培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告本次实验的目的是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
下面将从实验的步骤、注意事项、结果及讨论等方面进行介绍。
一、实验步骤1、准备物质：本次实验需要的物质有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂、蔗糖、粉红色指示剂等。
2、称量：按照配方称取所需要的物质，放置于烧杯中。
3、加水：将溶液加到烧杯中，使用热水搅拌溶解。
4、调pH值：使用磁力搅拌器搅拌溶液，同时加入酸、碱溶液调整其pH值。
5、加入琼脂：琼脂在液态时将其加入培养基中，在0.5小时后，将烧杯放入水浴中，加热至琼脂溶解。
6、灭菌：将培养基热量至65℃进行灭菌处理。
二、注意事项1、称量精准：由于配方中各种物质的比例不同，所以在称量时应该特别注意精准。
2、调pH值准确：必须要根据实验要求，合理的加入酸、碱溶液，使pH值调整在适宜的范围内。
3、琼脂的加入和热力均匀：琼脂的加入需要在液态状态下进行，加入方法应该温和，慢慢地注入。
在加热的过程中也需要注意热力的均匀分布。
4、灭菌时间和方法：都应该根据实验要求进行相应的调整和安排，保证灭菌的效果。
三、结果及讨论培养基制备完成后，我们使用其进行实验，成功得到了所需的细菌菌落。
同时我们也根据实验结果对制备过程中的一些问题进行了总结和讨论。
1、物质的准确称量对实验结果影响较大。
2、pH值的调整应详细了解各个物质对呈酸、碱性的影响。
3、琼脂的加入要在合适的液态下进行，加热过程要均匀。
4、灭菌的方法和时间应根据实验要求进行相应的调整和安排。
综上所述，本次实验是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
实验过程中我们按照步骤并严格注意了一些细节问题，最终得到了满意的结果，更加深入了我们对实验的了解。
培养基制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。
2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。
根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。
灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。
- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。
- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。
2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。
3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。
2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。
3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。
基础培养基的制备实验报告（共10篇）
基础培养基的制备实验报告(共10篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告培养基的制备与灭菌实验报告引言：在微生物学研究中，培养基是不可或缺的工具。
培养基的制备和灭菌是保证实验结果准确性和可重复性的重要步骤。
本实验旨在探究培养基的制备方法和灭菌技术的应用。
一、培养基的制备1.1 选择合适的培养基成分培养基的成分根据微生物的需求而定。
常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基时，需根据所研究的微生物特性选择合适的成分。
1.2 制备培养基的步骤制备培养基的步骤主要包括称量、溶解、调pH、加热消毒和装瓶。
首先，按照配方称取所需成分，并逐一溶解于适量的蒸馏水中。
随后，根据微生物的需求，调节溶液的pH值。
最后，将溶液装入试管或培养皿中，并加热消毒。
二、灭菌技术的应用2.1 灭菌的目的灭菌是指将培养基、培养器具和实验室环境中的微生物杀灭或去除的过程。
灭菌的目的是为了避免外来微生物的污染，确保实验结果的准确性。
2.2 常用的灭菌方法常用的灭菌方法包括高温灭菌、化学灭菌和紫外线灭菌。
高温灭菌是指将培养基或器具在高温条件下进行加热消毒，常用的方法有烘箱灭菌和压力灭菌。
化学灭菌则是通过使用化学物质如酒精、乙醛等来杀灭微生物。
紫外线灭菌则是利用紫外线的辐射杀灭微生物。
2.3 实验中的灭菌操作在实验中，常用的灭菌操作包括培养基灭菌、器具灭菌和工作台灭菌。
培养基灭菌是将制备好的培养基加热消毒，以杀灭其中的微生物。
器具灭菌则是通过高温、化学物质或紫外线对实验器具进行消毒。
工作台灭菌则是通过紫外线辐射对实验台面进行灭菌处理。
结论：培养基的制备和灭菌是微生物学研究中的重要环节。
正确的培养基制备和灭菌操作可以确保实验结果的准确性和可重复性。
通过本实验，我们学习了培养基的制备方法和常用的灭菌技术，为今后的微生物实验打下了基础。
参考文献：[1] 陈晓玲, 赵莉, 邱晓红, 等. 基础微生物学实验教程[M]. 2版. 北京: 高等教育出版社, 2017.[2] 郭燕妮, 张晓红. 微生物学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社, 2019.。
培养基的制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。
2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。
4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。
根据微生物的种类和实验目的，培养基可以有不同的配方和种类。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基，适用于培养大多数细菌。
三、实验材料与仪器实验材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。
四、实验步骤1. 称量：根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。
2. 溶解：将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
3. 调整pH值：用pH试纸测定溶液的pH值，根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。
4. 灭菌：将溶解好的培养基转移至三角瓶中，加入灭菌棉塞，用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，灭菌时间为15-20分钟。
5. 冷却：灭菌后，待培养基冷却至50-60℃，加入适量的琼脂，充分搅拌使其溶解。
6. 分装：将冷却后的培养基分装至培养皿中，待凝固后备用。
7. 无菌操作：在无菌操作条件下，用移液管吸取适量的菌液，接种至培养基中。
五、实验结果与分析1. 培养基制备：成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，颜色呈淡黄色，透明度高。
2. 灭菌效果：通过高压蒸汽灭菌，确保了培养基的无菌状态，避免了微生物污染。
3. 接种结果：接种后，培养基上出现了菌落生长，表明培养基对细菌具有良好的培养效果。
六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中，称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要，应严格按照实验步骤进行操作。
2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节，应选择合适的灭菌方法，确保灭菌效果。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物培养提供保障。
二、实验原理1. 培养基的制备方法：（1）选用适当的基质：如蛋白胨、肉汤、蔗糖等；（2）添加必需元素：如氮源、碳源、矿物质盐等；（3）调节pH值：使其接近微生物生长最适pH值；（4）加入琼脂：使液态培养基凝固成固态培养基。
2. 灭菌技术：灭菌是指将微生物及其孢子全部杀灭或去除，以保证培养基无菌。
常用的灭菌方法有高温灭菌法和化学药剂灭菌法。
三、实验材料和设备材料：蛋白胨、肉汤、琼脂、氧化钠等。
设备：量筒、天平、自动移液器、恒温水浴器等。
四、实验步骤1. 制备液态培养基：（1）称取所需的蛋白胨和肉汤，按比例混合加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀；（2）调节pH值至7.0-7.2，若pH值过高可加入适量的氧化钠溶液；（3）将制好的液态培养基分装到不锈钢培养皿中，每个培养皿约20ml；（4）将分装好的液态培养基在恒温水浴器中加热至沸腾，持续煮沸10分钟。
2. 制备固态培养基：（1）按照液态培养基制备方法制备好液态培养基；（2）将琼脂加入到液态培养基中，搅拌均匀；（3）将制好的固态培养基分装到无菌试管或无菌平板中；（4）在恒温水浴器中加热至琼脂完全溶解。
3. 灭菌：将制备好的液态和固态培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌处理，温度和时间根据不同材料和设备而定。
五、实验结果经过灭菌处理后，制备好的液态和固态培养基均无菌，可以用于微生物培养。
六、实验注意事项1. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范，以保证培养基无菌。
2. 制备液态培养基时，要注意加入必需元素的比例和pH值的调节。
3. 制备固态培养基时，要注意琼脂的加入量和溶解度。
4. 灭菌处理时，要根据实验材料和设备选择合适的灭菌方法和时间。
5. 实验结束后，要对实验器材进行消毒处理。
七、实验结论本实验通过制备液态和固态培养基以及灭菌处理等操作，掌握了培养基制备和灭菌技术。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告
实验目的，通过本次实验，掌握培养基的制备方法，为后续微生物实验提供基
础条件。
实验原理，培养基是微生物生长繁殖的营养物质，其主要成分包括碳源、氮源、磷源、微量元素和水。
培养基的制备需要根据不同微生物的生长需求进行配方，通常包括基础培养基和选择性培养基两种类型。
实验步骤：
1. 称取适量蔗糖和琼脂，加入蒸馏水中，混合搅拌至完全溶解；
2. 加入适量氨基酸、磷酸盐和微量元素，搅拌均匀；
3. 调节pH值至7.0，加热煮沸，然后灭菌；
4. 倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
实验结果，制备好的培养基呈黄色透明凝胶状，无异味，pH值稳定在7.0左右。
实验分析，本次实验中，我们成功制备了基础培养基，为后续微生物的培养提
供了必要条件。
在实验过程中，需要注意控制好各种原料的比例和加热时间，以保证培养基的质量和稳定性。
实验结论，通过本次实验，我们掌握了基础培养基的制备方法，并取得了良好
的实验结果。
培养基的质量对微生物的培养和研究具有重要影响，因此在实验过程中需要严格按照配方和操作规程进行操作，确保培养基的质量和稳定性。
实验改进，在今后的实验中，可以尝试制备不同类型的培养基，以满足不同微
生物的生长需求，并且可以对培养基的配方和制备工艺进行进一步优化，提高培养基的质量和效率。
总结，培养基的制备是微生物实验的基础，掌握好培养基的制备方法对于后续实验的顺利进行具有重要意义。
通过本次实验，我们对培养基的制备方法有了更深入的理解，为今后的实验工作奠定了基础。
以上就是本次培养基的制备实验报告内容，希望对大家有所帮助。
培养基的配制实验报告
培养基的配制实验报告实验名称：培养基的配制实验报告实验目的：掌握微生物培养基的配制方法及影响因素，加深对微生物生长和培养的认识。
实验原理：微生物的生长和培养需要用到适宜的培养基。
培养基的成分和配制方法不同会对微生物生长和培养产生影响。
本实验选用普通营养琼脂培养基为例，以掌握培养基制备的基本方法和技术操作。
实验材料：普通营养琼脂培养基粉末、培养基配制器具（烧杯、量筒、过滤器、移液器等）、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。
实验步骤：1. 称取所需的琼脂粉末，按照要求的比例加入适量的蒸馏水中，溶解均匀。
2. 用不锈钢网过滤琼脂溶液，去除颗粒和杂质，减小后续培养的干扰。
3. 将琼脂溶液分装至烧杯中，加热至溶解，然后用自由落滴法测定琼脂的pH值。
4. 加入所需的营养成分，如碳源、氮源、矿物质等，调节培养基的成分。
同时，根据需求在培养基中加入相应抗生素或生长因子。
5. 将培养基配制至预定体积，混合均匀后用带滤芯的移液器过滤。
6. 将培养基分装至耐热培养皿中，约1/3满，放入高压灭菌锅中高压灭杀15-20分钟。
7. 取出被高压灭菌的培养皿，放置至室温下自然冷却或以水冷却。
8. 在无菌条件下将预先生长的细菌转移到已灭菌的琼脂培养基中，然后在适宜的环境下进行培养观察。
实验结果和分析：本实验制备的普通营养琼脂培养基满足生长条件，多种菌种都能够成功生长。
制备过程中，各个步骤都需要精确、细致地操作，如琼脂的过滤、配制和自由落滴pH值的测定、高压灭菌等。
这些步骤的误差可能会导致培养基的成分产生变化，进而影响培养效果。
结论：微生物的培养需要适宜的培养基，不同生物和实验需求需要不同的配方和配制方法。
掌握基础的培养基配制技术，能够快速、精准地制备适宜的培养基。
这对于微生物研究和应用有着重要的意义。
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培养基的制备实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中．微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样．雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌．如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀．继续加热，此时由于蒸气不能道出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl 提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或稀碱将其PH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 3.0g蛋白胨 10.0 gNaCl 5.0g水1000mlpH7.4—7.6实验仪器与药品1.溶液或试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol／L NaOH、1mol／L HCl。
2.仪器或其他用具：试管、三角瓶、1000ml烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）、量筒、玻棒、培养基分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（pH 5.5-9.0）、普通棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布等。
实验步骤（一）牛肉膏蛋白胨培养基的制备1.称量（假定配制1000ml培养基）按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上，称量后直接放人水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
2.溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
3.调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸．用滴管向培养基中逐滴加入1mol／LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其PH，直至pH达7.4-7.6。
反之，用1mol／LHCl进行调节。
4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利某些实验结果的观察。
可以省去(本实验勿需过滤)。
5.分装液体分装分装高度以试管高度的1／4左右为宜。
分装三角瓶的虽则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的一半为宜，如果是用于振荡培养用，则根据通气量的要求酌情减少；有的液体培养基在灭菌后，需要补加一定量的其他无菌成分，如抗生素等，则装量一定要准确。
固体分装分装试管，其装量不超过管高的1／5，灭菌后制成斜面。
分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
半固体分装一般以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
6.加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶口上塞上棉塞(或硅胶塞、金属或高温塑料试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内面造成污染，并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎加塞后，将全部试管放入铁丝筐或用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、配制日期。
三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、配制日期。
8.灭菌将上述培养基以0.103MPa，l21℃，20min高压蒸气灭菌。
9.摆斜面将灭菌的试管培养基冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜l0.无菌检查将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24-48h．以捡查灭菌是否__。
注意事项1.蛋白胨很容易吸湿，在称取时动作要迅速，另外，称量时严防药品混杂．一把牛角匙用于一种药品．或称取一种药品后，洗净——擦干——再称职另一药品——瓶盖也不要盖错。
2.在琼脂溶化过程中．应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。
同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦，制培养基时，不可用铜或铁锅加热溶化，以免离子进入培养基中，影响细菌生长。
3.对于有些要求PH较精确的微生物，其PH的调节可用酸度计进行(使用方法、可参考有关说明书)。
pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。
配制pH低的琼脂培养基时．若预先记好PH并在高压蒸汽下灭菌，则琼脂因水解不能凝固。
因此，应将培养基的成分和琼脂分开灭菌后再混合，或在中性pH条件下灭菌，再调整pH。
4.分装过程中，注意不要使培养基沾在管(瓶)口上，以免沾污面塞而引起污染。
（二）高压蒸汽灭菌法步骤1.加水使用前在锅内加入适量的水，加水不可过少，以防将灭菌锅烧干，引起炸裂事故。
加水过多有可能引起灭菌物积水。
水面与三角架相平为宜2.装料将灭菌物品放在灭菌桶中，不要装得过满。
3.加盖盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺旋，打开排气阀。
4.加热排气加热后水蒸气与空气一起从排气孔排出，待锅内沸腾并有大量蒸汽自排气阀冒出时，排出的气流很强并有嘘声时，维持2—3min以排除冷空气。
如灭菌物品较大或不易透气，应适当延长排气时间，务必使空气充分排除，然后将排气阀关闭。
5.加压将排气阀关闭6.保压当压力升至0.1MPa时，温度达121℃，此时应注意观察，控制热源。
保持压力稳定，维持20-30min后，切断热源。
7.自然降压当压力表降至“0”处，稍停，使温度继续降至100℃以下后，打开排气阀，旋开固定螺旋，开盖，取出灭菌物。
注意：切勿在锅内压力尚在“0”点以上，温度也在100℃以上时开启排气阀，否则会因压力骤然降低，而造成培养基剧烈沸腾冲出管口或瓶口，污染棉塞，以后培养时引起杂菌污染。
压力降到“0”时，方可打开排气阀。
8.保养灭菌完毕取出物品后，将锅内余水倒出，以保持内壁及内胆干燥，盖好锅盖。
9.培养基无菌检查五、关键步骤及注意事项1.要严格按配方配制。
2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC 以下放物、取物。
4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。
5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。
陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目《培养基的制备与消毒灭菌》姓名学号专业批次/层次指导教师学习中心实验报告培养基的常规配置程序一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理营养琼脂培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品：营养琼脂、蒸馏水。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
再置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，用报纸按传统包月饼的方法，将几套培养皿包成一包，准备灭菌。
（2）移液管的包扎：先将报纸裁成宽约5cm的长纸条，然后将移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，右手将移液管压紧。
在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（3）无菌水的制备：往两支洁净的试管中分别加入10ml蒸馏水，用试管塞塞好，准备灭菌。
（二）固体培养基的配制过程1．培养基配制（1）称取4g营养琼脂，溶于125ml的蒸馏水中，加热使其完全溶解。
（2）培养基的分装分装时，将4支洗净的试管放置在试管架上，用5ml的移液管分别移取适量的上述溶液于试管中（装入量不宜超过试管高度的1/5）；将剩余溶液倒入锥形瓶中（装入量以锥形瓶总体积的一半为限度），用橡皮塞塞好瓶口。
（3）试管、锥形瓶的包扎将上述所有试管（包括盛装无菌水的试管）捆成一捆。
然后，将捆好的试管与锥形瓶标明组别与日期。
（4）培养基的灭菌将包扎好的玻璃器皿与捆好的试管与锥形瓶在高压灭菌锅中常压，121℃条件下灭菌20min。
（5）斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度（斜面长度不超过试管长度l／2为宜），凝固后即成斜面。
（6）平板的制作在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部，左手同时用小指和手掌将塞子打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，将装在锥形瓶中已灭菌的培养基，待冷至50℃左右分别倾入10~12mL培养基，于2个无菌培养皿中，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个平皿中，冷凝后即成平板。