白蛋白测定试剂盒(溴甲酚绿法)产品技术要求jiuqiang
参考区间确定资料
第二类体外诊断试剂产品注册资料白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）参考区间确定资料XXXXXX有限公司一、参考依据依据NCCLS C28-A2 如何确定临床检验的参考区间：批准指南（2000）文件。
该文件是确定定量临床检验项目的参考区间的指南。
二、材料与方法1．标本来源按健康人群要求选择XXXXXXXXX医院健康体检者，收取该医院检验科检测已完成的临床样本。
样本采集/检验时间：XXXX.XX。
对象：在XX地区居住的性别不限、年龄不限的健康人。
健康人的要求：（1）一月内无急性感染史；（2）发育正常，无心血管、肺、肾和肝、胆、胰等器质性疾患；（3）半年内无输血和大手术史；（4）3月内未服用影响凝血功能的药物，2周内无中毒史，未接触毒物及其他有害物质；（5）妇女不在妊娠或哺乳期。
2．使用仪器HITACHI 7020全自动生化仪。
3．检测试剂XXXXXX有限公司生产的白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）。
规格：XXmL；批号：XXXXXX；生产日期：XXXXXXXX；有效期XXXXXXXX。
4. 质量控制按照技术要求3.1、3.3~3.6.1、3.7进行产品性能的测定，结果应符合要求。
5. 参考值确定根据项目制定双侧界限或单测界限，采用95％参考区间范围。
6．统计方法应用SPSS20进行数据统计分析。
正态性检验采用Kolmogorov–Smirnov(K-S) 检验。
结果属于正态分布的，用正态分布法计算参考区间范围，其95％参考区间范围分别用下式计算：双侧：SD.1X96单测下限：SD.1＋X64－单测上限：SD.1X64结果属于偏态分布的，用百分位法计算参考区间范围，其95％参考区间范围分别用下式计算：双侧：P2.5～P97.5单测下限：P5单侧上限：P95三、试验结果用白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）对收集到的标本进行测定，测定结果呈正态分布（见图1）。
95%参考区间用公式求出，得出了本试剂盒测定ALB的参考值范围上下限，见表1。
溴甲酚绿法测定血清白蛋白
溴甲酚绿法测定血清白蛋白溴甲酚绿法是一种常用的测定血清白蛋白含量的方法，其原理是利用溴甲酚绿与白蛋白混合后的光度变化来测定血清白蛋白的含量。
下面将详细介绍溴甲酚绿法测定血清白蛋白的具体操作过程。
实验原理血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成复合物，形成的复合物的光学密度与白蛋白的含量呈正相关。
测定方法如下：步骤一：准备溴甲酚绿溶液将溴甲酚绿加入缓冲液中，制备浓度为0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液。
步骤二：制备标准工作液将0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液和1%的牛血清白蛋白溶液以1:5的比例混合，制备出浓度为0.002mg/mL的标准工作液。
步骤三：制备比色管取6mm x 100mm的试管，标出标准液和待测液的填充线，分别用吸管将标准液和待测液分别加入比色管中。
步骤四：光度测定将加入标准液和待测液的比色管分别放入分光光度计中，设置波长为628nm，测定各试管的吸光度值（OD值）。
步骤五：计算白蛋白含量比较标准工作液和待测液的吸光度值，根据标准曲线计算出待测液中白蛋白的含量。
实验要点1、比色管的选择：使用6mm x 100mm的试管即可。
3、比色管中待测液的加入：待测液的加入应加到标记线上方。
4、比色管中标准液和待测液的混合：比色管中标准液和待测液的混合应该彻底，避免混合不均导致误差。
5、波长的设置：溴甲酚绿法测定血清白蛋白的波长一般定在628nm。
实验注意事项1、实验过程中要保持实验环境的清洁和卫生，保证实验的准确性。
2、所有实验仪器和试剂必须在实验前检查是否正常。
3、实验过程中要严格按照实验步骤进行，保证结果的准确性。
4、实验结束后要保持实验环境整洁，清洁仪器和试管。
总结溴甲酚绿法是一种简单、快速、准确的血清白蛋白含量测定方法。
通过以上步骤，我们可以很容易地进行血清白蛋白含量的测定。
在实验过程中，需要注意实验细节和准确性，保障实验结果的准确性。
ALB方法学验证
方法学验证报告
检验项目：白蛋白(ALB)检测试剂盒(溴甲酚绿比色法)
仪器型号： AU400
仪器序号： 9125373 协助单位：北京世纪沃德生物科技有限公司
验证人：冯红霞、郭丽梅
验证时间： 2014-4
一、基本参数
主波长：570nm 测定方法：终点法
测定温度：37℃测试时间：10分钟
反应方向：向上试剂样品比：100 ：1
二、实验中选用的质控品校准品
三、检测结果
规格：R: 1×100mL 仪器：奥林巴斯AU400全自动生化仪批次1
批次3
四、结论
1、通过测定准确度结果均在给定的范围内。
2、高值标本倍比稀释后测定值与理论值进行线性回归，试剂线性良好，且测定值与理论值接近。
3、批内变异要求小于5％，本实验中结果完全达到要求。
实验结果表明，本公司研制的ALB 测定试剂盒准确性、分析灵敏度、空白、线性范围、批内精密性、批间差均达到标准要求。
白蛋白测定试剂盒(溴甲酚绿法)产品技术要求lepu
白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）
适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中白蛋白的含量。
1. 产品型号/规格及其划分说明
1.1 规格
1×60mL；4×60mL；6×60mL；2×45mL；1×5L；1×20L。
1.2 主要组成成分
2.1 净含量
应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观
试剂：为浅绿色或深绿色液体。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白
在570nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.5。
2.4 分析灵敏度
测试40g/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.05。
2.5 准确度
测定参考物质（GBW（E）090619），相对偏差应不大于6.0%。
2.6 重复性
重复测试控制血清，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于2.0％。
2.7 线性
2.7.1在[10.0，60.0]g/L区间内，线性相关系数|r|应不小于0.990；
2.7.2 [10.0，20.0]g/L区间内，线性偏差应在±4.0g/L范围内；[20.1，60.0]g/L 区间内，线性偏差应不超过±10.0%。
2.8 批间差
测试浓度在（40±5）g/L的控制血清，批间相对极差应不大于5.0％。
2.9 稳定性
取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)简介：总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。
检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。
Leagene 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple ，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm 处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。
本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 离心管、小试管2、 比色杯3、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml 的白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解白蛋白标准品的稀释液。
2、 样本处理：血清、血浆样本直接取检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比例，加入生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。
编号 名称TC0567 100T Storage试剂(A): BCP 试剂 200ml 4℃ 避光试剂(B): 白蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 白蛋白标准配制液 100mlRT使用说明书1份3、白蛋白加样操作，按下表依次加入试剂：加入物(ml) 空白管标准管待测管白蛋白标准配制液0.01 −−白蛋白标准溶液(40mg/ml) −0.01 −待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) −−0.01BCP试剂 2.0 2.0 2.04、比色杯光径，先在分光光度计以空白管调零，逐管加入BCP试剂，并立即混匀。
白蛋白检测操作程序
白蛋白检测操作程序白蛋白（albumin ，ALB ）是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。
溶于水和中性盐，易与阴离子染料结合，故本试验采用溴甲酚绿（阴离子染料）法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊，降低空白吸光度。
主要用于肝、肾等疾病的诊断。
实验原理在pH4.2条件下，白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值，即可求得样本中白蛋白的浓度。
试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒（由上海复兴长征医学科学有限公司提供）化学组成：溴甲酚绿0.35mmol/L 丁二酸缓冲液50mmol/L工作参数：在开展项目之前或更换试剂品牌时，将以上工作参数输入到仪器内，并按要求进行调整后，方可进行实验。
技术性能指标:试剂空白起始吸光度（630nm37℃）≤0.20A 。
线性范围：50g/L ±10%。
准确度：相对偏差(RE%)≤±10%。
精密度：批内精密度变异系数(CV%)≤5%；批间精密度相对极差(%)≤5%。
储存条件、有效期：储存于2～25℃，避光可稳定18个月。
以蒸馏水为空白在630nm 处光吸收值高于0.3A时，则不能使用。
计算公式： 白蛋白深度(g/L )= ×校准液浓度(g/L )样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式，全自动分析时将校准液浓度值（Conc值）输入仪器即可。
1.2. 英国郎道（RANDOX）质控品，每次采用正常和异常两个水平，并参照质控品测试要求进行。
1.3. 校准液2. 仪器采用日立（HITACHI）7060型全自动生化分析仪。
选择波长340-800nm之间，能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。
标本测定程序1. 开机：开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。
然后打开电源及中文计算机信息管理系统。
2. 试剂准备：开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。
白蛋白测定试剂盒(溴甲酚绿法)产品技术要求senmeixikema
白蛋白测定试剂盒(溴甲酚绿法)适用范围：用于体外定量检测人血清中白蛋白的浓度。
1.1规格a)2×100ml；b)3×60ml；c)3×400ml；d)4×45ml；e)4×50ml；f)4×60ml；g)4×80ml；h)5×60ml；i)10×60ml；j)12×24ml；k)12×65ml；l)1×40ml；m)2×40ml；n)3×50ml；o)1×50ml。
1.2 组成试剂主要组分见表1：表1 试剂主要组分2.1 外观外包装完整无破损，标签清晰；试剂应为黄绿色澄清液体。
2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白在630nm处测定试剂空白吸光度，应≤0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度为40g/L的样品，吸光度变化（△A）应不低于0.25。
2.5 线性2.5.1在[5，65]g/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；2.5.2测试浓度[20，65]g/L的样品，相对偏差应不超过±10%；测试浓度[5，20)g/L的样品，绝对偏差应不超过±3g/L。
2.6 重复性2.6.1 批内重复性变异系数(CV)应不超过2.0%。
2.6.2 批间差对同一份样品进行重复测定，相对极差(R)应不超过5.0%。
2.7 准确度用国家标准物质对试剂盒进行测试，测定值与标准物质标示值的相对偏差应不超过±6.0%。
2.8 稳定性原包装试剂在2℃～8℃条件下有效期为18个月，取到效期后6个月内的试剂盒检测，应符合本技术要求2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。
实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41
实验十四血清白蛋白测定（溴甲酚绿法）一、实验目的与要求1 了解血清白蛋白（albumin）在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理在具有表面活性剂的酸性环境中，血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合，形成绿色。
最高吸收峰628nm，颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。
三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2）四孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组与仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3）可调微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5）吸耳球1个；（6）搪瓷盘1个；（7）微量加样滴头；（8）吸水纸。
3 本试剂盒内含2种试剂：（1）溴甲酚绿试剂100ml×3瓶；（2）白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。
四、实验步骤1 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表141系列反应管中所加溶液的量空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.002 以上各管充分混匀,室温放置10min。
3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。
五、实验结果与分析A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度（g/L）＝血清白蛋白（g/L）线性范围：在0~60g/L范围内线性良好。
六、实验报告参照《营养学》、《生物化学》原理分析。
七、注意事项1 试剂为空白对照；2 每组样品做2～3个平行实验；3 正常参考范围： 55～75g/L。
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白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）
适用范围：用于体外定量测定人血清中的白蛋白含量。
1.1 包装规格
包装规格见表1。
表1 包装规格
1.2 主要组成成分
主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分
2.1 外观
试剂为黄绿色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量
试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度
试剂空白：A600nm（主）/A700nm（副）下测定空白吸光度应≤0.5000。
2.4 准确度
用国际参考物质ERM-DA470K/IFCC，对试剂盒进行测试，其测量结果的相对偏差应不大于6.0%。
2.5 分析灵敏度
样本浓度为40.0g/L时，其吸光度变化在0.6900～1.6600之间。
2.6 线性区间
测试血清样本，试剂线性在[2.0，60.0]g/L区间内：
a）线性相关系数| r |应不小于0.990；
b） [2.0，20.0]g/L区间内，线性绝对偏差应在±2.0 g/L范围内；
(20.0，60.0]g/L区间内，线性相对偏差应不超过±10.0%。
2.7 测量精密度
2.7.1 重复性
重复测试浓度在(40±5）g/L的血清样本或质控品，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于2.0%。
2.7.2 批间差
测试浓度在(40±5）g/L的血清样本或质控品，批间相对极差（R）应不大于5.0%。
2.8 稳定性
试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为18个月。
取到效期后的试剂盒检测外观、准确度、线性区间应符合2.1、2.4、2.6的要求。