微生物学第三章消毒与灭菌
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第3章 消毒与灭菌
长。
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3.温度
温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。温度每增高
l0℃，重金属盐类的杀菌作用约增加2～5倍，石炭酸的杀
菌作用约增加5～8倍。
4.酸碱度
消毒剂杀菌作用受pH影响。如新洁尔灭pH 9时
杀菌作用强。同时pH也影响消毒剂的电离度，一般说，未 电离的分子，较易通过细胞壁，杀菌效果好。 5.有机物 6.药物颉抗 7.其他因素 环境中有机物，可降低消毒剂效果。 两种消毒剂合用时，有的能相互颉抗。如阴 湿度、穿透力、表面张力等。
800nm。可见光线只有微弱的杀菌作用。 2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用，是天然杀菌因素，紫外线是日光
杀菌作用的主要因素。许多微生物在直射日光下，半小时到数小时即 可死亡。芽抱的抵抗力强，经20h才死亡。
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3.紫外线 紫外线中波长200-300nm部分具有杀菌作用，其 中以265-266nm段的杀菌力最强，这与DNA吸收光谱范围一 致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm，杀菌力强而稳定。
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（1）干热灭菌法 包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。
火焰灭菌法是以火焰直接烧灼杀死物体中微生物的方 法。分为灼烧和焚烧两种。 热空气灭菌指利用干热灭菌器以干热空气进行灭菌的 方法。用于耐高温物品。灭菌条件：160℃维持 l-2h，才 能杀死所有微生物（芽孢、孢子）。
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高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121 ℃ 20~30分钟 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 水蒸汽100 ℃ 15~30分钟(繁殖体) 巴氏消毒法 较低的温度（61 ℃ 30分钟）杀灭致病菌 间歇蒸汽灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌
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巴氏消毒法具体方法有三种
消毒与灭菌
烷化剂
蛋白质、核酸烷基化 环氧乙烷
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消毒剂的作用机理
使细胞膜通透性受损；
使菌体蛋白变性和凝固，失去生物活性， 导致细菌死亡；
破坏或改变蛋白质与核酸功能基团，使菌 体酶蛋白失去酶的活性。
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二、化学消毒灭菌法
（一）高效消毒剂 （high-level disinfectants） 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷
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生物安全水平分级
生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分 为4级，以表示实验室的相应生物安全防护水平。
BSL－1：防护水平最低,普通建筑物即可，每个 实验室应设洗手池。
BSL-2：实验室的门有可视窗。在实验室工作区 域外还应当有供长期使用的存储空间。在实验室 内使用专门的工作服；应戴乳胶手套。配备高压 蒸汽灭菌器，在实验室内配备生物安全柜。
间歇灭菌法
本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到 灭菌的目的。
只适用于不耐热（100℃以内）的营养物质如 某些培养基的灭菌。
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高压蒸汽法 Autoclaving
压力：1.05kg/cm2 温度：121.3℃ 时间：15～30min 效果
杀死一切微生物， 包括芽胞
（二）中效消毒剂 （intermediate-level disinfectants） 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂
（三）低效消毒剂 （low-level disinfectants） 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾
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消毒与灭菌技术PPT课件
煮沸消毒法（boiling sterilization）
要求 适用 方法 注意
❖殖❖配可强防❖物❖橡▪▪▪▪经应 有 空 物煮将 的体成提杀锈取 将适如❖浸沸❖❖第品胶轴将腔品消间从间后轴碗应 置5前将消如出，1高菌。▪， ， 当碳用金没二根玻橡～节物导不类及冷为放节、毒用 于%物毒中海 水 延水据璃胶达沸作酸的管品宜于属在次消水入1或盆1时等无 无～0器制物拔 长0器须刷放的品时途毒或，盖不到点用氢～的耐、水水间菌 菌分2皿品品械洗先置高时温时沸打能1刷间加沸消达，钠煮%湿搪；中沸器 容5应用性钟或在干过间水间开重的点m点洗从入毒还1海加时的用纱质、瓷械 器，后带腔净多中为叠再i可地n受0也纱布决干水物拔内盖，将 内效可入浓放5，放耐 、5然重区杀气～低布 包定℃灌的大每入要入物净沸品果去水度高玻后新气1压灭包 好放水容小，，保水，增0品，后，。污中时温璃m压加计裹 ，入影煮器相繁需消证中高增及i全计则n好 待水、低，，应同响的和热时毒物后适时后 水的部算在时煮， 沸时
特点：紫外线穿透力较弱
紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、 病毒、真菌、细菌繁殖体等。杀灭繁殖 体需3~5s；杀灭芽孢需10min以上。
杀菌机制
使菌体DNA失去转换能力而死亡； 破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解 变性； 降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失； 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭 氧。
第三章 清洁、消毒与灭菌技术
一、基本概念 二、物品清洁法 三、物理方法 四、化学方法
一 基本概念
洁清消 毒灭菌防 腐
是切清 上清上污抑 与清除 的除的迹制 繁除或 一脂物病,微 殖如或杀 切品等原生尘杀灭 微上微物埃灭物生的生的,物品物油一物生品, 长 以杀灭芽孢为准
微生物的消毒和灭菌技术
微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。
通常用化学的方法来达到消毒的作用。
用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。
灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。
防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物叫做防腐剂。
无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。
防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。
物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。
最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。
热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。
杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。
煮沸时间一般为 10~30分钟。
金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。
但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。
热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。
消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。
瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。
灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。
紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。
革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。
但结核杆菌却有较强抵抗力。
一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。
紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。
灯管距地面约 2.0~2.5m 高。
每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。
灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。
对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。
3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。
4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。
消毒与灭菌
us
毒
科
BSL-3
BSL-2
4 Ebola virus
埃博拉 丝 病毒 状
病 毒 科
第 BSL-4 ABSL-4 一 类
BSL-3
BSL-2
运输包装分
类f
无感染性 A/B 材料的操 作e
UN编 号
备注
BSL-1 A UN 2814
BSL-1 A UN 仅培养 2814 物A类
➢应用范围： 手术室、传染病房、细菌实验室空气的消毒，不耐
热物品的表面消毒。
宁夏医科大学
2、电离辐射：
➢高速带电离子、X射线、γ射线等； ➢机制：
破坏核酸及蛋白质等生物大分子； 破坏细胞膜； 并引起酶系统紊乱； 瞬间产生大量自由基，干扰DNA复制。水分子 经辐射后产生H2O2。
宁夏医科大学
➢应用范围： 常用于中药和一次性医用塑料制品的灭菌。
宁夏医科大学
➢滤过除菌：通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等 微生物除去的方法。
滤膜孔径为0.22μm，只能除去细菌，不能除去病毒、
支原体、衣原体、细菌L型等小颗粒。
宁夏医科大学
➢主要用于不耐高温 的营养液、血清、抗 菌素、空气等除菌。
宁夏医科大学
（四）干燥抑菌法
➢作用：干燥环境中微生物因失去水分致新陈代谢障碍， 菌体蛋白变性，逐渐死亡。 ➢用途：常用于保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。 利用高浓度的盐水或糖水保存食品，高渗溶液吸取菌体水 分，造成生理干燥而抑菌。
BSL-1 A UN 2814
宁夏医科大学
二、生物安全实验室的生物防护分级
《病原微生物实验室生物安全管理条例》根据实验室 对病原微生物防护的生物安全水平（biology security level， BSL）及实验微生物国家安全标准，将实验室分为四个等 级：
毒
科
BSL-3
BSL-2
4 Ebola virus
埃博拉 丝 病毒 状
病 毒 科
第 BSL-4 ABSL-4 一 类
BSL-3
BSL-2
运输包装分
类f
无感染性 A/B 材料的操 作e
UN编 号
备注
BSL-1 A UN 2814
BSL-1 A UN 仅培养 2814 物A类
➢应用范围： 手术室、传染病房、细菌实验室空气的消毒，不耐
热物品的表面消毒。
宁夏医科大学
2、电离辐射：
➢高速带电离子、X射线、γ射线等； ➢机制：
破坏核酸及蛋白质等生物大分子； 破坏细胞膜； 并引起酶系统紊乱； 瞬间产生大量自由基，干扰DNA复制。水分子 经辐射后产生H2O2。
宁夏医科大学
➢应用范围： 常用于中药和一次性医用塑料制品的灭菌。
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➢滤过除菌：通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等 微生物除去的方法。
滤膜孔径为0.22μm，只能除去细菌，不能除去病毒、
支原体、衣原体、细菌L型等小颗粒。
宁夏医科大学
➢主要用于不耐高温 的营养液、血清、抗 菌素、空气等除菌。
宁夏医科大学
（四）干燥抑菌法
➢作用：干燥环境中微生物因失去水分致新陈代谢障碍， 菌体蛋白变性，逐渐死亡。 ➢用途：常用于保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。 利用高浓度的盐水或糖水保存食品，高渗溶液吸取菌体水 分，造成生理干燥而抑菌。
BSL-1 A UN 2814
宁夏医科大学
二、生物安全实验室的生物防护分级
《病原微生物实验室生物安全管理条例》根据实验室 对病原微生物防护的生物安全水平（biology security level， BSL）及实验微生物国家安全标准，将实验室分为四个等 级：
消毒与灭菌
上,可使被处理物品中的芽胞、繁殖体全部
被杀灭,即达到灭菌目的。 适用于含糖、血清等不耐高温的营养培 养基的灭菌,或用于无高压蒸汽灭菌器而物 品又必须灭菌时。
2.紫外线( ultraviolet ray,U)杀菌法
波长200-300mm的紫外线(包括日光中紫
外线)有杀菌作用,其中波长265-266m作用
下,温度可达121.3℃,维持15-20分钟,可达 到灭菌的目的。
适用于金属器械、敷料、手术衣、生理
盐水、普通培养基等耐高温、耐湿物品的
灭菌,不适用于油类及粉剂。现在还有一种
新型的预真空压力蒸汽灭菌器,灭菌速度快,
省时节能,效果更好。
2)煮沸法:在一个大气压(101.325kPa)下,
水煮沸(温度100℃)经5分钟可杀死细菌繁
消毒效果,故消毒皮肤、器械和衣服时,需先
洗净这些污染物后再消毒； 对痰液、粪便等的消毒,宜选择受有机物影 响小的消毒剂,如漂白粉、生石灰、酚类等。
(4)其他影响
其他影响消毒效果的因素还有温度、湿度、 酸碱度等,如戊二醛溶液中加入碳酸氢钠后 才有杀菌作用。
小结
消毒是指杀灭物体上病原微生物的方法,不一定能杀死非病原微 生物或细菌芽胞。用于消毒的化学制剂称为消毒剂。灭菌是指杀 灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞在内的所有病原微 生物和非病原微生物。无菌是指物体上无活的微生物存在。防腐 是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。防腐不导致微生物死亡, 用于防腐的化学制剂称为防腐剂。无菌操作防止活的微生物侵入 机体或污染物品的操作方法称为无菌操作。无菌操作所用器具和 材料必须先经灭菌处理。物理消毒灭菌方法是利用热力射线、超 声波滤过、干燥、低温等物理因素进行消毒灭菌的方法。焚烧是 一种简单、彻底的灭菌方法,高压蒸汽灭菌法是医疗中最常用、最 有效的灭菌方法。煮沸法是一种简便、实用的消毒方法。紫外线 杀菌法能破坏DNA而导致微生物的变异或死亡。但紫外线穿透力弱, 玻璃、纸张、灰尘、蒸汽等均能阻挡紫外线,所以只适用空气消毒 或不耐热物品表面消毒。紫外线对入体皮肤、眼睛有损伤作用,使 用时应注意防护。化学消毒灭菌法只能外用或用于环境消毒。
4 消毒灭菌
A． B． C． D． E. 核酸吸收紫外线的能量 破坏DNA DNA构型 破坏DNA构型 穿透力强 常用于空气消毒 刺激眼睛和皮肤
9. 能达到灭菌效果的方法
A．煮沸10分钟 煮沸10分钟 10 干烤160℃ 1～ B．干烤160℃ 1～2小时 C．巴氏消毒法 D．高压蒸汽灭菌 E. 滤菌器滤过除菌
（3）人工紫外线灯原理：将水银放入石 人工紫外线灯原理： 英玻管中通电气化而成。 英玻管中通电气化而成。 （4）紫外线的穿透能力弱，不能通过普 紫外线的穿透能力弱， 通玻璃、尘埃， 通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及 空气、手术室、 空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病 亦可用于不耐热物品表面消毒。 房，亦可用于不耐热物品表面消毒。 杀菌波长的紫外线对人体皮肤、 （5）杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
第三章 消毒与灭菌
梅 雪
一 基本概念
消毒（Disinfection） 消毒（Disinfection）
杀灭物体上病原微生物的方法。 杀灭物体上病原微生物的方法。用以消毒的 药物称为消毒剂(Disinfectants) (Disinfectants)。 药物称为消毒剂(Disinfectants)。一般消毒剂 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。对于芽胞 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
A． 杀灭物体上所有微生物的方法 B． 杀死物体上病原微生物的方法 C． 抑制微生物生长繁殖的方法 D．杀死细菌芽胞的方法 E. 物体中没有任何活的微生物存在
2．杀灭细菌芽胞最有效的方法是
A． 煮沸法 B． 流动蒸汽消毒法 C． 间歇灭菌法 D． 高压蒸汽灭菌法 E. 巴氏消毒法
9. 能达到灭菌效果的方法
A．煮沸10分钟 煮沸10分钟 10 干烤160℃ 1～ B．干烤160℃ 1～2小时 C．巴氏消毒法 D．高压蒸汽灭菌 E. 滤菌器滤过除菌
（3）人工紫外线灯原理：将水银放入石 人工紫外线灯原理： 英玻管中通电气化而成。 英玻管中通电气化而成。 （4）紫外线的穿透能力弱，不能通过普 紫外线的穿透能力弱， 通玻璃、尘埃， 通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及 空气、手术室、 空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病 亦可用于不耐热物品表面消毒。 房，亦可用于不耐热物品表面消毒。 杀菌波长的紫外线对人体皮肤、 （5）杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
第三章 消毒与灭菌
梅 雪
一 基本概念
消毒（Disinfection） 消毒（Disinfection）
杀灭物体上病原微生物的方法。 杀灭物体上病原微生物的方法。用以消毒的 药物称为消毒剂(Disinfectants) (Disinfectants)。 药物称为消毒剂(Disinfectants)。一般消毒剂 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。对于芽胞 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
A． 杀灭物体上所有微生物的方法 B． 杀死物体上病原微生物的方法 C． 抑制微生物生长繁殖的方法 D．杀死细菌芽胞的方法 E. 物体中没有任何活的微生物存在
2．杀灭细菌芽胞最有效的方法是
A． 煮沸法 B． 流动蒸汽消毒法 C． 间歇灭菌法 D． 高压蒸汽灭菌法 E. 巴氏消毒法
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精选课件
29
可见光线的影响
长时间暴露于光线中，其代谢与繁殖均可受 影响而递增。
光感作用（photosensitization）:某些染 料能增强可见光的杀菌作用。
一般在有氧条件下才出现光感作用；
G+菌比G-菌对光感作用敏感；
伊红、美兰和汞溴红只作用于G+菌，沙黄只 作用于G-菌.
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表面、G— 菌（敏感）、葡萄球菌和链球菌 （抵抗力大，5~10倍）、芽胞（病毒抵抗力 大）
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32
紫外线对微生物的作用机理：
DNA分子吸收260nm左右的紫外光，同一 股DNA链上相邻的胸腺嘧啶通过共价链结 合形成胸腺嘧啶二聚体，影响DNA复制与 转录时的正常碱基配对，引起致死性突变 而死亡。
无菌操作：是指防止或杜绝任何微生物进入动物机体 或其他物体的方法。
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3
方法
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4
第一节 物理消毒灭菌法
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5
控制温度（高温、低温） 干燥 渗透压 辅射 微波 声波 滤过
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6
一、温度与热力灭菌法
温度是微生物生长繁殖的重要因素。 最适温度：微生物繁殖最快、最盛，并能将它
第三天：100℃-30分钟，杀死所有微生物。
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15
巴氏消毒法
常用于牛乳及一些饮料
最大限度地消灭病原体，尽可 能少地损害食品的营养物质
•低温维持巴氏消毒法（LTH)：
•63～65℃-30分钟；
•高温短时间巴氏消毒法(HTST):
•71～72℃-15秒，
•超高温巴氏消毒法(UHT):
•132℃-1～2秒
第三章 消毒与灭菌
精选课件
1
微生物有比其他生物更大的表面积，极高的 代谢率，惊人的繁殖速度和明显的适应能力。
用控制微生物的生长的方法来减少它们对营 养资源的破坏。如食物的腐烂、人与动物的 疾病等。
物理
化学
生物
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2
概念
灭菌（Sterilization）：杀死物体上所有微生物的方 法，包括杀灭所有细菌芽孢、霉菌孢子在内的全部病 原微生物和非病原微生物。
消毒（Disinfection）：杀灭物体上的病原微生物的 方法，叫消毒。消毒只要求达到消灭传染性的目的， 而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部
Байду номын сангаас杀死。
防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生 物生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。
无菌（asepsis）：指没有活的微生物的状态。
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22
温度对一种嗜中温菌存活力的影响
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23
细菌的浓度
浓度越大，杀死最后一个细菌所需时间愈长。
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24
介质的性质
细菌在非水介质中，比水作介质时对热 的抵抗力大
水分、2~4℃石炭酸、油类、干焦空气
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25
不同介质对微生物抗热力的影响
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26
2、低温抑菌法
低温可降低微生物代谢的速度。 大多数微生物对低温有很强的抵抗力 一般的：4-10℃ 淋球菌、脑膜炎球菌、流行感冒杆菌敏感，
的生活机能充分地表现出来的温度。 最高温度：能够生长的最高温度。 最低温度：能够生长的最低温度。
细菌休眠
细菌生长繁殖
细菌死亡
最低温度
最适温度
最高温度
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7
根据微生物对温度的适应性可分为：
嗜冷菌 嗜温菌 嗜热菌
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8
生长温度范围
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9
1、热力灭菌法
高温杀菌原理：高温可引起菌体蛋白质、核酸 酶系统破坏
30
日光的影响
直射阳光有强烈的杀菌作用，是天然的 杀菌因素。
细菌：0.5-几个小时 炭疽杆菌芽胞：20小时
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31
紫外线的影响
紫外线波长：13.6-400nm ；
杀菌波长： 200-300nm ；
265-266nm杀菌力最强 ；
紫外线杀菌灯253.7nm； 紫外线穿透力较弱，只适用于空气及表面杀菌
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33
光复活作用：细菌受致死量的紫外线照射后，3h
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16
高压蒸气灭菌法
121.3℃ (15磅压力/英寸2 ) 20-30分
115℃ (10磅压力/英寸2 ) 20-30分（含葡萄糖培养基）
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17
影响高温杀菌作用的因素
微生物的类型 菌龄及发育时温度 加热的温度和时间 细菌的浓度 介质的性质
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18
几种细菌的致死温度及时间
蛋白质受热变性→氢键破坏→失去生物活性
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10
热力灭菌法
干热灭菌法
•火焰灭菌法 •热空气灭菌法
湿热灭菌法
•煮沸灭菌 •流通蒸气灭菌法 •巴氏消毒法 •高压蒸气灭菌法
精选课件
11
干热灭菌法
火焰灭菌法
以火焰直接灼烧杀死 物体中的全部微生物 的方法。
灼烧 焚烧
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酒精灯
12
热空气灭菌法
精选课件
19
几种细菌芽胞的致死温度及时间
精选课件
20
菌龄及发育时温度
对数生长期比老龄菌抵抗力低， 芽胞最适形成比最高时抵抗力大。
精选课件
21
加热的温度和时间
60℃
30分 ；
70℃
10~15分；
80~100℃→立即、几分钟
热毙点：是指一定时间内杀死某菌所需的温度。 热毙时：是指一定温度下杀死某菌所需的时间。
伤寒杆菌、白喉杆菌耐低温 冷冻干燥：采用迅速冷冻和抽真空除水。
精选课件
27
为什么低温保存微生物时必须迅速冷冻， 原因是： （1）冰结晶扰乱胞浆胶体状态； （2）刺伤菌体胞膜、胞壁； （3）迅速冰冻，水分形成均匀的玻璃样状态；
精选课件
28
二、辅射灭菌法
可见光线的影响 日光的影响 紫外线的影响 电离辐射的影响 放射性同位素对微生物的影响 红外线 微波
适用于高温下不损坏、 不变质的物品，需在 160℃维持1－2小时， 才能达到杀死所有微 生物及其芽孢、孢子 的目的。
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干烤箱 13
湿热灭菌法
煮沸灭菌
100℃，煮沸10～20分钟，可杀死所有细 菌繁殖体，芽孢常需煮沸1－2h才能杀死。
水中加入2%碳酸钠或2～5%石炭酸增强 灭菌效果）
精选课件
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流通蒸气灭菌
利用蒸汽在蒸笼或流通蒸汽灭菌器内杀死细菌的方 法。
100℃-30分钟，杀死细菌繁殖体。 间歇灭菌法 ：（含糖培养基；血清培养基）
第 一 天 ： 100℃-30 分 钟 ， 杀 死 细 菌 繁 殖 体 ， 37℃过夜培养，芽孢发芽为繁殖体；
第 二 天 ： 100℃-30 分 钟 ， 杀 死 细 菌 繁 殖 体 ， 37℃过夜培养，残余的芽孢发芽为繁殖体；