以作为评估肾小球滤过率的指标之一,帮助医生判断疾病的严重程度和治疗方案的选择。

总结起来,ALB的测定在临床上具有重要的意义。

它可以用于评估患者的营养状态、肝功能、炎症反应和肾脏功能等方面,有助于医生制定合理的治疗方案并预测疾病的预后。

临床医生在正确定义和解释ALB水平时,一定要结合患者的临床症状和其他相关检查结果进行综合分析,以避免误诊和漏诊。

血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清白蛋白测定(缩写ALB);组合项目申请:血生化中肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2。

1标本采集2。

1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2。

1。

2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2。

1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2。

1。

5下列标本为不合格标本2。

1。

5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0。

1ml的血清或血浆。

2。

1。

5。

2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2。

1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.2。

1。

5。

4其他如标识涂改、标本试管破裂等.2。

2标本保存2.2。

1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定一周,普通冰箱中(2~8℃)稳定一个月。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.3标本采集的注意事项2.3。

1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2。

3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物,溶液由黄色变为绿色,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。

PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品.4。

2试剂盒保存:保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。

开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。

变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用.4.3试剂盒准备:液态单试剂型,即开即用,无特殊准备4.4试剂盒主要成分:缓冲液(pH 4.2)50 mmol/L,溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂<0.1%。

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白,其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。

以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。

一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括:白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。

2. 仪器包括:分光光度计、细管离心机等。

二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。

2. 血样采集后,立即置于无菌离心管中,以4,000转/分钟离心10分钟,将血浆分离。

3. 将血浆分装在无菌离心管中,分别标注,冷藏保存。

三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀,按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算,避免过量使用试剂。

2. 准备好所需标准品的稀释液,按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。

四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。

2. 试剂和样本准备:a. 在试验前半小时,将试剂和样本从冰箱中取出,适应室温。

b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀,避免生成气泡。

3. 试剂预热:取足够的试剂和样本,在试剂的使用温度下预热15分钟。

4. 光度计的调整:a. 打开分光光度计,选择合适的检测波长,适用于试剂盒中所使用的测量波长。

b. 将白色比色杯放入试槽中,调零,使显示屏上的光吸收值为0。

5. 基线测定:a. 将预热的白色比色杯置于试槽中,按下基线的按钮,待显示屏上的光吸收值稳定后,即可进行下一步操作。

b. 注意每次操作前都要进行基线测定,确保测量结果的准确性。

6. 样本和标准品的检测:a. 在预热的白色比色杯中,加入1.0mL的试剂,再加入0.01mL的样本,立即搅拌均匀。

b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。

c. 重复上述步骤,测量标准品的吸光度值,并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。

7. 结果的记录计算:a. 将吸光度值记录在结果表格中。

b. 根据标准曲线的结果,计算样本中的白蛋白浓度。

测定白蛋白的方法有哪些

测定白蛋白的方法有哪些

测定白蛋白的方法有哪些测定白蛋白的方法多种多样,可以根据具体实验要求和条件选择合适的方法。

下面将介绍几种常见的测定白蛋白的方法。

一、比色法。

比色法是一种常用的测定白蛋白含量的方法。

通过在特定条件下,白蛋白与某些试剂发生显色反应,利用光度计测定溶液的吸光度,从而计算出白蛋白的含量。

常用的试剂有比溴酚蓝、铜离子等。

比色法操作简便,准确性高,是实验室常用的测定方法之一。

二、免疫测定法。

免疫测定法是利用抗体与抗原特异性结合的原理,通过测定免疫反应产物的数量来确定白蛋白的含量。

常用的免疫测定方法有酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)等。

免疫测定法具有高灵敏度、高特异性和高准确性的特点,适用于测定白蛋白含量较低的样品。

三、电泳法。

电泳法是利用蛋白质在电场作用下的迁移速度差异来分离和测定蛋白质的含量。

常用的电泳方法有聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶双向电泳(2D-PAGE)等。

电泳法可以直接观察到蛋白质的分离情况,适用于复杂样品的分析。

四、质谱法。

质谱法是利用质谱仪对蛋白质进行分析和测定的方法。

常用的质谱方法有质谱联用技术(LC-MS)、气相色谱质谱联用技术(GC-MS)等。

质谱法具有高灵敏度和高分辨率的特点,可以用于测定蛋白质的分子量和结构。

五、光散射法。

光散射法是利用蛋白质溶液对光的散射特性来测定蛋白质的含量和分子量的方法。

通过测定散射光的强度和角度来计算蛋白质的含量和分子量。

光散射法操作简便,适用于测定大分子蛋白质的含量。

综上所述,测定白蛋白的方法有比色法、免疫测定法、电泳法、质谱法和光散射法等多种多样。

在实际应用中,可以根据实验要求和条件选择合适的方法进行测定。

希望以上内容对您有所帮助。

白蛋白吸光度标准值

白蛋白吸光度标准值

白蛋白吸光度标准值一、引言白蛋白是人体血浆中最主要的蛋白质,具有维持血浆渗透压、运输营养物质、清除代谢废物等重要生理功能。

白蛋白的吸光度标准值在临床诊断和实验室检查中具有重要的参考价值。

本文将围绕白蛋白吸光度标准值展开探讨,以期为相关领域提供理论和实践指导。

二、白蛋白吸光度标准值的建立白蛋白的吸光度标准值是通过一系列实验测定得出的,具体步骤如下:1.样本收集:采集健康人群或特定疾病患者的血浆样本,确保样本质量和数量满足实验要求。

2.样本处理:对血浆样本进行预处理,如去除红细胞、离心分离等,以获得清澈的血浆液。

3.吸光度测量:将处理后的血浆液与特定波长的光源进行比色,测量其吸光度值。

通常选用500nm、540nm、570nm等波长进行测定。

4.标准曲线制备:采用已知浓度的白蛋白标准品,制备一系列不同浓度的标准品溶液,测定各浓度的吸光度值,绘制标准曲线。

5.样本分析:将血浆样本的吸光度值代入标准曲线,计算样本中白蛋白的浓度。

为了保证准确性,需进行多次测量求平均值。

6.结果报告:根据实验数据,整理并报告每份血浆样本的白蛋白吸光度标准值。

在建立白蛋白吸光度标准值的过程中,需注意以下几点:1.确保实验操作规范,避免误差的产生。

2.选择适宜的光源和波长,以提高测量的准确性。

3.对标准品和样本进行质量检查,确保无杂质干扰。

4.进行重复测量,以提高结果的可靠性。

三、白蛋白吸光度标准值的影响因素在实际操作中,白蛋白吸光度标准值可能受到多种因素的影响,主要包括以下几个方面:1.光源和波长:不同波长的光源对白蛋白的吸光度值有不同影响。

此外,光源的稳定性也会影响测量结果的准确性。

因此,需选择合适的光源和波长进行测量。

2.样本质量:血浆样本中若有溶血、脂血、黄疸等情况,会对白蛋白的吸光度值产生干扰。

因此,需对样本进行预处理,以去除杂质和干扰因素。

四、白蛋白吸光度标准值在临床实践中的应用白蛋白吸光度标准值在临床实践中具有重要的应用价值,主要体现在以下几个方面:1. 诊断肝脏疾病:白蛋白由肝脏合成,当肝脏受损或病变时,白蛋白的合成能力会降低,血浆中白蛋白的浓度也随之降低。

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

溴甲酚绿法测定血清白蛋白溴甲酚绿法是一种常用的测定血清白蛋白含量的方法,其原理是利用溴甲酚绿与白蛋白混合后的光度变化来测定血清白蛋白的含量。

下面将详细介绍溴甲酚绿法测定血清白蛋白的具体操作过程。

实验原理血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成复合物,形成的复合物的光学密度与白蛋白的含量呈正相关。

测定方法如下:步骤一:准备溴甲酚绿溶液将溴甲酚绿加入缓冲液中,制备浓度为0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液。

步骤二:制备标准工作液将0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液和1%的牛血清白蛋白溶液以1:5的比例混合,制备出浓度为0.002mg/mL的标准工作液。

步骤三:制备比色管取6mm x 100mm的试管,标出标准液和待测液的填充线,分别用吸管将标准液和待测液分别加入比色管中。

步骤四:光度测定将加入标准液和待测液的比色管分别放入分光光度计中,设置波长为628nm,测定各试管的吸光度值(OD值)。

步骤五:计算白蛋白含量比较标准工作液和待测液的吸光度值,根据标准曲线计算出待测液中白蛋白的含量。

实验要点1、比色管的选择:使用6mm x 100mm的试管即可。

3、比色管中待测液的加入:待测液的加入应加到标记线上方。

4、比色管中标准液和待测液的混合:比色管中标准液和待测液的混合应该彻底,避免混合不均导致误差。

5、波长的设置:溴甲酚绿法测定血清白蛋白的波长一般定在628nm。

实验注意事项1、实验过程中要保持实验环境的清洁和卫生,保证实验的准确性。

2、所有实验仪器和试剂必须在实验前检查是否正常。

3、实验过程中要严格按照实验步骤进行,保证结果的准确性。

4、实验结束后要保持实验环境整洁,清洁仪器和试管。

总结溴甲酚绿法是一种简单、快速、准确的血清白蛋白含量测定方法。

通过以上步骤,我们可以很容易地进行血清白蛋白含量的测定。

在实验过程中,需要注意实验细节和准确性,保障实验结果的准确性。

白蛋白检测操作程序

白蛋白检测操作程序

白蛋白检测操作程序白蛋白(albumin ,ALB )是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。

溶于水和中性盐,易与阴离子染料结合,故本试验采用溴甲酚绿(阴离子染料)法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊,降低空白吸光度。

主要用于肝、肾等疾病的诊断。

实验原理在pH4.2条件下,白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值,即可求得样本中白蛋白的浓度。

试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒(由上海复兴长征医学科学有限公司提供)化学组成:溴甲酚绿0.35mmol/L 丁二酸缓冲液50mmol/L工作参数:在开展项目之前或更换试剂品牌时,将以上工作参数输入到仪器内,并按要求进行调整后,方可进行实验。

技术性能指标:试剂空白起始吸光度(630nm37℃)≤0.20A 。

线性范围:50g/L ±10%。

准确度:相对偏差(RE%)≤±10%。

精密度:批内精密度变异系数(CV%)≤5%;批间精密度相对极差(%)≤5%。

储存条件、有效期:储存于2~25℃,避光可稳定18个月。

以蒸馏水为空白在630nm 处光吸收值高于0.3A时,则不能使用。

计算公式: 白蛋白深度(g/L )= ×校准液浓度(g/L )样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式,全自动分析时将校准液浓度值(Conc值)输入仪器即可。

1.2. 英国郎道(RANDOX)质控品,每次采用正常和异常两个水平,并参照质控品测试要求进行。

1.3. 校准液2. 仪器采用日立(HITACHI)7060型全自动生化分析仪。

选择波长340-800nm之间,能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。

标本测定程序1. 开机:开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。

然后打开电源及中文计算机信息管理系统。

2. 试剂准备:开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。

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按下表操作: 0 1 2 —— 0.20 5.0 3 —— 0.20 5.0 4 —— 0.20 5.0
生理盐水(ml) 生理盐水(ml) 0.20 —— 上述1~4管标 上述1~4管标 —— 0.20 准稀释液(ml) 准稀释液(ml) BCG应用液 BCG应用液 (ml) 5.0 5.0
实验试剂
1.溴甲酚绿(BCG)贮存液 1.溴甲酚绿(BCG)贮存液 取BCG 419mg,用10ml 419mg,用10ml 0.1mol/L NaOH溶解,加NaN3 100mg ,定容至1000mL。 NaOH溶解,加NaN3 ,定容至1000mL。 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 溶解。 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH 4.2)分别配制0.1mol/L柠 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH 4.2)分别配制0.1mol/L柠 檬酸和柠檬酸钠溶液,然后按12.3:7.7的体积比例混合。 檬酸和柠檬酸钠溶液,然后按12.3:7.7的体积比例混合。 每1000ml混合液加入NaN3 100mg。 1000ml混合液加入NaN3 100mg。 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 取Brij-35 30g,加 Brij- 30g,加 少量水,60℃水浴溶解,加水至100ml(此可用Tween少量水,60℃水浴溶解,加水至100ml(此可用Tween-20 或Tween-80代替)。 Tween-80代替) 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml,0.1mol/L柠檬酸缓冲液 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml,0.1mol/L柠檬酸缓冲液 (pH4.2)750ml,30%Brij-35 8ml(也可以用Tween-20 8ml pH4.2)750ml,30%Brij- 8ml(也可以用Tween或Tween-80 10ml代替)混合而成。 Tween- 10ml代替)混合而成。 5.标准蛋白溶液(10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g,用生 5.标准蛋白溶液(10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g,用生 理盐水
3.白蛋白/球蛋白比值(A/G比值) 用双缩脲法测定血清标本中的总蛋白浓度,用总蛋白浓度减去白蛋白浓度 即得球蛋白浓度,并可求的A/G比值:
A/G比值 比值= ————————————— 比值
白蛋白含量
总蛋白含量---白蛋白含量 总蛋白含量 白蛋白含量 参考值: 参考值:35~50g/L
【临床意义】 临床意义】 1.血清白蛋白浓度增高,常见于严生脱水所致的血浆浓 缩 2.血清白蛋白浓度降低 在临床上比较重要和常见,通 常与总蛋白降低的原因大致相同。急性降低主要见于大出 血和严重的烧伤;慢性降低见于肾病蛋白尿,肝功能损伤, 肠道肿瘤及结核病伴慢性出血,营养不良和恶性肿瘤等。 血清白蛋白低于20g/L。临床上出现水肿。 血清白蛋白低于20g/L。临床上出现水肿。 20g/L 3.A/G 某些病人可同时出现白蛋白减少和球蛋白升高的 现象,严重者比值可<1。这种情况称为A/G比值倒置。 现象,严重者比值可<1。这种情况称为A/G比值倒置。 4.文献报道还有极少见的因白蛋白合成障碍,血清中几 乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏症。
实验八
溴甲酚绿法测定血清白蛋白
【目的要求】 目的要求】 1.溴甲酚绿法测定血清 1.溴甲酚绿法测定血清 白蛋白含量的实验原 理、关键技术和特点 意义。 2.熟悉稳定性试验的基 2.熟悉稳定性试验的基 本操作及意义
【实验原理】 实验原理】 血清白蛋白在PH4.2的缓冲液中带正电荷, 血清白蛋白在PH4.2的缓冲液中带正电荷, 在有非离子型表面活性剂存在时,可与带 负电荷的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成蓝 负电荷的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成蓝 绿色复合物,在波长630纳米处有光吸收峰, 绿色复合物,在波长630纳米处有光吸收峰, 其颜色的深浅与白蛋白浓度成正比,与同 样处理的白蛋白标准比较,可求得血清白 蛋白含量。
混合后以空白管校零,立即比色,比色波长为 620nm,以光密度为纵坐标,相应管中的白蛋白 620nm,以光密度为纵坐标,相应管中的白蛋白 浓度为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。
2. 血清白蛋白测定 用生理盐水按1:10的比例稀释血清,取稀释后的血清0.2ml 加入BCG应用液 5.0ml混匀后立即同上比色,读取光密度,并从标注曲线上 查出相应的白蛋白 浓度。
实验操作
1.白蛋白标准曲线绘制 1.白蛋白标准曲线绘制 取4支试管,按下表稀释标准液: 1 白蛋白标准液 (ml) 生理盐水(ml) 生理盐水(ml) 0.10 0.90 2 0.20 0.80 2.0 3 0.40 0.60 4.0 4 0.60 0.40 6.0
稀释后白蛋白 1.0 含量(mg/ml) 含量(mg/ml)
【方法评价】 方法评价】 1.本法操作简便、快速、胆红素、溶血和中度脂 血无干扰,既可手工操作,也能自动化分析,是 目前国内测定血清白蛋白的最常用方法。 2.本法线性范围10-60g/L,RCV<4%。但该法 .本法线性范围10-60g/L,RCV<4%。但该法 与溴甲酚紫法比较,对血清白蛋白特异性稍差。 3.血清白蛋白测定法主要有色氨酸含量法、染料 结合法、电泳法、免疫化学法和电化学测定法。
【注意事项】 注意事项】 1.BCG是一种PH指示剂,变色域为PH3.8(显黄色)~5.4 BCG是一种PH指示剂,变色域为PH3.8(显黄色)~5.4 (显蓝绿色),因此控制反应液的PH是本法测定的关键。 (显蓝绿色),因此控制反应液的PH是本法测定的关键。 2.配制BCG试剂也可用其他缓冲液如枸椽酸盐或乳酸盐缓冲 .配制BCG试剂也可用其他缓冲液如枸椽酸盐或乳酸盐缓冲 液。但以琥珀酸缓冲液的校正曲线通过原点,线性好,灵敏 度高,成为首选推荐配方。 3.试剂中的Brij-35也可用其他表面活性剂代替,如吐温20或 .试剂中的Brij-35也可用其他表面活性剂代替,如吐温20或 吐温80,终浓度为2ml,灵敏度和线性范围不变。 吐温80,终浓度为2ml,灵敏度和线性范围不变。 4.当白蛋白标准与BCG结合后,溶液光径1,在630处测定的 .当白蛋白标准与BCG结合后,溶液光径1,在630处测定的 吸光度应为0.811±0.035,如达不到此值,表示灵敏度较差。 吸光度应为0.811±0.035,如达不到此值,表示灵敏度较差。 5.蛋白质标准液是一个复杂的问题,实验证明,BCG不但与 .蛋白质标准液是一个复杂的问题,实验证明,BCG不但与 白蛋白呈色,而且与血清中多种蛋白质成分呈色,其中以球 蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著,其反应速度较白蛋 白稍慢。由于30S内呈色对白蛋白特异,故BCG与血清混合后, 白稍慢。由于30S内呈色对白蛋白特异,故BCG与血清混合后, 在30S内读取吸光度,可明显减少非特异性呈色反应。为了减 30S内读取吸光度,可明显减少非特异性呈色反应。为了减 少本法基质效应的影响,最好用参考血清作标准。
【思考题】 思考题】 1.BCG法测定ALB的技术关键是什么?应 BCG法测定ALB的技术关键是什么?应 如何解决非特异性反应的问题。 2.简述稳定性实验的作法及意义。
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