大肠埃希氏菌菌落特征
致泻大肠埃希氏菌
3.
生化反应
生化反应十分活泼，是鉴定肠道菌的重要 依据。 乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病和非致 病菌时有重要意义，肠道致病一般不分解乳 糖，而非致病菌多数能分解乳糖。
鉴定中最重要的生化反应
乳糖发酵试验
肠道非致病菌（埃希菌属） 发酵乳糖、产酸产气＋
肠道致病菌（志贺菌属、
沙门菌属等）不发酵乳糖 —
4. 抗原构造复杂
在肉汤培养基中生长18-24小时变为均匀浑浊，而 后底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味。
培养特性
部分菌落可出现β溶血。 在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落。
在SS琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌
也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落。
在伊红美兰琼脂上形成具有金属光泽的黑色菌落。
在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色。
肠产毒性大肠埃希氏菌 （Enterotoxigenic E. coli,ETEC）
引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻， 也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性， 一般2-3天即愈。致病因素是LT或ST，或两者 同时致病。有些菌株具有定居因子，常见者 为O6：K15：H16、O25：K7：H42。鉴定ETEC 主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参 考意义。
分类
肠杆菌科
埃希氏菌属
大肠埃希氏菌
致泻大肠埃希氏菌
肠道致病性大 肠埃希氏菌 EPEC
肠道出血性大 肠埃希氏菌 EHEC
产肠毒素大肠 埃希氏菌 ETEC
肠道侵袭性大 肠埃希氏菌 EIEC
致泻大肠埃希氏菌
致泻性大肠埃希氏菌的形态特点、培养特性和生化 特性均与非致病的大肠埃希氏菌非常相似，以至难 以区分，只能通过血清学的方法，从抗原结构的差 异来区别。 在致泻性大肠埃希氏菌中，有些血清型能够引起人 的食物中毒，有些血清型能够引起人的肠道内外感 染。还有一些血清型的菌株能够使畜禽发病，危害 畜牧业，降低畜产食品的质量。致泻性大肠埃希氏 菌可从饮用水，未消毒牛乳，病畜脏器、禽类及其 人畜粪便污染的各种食品中分离出来。
牛肉样品中产志贺毒素大肠埃希氏菌和肠致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定
牛肉样品中产志贺毒素大肠埃希氏菌和肠致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定朱应飞，聂 翔，熊丽霞，吴学平，占忠旭，匡佩琳（江西省检验检测认证总院食品检验检测研究院，江西南昌 330000）摘 要：于2018年9月—2019年3月，每个月从超市和农贸市场中抽取20个样本，共抽取140个牛肉及制品样本，在qPCR初筛时stx阳性率为45.8%，eae的阳性率为52.2%。
每月的stx初筛阳性率分别为65%、60%、80%、5%、25%、45%和40%；eae初筛阳性率分别为70%、70%、65%、0%、40%、65%和55%。
检出携带stx基因的产类志贺毒素大肠埃希氏菌样本4份，样本阳性菌株检出率为2.9%；检出携带eae基因的肠致病性大肠埃希氏菌样本12份，样本阳性菌株检出率为8.6%。
关键词：产志贺毒素大肠埃希氏菌；肠致病性大肠埃希氏菌；分离；鉴定Isolation and Identification of Shiga Toxin Producing Escherichia coli and Enteropathogenic Escherichia coli in BeefSamplesZHU Yingfei, NIE Xiang, XIONG Lixia, WU Xueping, ZHAN Zhongxu, KUANG Peilin (Jiangxi General Institute of Testing and Certification Food Testing Institute, Nanchang 330000, China)Abstract: From September 2018 to March 2019, 20 samples were taken from supermarkets and farmers’ markets every month, with a total of 140 beef and product samples taken. the positive rate of stx was 45.8%, and the positive rate of eae was 52.2%. The monthly positive rates of stx initial screening positive rates of 65%, 60%, 80%, 5%, 25%, 45%, and 40%, respectively; The positive rates of eae initial screening were 70%, 70%, 65%, 0%, 40%, 65%, and 55%, respectively. Four Shiga toxin producing Escherichia coli samples carrying the stx gene were detected, with a positive strain detection rate of 2.9%; From September 2018 to March 2019, 12 samples of enteropathogenic Escherichia coli carrying the eae gene were detected, with a positive strain detection rate of 8.6%.Keywords: Shiga toxin producing Escherichia coli; enterogenic Escherichi coli; separation; appraisal产志贺菌毒素的大肠杆菌（Shiga Toxin Producing Escherichia coli，STEC）和肠致病性埃希氏菌（Enterogenic Escherichi coli，EPEC）是世界上最重要的食源性病原体之一。
大肠埃希氏菌生化鉴定结果
大肠埃希氏菌生化鉴定结果大肠埃希氏菌（Escherichia coli）是一种常见的细菌，可以引起多种感染性疾病，包括腹泻、尿路感染和食物中毒等。
鉴定大肠埃希氏菌的生化特征可以帮助确定病原菌的身份以及其潜在的耐药性和毒力因子。
本次实验目的是对一株致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，以确认其菌株的性质和特征。
首先，我们进行了气体产生实验。
在Triple Sugar Iron Agar（TSI）培养基中，观察到菌落周围发生了气体产生，此结果表明该菌株具有产气性。
产气性通常意味着大肠杆菌等需要葡萄糖产生酸，进而分解产生气体的细菌。
其次，我们进行了甲烷发酵试验。
在Methyl Red（MR）试剂中，当菌液发酵产酸时，溶液颜色由黄色变成红色。
然而，该菌株在MR试剂中没有产生红色反应，这表明它无法通过甲烷发酵产酸。
这一结果与典型的大肠杆菌不同，因为大肠杆菌通常可以通过此途径产酸。
进一步，我们进行了亮氨酸脱氨酶试验。
使用亮氨酸脱氨酶（LDC）培养基，如果菌株具有亮氨酸脱氨酶活性，菌液会变色。
然而，我们观察到该菌株在培养基中没有出现任何颜色变化，这表明它不具备亮氨酸脱氨酶活性。
亮氨酸脱氨酶活性通常是大肠杆菌的典型特征之一。
此外，我们还进行了尿素酶试验。
使用尿素平板培养基，如果菌株具有尿素酶活性，培养基颜色将由黄色变为粉红色。
然而，我们观察到该菌株在培养基上未显示出任何颜色变化。
这暗示着该菌株可能缺乏尿素酶活性，与大肠杆菌的典型特征不同。
最后，我们进行了青霉素酶试验。
使用青霉素酶试纸进行反应检测，在试纸上出现蓝色点状斑点表示菌株具有青霉素酶活性。
而对于这个菌株，我们观察到在试纸上没有出现蓝色斑点。
这意味着该菌株可能对青霉素类药物敏感，这对于抗生素选择治疗提供了重要信息。
综上所述，通过对致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，我们发现该菌株具有产气性，但与典型的大肠杆菌不同，它不表现出甲烷发酵、亮氨酸脱氨酶和尿素酶活性。
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌属于肠杆菌科埃希氏菌属，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌，其细胞一般呈杆状，不具典型的细胞结构，其内的遗传物质没有与组蛋白结合，是长约1000微米的环状DNA分子。
大肠埃希菌细胞体限界膜（胞膜外）还有一层黏多糖蛋白构成的细胞壁，这和植物体细胞相似，胞体（菌体）宽约0.8μm，长2μm。
一般的条件下，大约20多分钟就繁殖一代。
此外，大肠埃希菌还有周鞭毛，兼性厌氧，对营养要求不高。
在麦康凯平板上形成红色、圆形隆起的菌落；在血琼脂平板上通常形成圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色、不透明的光滑、湿润菌落，少数菌株产生β-溶血环，少数呈黏液型菌落或较大、扁平、皱起的粗糙型菌落。
大肠埃希菌的抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。
现已知有171种O抗原，100种K抗原和56种H抗原。
一个菌株的抗原类型由特殊的0、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58（B4）:H2。
如需了解更多关于大肠埃希菌的结构信息，建议查阅生物学书籍或咨询专业生物学家获取准确信息。
大肠埃希菌的风险评估
大肠埃希菌的生物危害评估报告一、细菌的传播与致病大肠埃希氏菌通常被称为大肠杆菌，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为6类:肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)和弥散粘附性大肠杆菌(DAEC). 大肠埃希菌也是医院感染和社区感染的常见病原菌，可引起人体各部位感染，以尿路感染为主(尿路感染中大肠埃希菌其比例可达90 % ) 。
还可引起菌血症、败血症、新生儿脑膜炎、胆囊炎、手术后腹腔感染及灼伤创面感染等疾病。
致病物质1、定居因子：也称粘附素，即大肠杆菌的菌毛。
2、黏附素3、外毒素4、肠毒素5、其他：胞壁脂多糖的类脂A具有毒性，O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。
大肠杆菌的K抗原有吞噬作用。
传播途径：1．通过食物传播2通过水传播3．密切接触传播人与人之间的密切接触也可引起O157H7大肠杆菌的传播。
肠出血性大肠杆菌感染是一种人畜共患病。
凡是体内有肠出血性大肠杆菌感染的病人、带菌者和家畜、家禽等都可传播本病。
二、细菌的生物学特性革兰阴性杆菌，粗短，大小为(1.1~1.5)μm X(2. 0 ~ 6.0)μm，多数有周鞭毛。
在血琼脂平板上35℃培养18~24h ，呈圆形、直径为2~3mm 、稍凸、边缘整齐、灰白色、不透明的菌落，少数菌株产生R 溶血环。
在麦康凯琼脂平板上形成不透明、粉红色菌落，部分不发酵乳糖的菌株呈无色菌落，少数呈黠稠状菌落。
在伊红亚甲蓝琼脂平板上菌落呈紫黑色，并有金属光泽。
在中国蓝琼脂平板上菌落呈蓝色。
在XLD 琼脂平板上菌落呈不透明黄色。
在H -E 琼脂平板上菌落呈黄色。
在大肠埃希菌显色培养基上呈蓝色菌落。
在尿道菌定位培养基上菌落呈红色。
三、细菌的实验室检查及其它检查1.标本采集采自不同感染部位的各种标本如粪便、血液、尿液等；2.染色镜检为革兰氏阴性粗短杆菌3.分离培养粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。
《微生物与实验技术》食品中大肠埃希菌的检验实验
《微生物与实验技术》食品中大肠埃希菌的检验实验一、实验目的1.熟悉大肠埃希菌的检验原理2.熟悉大肠埃希菌检验的基本操作二、实验原理1.大肠杆菌，又叫大肠埃希氏菌是条件致病菌，在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染。
因此，检查食品中是否存在治病大肠埃希氏菌具有实际意义。
2. 在TSI琼脂中,典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢(H2S)。
置MUG-LST肉汤管于长波紫外灯下观察,MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生,MUG阴性的应无荧光产生，大肠埃希氏菌O157:H7/NM为MUG试验阴性,无荧光。
三、试剂及器材1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：2 EC肉汤（E.coli broth）：3 蛋白胨水：4磷酸盐缓冲液：5伊红美蓝（EMB）琼脂：6 营养琼脂斜面：7结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）：8革兰氏染色液：9无菌1mol/LNaOH：10无菌1mol/LHCl：四、操作方法样品的稀释1. 固体和半固体样品：称取25g样品，放入盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌均质杯内，8000r/min~10000r/min均质1min~2min，制成1:10的样品匀液或放入盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min制成1:10的样品匀液。
2.液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1.10的样品匀液。
3. 样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间，必要时分别用1mol/LNaOH或1mol/LHCl 调节。
4 .用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入9mL 磷酸盐缓冲液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面）振摇试管或换用1支1mL无菌吸管或吸头反复吹打，使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。
大肠埃希氏菌的生物学特性及鉴定要点
4.鉴别要点： 4.1 本菌特征：
TSI或KIA为A/A，发酵葡萄糖，乳糖，甘露醇等多种 糖类，产酸产气。常规接种：KIA，MIA管。 4.2 与痢疾志贺氏菌的鉴别：
无动力而乳糖迟发酵的菌株，易于痢疾志贺氏菌相混 淆。鉴别如下：
4.3 与肺炎克雷伯菌的鉴别：
少数黏液样菌落的大肠埃希菌在麦康凯平板上易于肺炎克雷伯菌相混淆， 大肠埃希菌黏液样菌漏乘深粉红色，而肺炎克雷伯菌则呈浅粉红色，无 动力。
大肠埃希氏菌的生物学特性及鉴定 要点
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1.形态与染色：
革兰阴性杆菌
2. 培养特性：
在血平板上35℃培养18~24小时，呈灰白 色菌落，在麦康凯平板上形成不透明，粉 红色或无色菌落，少数呈黏稠状菌落
3. 生化反应：
氧化酶（-），TSI或KIA为A/A，发酵葡 萄糖，乳糖，甘露等多种糖类，产酸产气， 赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验阳性。
九．EPEC,ETEC,EIEC,EHEC主要靠血清学进行O.H诊断血清进行分 型。
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鉴定流程：
标本 （-）
பைடு நூலகம்
麦康凯平板呈粉红色菌落 生化鉴定试验 大肠埃希氏菌
氧化酶
6. 致病性大肠埃希氏菌的概述：
7. 致病性大肠埃希氏菌分5个血清群，分别是：
○ 产毒型大肠埃希氏菌（ETEC）、肠致病大肠埃希氏菌（EPEC） 肠侵袭型大肠埃希氏菌（EIEC）,肠出血型大肠埃希氏菌 （EHEC），肠凝聚性大肠埃希氏菌（EAggEC）5群。
8. 鉴定要点：
六．生化反应与普通大肠埃希氏菌相似。
致病性大肠埃希氏菌及其检验
5）在鲜血琼脂平板上生长，有些菌株可见β溶血环。 6）在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落 7）在S．S琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌， 也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落； 8）在伊红美兰琼脂上形成紫黑色具有金属光泽的菌 落 9）在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色 •
埃希氏菌在S．S琼脂平板上形成红色菌落
• 在麦康基培养基上培养的大肠埃希杆菌 大肠埃 希杆菌产生粉红色乳糖发酵菌落。麦康基培养基 是肠道细菌的选择培养基，含胆盐、乳糖和pH指 示剂中性红。乳糖发酵菌落产生酸，将指示剂变 红。（麦康基琼脂，18小时，37℃）
革兰氏阴性杆菌
革兰氏阳性杆菌
大肠杆菌扫描电镜照片
大肠杆菌透射电镜照片
大肠杆菌革兰氏染色照片
致病性大肠埃希氏菌的检验
（四）血清学试验 • 假定试验： 从平板上选菌落生长稠密处挑取培养物，用致病 性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒 素大肠埃希氏菌多价O血清和出血性大肠埃希氏菌 O157血清做玻片凝集试验。不凝集的培养物可做 阴性报告。当与某一种多价O血清凝集时,再与该 多价血清所包含的单价血清做实验,如与某一种单 价O血清呈现强烈的凝集反应,即为假定实验阳性. 不凝集的培养物可做阴性报告。
一、埃希氏菌属生物学特性
致病性：（2）所致疾病 • 肠外感染：泌尿系统感染最常见病原菌。还可引 起胆囊炎、肺炎、新生儿或婴儿脑膜炎。 • 腹泻：产毒素大肠杆菌是婴儿及旅游者腹泻的主 要原因；致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要原因； 侵袭型大肠杆菌主要引起较大儿童和成年人腹泻。
一、埃希氏菌属生物学特性
C-枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
• 利用枸橼酸盐生长 + • 不能利用 •
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大肠埃希氏菌菌落特征
大肠埃希氏菌是一种常见的细菌，存在于人体肠道、土壤、水体等多
种环境中。
虽然大肠埃希氏菌在人类的肠道中是正常的共生菌群之一，但某些菌株会引起人类疾病。
因此，了解大肠埃希氏菌的特征对于预
防和控制相关疾病具有重要意义。
一、形态特征
大肠埃希氏菌是革兰氏阴性杆菌，细胞大小为0.5-1.5μm×1.0-6.0μm，呈杆状或梭形。
大肠埃希氏菌细胞表面有许多鞭毛和荚膜，具有运动
能力。
二、营养需求
大肠埃希氏菌属于厭氧性生物，但在寡营养条件下也能进行无氧呼吸。
它可以利用葡萄糖、果糖等单糖类物质作为碳源，并需要含有硫酸盐
和铵盐等无机盐的培养基。
此外，它还需要一定量的水分和适当的温
度来生长。
三、菌落特征
1. 形态特征
大肠埃希氏菌在普通琼脂培养基上形成的菌落呈灰白色，边缘光滑，表面平整。
在MacConkey琼脂培养基上形成的菌落呈粉红色，边缘光滑，表面平整。
2. 大小特征
大肠埃希氏菌在琼脂平板上的菌落大小一般为1-2mm左右。
3. 生长速度
大肠埃希氏菌在适宜环境下生长迅速，通常在24-48小时内就能形成可见的单个或多个菌落。
四、生物学特性
1. 运动性
大肠埃希氏菌具有鞭毛和荚膜，在液体培养基中可以活动。
通过运动能力，它可以快速定位到适宜生长环境中，并从不适宜环境中逃离。
2. 毒力因子
某些大肠杆菌株可以产生毒素，并引起人类疾病。
这些毒素包括Shiga毒素、血凝素等。
其中，Shiga毒素是导致出血性大肠杆菌感染的主要毒力因子之一。
3. 抗生素耐药性
近年来，由于滥用抗生素等原因，某些大肠杆菌株已经出现了多重耐药现象。
这些耐药菌株对于治疗相关疾病造成了较大的困难。
五、总结
大肠埃希氏菌是一种常见的细菌，在人类肠道中是正常的共生菌群之一。
但某些菌株会引起人类疾病。
了解大肠埃希氏菌的形态特征、营养需求、菌落特征、生物学特性等方面的信息，对于预防和控制相关疾病具有重要意义。