鸡白细胞介素1βIL-1β酶联免疫分析
萎缩性胃炎治疗中白细胞介素-1β作用价值分析
萎缩性胃炎治疗中白细胞介素-1β作用价值分析【摘要】目的：探讨萎缩性胃炎与白细胞介素-1β（IL-1β）的相关性。
方法：选取我院近年来收治的120例患者分为A组（浅表性胃炎组）45例、B组（萎缩性胃炎Hp-组）35例、C组（萎缩性胃炎Hp+组）40例，采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定三组患者胃黏膜组织中IL-1β水平。
结果：（1）三组患者胃黏膜IL-1β结果比较均有显著性差异（F=15.365，P<0.01），具有统计学意义。
（2）A组患者IL-1β平均值为（41.2〒9.65）pg/ml，B组患者IL-1β平均值为（64.3〒12.4）pg/ml，C组患者IL-1β平均值为（93.2〒14.6）pg/ml。
三组患者血清IL-1β水平比较差异显著（P<0.01），具有统计学意义。
结论：在萎缩性胃炎发生发展过程中，IL-1β可能为关键性因子，及时检测IL-1β水平可以为萎缩性胃炎诊治工作提供帮助。
【关键词】萎缩性胃炎；IL-1β；相关性白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）是一种主要由单核巨噬细胞产生的重要细胞因子和多肽调节因子，主要在细胞免疫激活中发挥调节作用。
IL-1β参与机体造血系统、神经、内分泌系统、机体炎症反应以及某些抗肿瘤生理过程。
同时由于IL-1β具有强大的抑酸性，往往与萎缩性胃炎有着密切的联系。
本文就萎缩性胃炎与IL-1β的相关性作出相关探讨，报告如下：1 资料与方法1.1 一般资料选取我院近年来收治的120例患者分为A组（浅表性胃炎组）45例、B组（萎缩性胃炎Hp-组）35例、C组（萎缩性胃炎Hp+组）40例，所有患者均经胃镜及病理检查确诊。
A组45例患者中男32例，女13例；年龄26~78岁，平均48.6岁；B组35例患者中男23例，女12例；年龄28~83岁，平均45.8岁；C组40例患者中男31例，女9例；年龄24~76岁，平均46.7岁。
炎症相关因子IL—1β、TGF—β及MCP—1在肝细胞肝癌中的表达变化
炎症相关因子IL—1β、TGF—β及MCP—1在肝细胞肝癌中的表达变化作者：蔡宗发邵孔健来源：《中外医学研究》2017年第25期【摘要】目的：探究炎症相关因子白细胞介素-1β（IL-1β），转化生长因子-β（TGF-β）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达变化。
方法：选取2014年10月-2016年12月笔者所在医院诊治的HCC患者96例作为研究对象，另选取同期体检正常者40例为对照组研究对象，使用实时荧光定量法检测96例HCC患者肿瘤组织、癌旁组织及40例体检正常者正常组织中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表达，用免疫组织化学方法检测96例HCC患者肿瘤组织、癌旁组织及40例体检正常者正常组织甲醛固定石蜡包埋标本中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表达。
结果：实时荧光定量法检测结果显示，IL-1β、TGF-β及MCP-1在癌旁组织中的表达显著高于其在肿瘤组织和正常组织中的表达，差异有统计学意义（P【关键词】白细胞介素-1β；转化生长因子-β；单核细胞趋化蛋白-1；肝细胞肝癌doi：10.14033/ki.cfmr.2017.25.031 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）25-0060-03肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一种最常见的原发性肝癌，死亡率高，癌细胞排列形成实性团块状，周围富有扩张的血窦[1]。
多项动物试验显示，肿瘤微环境与HCC 的产生和转移密切相关，但缺乏临床研究证实[2]。
因此，本研究对2014年10月-2016年12月笔者所在医院诊治96例的HCC患者的肿瘤组织、癌旁组织及体检正常者正常组织中的炎症相关因子白细胞介素-1β（IL-1β）、转化生长因子-β（TGF-β）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）进行检测，探究其与HCC的产生和转移间的相关性，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2014年10月-2016年12月笔者所在医院诊治的HCC患者96例作为研究对象。
饲养密度对肉鸡生长性能和免疫指标的影响
饲养密度对肉鸡生长性能和免疫指标的影响作者：袁磊来源：《中国动物保健》2024年第06期摘要：为了探索饲养密度对肉鸡生长性能和免疫指标的影响。
本试验以100羽1～3日龄的白羽肉鸡作为研究对象，并采用随机数字表法将其均分成5组，每组20羽毛；试验处理中的不同的饲养密度分别为7 、9 、11 、13 和15 羽/m2；试验在计算白羽肉鸡的平均日采食量、平均日增重和料重比的同时，还对白羽肉鸡血清中的IL-10、IL-4和IL-1β的含量进行测定。
试验结果显示：饲养密度在11、13 和15 羽/m2时的白羽肉鸡的平均日采食量明显低于饲养密度在7 和9 羽/m2时的白羽肉鸡的平均日采食量，且差异显著（P＜0.05）；饲养密度在11、13和15 羽/m2时的白羽肉鸡血清中IL-4的含量明显高于饲养密度在7 羽/m2和9 羽/m2时的白羽肉鸡血清中IL-4的含量，且差异显著（P＜0.05）；饲养密度在13 和15 羽/m2时的白羽肉鸡血清中IL-1β的含量明显高于饲养密度在7 、9 和11 羽/m2时的白羽肉鸡血清中IL-1β的含量，且差异显著（P＜0.05）；饲养密度对白羽肉鸡血清中的IL-10的含量、平均日增重和料重比没有影响。
以上结果表明，饲养密度在7 和9 羽/m2时可以防止饲养密度对白羽肉鸡生长性能和免疫指标的负面影响。
关键词：饲养密度；肉鸡；生长性能；免疫指标随着人们生活水平的日渐提升，人们对畜禽的需求量和品质也有了更高的要求，而养殖场的规模化养殖面积也需要急速的扩张，因此畜禽养殖的饲养密度问题也越来越受到关注[1]。
虽然近年来前人对饲养密度进行的研究较多，但是前人的研究大多均以比较2～3个水平的饲养密度为主。
有研究表明，饲养密度会对肉鸡的生长性能造成影响，且饲养密度的过度提高会造成肉鸡的体重、采食和饲料转化率下降，使肉鸡的患病率升高[2]。
同时，饲养密度的过度提高还会威胁肉鸡的健康，使肉鸡出现应激和肠道问题[3]，此外，有研究表明，科学合理的饲养密度能够有效提升肉鸡的生长性能和免疫能力[4]。
子宫内膜异位症组织中HMGB1、GSDMD、IL-1β表达变化及其意义
山东医药2023 年第 63 卷第 36 期子宫内膜异位症组织中HMGB1、GSDMD、IL-1β表达变化及其意义侯岩岩，李曼，叶国柳蚌埠医学院第一附属医院妇产科，安徽蚌埠 233004摘要：目的 观察子宫内膜异位症（EMS）组织中高迁移率族蛋白 B1（HMGB1）、消皮素D（GSDMD）、白细胞介素1β（IL-1β）的表达变化，并探讨其意义。
方法 EMS异位内膜组织80例份（观察组）及子宫平滑肌瘤正常内膜组织70例份（对照组），采用免疫组化法检测两组HMGB1、GSDMD、IL-1β阳性率，分析三者间及其与EMS临床病理特征的关系。
结果 观察组HMGB1、GSDMD、IL-1β阳性率分别为77.50%（62/80）、66.25%（53/80）、68.75%（55/ 80），对照组分别为32.96%（23/70）、22.86%（16/70）、17.14%（12/70），两组比较，P均<0.05。
HMGB1、GSDMD、IL-1β表达与EMS临床分期有关（P<0.05），而与患者年龄、痛经程度和囊肿直径无关（P均>0.05）。
观察组HMGB1与GSDMD、IL-1β表达呈正相关（r分别为0.577、0.717，P均<0.05），GSDMD与IL-1β表达呈正相关（r为0.797，P<0.05）。
结论 EMS异位内膜组织HMGB1、GSDMD、IL-1β表达上调，检测三指标有助于此病诊断及其临床分期的鉴别诊断，其可能会成为EMS的潜在治疗靶点。
关键词：高迁移率族蛋白B1；消皮素D；白细胞介素1β；子宫内膜异位症doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.36.012中图分类号：R711.71 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）36-0053-03子宫内膜异位症（EMS）是一种常见的慢性炎症性妇科疾病，子宫内膜组织定植和生长在子宫腔以外解剖部位（主要在盆腔腹膜和卵巢），是育龄期妇女盆腔疼痛和不孕的重要危险因素之一［1］。
il-1β 基因
il-1β 基因全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：IL-1β基因是编码白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白的基因，它在人类免疫系统中扮演着重要的角色。
IL-1β是一种由巨噬细胞和肺泡细胞等细胞产生的细胞因子，它在炎症反应、免疫调节和细胞增殖等生物学过程中发挥着重要作用。
IL-1β基因的突变或异常表达与多种免疫性疾病的发生和发展密切相关，因此对IL-1β基因的研究具有重要的理论和临床意义。
IL-1β基因属于IL-1基因家族，在人类基因组中位于第2号染色体上，包含5个外显子和4个内含子。
IL-1β的合成和分泌受到多种调控因素的影响，包括细胞因素、细胞因子、激素、细胞外基质和细胞因子信号转导途径等。
IL-1β的生物活性主要通过与其信号受体IL-1R相结合并激活下游信号通路来实现。
IL-1β在炎症反应中发挥着重要作用。
当机体受到外界刺激时，IL-1β的表达水平会显著增加，通过促进白细胞聚集和活化，调节炎症介质的表达，调控血管通透性和组织修复等机制来参与炎症过程。
IL-1β还可促进细胞因子IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症介质的表达，形成炎症反应的正反馈调节。
除了在炎症反应中的作用外，IL-1β还在免疫调节和细胞增殖等生物学过程中发挥着重要作用。
IL-1β可通过激活T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突细胞等免疫细胞，参与免疫应答的调节和协调。
IL-1β还可通过促进IL-2和IL-15等T细胞生长因子的表达来促进T细胞的增殖和分化，从而对免疫功能的调控起到重要作用。
IL-1β基因的突变或异常表达与多种免疫性疾病的发生和发展密切相关。
前研究表明，IL-1β的过度表达和异常激活与风湿性关节炎、类风湿性关节炎、炎症性肠病等疾病的发生和发展有关。
IL-1β还与白血病、淋巴瘤、乳腺癌、结肠癌等恶性肿瘤的发生和发展密切相关。
研究IL-1β基因的功能和调控机制对预防和治疗免疫性疾病和肿瘤具有重要意义。
近年来，针对IL-1β的研究取得了一系列重要进展。
il-1β 基因
il-1β 基因全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：IL-1β 基因是编码白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的基因，是炎症反应中一个非常重要的因子。
IL-1β是一种重要的促炎因子，它参与了免疫系统的调节，对炎症和免疫反应起着关键作用。
IL-1β基因在人体中的表达水平与疾病的发生发展密切相关，因此对IL-1β基因的研究具有重要的意义。
IL-1β基因位于人类的第2号染色体上，是一个包含7个外显子的基因。
IL-1β基因的编码蛋白质是一种由269个氨基酸组成的细胞因子，它在炎症过程中起着重要的作用。
IL-1β蛋白主要由单核细胞、巨噬细胞和一些其他免疫细胞产生，它能够促进炎症反应的发生，并引起发热、血管扩张和疼痛等症状。
IL-1β基因的突变和多态性已经被发现与多种疾病的发生有关。
IL-1β 基因的多态性可能会增加一些自身免疫性疾病的风险，如类风湿关节炎和炎症性肠病等。
IL-1β基因在心血管疾病、肿瘤和感染等疾病的发生发展中也扮演着重要的角色。
IL-1β基因的研究对于预防与治疗相关疾病具有重要的意义。
近年来，许多科研人员已经发现IL-1β在炎症反应调节中的重要性，并且针对IL-1β的药物已经开始进入临床试验阶段。
这些针对IL-1β的药物可以用于治疗类风湿关节炎、炎症性肠病以及其他相关疾病，为临床治疗带来了新的希望。
IL-1β基因在免疫系统中扮演着非常重要的角色，它对于炎症反应的调节具有重要的作用。
IL-1β基因的研究不仅可以帮助我们了解疾病的发生机制，还可以为相关疾病的预防与治疗提供新的思路。
希望未来能够有更多的研究针对IL-1β基因展开，为人类健康带来更大的福祉。
第二篇示例：IL-1β基因是人体免疫系统中的一种重要基因，它编码了一种促炎细胞因子，对于炎症反应的调控起着至关重要的作用。
IL-1β基因的异常表达与多种疾病的发生和发展密切相关，例如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊椎炎等自身免疫性疾病，以及白血病、淋巴瘤、肺炎、肝炎等炎症相关性疾病。
细胞因子谱、C-反应蛋白及降钙素原在小儿重症支原体肺炎诊治中的临床意义
细胞因子谱、C-反应蛋白及降钙素原在小儿重症支原体肺炎诊治中的临床意义郭艳梅;李晓春【摘要】目的探讨小儿肺炎急性期血清细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)的浓度水平变化在小儿重症支原体肺炎诊治中临床意义.方法选取肺炎患儿127例,将其中64例支原体肺炎(MPP)作为研究组,63例非支原体肺炎(NMPP)患儿作为对照组;并将研究组分为重症组和轻症组,同时又可将重症组MPP分为急性期和恢复期.采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测各组急性期血清CRP、PCT、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的浓度变化及重症MPP组恢复期各炎症指标浓度水平.结果研究组和对照组患儿血清IL-1β浓度水平变化无统计学意义(P>0.05).重症组患儿急性期血清IL-6、IL-8、TNF-α、CRP、PCT的浓度水平均高于轻症组、对照组和重症组恢复期比较,均差异有统计学意义(P<0.05),而血清IL-10在重症组、轻症组和对照组的浓度水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).ROC曲线分析血清IL-6检测在诊断MPP上特异性较高.结论血清IL-6、IL-8、TNF-α、CRP、PCT等炎症指标对早期诊治重症MPP 有重要意义.%Objective To explore the clinical significance in diagnosis of severe children mycoplasma pneumoniae pneumonia,detecting the serum changing levels of cytokine profiles,c-reactive protein (CRP)and procalcitonin(PCT) in the acute phase.Methods 127 cases of pneumonia were randomly selected to study.64 cases were served as the research group (MPP) and divided to the severe and mild group.63 cases were served as the control group(NMPP),which was also divided into the acuteand recovery phase.ELISA was used to observe the levels of serum interleukin-1β (IL-1β),interleukin-6 (IL-6),interleukin-8 (IL-8),interleukin-10 (IL-10),tumor necrosis factorα (TNF-α),PCT,CRP in the acute phase of the research group,control group and in the recovery phase of the severe group.Results IL-1βshowed no significant difference between the research group and the control group (P>0.05);Serum concentrations of IL-6,IL-8,TNF-α,CRP,PCT of the severe group in acute phase were higher than the mild group,control group and the recovery phase of its.The differences between the three groups were statistically significant(P<0.05).The levelsof serum interleukin-10 hadnodifferences in the three groups.There was no statistically significant difference comparison (P>0.05).ROC curve analysis showed that serum IL-6 had higher specificity in diagnosis ofMPP.Conclusion Detecting the serum levels of IL-6,IL-8,TNF-α,CRP,PCT had important clinical significancein early diagnosis of severe children mycoplasma pneumoniae pneumonia.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2017(021)005【总页数】4页(P900-903)【关键词】支原体肺炎;细胞因子谱;C-反应蛋白;降钙素原【作者】郭艳梅;李晓春【作者单位】安徽医科大学附属安庆医院儿内科,安徽安庆 246003;安徽医科大学附属安庆医院儿内科,安徽安庆 246003【正文语种】中文肺炎是儿科常见病及多发病，常由多种病原体感染引起，是儿童住院率最高的疾病之一，而肺炎支原体肺炎(MPP)是肺炎支原体(MP)感染所引起的肺部炎症，在儿童社区获得性肺炎中约占10%～40%[1-2]，且Bamba等[3]的一项前瞻性研究显示儿童MPP发病率随年龄增长而升高。
IL-1α和IL-1β的区别
白介素IL-1早期被描述为引起发烧的蛋白质,称为人白细胞致热原,主要由IL-1α和IL-1β两种蛋白质组成。
IL-1α和IL-1β序列同源性并不高,但他们结合相同的受体复合物,具有相似的生物学活性。
在具体的生物学功能上, IL-1α和IL-1β还是存在一些差别的。
第一, IL-1α通常与其所产生的细胞质膜关系较大,因此只能局部起作用,而IL-1β可以全身分泌并循环作用;第二, IL-1α表达比较普遍,主要在上皮细胞、角化细胞和内皮细胞中表达,也可以在骨髓细胞表达, IL-1β主要由单核细胞和巨噬细胞产生;第三, IL-1α在不同部位被各种蛋白酶(包括钙蛋白酶,颗粒酶B和炎性蛋白酶)加工以达到全部活性,相比之下, IL-1β主要由先天性免疫细胞在炎性损伤中表达。
IL-1β前体的细胞内加工依赖于半胱天冬酶-1。
第四,两个基因在发育过程中和对环境的反应是有差别调控,这在免疫反应中导致了这些细胞因子的不同功能。
第五, IL-1α的前域具有核定位序列,有固有的转录反式激活活性,其通过与组蛋白乙酰转移酶的相互作用而增强,并可影响基因表达模式和细胞存活。
细胞因子检测
细胞因子检测【关键词】细胞因子检测一、白细胞介素(IL)检测1.白细胞介素1β(IL-1β)检测IL-1又称淋巴细胞激活因子，是急性期免疫反映的要紧调剂因子，对T细胞激活，诱导IL-2产生起着大体的作用；而这些作用大多数是IL-1β直接产生的。
[参考值]～μg/L(ELISA)[临床意义](1)组织损伤或感染，如Crohn’s病、败血症；某些自身免疫性炎症反映(如类风湿关节炎)、结核、风湿等血中IL-1β升高。
(2)神经系统炎症或损伤时脑脊液中IL-1β升高。
(3)胸膜腹膜炎渗出液中IL-1β升高。
(4)在再生障碍性贫血患者，单核细胞产生IL-1能明显下降。
(5)老年人或癌症患者外同血中单核细胞产生IL-1能力也低于正常人，因此在感染后不易显现发烧等临床病症。
[注意事项](1)不抗凝静脉血检测，也可是脑脊液或渗出液；(2)搜集标本必需用不含致热原、内毒素的清洁试管；(3)标本不该有溶血、脂血、黄疸。
2.白细胞介素2(IL-2)检测白细胞介素2(IL-2)是白细胞介素中的一种。
要紧由活化T细胞产生，是具有多向性作用的细胞因子(要紧增进淋巴细胞生长、增殖、分化)。
它对机体的免疫应答和抗病毒感染有重要作用。
[参考值]～μg/L(ELISA)[临床意义](1)IL-2要紧刺激T细胞生长；诱导细胞毒作用；对B细胞的生长及分化有必然的增进作用；可明显增强对单核.巨噬细胞的抗原递呈能力、杀菌力、细胞毒性。
IL-2随年龄增加有降低趋势。
(2)增高见于自身免疫性疾病(如SLE、类风湿关节炎等)、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤、心血管病、肝病、肿瘤、排斥反映等。
(3)降低见于免疫缺点病(如艾滋病、联合免疫缺点病等)、恶性肿瘤、l型糖尿病、某些病毒感染、同意免疫抑制医治者和老年人等。
[注意事项](1)不抗凝静脉血标本，以血清进行检测，也可检测尿液或人淋巴细胞培育上清液中的白细胞介素2水平。
(2)搜集标本必需用不含致热原、内毒素的清洁试管。
巨噬细胞作用机制-概述说明以及解释
巨噬细胞作用机制-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述巨噬细胞是一种重要的免疫细胞类型，主要存在于机体的组织间隙和器官中。
它们被认为是机体的第一道防线，参与了多种免疫反应和炎症过程。
巨噬细胞通过吞噬病原微生物、清除细胞的废弃物以及调节炎性免疫反应等多种途径来发挥其作用。
巨噬细胞的活性和功能特点决定了它们在免疫应答中的重要地位。
巨噬细胞可以通过识别病原微生物的表面标志物，如细菌的LPS、真菌的β-葡聚糖等，来介导吞噬作用。
这种吞噬过程可以有效地摧毁入侵的病原微生物，防止它们进一步扩散和感染。
同时，巨噬细胞还可以分泌多种抗菌蛋白和抗炎因子，如巨噬细胞激活因子、一氧化氮等，来增强抗菌和抗炎反应。
此外，巨噬细胞还能够执行胞吞作用，吞噬细胞内的病原微生物，如细胞内寄生的病毒和细胞表面的病原微生物。
通过这种方式，巨噬细胞可以有效地清除感染的细胞，并保持整个机体的免疫环境。
巨噬细胞通过与其他免疫细胞的相互作用来参与多种免疫反应。
它们可以与T细胞、B细胞和自然杀伤细胞等免疫细胞相互作用，协同发挥免疫调节的作用。
巨噬细胞还可以释放多种免疫调节分子，如细胞因子、趋化因子等，来影响其它免疫细胞的活性和功能。
总之，巨噬细胞作为机体免疫系统中的重要成分，通过吞噬、胞吞和调节免疫反应等多种机制来对抗病原微生物的入侵和组织的损伤。
巨噬细胞的活性和功能特点使其在炎症反应和免疫应答中起到关键的作用。
尽管巨噬细胞的作用机制已经被广泛研究，然而仍有许多问题需要进一步探索和解答。
未来的研究将有助于更好地理解巨噬细胞的功能以及它们在免疫疾病和炎症性疾病中的作用，为疾病的治疗和预防提供新的思路和方法。
1.2 文章结构文章结构部分的内容如下：文章结构部分主要介绍本文的组织结构和内容安排。
通过清晰的结构和合理的安排，读者可以更好地理解文章的主题和内容。
首先，本文的结构可以分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分将提供对于巨噬细胞作用机制主题的概述，说明本文的写作意图和目的。
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鸡白细胞介素1β（IL-1β）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
3 ng/L -120 ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1β（IL-1β）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素1β（IL-1β）水平。
用纯化的鸡白细胞介素1β（IL-1β）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素1β（IL-1β），再与HRP标记的白细胞介素1β（IL-1β）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β（IL-1β）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素1β（IL-1β）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。