大肠菌群检测(MPN法)
大肠菌群检测(MPN法)
大肠菌群检测(MPN法)大肠菌群检测(MPN法)是一种常用的微生物学技术，可用于检测土壤、水源、食品等中的大肠菌群进行水质和食品安全监测。
本文将介绍大肠菌群及其检测方法-最可能数法(MPN法)。
一、大肠菌群概述大肠菌群是以肠道菌属为主体的一类细菌，包括肠道埃希菌、沙门氏菌、志贺菌、伤寒杆菌等成员，它们可以在人类和动物的肠道中生存并繁殖。
在自然界中，大肠菌群也是广泛存在的微生物家族，如彗星菌、副肠杆菌、耶尔森氏菌等都属于大肠菌群。
1.菌落计数法该方法主要是利用琼脂平板培养皿在水培的条件下，大肠菌群在培养基上经不同时间的生长，形成菌落来进行菌数计数。
缺点是容易受到其他微生物的干扰，只能算出概略的数值，一定误差，没有国家标准。
2. 硝酸德钠试剂法将测样加硝酸德阳试剂进行加热，最终乳黄色的镜检测前进行比色，得出含大肠菌群的细菌群落达标后延迟显色的时间。
该方法已被最可能数(MPN)法所替代。
3. 最可能数法(MPN法)该方法先将测量的样品分别稀释到不同浓度下，再将每一份稀释液添加到以琼脂平板固化培养基为基础的不同培养液中，观察哪一份培养液出现大肠菌群的生长，最后通过MPN表格计算每85ml或100ml的水样中最可能含有的大肠菌群数量，计算公式为：10^x = n / 联合效价（即dilution rate的倒数）其中，x代表最可能数，n代表测量到大肠菌群的样品数。
在实际工作中，MPN法检测显示出了较好的结果，优点是用固定方法，可重复性好，而且可以通过相关将分析获得定量值，便于与相关的标准进行比较。
三、大肠菌群的检测范围1. 水源：大肠菌群检测是办公室里检测饮用水可能携带的最佳方法。
一般情况下，检测过程是检测水中的微生物是否合乎标准。
2.食品：由于食品生产经常存在卫生要求，因此食品也是大肠菌群检测重要的一环。
例如，必须检测火腿或肉类制品中的大肠菌群是否合格以确保食品安全。
3. 其他领域：大肠菌群检测可以用于医学、农业、环境和建筑等领域，如医院污水浑浊度的检测和土壤中大肠菌群的检测。
mpn法检测大肠菌群的原理
mpn法检测大肠菌群的原理1. 什么是MPN法？大家好，今天咱们聊聊MPN法，也就是最可能数法，这可是检测水中大肠菌群的“神器”呢！MPN法的英文全名是“Most Probable Number”，翻译过来就是“最可能数”。
听起来是不是很神秘？其实它就是一种通过统计学的方法来估算水里大肠菌群的数量，通俗点说，就是看水中藏着多少小“坏蛋”。
首先，MPN法听起来有点复杂，其实它的工作原理还挺简单的。
咱们可以把它理解成一种通过“打样”的方法来找出水中的大肠菌群到底有多少。
这就好比我们去商场逛街，看到一件漂亮的衣服，试穿了几件差不多款式的，最终决定了买哪一件。
MPN法也是这样，它通过一系列的实验，来估算大肠菌群的数量。
要知道，大肠菌群这家伙可是影响水质的重要因素，所以咱们得好好了解一下它们的情况。
2. MPN法的基本步骤2.1 采样和稀释说到MPN法，首先要做的就是采样。
就像咱们去商场挑衣服一样，第一步是挑选你想要的样品。
这里咱们的样品是水，特别是那些咱们平时喝的水，或者用来洗菜、做饭的水。
这些水可得小心处理，不然大肠菌群的数量会被弄得不准确。
采样之后，我们需要把水样进行稀释。
稀释的目的是为了减少水中大肠菌群的浓度，使得后续的实验更容易操作。
这个过程就像是调配饮料时，加水稀释一样。
稀释得越多，水样中的细菌浓度就越低。
这样做是为了确保在实验时，能准确地找出大肠菌群的数量。
2.2 培养和观察接下来，我们把稀释后的水样放到培养基里去培养。
培养基是一种特殊的营养液，可以让细菌在里面繁殖。
就像给植物提供土壤一样，培养基给细菌提供了生长的环境。
这个过程需要一点时间，一般来说，细菌在培养基里待24到48小时，就可以看到结果了。
观察结果的时候，我们需要注意培养基的变化。
如果水样中有大肠菌群，它们会在培养基中产生一些气体或者改变颜色，这就像是植物长出了新芽一样。
通过观察这些变化，我们可以判断水样中是否有大肠菌群存在。
如果培养基的颜色发生了变化，那就意味着水中有大肠菌群，咱们可以进一步计算它们的数量。
MPN大肠菌群大肠杆菌原理
MPN大肠菌群大肠杆菌原理MPN的全称是Most Probable Number，即最有可能数目。
MPN是一种用于测定微生物数量的方法。
在微生物学中，常常需要知道一个环境样品中微生物的数量，这对于病原微生物的检测、食品与饮用水质量的检验等具有重要意义。
MPN方法的原理基于一种统计学的原则，即当样品中存在微生物时，根据样本连续稀释后的阳性结果的比率可以估算样品中微生物的数量。
首先，将样品连续稀释，然后分别将稀释液接种到不同的培养基中，根据不同培养基的阳性结果来估算微生物数量。
大肠菌群是人类消化系统中的一类细菌。
它们主要分布在人体肠道的大肠中，经常与人体共生共存。
通常情况下，大肠细菌对人体有很多益处，如帮助消化食物、合成维生素等。
然而，有些大肠细菌可能是致病菌，会导致人体感染。
因此，对大肠菌群的检测对于维护人体健康具有重要意义。
大肠杆菌（Escherichia coli）是大肠菌群中的一种细菌，是最常见的肠道细菌之一、大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌，通常呈杆状且单株分离。
它们在肠道中发挥着重要的生理功能，如参与食物消化、产生维生素和促进免疫系统的功能。
此外，大肠杆菌在医学和微生物学中也经常被用作实验模型。
大肠杆菌的检测原理一般采用培养方法。
首先，将样品中的细菌进行传代培养，为了区分大肠杆菌和其他微生物，通常会在培养基中加入选择性抑制剂。
在培养基中生长的细菌经过一段时间后会形成典型的大肠杆菌形态，如菌落大小、形状和颜色等。
此外，还可用生化试剂进行进一步检测，如糖发酵试验和气体产生试验等，以确定细菌是否为大肠杆菌。
总结起来，MPN是一种用于估算样品中微生物数量的方法，大肠菌群是人体肠道中的一类细菌，而大肠杆菌则是大肠菌群中的一种最常见细菌。
大肠杆菌的检测一般采用培养方法，通过培养基中细菌的生长和形态特征以及生化试剂的反应来确定是否为大肠杆菌。
这些检测方法对于保障人体健康和食品安全具有重要作用。
MPN法测定食品中大肠杆菌群数
知识点：MPN法测定大肠杆菌群数情境：微生物检测技术任务：MPN法测定大肠杆菌群数课程：食品微生物技术MPN 法测定大肠菌群原理一、大肠菌群什么叫大肠菌群大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，在37℃生长时，能在48h内发酵乳糖并产酸产气。
二、MPNMPN❞食品中大肠菌群数是以每100 mL（g）检样内大肠菌群最近似数（The most probable number，简称MPN）表示。
❞据此含义，所有食品卫生标准中所规定的大肠菌群均应以每mL（g）食品内允许含有大肠菌群的实际数值为报告标准。
三、MPN法测定原理MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。
待测样品经系列稀释并培养后，根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度，应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。
大肠菌群测定步骤1.液体样品稀释以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）或其他无菌容器中充分振摇或置于机械振荡器中振摇，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。
2.梯度稀释❞用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取（1:10）样品匀液1 mL，沿管壁缓缓注入9 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管混匀或换用1支1 mL无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，作成1:100的样品匀液。
❞根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。
每递增稀释1次，换用1支1 mL灭菌吸管或吸头。
从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
五、初发酵试验每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL（如接种量超过1mL，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生，24h±2h产气者进行复发酵试验（证实试验），如未产气则继续培养至48h±2h，产气者进行复发酵试验。
生活饮用水中总大肠菌群三种不同检测方法比较
生活饮用水中总大肠菌群三种不同检测方法比较在生活饮用水中，大肠菌群是一种重要的指标，用来评价水源的卫生状况。
常见的三种大肠菌群检测方法包括MPN法（Most Probable Number）、膜过滤法和PCR法（聚合酶链式反应法）。
本文将对这三种方法进行比较，分析其特点和适用场景。
首先，MPN法是一种常用的大肠菌群检测方法。
该方法通过对一系列稀释液进行培养，根据培养液中菌落的种类和数量来评估大肠菌群的含量。
这种方法的优点是操作简单、成本较低，可适用于大批量的水样检测。
但是，MPN法的缺点是需要较长时间的培养过程，通常需要3-5天的时间才能得到结果。
此外，该方法对生活饮用水中的非培养大肠菌群无法进行检测。
其次，膜过滤法是一种较为常用的大肠菌群检测方法。
该方法通过将水样通过特殊大小的膜过滤器，使大肠菌群滞留在膜上，然后将膜转移到培养基上进行培养。
该方法的优点是操作相对简单，需要的时间较短，通常在24小时内可以得到结果。
此外，该方法可以对生活饮用水中的非培养大肠菌群进行检测。
但是，膜过滤法的缺点是需要较多的培养器材和耗材，成本较高。
最后，PCR法是一种较为先进的大肠菌群检测方法。
该方法通过扩增水样中大肠菌群的DNA片段，然后利用荧光技术进行检测。
PCR法的优点是快速、灵敏，可以在短时间内得到准确的结果。
此外，该方法可以对生活饮用水中的非培养大肠菌群进行检测，并可以进行定量分析。
但是，PCR法的缺点是需要较复杂的实验设置和专业的设备，操作要求较高，成本较高。
综上所述，生活饮用水中总大肠菌群的检测方法包括MPN法、膜过滤法和PCR法。
这三种方法各有特点，在不同的场景中适用。
MPN法适用于大批量的水样检测，操作简单、成本较低，但需要较长时间。
膜过滤法适用于一般的大肠菌群检测，操作相对简单、时间较短，但成本较高。
PCR 法适用于准确和快速的大肠菌群检测，可以进行定量分析，但需要较复杂的实验设置和专业设备。
在实际应用中，可以根据需求和实际条件选择合适的检测方法来评估生活饮用水的卫生状况。
大肠菌群MPN计数法方法学验证报告
大肠菌群MPN计数法方法学验证报告摘要：大肠菌群MPN计数法是一种常用的微生物计数方法。
本报告通过实验验证了该方法的可靠性和重复性，详细描述了实验的步骤和结果。
实验采用了一种食品样品，通过连续的稀释和培养方法，最终得到了大肠菌群的MPN计数结果。
实验结果表明，该方法具有良好的可重复性和准确性，适用于大肠菌群的数量测定。
关键词：大肠菌群，MPN计数法，微生物计数，可重复性，准确性1.引言大肠菌群是一种食品安全和卫生检测中常见的指标微生物，其数量的测定对于判断食品卫生状况具有重要意义。
MPN计数法是一种常用的大肠菌群计数方法，通过连续的稀释和培养过程，根据培养皿中的菌落数目来估计原始样品中的大肠菌群数量。
本实验旨在验证大肠菌群MPN计数法方法学的可靠性和重复性。
2.实验材料与方法2.1实验材料-食品样品：取一定数量的食品样品。
-种植基质：使用大肠菌群选择性培养基质（如曼氏培养基）。
2.2实验方法1) 稀释：取一定量的食品样品（例如1 ml），分别加入到一系列稀释液中，并进行稀释。
最常用的稀释液有无菌蒸馏水、少量盐水等。
根据实验需要，通常选择稀释液的倍数为10倍至100倍。
2) 接种：从每个稀释液中取出一定量的液体（例如0.1 ml），分别接种到相应的培养基上。
通常，每个稀释液取3个平板培养皿进行接种。
3)培养：将接种过的培养皿在恒温培养箱中进行静置培养。
通常，培养温度为37℃，培养时间为24-48小时。
4)菌落计数：观察培养皿中的菌落情况，根据不同菌落数量，采用MPN计数法进行计算并进行统计分析。
3.实验结果与分析经过实验操作，得到了一系列稀释液和培养皿，培养皿中的菌落数目如下表所示：稀释倍数培养皿1培养皿2培养皿3123019521010302532100324根据MPN计数法的计算公式，通过将菌落数目带入公式，我们可以得到每个稀释倍数对应的大肠菌群数量估计值。
通过统计分析，得到大肠菌群的最可能数目为3.2×10^5个/g（或ml），估计误差为±0.5×10^5个/g（或ml）。
mpn测试方法
mpn测试方法MPN测试方法MPN测试方法是一种常用于微生物检测的技术，MPN全称为Most Probable Number，即最可能数。
该方法主要用于对水样、食品等样品中微生物的数量进行估算。
本文将详细介绍MPN测试方法的原理、步骤以及应用范围。
一、原理MPN测试方法是基于统计学原理的一种间接计数方法。
其基本思想是通过观察样品中微生物的生长情况，根据生长的阳性与阴性结果的比例，利用MPN表格推测出微生物的数量。
该方法适用于微生物数量较低的样品，如水质检测中的大肠菌群检测。
二、步骤1. 样品准备：将待测样品进行适当稀释，以获得合适的浓度范围。
2. 培养基选择：根据待测微生物的特性选择适当的培养基。
常用的培养基有大肠杆菌选择性培养基、营养琼脂培养基等。
3. 分装：将稀释后的样品分装到多个培养基含量相同的试管中。
4. 培养：将试管置于适当的温度和时间下进行培养，促使微生物生长。
5. 观察结果：观察培养后试管中是否有微生物生长，根据阳性与阴性的试管数量比例确定MPN值。
6. MPN值计算：利用MPN表格，根据阳性与阴性的比例找到对应的MPN值。
三、应用范围MPN测试方法广泛应用于食品安全、环境卫生等领域。
在食品安全领域，MPN测试常用于检测食品中的致病菌，如大肠杆菌、沙门氏菌等。
在环境卫生领域，MPN测试常用于水质检测，以评估水源的安全性。
MPN测试方法的优点是相对简单、快速，并且能够在没有仪器设备的情况下进行。
但其也存在一些限制，如对待测物种的选择性较强，不适用于所有微生物的检测；同时，MPN测试方法的准确性也受到多种因素的影响，如样品的预处理、培养条件等。
MPN测试方法是一种常用的微生物检测方法，通过观察样品中微生物的生长情况，利用统计学原理推测微生物的数量。
该方法在食品安全和环境卫生等领域具有重要应用价值。
然而，为了提高测试结果的准确性，需要在实际操作中严格控制各种因素，并结合其他检测方法进行综合评估。
大肠菌群MPN法检测结果怎么报告还不明白？看过来！
大肠菌群MPN法检测结果怎么报告还不明白？看过来！食品微生物检测大肠菌群(Coliform bacteria)是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。
大肠菌群作为作为食品微生物的主要检测指标之一，食品企业最常检测的微生物项目，我们都知道目前大肠菌群检测的方法包括：GB 4789.3-2003 和GB 4789.3-2016，那在日常检测中细心的小伙伴们可能会发现，报告单位有时是MPN/g(mL)，有时又是MPN/100g(mL)，这两个单位是什么意思呢？能够简简单单的认为两者相差100倍吗？答案当然是NO。
针对这个问题，今天我们就仔细地分析探讨一下，一次性解决大肠菌群MPN法报告的问题。
一、检测方法大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法，其一是以100mL(g)检样内大肠菌群最大可能数(MPN)表示，检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；其二以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示，检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。
二、报告单位溯源首先看看这两个单位的来源。
2003年8月，国家卫生部和标准化管理委员会联合发布了《GB/T 4789.3-2003 食品微生物学检验大肠菌群测定》，来替代1994版国标。
这版国标的检测只有一种MPN法，但是却是大肠菌群检测的经典国标。
在2016年12月，国家卫生部发布了《GB 4789.3-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》，这次标准标准代替了GB 4789.3-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》、GB/T 4789.32-2002《食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测》和SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。
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大肠菌群计数MPN法流程图
GB 4789.3-2016（第一法）
检样
稀释
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）36±１℃，24~48±2h
不产气
产气 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB） 36±１℃，24~48±2h
不产气 大肠菌群阴性
产气 大肠菌群阳性
报告
初发酵 复发酵
大肠菌群计数MPN法示意图
25g
移1ml
大肠杆菌 （Escherichia coli）
一群在44.5 ℃发酵乳糖、产酸产气、IMViC生化试验为++--或-+--的革兰氏 阴性无芽孢杆菌。
分类学概念：肠杆菌科、埃希氏菌属 是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要菌种。一般生活在人
大肠中并不致病，但它侵入人体一些部位时，可引起感染 。 O抗原（菌体抗原，150个）
大肠菌群计数MPN法
大肠菌群 （Coliforms）
一群在36℃培养48h可发酵乳糖产酸产气、需氧或兼性 厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
该菌主要来源自人畜粪便，作为粪便污染指标评价食品 的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。
并非分类学概念，在生化及血清学方面并非完全一致。 一般认为包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯 氏菌和阴沟肠杆菌等。
注意事项
归纳总结
目前很多产品大肠菌群标准要求单位为MPN/100mL（g），同2010版检测结果单位 MPN/100mL（g）不一致。中华人民共和国卫生部公告 2009第16号正式公告：现行食品标准 中规定的大肠菌群指标以“MPN/100克或MPN/100毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学 检验大肠菌群测定》（GB/T 4789.3-2003）进行检测；以“MPN/克或MPN/毫升”、“CFU/ 克或CFU/毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大肠菌群计数》（GB/T 4789.3-2008） 进行检测。
培养基主要成分作用
归纳总结
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）
①胆盐可抑制革兰氏阳性菌。 ②煌绿是抑菌抗腐剂，可增强对革兰氏阳性菌的抑制作用。 ③乳糖是大肠菌群可利用发酵的糖类。有利于大肠菌群的生长繁殖并有助于鉴别大肠菌 群和肠道致病菌。 ④发酵试验判定原则：产气为阳性。由于配方里有胆盐，胆盐遇到大肠菌群分解乳糖所 产生的酸形成胆酸沉淀，培养基可由原来的绿色变为黄色，同时可看到管底通常有沉淀 。
95%可信限
MPN
0.10 0.01 0.001
下限 上限
0
0
0 <3.0 -
9.5
0
0
1
3.0 0.15 9.6
1
0
0
3.6 0.17 18
3
3
3 >1100 420
-
培养基主要成分作用
归纳总结
月桂基磺酸盐胰蛋白胨（LST）
①月桂基磺酸钠能抑制革兰氏阳性菌的生长，同时比胆盐的选择性和稳定性好。由于胆 盐与酸产生沉淀，沉淀有时候会使对产气情况的观察变得有些困难； ②乳糖是大肠菌群可利用发酵的糖类。有利于大肠菌群的生长繁殖并有助于鉴别大肠菌 群和肠道致病菌； ③胰蛋白胨提供基本的营养成分； ④LST肉汤是国际上通用的培养基，与乳糖胆盐肉汤的作用和意义相同，但具有更多的 优越性。
0 将产气的试管内样品
接种到BGLB肉汤
结果报告
根据大肠菌群阳性管数, 查MPN检索表，报告每 g (mL)样品中大肠菌群的MPN值。
根据经确证后的对应浓度阳性管数查MPN表
MPN：MPN（最可能数）是表示样品中活菌密度的估测。因此MPN值只是活菌密度的 估算值，并不是样品中活菌数的真值。
阳性管数
K抗原（荚膜抗原，90个） H抗原（鞭毛抗原，50个）
致泻性大肠杆菌
大肠杆菌 （Escherichia coli）
能侵入肠粘膜上皮细胞，引起食物中毒的大肠杆菌。 产毒性大肠杆菌（ETEC)——肠胃炎、旅行性腹泻 致病性大肠杆菌（EPEC)——婴儿腹泻 肠出血性大肠杆菌（EHEC)——出血性结肠炎（O157：H7；O104：H4；O111；
检样25g(ml)+225ml稀释液，均质
10倍稀释
选择3个连续稀释度样品匀液接种LST
36℃±1℃
48±2h
产气
EC肉汤 45℃±0.2℃ 24±2h
查MPN表，报告
不产气
产气
EMB琼脂平板
36℃±1℃ 24±2h 营养琼脂斜面培养
36℃±1℃ 24±2 I M Vi C生化试h验，
革兰染色
阴性 阳性 阴性
有肠道致病菌（如大肠杆菌O157、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧 菌等），因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。大肠菌群数量 越多则肠道致病菌存在的可能性就越高，但两者之间并不总是呈平行关系。 通常情况下，粪大肠菌群与大肠菌群，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且 由于在自然界容易死亡等原因，粪大肠菌群的存在可认为食品直接或间接的受到 了比较近期的粪便污染。因而，粪大肠菌群在食品中的检出，与大肠菌群相比， 说明食品受到了更为不清洁的加工，肠道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
O26等） 侵袭性大肠杆菌（EIEC)——杆菌性痢疾 粘附性大肠杆菌（EAEC)——急慢性腹泻
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的关系
EIEC
ETEC
EHEC
O157：H7；O104：H4等
食品卫生学意义
是评价卫生质量的重要指标，作为食品中的粪便污染指标。 食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，粪便中既有正常肠道菌，也可能
粪大肠菌群 （Fecal colifoms）
指在44.5℃培养24-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏 阴性无芽孢杆菌。
北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念，如AOAC、FDA；而欧洲使用 “耐热大肠菌群”概念，较少使用“粪大肠菌群”，如NMKL。
与大肠菌群一样，并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不 代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关 的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
归纳总结
注意事项
大肠菌群单位MPN/100克或MPN/100毫升的产品，建议选择取样量1mL（g）×3、0.1mL（g）×3、0.01mL（g）×3
固体样品大肠菌群检测流程
液体样品大肠菌群检测流程
注意事项
归纳总结
大肠菌群标准要求不超过29MPN/100mL产品,建议检测流程为：
根据阳性管数, 查MPN检索表（03版）值除以10，报告每 100g (mL)样品中大肠菌群的MPN值。
粪大肠菌群计数MPN法
检样25g(ml)+225ml稀释液，均质
10倍稀释
不产气
选择3个连续稀释度样品匀液接种LST
36℃±1℃
48±2h
产气
根据阳性管数, 查 MPN检索表，同大肠 菌群。
EC肉汤 45℃±0.2℃ 24±2h
不产气
产气
粪大肠菌群阳性管
查MPN表，报告结果
不产气
大肠杆菌计数MPN法
G-
靛基质试验 (吲哚ຫໍສະໝຸດ 验)(I)阳性甲基红反应(MR)
阴性
V-P试验(VP)
阳性
柠檬酸盐利用试验（C）
革兰氏染色
移1ml
101
102
均质器 固体样品
225ml生 理盐水
9ml生理 盐水
各1ml
各1ml
103
9ml生理 盐水
各1ml
各10mL LST
接种
25mL
玻璃珠
液体样品
225ml 生理盐水
其他相同
产气管
10mL BGLB
大肠菌群计数MPN法操作 MPN法
LST不产气（-） 小导管里无气泡
LST产气（+）