一株鸭源大肠杆菌致病性及毒力因子检测
鸭大肠杆菌病病原菌的分离鉴定及耐药性监测
１ 细 菌 的 分 离培 养 ． ３
无 菌 取 病 鸭 的 肝 、 脏 病 心
较 敏 感 的 药 物 来 进 行 预 防 和 治疗 ．达 到 有 效 控 制
疾 病 的 目的 １ 材 料 和 方 法 １１ 病 例 来 源 山 西 省 长 子 县某 养 殖 户 的 ２月 ． 龄 病 鸭 送 检 时 已死 亡 问诊 可 知 病 鸭 拉 白 色 稀
１５ １ 糖 类 分 解 试 验 ．． 结果。 １５２ 硫 化 氢 试 验 ．．
挑 取 普 通 琼 脂 平 板 上 可 疑
菌 落 接 种 于 各 种 糖 培 养 基 上 ３ ｃ 培 养 ２ ｈ．观 察 ７Ｃ ４ 挑 取 普 通 琼 脂 平 板 上 可 疑 菌
膜 覆 盖 。 胆 囊 肿 大 ． 汁 充 盈 。小 肠 臌 气 ， 膜 增 胆 粘
料 分 别 划 线 接 种 于普 通 琼 脂 平 板 、麦 康 凯 琼 脂 平 板 、伊 红 美 蓝 琼 脂 平 板 及 营养 肉 汤 于 ３ ℃有 氧 情 ７
况 下 培 养 ２ ｈ后 观 察 结 果 ４ １４ 涂 片 染 色镜 检 ． 菌 落 形 态
１５ 生 化 试 验 ．
挑 取 普 通 琼 脂 平 板 上 可 疑
霉 素 （）泰 乐 菌 素 （Ｌ 、 红 霉 素 （）利 福 平 （ Ａ 、 氟 沙 星 （Ｆ ）诺 氟 沙 星 （Ｏ 、 丙 沙 星 Ｋ、 Ｔ ）硫 Ｅ、 Ｒ ）氧 Ｏ Ｌ、 Ｎ Ｒ）环
ｆ Ｉ） 恩 诺 沙 星 ｆ Ｎ ） 药 。结 论 ： ＣＰ 、 Ｅ Ｒ耐 交替 使 用 头 孢 噻 肟 、 头孢 曲松 钠 、 大霉 素 、 庆 头孢 拉 啶 和 氟苯 尼 考 对 该 病 进 行 治疗 ， 临床 效 果 显 著 。 关 键 词 ： 大肠 杆 菌病 ； 离 ； 定 ； 鸭 分 鉴 药敏 试验 中 图分 类 号 ：８ ４４３ ￥ ５ ． 文献 标 识 码 ： Ｃ 文 章 编 号 ：６ ３ １ ８ （ ０ ０）４ ０ ３ — ３ １７ — ０ ５ ２ １ ０ — ０ ９ ０
鸭致病性大肠杆菌的诊治方法及预防措施
PECIAL ECONOMIC ANIMALS AND PLANTSS鸭致病性大肠杆菌的诊治方法及预防措施●李东华（河南省扶沟县畜牧工作站河南周口461300）摘要：随着我国鸭养殖业迅速发展，养殖规模扩大，养殖密度增加，鸭类大肠杆菌病也随之而来。
本文分析了鸭类大肠杆菌疾病发生的原因流行特征及防治方法，提出了保持养殖环境干净卫生以及加强饲养管理等措施，进而促进鸭类养殖健康发展。
关键词：鸭；致病性大肠杆菌；诊治；预防鸭大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌导致的细菌性传染病，此病一年四季都可发生，气温多变的冬春季节较为多发，特别是3~6周龄的雏鸭发病较多。
在日常养殖过程中，饲料营养失衡以及环境通风不畅等因素都会引发大肠杆菌疾病的发生，继而对鸭类养殖业造成危害。
本文根据鸭致病性大肠杆菌的发病原因及特点，寻找可靠有效的诊治方法及预防措施。
1鸭致病性大肠杆菌的发病原因及疾病特点1.1鸭致病性大肠杆菌发病原因首先，鸭种蛋被污染或种鸭孵化机器消毒不彻底，导致种鸭在孵化过程中被感染，种鸭脐带愈合不完全诱发大肠杆菌性脐炎，或者全身性败血病。
其次，环境污染也易引发此病，被污染的饲料或水源，可引起大肠杆菌疾病；各种鸭类病毒疾病容易继发细菌感染，比如发生鸭流感后继发大肠杆菌；养殖人员对其滥用抗生药物，致其体内大量有益菌被杀死，鸭类自身免疫力下降，条件性致病菌发病；最后，环境温差过大或者受到过度惊吓等应激情况下，使鸭机体抵抗力下降，最终引发大肠杆菌疾病。
1.2大肠杆菌疾病的特点雏鸭脐炎雏鸭在1~7d发病，脐带周围会出现发黑出血的症状，卵黄呈黄绿色，散发出腐臭味，感染鸭肝脏内出血，并有呼吸困难及肺部出血、充血现象。
败血型这是大肠杆菌病症的主要表现形式，各个阶段的鸭类都可能会感染，各种疾病引发的大肠杆菌病都可能转变成这种病症，感染病鸭出现无精打采、羽毛逆立、较少走动、少食或者不进食的症状。
肠炎主要因为进食了被污染的饲料或者水源而引起的，感染病鸭表现为体重下降、毛色无光泽、饮水量增加及排黄绿色稀溏排泄物等[1]。
鸭致病性大肠杆菌的分离及人工感染鸭的组织病理学研究
鸭致病性大肠杆菌的分离及人工感染鸭的组织病理学研究摘要:经过菌落形态､染色形态､生化试验,从来自湖北某鸭场的30份病料中,分离到20株鸭大肠杆菌｡以3.0×108CFU/mL剂量感染健康昆明鼠和健康樱桃谷鸭,鼠和鸭分别在感染后8 h和12 h出现症状,12 h和18 h后开始出现死亡,而对照组则未出现任何症状,表明该菌株为致病性菌株｡药物敏感试验结果显示该鸭场分离菌株对某些药物已经产生很强的耐药性｡人工感染鸭的组织病理学结果表明其肝脏､心脏有广泛的纤维素渗出物且发生严重的变性､坏死｡关键词:鸭致病性大肠杆菌;分离;药敏试验Isolation of Pathogenicity E.coli from Ducks and Histopathological Representation of the Experimentally Infected DucksAbstract: 20 duck pathogenic Escherichia coli from 30 clinical samples of a duck farm in Hubei province were isolated and confirmed by microscopic morphology and biochemical assay. Subsequently, they were used to infect healthy Kunmin mice and Cherry valley ducks experimentally with 3.0×108 CFU/mL. Typical clinical manifestations were observed after eight hours and twelve hours in the infected mice and ducks, respectively. And after twelve hours and eighteen hours respectively, the mice and ducks got to die. But there was no any symptom in the control group. Drug sensitivity test indicated that some strains isolated were highly resistant to certain antibiotics. The histopathology tests of experimentally infected ducks showed that livers and hearts had lots of fibrinousexudate, and became denaturation and necrosis. Key words: duck pathogenic Escherichia coli; isolation; drug sensitivity tests鸭大肠杆菌是引起鸭大肠杆菌病的病原,鸭大肠杆菌病是一种急性败血性传染病,又名鸭大肠杆菌败血病[1]｡该病在临床剖检上主要表现为纤维素性心包炎､肝周炎､气囊炎｡各种年龄的鸭均可感染,雏鸭最易感,2~6周龄多发,发病率和死亡率较高,在商品肉鸭中死亡率可高达50%左右,而且常常与鸭传染性浆膜炎混合感染,给养鸭业造成了严重的经济损失｡随着养鸭业的日益发展和集约化程度的提高,鸭大肠杆菌病越来越多,支原体､病毒细菌､环境因素常加重或诱发大肠杆菌病｡调查显示[2,3],鸭大肠杆菌病在我国不同类型的养鸭场中均普遍存在,流行广泛,且血清型众多,不同地区差异较大｡本次试验对湖北省某鸭场的大肠杆菌进行了分离鉴定与组织病理学研究,并对分离株进行药物敏感性试验,以便指导临床合理用药,也为今后进一步筛选优势血清型菌株制备灭活疫苗预防本地的大肠杆菌病提供科学依据｡1材料和方法1.1材料病料采集于湖北省某鸭场病､死鸭的肝脏,心脏和脑｡麦康凯琼脂､伊红美蓝琼脂､生化试验微量发酵管和药敏纸片均购自杭州微生物试剂有限公司｡小白鼠购自湖北省实验动物研究中心｡2周龄健康樱桃谷鸭购自武汉某鸭场｡普通营养琼脂､普通营养肉汤为本实验室自制｡1.2方法1.2.1细菌的分离无菌操作取病料直接划线于麦康凯琼脂上,37℃培养24 h,观察结果｡从其中挑取可疑菌落,进行革兰氏染色､瑞氏染色,镜检,并划线于伊红美蓝琼脂上,观察菌体形态及染色特征｡1.2.2细菌的纯培养从麦康凯琼脂上挑取红色､圆形隆起､光滑的菌落在新的麦康凯琼脂上划线,37℃培养24 h,观察结果,再次染色､镜检｡若菌体形态和染色特性符合大肠杆菌的形态和染色特性时,挑取剩余的半个菌落接种于麦康凯斜面培养基,37℃培养24 h,然后取出置4℃冰箱保存备用｡1.2.3生化特性鉴定将分离的20个菌株,接种于普通肉汤,37℃培养24 h后进行葡萄糖､蔗糖､乳糖､麦芽糖､甘露醇､棉子糖､尿素､H2S､靛基质､鸟氨酸脱羧酶､赖氨酸脱羧酶､M.R､V-P试验｡1.2.4致病性试验1)小白鼠致病性试验:取已分离纯化的每个菌株的18 h普通肉汤培养物(菌液浓度为 3.0×108CFU/mL),经纯粹检验合格,分别腹腔接种小白鼠(体重18~25 g),0.2 mL/只,每个菌株接种6只,对照组经相同的途径接种0.2 mL普通肉汤培养液,接种6只｡接种后饲养观察120 h,记录小白鼠的死亡时间并从死亡小鼠的肝脏､心脏分离致病菌｡2)鸭的致病性试验:随机抽取10株已分离鉴定的致病性大肠杆菌分别胸肌接种2周龄雏鸭,0.5 mL/只(菌液浓度为3.0×108CFU/mL),每个菌株接种6只,对照组经相同的途径接种0.5 mL普通肉汤培养液,接种6只｡接种后饲养观察7 d,7 d后迫杀仍存活的雏鸭,并从病死鸭和迫杀活雏鸭的肝脏､心脏､脑组织中分离致病菌｡1.2.5药敏试验按世界卫生组织(WHO)推荐的Kirby-Baure法进行｡测试菌的制备:从被检菌株中随机挑取5株细菌接种于同一支含4~5 mL的营养肉汤培养基的试管中,37℃培养16~18 h,用灭菌生理盐水稀释至其浊度相当于0.5号麦氏标准,此时肉汤中细菌数约为1×108CFU/mL｡接种平板:用无菌棉签吸取调节好浓度的菌液,在营养琼脂平板表面涂抹接种,务必将细菌菌液涂布均匀｡每个菌株接种3个平板,作好标记｡在琼脂平板上贴药敏纸片:用灭菌尖头镊子夹取各种药敏纸片,按一定密度分别贴到上述已涂布细菌的培养基表面,用镊子轻压,确保药敏试纸片与琼脂表面完全接触｡纸片贴完15 min后将平板翻转过来,底部在上置37℃温箱内培养18 h,取出观察,记录结果｡1.2.6组织病理学试验取攻毒鸭只的肝脏､心脏､脑固定于10%福尔马林溶液中,常规石蜡切片,分别进行HE染色｡2结果2.1临床症状及解剖特征自然感染鸭大肠杆菌的病鸭临床表现为精神不振,食欲降低,排黄绿色粪便,间或有神经症状｡解剖发现有的病鸭有广泛性的纤维素性心包炎､肝周炎､气囊炎､脑膜炎特征｡气囊壁浑浊､增厚,有灰白色纤维素性渗出物;肝脏肿大,呈暗红色或土黄色｡图1为自然感染鸭大肠杆菌病鸭的解剖照片,图中可见典型的纤维素性肝周炎､心包炎､气囊炎病理变化｡2.2分离菌的培养特性及形态特征经37℃培养24 h,分离菌在麦康凯琼脂上形成红色､圆形､隆起､光滑湿润､边缘整齐的中等大菌落;在伊红美蓝琼脂上形成紫黑色､具有金属光泽的小菌落;在普通琼脂斜面上为灰白色菌落;在普通肉汤中呈均匀混浊､管底有灰白色的沉淀,轻摇试管时,沉淀物呈絮状慢慢升起｡取培养物涂片,革兰氏染色,镜检可见到两端钝圆的革兰氏阴性短杆菌;瑞氏染色能见到两端浓染的杆菌｡20株细菌的培养特性和形态特征均符合大肠杆菌的特性｡2.3分离菌的生化特性对分离出的20株细菌分别进行了生化试验,结果均符合大肠杆菌的生化特性(见表1)｡2.4药敏试验药敏试验结果显示,此次该鸭场分离的大肠杆菌对多粘菌素B､环丙沙星､氟苯尼考､强力霉素高度敏感,对卡那霉素､庆大霉素中度敏感,对土霉素､氨苄青霉素､头孢呋肟､磺胺甲基异噁唑､头孢噻吩､恩诺沙星有耐药性｡2.5致病性试验1)小白鼠致病性试验:接种分离菌的小白鼠8 h后均出现精神不振,12 h开始出现死亡,48 h全部死亡｡剖检死亡的小白鼠可见肝脏肿大淤血､表面有散在针尖大小的出血点,心包膜出血｡从死亡小白鼠的肝脏､心脏中均可分离到分离菌｡对照组小白鼠健活,迫杀时未见任何肉眼变化,肝脏､心脏均未分离出分离菌｡2)雏鸭致病性试验:10株鸭大肠杆菌分离株接种雏鸭12 h后普遍出现精神萎靡等症状,于接种后18 h开始出现死亡｡剖检死亡鸭,24 h内死亡的雏鸭可见肝脏肿大,气囊炎性渗出｡24 h以后死亡的雏鸭可以普遍观察到纤维素性肝周炎､心包炎､脑膜炎､气囊炎｡肝脏肿大,表面覆盖灰白色纤维素性渗出物,且有大小不一的坏死灶;心包积液,心包膜增厚､浑浊｡未死亡雏鸭迫杀后均可观察到不同程度的肝周炎､心包炎､脑膜炎､气囊炎｡从死亡和迫杀雏鸭的心脏､肝脏和脑中均能分离出分离菌｡对照组雏鸭健活,迫杀时未见肉眼变化,心脏､肝脏和脑中均未分离出分离菌｡图2为人工感染鸭致病性大肠杆菌的病鸭的解剖照片,图中可见典型的纤维素性肝周炎､心包炎等病理变化｡2.6组织病理学变化鸭感染大肠杆菌后,光镜下观察发现,各个时间死亡的鸭只和7 d后迫杀的鸭只的肝脏､心脏､脑均有不同程度的损伤,其中以2~7 d死亡鸭只和7 d迫杀鸭只病变最明显｡肝脏:肝脏内有大量纤维素性渗出物;肝细胞严重变性､坏死(见图3);肝索增宽､排列紊乱有断裂;肝小叶上有许多坏死灶,有大量炎性细胞浸润｡心脏:心脏外膜形成一层较厚的纤维素性渗出物,其中有大量变性､坏死的炎性细胞(见图4);心肌纤维肿胀变性,有的呈空泡样;心肌纤维间隔增宽,浸润纤维素性渗出物和大量炎性细胞｡脑:脑血管周围间隙增宽,神经细胞周围有少量胶质细胞围绕,“嗜神经元现象”､“卫星现象”均可见(图5);水肿现象严重,神经细胞变性坏死,核浓缩,有胶质细胞结节形成｡3讨论1)在自然感染的病死鸭中,大肠杆菌的分离从脑中分离率最高,其次是肝脏和心脏,建议把脑作为分离大肠杆菌的主要对象｡人工感染鸭的致病性试验结果显示,在肝脏､心脏､气囊中可见到典型的纤维素渗出性炎症,并且从病死鸭的肝脏､心脏､脑中分离出了鸭致病性大肠杆菌,表明本病理模型复制成功｡2)本研究还对致病性大肠杆菌人工感染鸭的组织病理学进行研究,试验结果表明,各个时间死亡的鸭只和7 d后迫杀的鸭只的肝脏､心脏､脑均有不同程度的损伤,其中以2~7 d死亡鸭只和7 d迫杀鸭只病变最明显,光镜下观察到肝脏､心脏有广泛的纤维素渗出性炎症,并且发生了严重的变性､坏死｡关于鸭大肠杆菌人工感染鸭的组织病理学方面的研究报道甚少,可能与临床上鸭大肠杆菌病不太受重视有关｡3)鸭大肠杆菌病是一种常见病多发病,随着规模化养鸭的发展和区域集约化养殖的扩大,环境与水源的污染加重,加上许多鸭场并未完全实行全进全出的管理制度,造成该病危害日益严重,往往一个场发病,可导致集养区成片流行;另一个特点是鸭大肠杆菌病与传染性浆膜炎混合感染较多,还会造成更大的经济损失[4]｡因此,鸭大肠杆菌病的防治是至关重要的｡4)目前临床上广泛使用抗生素治疗大肠杆菌等细菌性疾病,但长期过量使用抗生素,易导致大量耐药菌株的产生[5],此次该鸭场分离的大肠杆菌对土霉素､氨苄青霉素､头孢呋肟､磺胺甲基异噁唑､头孢噻吩､恩诺沙星产生了很强的耐药性｡细菌具有多种携带耐药基因的可转移遗传因子,如质粒､转座子､噬菌体､整合子—基因盒系统,这些可转移遗传因子能在细菌间广泛传递耐药基因,可把耐药基因传递给其他大肠杆菌,同时,食源性动物耐药菌可通过多种途径将耐药基因传递给人类致病菌,危害人类健康[6],还可引起禽产品中药物残留､食品安全问题｡由此可见,在养殖场中要定期分离病原,进行耐药性监测,观察耐药性的发展和变化,以指导临床合理用药,且要有法规来规范兽药的使用｡筛选出致病性大肠杆菌的优势血清型菌株生产灭活疫苗防治鸭大肠杆菌病,可大大减少药物应用,对避免细菌耐药菌株的产生､保证禽产品安全､促进人类的健康具有重要的现实意义｡参考文献:[1] 周新民,陈桂银.鸭高效生产技术手册[M].上海:上海科学技术出版社,2002.335.[2] 刘吉山,沈志强,王燕,等.我国部分地区禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验[J]. 中国家禽,2005,27(7):14-16.[3] 宋立,宁宜宝,张秀英,等.中国不同地区家禽大肠杆菌血清型分布和耐药性比较研究[J].中国农业科学,2005,38(7):1466-1473.[4] 林毅,张道永,杨晓梅,等.幼肉鸭混合感染鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌的诊断与防治[J].中国兽医杂志,2001,37(1):23-24.[5] V AN DEN BOGAARD A E,LONDON N,DRIESSEN C,et al.Antibiotic resistance of faecal Escherichia coli in poultry,poiltryfarmers and poultry slaughterers[J].Journal of Antimicrobial Chemotherapy.200l,47:763-771.[6] 高光.畜禽食源性细菌耐药性与食品安全､现状与对策[J].中国禽业导刊,2003,20(4):12-15.。
鸭大肠杆菌病的诊断及防治体会
摘 要：鸭大肠杆菌病是一种急性、败血性传染病，发病急，死亡快，主要侵害2～6 周龄的雏鸭。
主要特征病变为发生心包炎、肝周炎、气囊炎等。
关键词：鸭；大肠杆菌；诊断；防治1 发病情况病鸭大多精神萎靡，食欲减退，缩颈嗜睡，眼角和鼻孔有黏性分泌物，粪便稀，色灰白或发绿，部分病鸭张口呼吸。
病情严重的患鸭多在4日内死亡，死亡率15%左右。
2 诊断2.1 临床诊断及剖检从病鸭发病后症状态临床表现的症状，怀疑是大肠杆菌病。
剖检部分病、死鸭，主要病变是心包膜、心内膜、肝被膜及气囊膜表面有黄白色纤维性渗出物，腹腔有渗出液，味恶臭。
患鸭肝脏肿大，青铜绿色，脾脏肿大、发黑。
此时初步诊断为大肠杆菌感染。
2.2 实验室诊断2.2.1 病原分离及镜检用无菌接种环沾取鸭的肝脏新鲜剖面，分别划线接种于10块伊红美蓝平板和10块麦康凯琼脂平板，37℃培养24h。
伊红美兰琼脂有7块培养良好，菌落黑色，带金属光泽。
菌落直径约为1～2mm，边缘整齐。
麦康凯琼脂有8块培养良好，菌落浅红色。
在伊红美蓝平板和麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落在普通琼脂斜面上进行纯培养，37℃培养 18h。
15块平板有13块培养效果好。
菌落灰白色，圆形、隆起、湿润光滑。
然后分别挑取纯培养物涂片、干燥，革兰氏染色后镜检。
镜下细菌菌体淡红色，两端钝圆，表面见有鞭毛及大量菌毛。
将分离到的13个菌株在斜面琼脂中培养后冷藏保存。
2.2.2 生化鉴定将分离到的13个菌株进行生化试验，所有菌株在肉汤中生长良好，肉汤均匀浑浊，管底形成沉淀。
所有菌株均能发酵麦芽糖、甘露醇、葡萄糖。
3个菌株能发酵乳糖。
所有菌株均不能产生H2S、不分解尿素、不液化明胶。
V-P 试验阴性，M-R 试验和吲哚试验阳性。
经分离培养和生化鉴定，这13个菌株可确定为埃希氏大肠杆菌。
2.2.3 大肠杆菌血清型鉴定用大肠杆菌 O 因子血清（O1～O163）鉴定分离到的13 株致病性大肠杆菌，结果有9个菌株分属3种血清型O1（3）、O78（5）O109（1），以此作为制备该鸭场“自家苗”的多价抗原。
大肠埃希氏菌生化鉴定结果
大肠埃希氏菌生化鉴定结果大肠埃希氏菌（Escherichia coli）是一种常见的细菌，可以引起多种感染性疾病，包括腹泻、尿路感染和食物中毒等。
鉴定大肠埃希氏菌的生化特征可以帮助确定病原菌的身份以及其潜在的耐药性和毒力因子。
本次实验目的是对一株致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，以确认其菌株的性质和特征。
首先，我们进行了气体产生实验。
在Triple Sugar Iron Agar（TSI）培养基中，观察到菌落周围发生了气体产生，此结果表明该菌株具有产气性。
产气性通常意味着大肠杆菌等需要葡萄糖产生酸，进而分解产生气体的细菌。
其次，我们进行了甲烷发酵试验。
在Methyl Red（MR）试剂中，当菌液发酵产酸时，溶液颜色由黄色变成红色。
然而，该菌株在MR试剂中没有产生红色反应，这表明它无法通过甲烷发酵产酸。
这一结果与典型的大肠杆菌不同，因为大肠杆菌通常可以通过此途径产酸。
进一步，我们进行了亮氨酸脱氨酶试验。
使用亮氨酸脱氨酶（LDC）培养基，如果菌株具有亮氨酸脱氨酶活性，菌液会变色。
然而，我们观察到该菌株在培养基中没有出现任何颜色变化，这表明它不具备亮氨酸脱氨酶活性。
亮氨酸脱氨酶活性通常是大肠杆菌的典型特征之一。
此外，我们还进行了尿素酶试验。
使用尿素平板培养基，如果菌株具有尿素酶活性，培养基颜色将由黄色变为粉红色。
然而，我们观察到该菌株在培养基上未显示出任何颜色变化。
这暗示着该菌株可能缺乏尿素酶活性，与大肠杆菌的典型特征不同。
最后，我们进行了青霉素酶试验。
使用青霉素酶试纸进行反应检测，在试纸上出现蓝色点状斑点表示菌株具有青霉素酶活性。
而对于这个菌株，我们观察到在试纸上没有出现蓝色斑点。
这意味着该菌株可能对青霉素类药物敏感，这对于抗生素选择治疗提供了重要信息。
综上所述，通过对致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，我们发现该菌株具有产气性，但与典型的大肠杆菌不同，它不表现出甲烷发酵、亮氨酸脱氨酶和尿素酶活性。
一株鸭源巴氏杆菌的分离鉴定和致病性研究
存食 品 营 养 学上 ． 肉类 食 品 多 汁 性 而 言 ． 肉 中 就 肌
水 分 含 量 高 ． 质 呈 现 多 汁 性 ． 利 于 改 善 适 口 性 。 伏 肉 有 牛 白 山 羊 肉 质 的 灰 分 含 量 适 中 ． 分 含 量 、 白 质 含 量 水 蛋
分 别 高 出龙 陵 黄 山羊 、云岭 山 羊 、昭通 山 羊 ６８ ％ １ 、 ．２ １ ０ １
３２ ％ Ｉ］ ２２ ％ ｌ 说 明 伏 牛 白 山 羊 肉 质 氨 基 酸 含 量 ．８ ｌ １ 和 ．８ 】 ２ 】 丰 富 ．南 于氨 基 酸具 有 促 进 大脑 发 育 ．调节 松 果 腺 、 乳
能及 肉质 ［］云南 农业 大学 学 报 ，９ ９，４ １ ：８ ６ ． Ｊ． １ ９ １ （ ）５ — １ １ 范 汀平 ， ２ 葛长 荣 ． 和 禄 ， ． 彭 等 昭通 山 羊产 肉性 能及 肉
质 特 性 ［ ］ 食 家 畜 ，９ ８ （ ） １ — ０ Ｊ． 草 １ ９ ，２ ：７ ２ ．
５ 中华 人 民共 和 国 肉 与 肉 制 品 总 脂 肪 含 量 测 定 Ｃ ／ Ｂ
Ｔ ６ ５７ １８ ９ ９ ．— ９ ８国 家 标 准 『 １ ０ ８ Ｓ． ０ ． ２ ６ 中 华 人 民 共 和 围 肉 与 肉 制 品 灰 分 测 定 ＧＢＴ ６ ５１— ／９ ９ ．８
１８ ９ ８国 家 标 准 『 ］ ０ ８ Ｓ． ０． ２ ７ 中 华 人 民 共 和 国 食 品 中 氨 基 酸 测 定 Ｇ ／９ ９ ．８ ＢＴ ６ ５１ — １８ ９ ８国 家 标 准 『 １２ ０ ． Ｓ ．０ ３
１ 王小 生 ． 需 氨基 酸对 人 体健 康 的影 响 『 ］中国食 物 ３ 必 Ｊ．
病原菌毒力因子的检测及其应用研究
病原菌毒力因子的检测及其应用研究病原菌是一种能够引起疾病的微生物，对人类和动物健康造成严重威胁。
毒力因子是病原菌引起疾病的重要因素之一，直接关系到病原菌的毒力强度，因此对病原菌毒力因子的检测和应用研究十分重要。
一、病原菌毒力因子的定义和分类病原菌毒力因子是指病原菌中能够引起宿主出现病征的分子，包括毒素、细胞壁成分、蛋白酶、抗凝血酶、鞭毛等。
不同种类病原菌毒力因子的种类也有所不同，不同毒力因子造成的病征和影响也不尽相同。
目前对病原菌毒力因子的研究主要集中在毒素方面。
基于毒素类型，可将病原菌毒素分为内毒素和外毒素两大类。
内毒素（Endotoxin）也叫脂多糖，主要存在于革兰氏阴性菌包括沙门氏菌、大肠杆菌等的细胞壁中，是一种引起急性炎症反应的高度毒性物质，能够刺激宿主抵抗细胞，引起全身炎症反应综合征。
外毒素则包括肝炎病毒、百日咳杆菌等多种生物类别，毒素作用于宿主细胞的各种机制也千差万别。
二、病原菌毒力因子的检测技术病原菌毒力因子检测技术是研究病原菌毒力因子的基础，了解病原菌毒力因子组成和类型有助于分析病原菌感染机制，进而开发治疗”破毒素”的相应药物。
现有的病原菌毒力因子检测技术主要包括以下几类。
1. 基于抗体的检测法抗体检测法是目前病原菌毒力因子检测中最为常用的方法，它通过检测病原菌分泌的毒素所特异激励的抗体来评估毒素的含量水平或者活性程度。
具体方法包括放射免疫测定（RIA）、酶联免疫测定（ELISA）和西式免疫印迹（Western Blot）等。
2. 基于PCR技术的检测法PCR技术通过引导特异引物，扩增DNA序列，从而确认该病原菌是否存在。
这种技术可用于检查特定毒素基因的存在与否，同时也能够帮助确认某些病原菌的存在性。
PCR技术的高灵敏性、高特异性和快速性使得它在病原菌毒力因子检测方面具有广阔应用前景。
3. 基于生物学活性检测法生物学活性检测法是直接通过对感染细胞和组织的影响，评估病原菌毒力因子的方法。
GB／T7713-1987图
刘华等
一株孔雀源大肠杆菌分离鉴定与致病特性初步研究 特性 ［ ］ 扬州： Ｄ． 扬州大学 ，０ ５ ２０．
２ ９
的学者 认为不 同致病 性 或相 似 致病 性 菌株 质 粒 电泳 图谱
不 同， 与致病 性有关 的基 因在正常情 况下 可能 与无关 核 苷 酸结合 在一起 ， 表现 出多种 不 同 的 电泳 图谱 特 征¨ 。因 此 靠血清 型来判 定菌株致病 性存 在不 足 ， 而主要 是取 决 于
—
３ ２ 禽 源高致 病性大 肠杆菌 毒力基 因的来 源 与公 共卫 生 ． 意义 大量 试验研 究表 明 ， 大肠杆 菌的致病 性取 决 于其所
９．
［０ 王亚君 ， １］ 樊琛 ， 李一经．ｔ ｉ Ｃ基 因与鸡 源大肠杆菌致病性 的相 ｍ
关 ［ ］ 畜牧 兽 医学 报 ，０ ４ ３ （ ） ６０— ８ ． Ｊ． ２ ０ ，５ ６ ：８ ６４
［ ２ Ｊｈ ｓｎＴ ，Ｗａ ｎｍ ｅｌｒＹ，Ｄ ｅｋｔ Ｃ，ｔ １ ｄ ｎｉｃｔｎｏ １ ］ｏｎｏ Ｊ ｎ ｅ ｕ ｈｅ ｏｔｏ ｅ ａ．Ｉｅｔ ａｉ ｆ ｔ ｉ ｆ ｏ
ｍｉ ｉ ｌｐ ｅ ｉｔ ｒ ｆ ａ ｉｎ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｃ ｅ ｉｈ ａ ｃ ｌ ｖｒ ｌ ｎ ｅ ｆｒ ｎ ｍａ ｒ ｄ ｃｏ ｓ ｏ ｖａ ａｈ ｇ ｎ ｃ Ｅｓ ｈ ｒｃ ｉ ｏ ｉ ｉｕｅ ｃ ｏ
其所 产生 的特定 的毒力 因子 ， 如菌毛 、 铁摄 取 系统 、 膜蛋 外 白以及毒素 等 。毒力 因子 的检 测 已 经成 为 确定 致 病性 大
肠杆 菌的常用 方法 ］ 。大肠 杆菌 的毒 力基 因携 带情 况
Ｅｓ ｈ ｒ ｈ ａ ｃ ｌ ｉｕ ｅ ｃ ａ ｔｒ ｓ ｃ ａｅ ｔ ｏ ｉ ｅ ｔ ｅ ａ ｉ ｃ ｅ ｉ ｉ ｏ ｉ ｒ ｌ ｎ ｅ ｆ ｃｏ ｓ ａ ｏ ｉｔｄ ｗｉ ｃ ｌ ｃ ｖ ｓ ｈ ｓ ｐ ｉ ｍｉ ｎ ｃ
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一株鸭源大肠杆菌致病性及毒力因子检测
古丽森汗·卡开沙;罗鹏飞;库拉西·阿尔斯坦别克;梁晏
【期刊名称】《草食家畜》
【年(卷),期】2012(000)002
【摘要】从新疆某鸭场的病鸭中分离到1株大肠杆菌,＂O＂抗原血清学鉴定为
O78,药敏试验结果显示该分离株已产生较高程度的耐药性。
对鼠疫菌素受体基因fyuA、铁调节蛋白基因irp2、LEE致病岛转录活化因子ler、紧密粘附素eaeA、Ⅰ型菌毛必须蛋白基因fimC、P型菌毛结构基因papA和血清耐受基因iss进行基因测序分析,结果表明该株细菌存在强毒力基因（high-pathogenicity island,HPI）。
动物实验表明,该菌可引起雏鸭发生急性全身败血症;10日龄雏鸭半数致死量为2.0×105CFU/ml,表明该菌具有高致病性。
%Xinjiang duck field disease duck isolated from 1 strains of Escherichia coli , serological identification of antigens by 078, Drug sensitive test showed that the isolates have a high degree of resistance. The plague bacterium receptor gene fyuA ,Iron regulatory protein gene irp2 ,LEE pathogenicity island of transcriptional activation of factor ler .The tight adhesion of eaeA .Type I pili must protein gene fimC ,The type P pilus structure gene papa and serum resistance gene ISS gene sequencing analysis ,The results showed that the strains of bacteria exist strong virulence ge （high-pathogenicity island, HPI）o Animal experiments show that, The bacteria can cause the occurrence of acute systemic sepsis in ducklings; 10 day old duck half lethal dose2.0＊105 CFU/ml,Show that the bacteria with high pathogenicity.
【总页数】5页(P65-69)
【作者】古丽森汗·卡开沙;罗鹏飞;库拉西·阿尔斯坦别克;梁晏
【作者单位】新疆阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心,新疆阿勒泰836500;新疆阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心,新疆阿勒泰836500;新疆阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心,新疆阿勒泰836500;新疆石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000
【正文语种】中文
【中图分类】S852.612
【相关文献】
1.一株鸭源新城疫病毒分子特性及对SPF鸡、鸭致病性的比较研究 [J], 吴伟;刘怀然;刘胜旺;陈洪岩
2.鸭源致病性大肠杆菌四环素类耐药基因检测 [J], 方志超;刘书超;林雅;简燕娟;韩冠双;吕朋沙;程方俊
3.RAPD用于鸭疫里默氏杆菌鸭源致病性大肠杆菌和鸭沙门氏菌的遗传相似性及聚类分析的初步研究 [J], 汪铭书;程安春;李淑梅;朱德康;陈孝跃
4.猪肺源致病性大肠杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染病原的分离鉴定及主要毒力因子的检测 [J], 蔡瑶; 周雪珂; 江朝源; 曾喻兵; 徐志文; 朱玲
5.江苏及周边地区鸭致病性大肠杆菌血清型、毒力因子及耐药研究 [J], 郭长明;吴植;朱善元;王永娟;封琦;董洪燕;袁橙;徐海;吴双
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。