2018年生物技术制药习题及答案
生物制药复习题(有答案)
《生物技术制药》习题（课后作业）一、下列概念：⑴生物制药：⑵生物药物：包括生物技术药物，天然生化药物，微生物药物，海洋药物和生物制品。
(3)生物技术制药：采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。
(4)生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。
（5）现代生物技术：以现代生命科学为基础, 把生物体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的设计，定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到某种目的)之综合性科学技术。
（6）基因表达：⒈转录：在RNA聚合酶的催化下以DNA为模板合成mRNA的过程。
2、翻译：以mRNA为模板,tRNA作为运载工具,将活化的氨基酸在核糖体上合成蛋白质的过程（7）质粒的分裂不稳定：基因工程菌分裂时产生一定比例不含质粒的子代菌的现象,即重组分子从受体细胞中逃逸。
（8）质粒的结构不稳定：DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。
重组DNA分子某一区域发生变异，导致表观生物学功能的丧失；（9）显微注射：显微注射就是借助光学显微镜的放大作用，利用显微操作仪，直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中，然后生产动物个体的技术。
经过显微注射DNA发育而成的动物中，有少数整合了被注射的DNA分子，成为转基因动物。
（10）悬浮细胞：（11）补料分批培养：是指分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。
（12）连续培养行下去的一种培养方法。
（13）接触抑制：细胞在生长分裂时达到相互接触而停止分裂的现象,称为接触性抑制（14）单克隆抗体：由一个抗原决定簇刺激的、单一的B细胞和骨髓瘤细胞融合增殖后所产生的、高度均一的抗体。
（15）多克隆抗体：一种抗原具有多个抗原决定簇,每个抗原决定簇都能刺激一个B细胞产生一种抗体。
这样所获得的免疫血清是多种抗体的混和物。
（16）人-鼠嵌合抗体：人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。
生物技术制药试题及答案(四)
生物技术制药试题及答案一、论述题（共10 道试题，共50 分。
）1. 悬浮培养答：培养细胞的生长不依赖支持物的表面，可在培养液中呈悬浮状态生长。
2. 双功能抗体答：它是非天然抗体，结合抗原的两个臂具有不同的特异性。
3. 连续培养答：将种子接入发酵反应器中，培养至一定菌体浓度后，进行不间断的培养。
4. 单克隆抗体答：是将抗体产生B淋巴细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合所产生的抗体。
5. 生物药物答：指从生物体、生物组织、细胞、体液等，利用物理、化学、生物技术等原理和方法方法制造一类用于预防、治疗和诊断的制品6. 固定化培养答：将固定化技术应用基因工程军的连续培养中，以提高治理的稳定性。
7. 补料分批培养答：将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间后，间接或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长。
8. 质粒的分裂不稳定答：指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象9. 酶工程答：是酶学和工程学相互渗透结合、发展而形成的新学科。
10. 基因表达答：指机构基因在生物体中的转录翻译机所有加工的过程二、简答题（共5 道试题，共50 分。
）1. 制备基因工程药物的一般程序？答：获得目的基因、组建重组质粒、构建基因工程菌、培养工程菌、产物分离纯化、除菌过滤、检定2. 蛋白质类药物的分离纯化方法？答：⑴沉淀法⑵按分子大小分离的方法⑶按分子所带电荷进行分离的方法⑷亲和层析法3. 简述单克隆抗体的制备过程？答：致敏动物的脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，培养杂交瘤细胞，大量培养能产生抗体的杂交瘤细胞注入纯系小鼠腹腔内，分离小鼠腹腔内抗体。
4. 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？答：⑴外源基因的拷贝数⑵外源基因的表达效率①启动子的强弱②核糖体结合位点的有效性③SD序列和起始密码ATG的间距④密码子组成⑶表达产物的稳定性⑷细胞的代谢负荷5. 生物药物德特性？答：⑴药理学特性①治疗针对性强、②活性高、③毒副作用小、④生理副作用常有发生⑵生产制备的特殊性①原料中有效含量低②稳定性差③易腐败④注射用药特殊要求一、问答题：（每题10分，共100分）1．成纤维细胞型细胞的特点及来源。
生物技术制药课后习题答案
第一章绪论1生物技术是以生命科学为基础，利用生物体（或生物组织、细胞及其组分）的特性和功能，设计构建有预期性状的新物种或新品系，并与工程相结合，进行加工生产，为社会提供商品和服务的一个综合性的技术体系。
2生物技术的主要内容：P1基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程蛋白质工程：运用基因工程全套技术改变蛋白质结构的技术。
染色体工程：探索基因在染色体上的定位，异源基因导入、染色体结构改变。
生化工程：生物反应器及产品的分离、提纯技术。
3生物技术制药采用现代生物技术人为创造条件，借助微生物、植物或动物来生产所需的医药品过程被称为4生物技术药物采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物才能被称为5生物药物生物技术药物与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为PPT复习题第二章基因工程制药1、简述基因工程制药的基本程序。
P162、说明基因工程技术用于制药的三个重要意义。
P15第一段第一行3、采用哪两种方法来确定目的cDNA克隆？P18（7目的基因cDNA的分离和鉴定）①核酸探针杂交法用层析法或高分辨率电泳技术(蛋白质双向电泳技术或质谱技术)分离出确定为药物的蛋白质，氨基酸测序，按照密码子对应原则合成出单链寡聚核苷酸，用做探针，与cDNA文库中的每一个克隆杂交。
这个方法的关键是分离目的蛋白，②免疫反应鉴定法（酶联免疫吸附检测）4、说明用大肠杆菌做宿主生产基因工程药物必须克服的6个困难。
①原核基因表达产物多为胞内产物，必须破胞分离，受胞内其它蛋白的干扰，纯化困难；②原核基因表达产物在细胞内多为不溶性(包含体, inclusion body)，必须经过变性、复性处理以恢复药物蛋白的生物学活性，工艺复杂；③没有翻译后的加工机制，如糖基化，应用上受到限制；④产物的第一个氨基酸必然是甲酰甲硫氨酸，因无加工机制，常造成N-Met冗余，做为药物，容易引起免疫反应；⑤细菌的内毒素不容易清除；⑥细菌的蛋白酶常常把外源基因的表达产物消化；5、用蓝藻做宿主生产基因工程药物有什么优越性？蓝藻：很有前途的药物基因的宿主细胞①有内源质粒，美国Wolk实验室已构建1200种人工质粒，可用做基因载体。
生物制药试题及答案
生物制药试题及答案一、单项选择题（每题2分，共10题）1. 生物制药中常用的细胞培养技术是：A. 悬浮培养B. 贴壁培养C. 微囊培养D. 以上都是答案：D2. 下列哪项不是生物制药的原料来源？A. 植物B. 动物C. 微生物D. 矿物答案：D3. 重组DNA技术在生物制药中的主要应用是：A. 提高药物纯度B. 改变药物结构C. 增加药物产量D. 以上都是答案：D4. 以下哪种生物反应器类型不适合用于大规模生产？A. 搅拌式反应器B. 气升式反应器C. 固定床反应器D. 流化床反应器答案：C5. 生物制药中，用于提高蛋白质稳定性的常用方法是：A. 降低温度B. 增加盐浓度C. 添加稳定剂D. 以上都是答案：D6. 下列哪项不是生物制药的下游加工步骤？A. 细胞破碎B. 蛋白质纯化C. 药物合成D. 制剂制备答案：C7. 以下哪种技术不适用于生物制药的蛋白质表达？A. 酵母表达系统B. 昆虫细胞表达系统C. 植物表达系统D. 化学合成答案：D8. 生物制药中，用于检测蛋白质纯度的常用方法是：A. SDS-PAGE电泳B. 高效液相色谱C. 质谱分析D. 以上都是答案：D9. 下列哪项不是生物制药的安全性评价内容？A. 毒性测试B. 免疫原性测试C. 药效学测试D. 药物稳定性测试答案：D10. 生物制药中，用于提高蛋白质溶解度的常用方法是：A. 增加pH值B. 降低离子强度C. 添加表面活性剂D. 以上都是答案：D二、多项选择题（每题3分，共5题）1. 生物制药中，以下哪些因素会影响蛋白质的表达？A. 宿主细胞类型B. 表达载体设计C. 培养条件D. 蛋白质的后修饰答案：ABCD2. 下列哪些是生物制药中常用的动物细胞培养技术？A. 微载体培养B. 悬浮培养C. 贴壁培养D. 共培养技术答案：ABCD3. 生物制药中，以下哪些是蛋白质纯化的关键步骤？A. 细胞破碎B. 蛋白质提取C. 层析技术D. 蛋白质定量答案：ABCD4. 生物制药中，以下哪些因素会影响蛋白质的稳定性？A. pH值B. 温度C. 离子强度D. 蛋白质浓度答案：ABCD5. 生物制药中，以下哪些是药物安全性评价的重要指标？A. 急性毒性B. 长期毒性C. 遗传毒性D. 免疫原性答案：ABCD三、简答题（每题5分，共2题）1. 简述生物制药中蛋白质纯化的主要目的。
生物技术制药试题及答案
生物技术制药试题及答案一、名词解释1. 生物技术（biotechnology）：有时也称为生物工程（bioengineering），是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2．基因工程（gene enginerring）：是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。
即按照人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA 分子）在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录和表达的操作，也称DNA重组技术。
3．细胞工程（cell engineering）：是指在细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种的目的，加速繁育动植物个体，或获得某种有用物质的技术。
4．酶工程（enzyme engineering）：是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。
5．发酵工程（fermentation engineering）：是指利用包括工程微生物在内的某些微生物或动、植物细胞及其特定功能，通过现代工程技术手段（主要是发酵罐或生物反应品的自动化、高效化、功能多样化、大型化）生产各种特定的有用物质；或把微生物直接用于某些工业化生产的一种技术。
由于发酵多与微生物密切联系在一起，所以又称之为微生物工程或微生物发酵工程。
6. 生物反应器（bioreactor）：主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器，动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器，转基因动物生物反应器等。
7. 转基因动物：是指在基因组中稳定地整合有导入的外源基因的动物。
8. 转基因植物：是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织，从而获得新遗传特性的再生植物。
生物技术制药习题答案
第一章绪论选择题1.生物技术的核心和关键是（A ）A 细胞工程B 蛋白质工程C 酶工程D 基因工程2. 第三代生物技术（ A ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围A 基因工程技术B 蛋白质工程技术C 海洋生物技术D细胞工程技术3.下列哪个产品不是用生物技术生产的（D ）A 青霉素B 淀粉酶C 乙醇D 氯化钠4. 下列哪组描述（A ）符合是生物技术制药的特征A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期B高技术、高投入、低风险、高收益、长周期C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期5. 我国科学家承担了人类基因组计划（C ）的测序工作A10% B5% C 1% D 7%名词解释1.生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品，称为生物技术制药。
2.生物技术药物一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。
3.生物药物生物技术药物是重组产品概念在医药领域的扩大应用，并与天然药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为生物生物药物。
简答题1.生物技术药物的特性是什么？生物技术药物的特征是：（1）分子结构复杂（2）具有种属差异特异性（3）治疗针对性强、疗效高（4）稳定性差（5）免疫原性（6）基因稳定性（7）体内半衰期短（8）受体效应（9）多效应和网络效应（10）检验特殊性2.简述生物技术发展的不同阶段的技术特征和代表产品？（1）传统生物技术的技术特征是酿造技术，所得产品的结构较为简单，属于微生物的初级代谢产物。
代表产品如酒、醋、乙醇，乳酸，柠檬酸等。
（2）近代生物技术阶段的技术特征是微生物发酵技术，所得产品的类型多，不但有菌体的初级代谢产物、次级代谢产物，还有生物转化和酶反应等的产品，生产技术要求高、规模巨大，技术发展速度快。
代表产品有青霉素，链霉素，红霉素等抗生素，氨基酸，工业酶制剂等。
生物技术制药试卷C答案
生物技术制药试卷C答案一、名词解释：每个概念5分，共50分1. 生物技术制药生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。
2. 基因表达基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。
3. 质粒的分裂不稳定通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。
在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。
一般情况下具有质粒的细胞(即P＋细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。
4. 补料分批培养发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。
它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。
因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。
但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。
5. 人-鼠嵌合抗体嵌合抗体（chimeric atibody ）是最早制备成功的基因工程抗体。
它是由鼠源性抗体的V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。
因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。
6. 悬浮培养非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
现代生物制药技术试卷B(附标准答案)
2017—2018学年 第二学期2015级 专业《现代生物制药技术》期末考试试卷一、名词解释：（本大题共5小题，每小题3共15分）1. 生物反应：2. 发酵：3. 种子制备：4. 愈伤组织：5. 免疫原性：二、选择题：（本大题共50小题，每小题0.5分，共25分）（请将正确答案填写在下面表格内）1.壳聚糖是（ ）。
A.普通多糖 B ．酸性多糖 C ．氨基多糖 D ．络合多糖 2.（ ）是医药工业合成甾体激素的原料。
A.薯蓣皂苷元B.多糖 C ．黄酮 D ．蛋白质3.具有强致泻、止血、影响血小板细胞和肝细胞与脑细胞内游离钙浓度等多种活性的番泻苷A 与其类似物属于（ ）药物。
A.皂苷类 B.多糖 C ．二蒽酮 D ．蛋白质4. 软紫草根中分离的抗菌、抗炎、抗癌的活性成分紫草素与其衍生物属于（ ）药物。
A.皂苷类B.多糖类 C ．苯醌类 D ．蛋白质类部 班级 姓名 学号 考场 ----------------------------------------------密----------------------------------封------------------------------------------线----------------------------------------5.当归根挥发油中分离当归内酯属于( )，具有抗肿瘤、调节免疫的功能。
A.萘醌类 B．萜类 C．香豆素类 D．植物甾醇类6. 海洋生物( )含有丰富的伊胡萝卜素。
A.虾蟹 B．海绵 C．珊瑚 D.盐藻7. 许多陆地植物含有皂苷，而目前在动物界中只发现海洋棘皮动物的海参和海星含有皂苷，皂苷是它们的毒性成分，均具有( )功能。
A.抗血栓 B．抗肿瘤 C．降血压 D.改善微循环8. 透明质酸可以从( )中获得。
A．鲸鱼 B．扇贝 C．海星 D．蓝藻9.人体必需的氨基酸有（）种。
A.8B.9C.10D.1210.从（）中分离出新的甾醇硫酸盐A和B，都具有体外抗猫白血病毒作用。
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2018年生物技术制药习题及答案一、选择填空题1. 酶的主要来源是什么?微生物生产。
2. 第三代生物技术是什么?基因组时代。
3. 基因治疗最常用的载体是什么?质粒载体和λ噬菌体载体。
4. 促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。
但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促红细胞生产素为什么?因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化, 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用。
5. 菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸?菌体生长所需能量 (大于) 菌体有氧代谢所能提供的能量时, 菌体往往会产生代谢副产物乙酸。
6.cDNA 第一链所合成所需的引物是什么?cDNA 第一条链合成所需引物为 PolyT 。
7. 基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么?表达产物的功能。
8. 为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
9. 根据中国生物制品规定要求,疫苗出厂需要经过哪些检验?理化检定、安全检定、效力检定。
10. 基因工程药物化学本质是什么?蛋白质。
11.PEG 诱导细胞融合?PEG 可能与可能与临近膜的水分相结合, 使细胞之间只有微笑空间的水分被 PEG 取代, 从而降低了细胞表面的极性,导致双脂层的不稳定,使细胞膜发生融合。
12. 以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么?胞内、周质、胞外。
13. 人类第一个基因工程药物是什么?重组胰岛素。
14. 动物细胞培养的条件是什么?温度 :哺乳类 37昆虫 25~28, ph7.2~7.4,通氧量:使 co2培养箱,不同动物比例不同。
防止污染, 基本营养物质:三大营养物质维生素, 激素, 促细胞生长因子, 渗透压:大多数 260~320。
15. 不属于加工改造抗体的是什么?单域抗体。
16. 第三代抗体是什么?利用基因工程技术制备的基因工程抗体。
17. 现代生物技术的标志是什么?DNA 重组技术。
18. 获得目的基因最常用的方法是什么?化学合成法、 PCR 法(最常用) 、基因文库法、 cDNA 文库法。
19. 鸟枪法克隆目的基因的战略适用于什么?细菌。
20.cDNA 获得目的基因的优点是什么?不含内含子。
21. 有机相酶反应的优点是什么?①增加疏水性底物或产物的溶解度;②热力学平衡向合成方向移动,如酯合成,肽合成等; ③可抑制有水参与的副反应,如酸酐的水解等;④酶不溶于有机介质, 易于回收再利用;⑤容易从低沸点的溶剂中分离纯化产物;⑥酶的热稳定性提高, pH 的适应性扩大;⑦无微生物污染; ⑧能测定某些在水介质中不能测定的常数; ⑨固定化酶方法简单, 可以只沉积在载体表面。
22. 抗体的发展阶段大致可分为什么?第一代抗血清第二代单克隆抗体药物第三代基因工程抗体药物(多克隆到单克隆到基因工程) 。
23. 生产基因工程药物时对生物材料的质控有什么要求?对目的基因、宿主细胞和表达载体都需要严格检查。
24. 质粒载体必须具备哪三要素?复制子、选择标记、多克隆位点。
25. 凝胶过滤层析法依据的原理是什么?凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒, 凝胶颗粒的内部具有立体网状结构, 形成很多孔穴。
当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后, 各个组分就向固定相的孔穴内扩散, 组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。
比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部, 完全被排阻在孔外, 只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动, 它们经历的流程短,流动速度快,所以首先流出;而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部,经历的流程长,流动速度慢,所以最后流出。
26. 体外培养动物细胞的三种类型是什么?贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。
27. 将液氮罐中的动物细胞复苏的方法?将冻存的细胞快速融化至 37摄氏度,使细胞冻存时的冰晶快速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成伤害。
28. 能将 IgG 分子水解产生两个抗原结合片段和一个可结晶片段的酶是什么?木瓜蛋白酶。
29. 单克隆抗体是由哪两个细胞融合而成?B 细胞与骨髓瘤细胞。
30. 第三代基因工程指什么?第二代指蛋白质工程。
31. 酶和细胞固定化最常用有效的方法是什么?包埋法、化学结合法和物理吸附法。
32. 真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达。
33. 应用最广泛的产酶菌是什么?大肠杆菌。
34. 大肠杆菌中的基因表达系统是什么?外源基因表达系统 pBV220/pET。
35. 外援基因在动物细胞与大肠杆菌中表达的主要区别是什么? 糖基化。
36. 用于生产阿尔法干扰素的动物细胞是什么?Namalum Namalwa淋巴瘤细胞。
37. 基因表达最常用的主宿菌是什么?大肠杆菌。
38. 筛选杂交瘤细胞选用的培养基是什么?(HAT )无血清培养基。
39. 采用凝胶过滤法分析单克隆抗体最高峰属于什么?IgG 。
40. 引选鼠原性的单克隆抗体首要目的是什么?降低免疫源性。
r41. 鼠源性单克隆抗体改造后得到的小分子抗体常用什么? Fab 片段抗体。
42. 血清中具有抗体活性的球蛋白属于什么?免疫球蛋白。
43. 基因工程的单元操作顺序是什么?切接转增检。
44.cho 细胞来源于什么动物?仓鼠。
45. 学会识别 DNA 片段回纹结构。
cccDNA 共价闭合环状 ocDNA 开环 IDNA 线状迁移速率 ccc>I>oc 。
46. 培养的动物细胞需要传代规定。
异培体细胞的性质。
47.T4DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两个片段连接在一起,底物和关键是什么? 5' -OH 和 3' – P 。
48. 工业用酶的生产方法是什么?微生物发酵。
49. 某质粒带有 lacz 基因与之匹配的筛选方法是在培养基中加什么?5-溴 -4-氯 -3-吲哚基 -b-D-半乳糖苷(X-gal ) 。
50. 人工化学和纯的 na 新形成的核苷酸链的方向?形成 5`末端? 3`末端?人工化学合成 DNA 新形成的核苷酸链的合成方向是3’→5’ ,合成的DNA5’末端是磷酸酯键, 3’末端是 -OH 。
51. 进行 PCR 扩增 DNA 时反应体系应加入什么物质?模板 DNA 、耐高温的 DNA 聚合酶、引物、 PCR 缓冲液、脱氧核苷酸贮备液。
52. 细胞培养基分为哪三大类?天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
53. 理想的质粒载体应具备什么条件?复制起点、选择性标记、克隆位点。
54. 质粒 DNA 的三种类型是什么?共价闭合环形 DNA (cccDNA ) 、开环 DNA (ocDNA ) 、线性分子(IDNA ) 。
55. 微生物转化中常用的微生物有哪些?细菌、放线菌和霉菌。
56. 生物技术的核心和关键是什么?基础条件是什么?获得最终产物的手段是什么? 基因工程。
细胞工程,发酵工程。
57.PCR 全称是什么?概念。
过程。
引物。
基本操作步骤。
聚合酶链式反应)概念(指在引物指导下由酶催化的对特定模板(克隆或基因组 DNA )的扩增反应, 是模拟体内 DNA 复制过程, 在体外特异性扩增 DNA 片段的一种技术) 。
过程 (变性、退火、延伸) 。
引物。
基本操作步骤。
P1258.mRNA 两个核糖体结合位点是什么?SD 序列与起始密码子 AUG 之间的距离。
59. 克隆真核基因常用的两种方法?逆转录法和和学合成法。
60. 抗体转化为酶的途径?61. 酶固定法中的两种包埋法是什么?网格型包埋法和微囊型包埋法。
62. 噬菌体抗体库的表达载体系统分为哪些?λ噬菌体、单链丝状噬菌体和噬菌粒。
63. 抗体药物的特点是什么?特异性、重要性、可检测性。
64. 质粒载体的结构包括哪些?65. 蛋白质药物按分子大小分离提取方法有哪些?凝胶过滤法、膜分离、离心。
66. 核酸药物分为哪六类?三磷酸腺苷、辅酶 A 、脱氧核苷酸、三氟胸苷、叠氮胸苷、阿糖腺苷。
67. 动物细胞对生长机制的依赖性分为?贴壁依赖性、非贴壁依赖性、兼性贴壁。
68. 受体细胞通过特殊处理后通透性改变称为什么细胞?感受态细胞。
69. 分子提取 DNA 加入酚氯的目的,金属离子的目的, RNASE 的目的,醇的目的。
分子提取 DNA 加入酚氯的目的(使蛋白质变性或水解,除去蛋白质) ,金属离子的目的(细胞内有金属离子, 如 Mg2 , 是酶活性的辅助因子, 会使 DNA 被 DNase 分解, 故除去使 DNase 活性的 Mg2 以保护 DNA 不被变性或降解) , RNASE 的目的(除去DNA 沉淀中的 RNA ,是凝胶电泳检测时条带更明显) ,醇的目的(是 DNA 变性沉淀,并除去蛋白质、糖类等其他水溶性杂质,使之分离) 。
二、简答题1. 简述生物药物与生物技术药物的内涵。
生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果,综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法,利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。
生物药物,包括生物技术药物和原生物制药。
生物技术药物:是指采用 DNA 重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。
细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单克隆抗体药物、反义核酸药物、 RNA 干扰 (RNAi)药物、基因治疗药物。
2. 简述生物技术药物与生物技术制药概念。
生物技术药物是指采用 DNA 重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物;生物技术制药是指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程等生物技术,来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。
3. 比较基因工程育苗与传统疫苗的区别。
3、比较基因工程疫苗和传统疫苗。
基因工程疫苗:1、免疫原性良好、效果持久及交叉免疫防护 2、可精细设计、便于操作、制备简便 3、能制备联合疫苗 4、能重复利用 5、可用于免疫治疗。
虽然基因工程疫苗拥有传统疫苗所没有的优越性, 但是目前还存在一下不足与缺点:1、安全性尚不稳定 2、免疫效果有待提高 3、抗核酸免疫反应。
4. 如何控制基因工程药物质量?基因工程药物的质量控制要点如下。
1蛋白质含量的测定。
2蛋白质纯度检测。
3蛋白质 Mr 测定。
4蛋白质等电点测定。
5蛋白质序列分析。
6内毒素分析, 宿主蛋白液和酸残留分析。
5. 什么是单克隆抗体?简述制备过程。
经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆抗体。
单抗的制作过程大体分为抗原的制备,动物的免疫, b 细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,筛选杂交瘤细胞,筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞, 杂交瘤细胞的克隆化,体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆,单抗的纯化及鉴定。