生物化学考研资料
考研考博专业课复习资料-生物化学
Chapter 1 糖类一、名词1.糖类：四大类生物大分子之一，是多羟基醛、多羟基酮或其衍生物，或水解时能产生这些化合物的物质。
2.生物量：指某一时刻单位面积内实存生活的有机物质（干重）总量，通常用kg/m2或t/ha表示。
3.壳多糖：昆虫和甲壳类的外骨骼。
4.结构多糖：构成细菌细胞壁的肽聚糖。
5.葡萄糖：也称己醛糖，含6个碳原子、5个羟基和1个CHO。
6.果糖：也称己酮糖，含6个碳原子、5个羟基和1个酮基。
7.单糖：也称简单糖，是不能被水解为更小分子的糖类，如葡萄糖、果糖和核糖等。
8.寡糖：包括很多类别，主要指水解时产生小鱼20个单糖分子的糖类。
9.二糖：也称双糖，水解时生成2个分子单糖，如麦芽糖、蔗糖等。
10.三糖：水解时生成3分子单糖，如棉子糖。
11.多糖：水解时产生20个以上单糖分子的糖类。
12.同多糖：水解时只产生一种单糖或单糖衍生物，如糖原、淀粉、壳多糖等。
13.杂多糖：水解时产生一种以上的单糖或单糖衍生物，如透明质酸、半纤维素等。
14.复合糖：也称糖复合物，是糖类与蛋白质、脂质等生物分子形成的共价结合物。
15.同分异构：也称异构，指存在两个或多个具有相同数目和种类的原子并因而具有相同相对分子质量的化合物的现象。
16.结构异构：也称构造异构，由于分子中原子连接的次序不同造成的，包括碳架异构体、位置异构体和功能异构体。
17.立体异构：也称构型异构，具有相同的结构式，但原子在空间的分布不同。
18.几何异构：也称顺反异构，由于分子中双键或环的存在或其他原因限制原子间的自由旋转引起的。
19.旋光异构：也称光学异构，由于分子存在手性，导致化合物具有旋光性。
20.构象：分子所采取的特定形态。
21.旋光性：旋光物质能使平面偏振光的偏振面发生旋转的能力。
22.平面偏振光：当光波通过尼科尔棱镜时，由于棱镜的结构只允许某一平面偏振的光通过，其他光波都被阻断，这种光称为平面偏振光。
23.旋光度：cl cl tt t t λλλλαααα==][][或24.旋转方向：顺时针为+，记为右旋；逆时针为-，记为左旋。
生物化学考研重点
引言概述：生物化学是考研生物学专业的重点内容之一。
在生物化学考研中，有一些重点知识点需要特别关注。
本文将从生物大分子、酶学、代谢途径、基因调控和信号传导等五个大点进行详细阐述，帮助考生更好地理解和掌握这些重点内容。
通过对这些重点知识点的全面了解，考生将能够更有针对性地备考，提高考试成绩。
正文内容：一、生物大分子1.蛋白质-结构和功能：介绍蛋白质的结构和各种功能，包括结构功能关系、酶的催化作用等。
-翻译和转录：解释蛋白质的翻译和转录过程，讲述其中的关键步骤和调控因素。
-蛋白质的修饰：探讨蛋白质的修饰类型和在细胞信号传导中的作用。
2.核酸-DNA和RNA的结构：介绍DNA和RNA的结构和特点，包括单链和双链结构、碱基组成等。
-DNA的复制和修复：讲解DNA的复制过程和各种修复机制，解释DNA的稳定性和遗传信息传递的重要性。
-RNA的转录和加工：解释RNA的转录和加工过程，阐述剪接、修饰和运送等关键步骤。
二、酶学1.酶的分类和特性-酶的分类：介绍不同类型的酶，包括氧化还原酶、水解酶等，解释它们的功能和催化机制。
-酶的特性：讲述酶的催化速度、底物亲和力等特性，解释酶的催化效率和酶促反应的速率限制因素。
2.酶的活性调控-底物浓度和酶活性：探讨底物浓度对酶活性的影响，解释酶底物结合和解离的动力学过程。
-酶的调控：介绍酶的调控方法，包括底物浓度调节、酶活化和抑制等，讲述这些调控机制的生理意义。
三、代谢途径1.糖代谢-糖酵解和糖异生：解释糖酵解和糖异生的过程和关键酶，解释它们在能量产生和产物合成中的作用。
-糖原和糖酵解的调控：介绍糖原的合成和分解过程，解释糖酵解途径的调控机制。
2.脂质代谢-脂质的消化和吸收：讲解脂质在胃肠道中的消化和吸收过程，解释脂质消化酶的作用。
-脂质的合成和分解：探讨脂质的合成和分解途径，解释关键酶的作用和调控方式。
四、基因调控1.转录调控-转录激活和抑制：介绍转录激活和抑制因子对基因转录的调控机制，解释它们与DNA结合的方式。
851生物化学考研题库
851生物化学考研题库生物化学是研究生物体中化学过程和物质的科学，它在医学、农业、环境科学等多个领域都有广泛的应用。
考研生物化学题库通常包括基本概念、代谢途径、酶学、遗传信息的传递、蛋白质结构与功能等重要主题。
以下是一些可能包含在生物化学考研题库中的问题和解答示例：一、选择题1. 酶的催化作用机制主要依赖于：A. 温度B. 酶的浓度C. 酶的活性部位D. 底物的浓度解答：C. 酶的催化作用机制主要依赖于酶的活性部位，它提供了与底物结合的特定空间结构，从而降低反应的活化能。
2. 下列哪个过程不涉及ATP的合成？A. 光合作用B. 糖酵解C. 氧化磷酸化D. 电子传递链解答：B. 糖酵解过程中，虽然产生能量，但不产生ATP，而是产生NADH和少量ATP。
二、填空题1. 蛋白质的一级结构是指_________，二级结构是指_________，三级结构是指_________。
解答：蛋白质的一级结构是指氨基酸的线性序列；二级结构是指局部的折叠结构，如α-螺旋和β-折叠；三级结构是指整个蛋白质分子的空间构型。
2. 细胞呼吸过程中，_________是能量产生最多的阶段。
解答：氧化磷酸化是细胞呼吸过程中能量产生最多的阶段。
三、简答题1. 简述糖酵解过程及其生物学意义。
解答：糖酵解是将葡萄糖分解为两个丙酮酸分子的过程，这个过程不需要氧气，可以在有氧或无氧条件下进行。
生物学意义在于，糖酵解是细胞获取能量的初步步骤，为细胞提供了ATP和还原型辅酶，为后续的有氧呼吸或无氧发酵提供底物。
2. 描述DNA复制的基本过程。
解答：DNA复制是一个半保留的过程，首先，DNA解旋酶解开双链DNA，形成复制叉。
接着，DNA聚合酶在模板链上添加互补的核苷酸，形成新的DNA链。
最终，每条原始链都作为模板生成了一条新的互补链。
四、论述题1. 论述酶的专一性及其生物学意义。
解答：酶的专一性指的是一种酶只能催化一种或少数几种底物的特定化学反应。
生化考研知识点归纳总结
生化考研知识点归纳总结一、细胞生物化学1. 细胞的结构与功能细胞是生命的基本单位，包括原核细胞和真核细胞。
原核细胞包括细菌和蓝藻等，真核细胞包括植物、动物和真菌细胞。
细胞有细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等多个部分组成。
2. 细胞膜细胞膜是细胞的保护膜，内外有不同的脂类和蛋白质组成。
蛋白质有通道蛋白、受体蛋白、酶蛋白和结构蛋白等。
细胞膜的重要功能包括细胞识别、物质的运输、细胞信号传导等。
3. 蛋白质合成、折叠和降解蛋白质的合成在细胞质中进行，包括转录和翻译两个过程。
新合成的蛋白质需要经过正确的折叠，否则会形成蛋白质聚集，造成细胞内质的损害。
细胞中有多种蛋白质降解途径，主要包括泛素-蛋白酶体途径和溶酶体-体液途径。
4. 细胞核细胞核包括染色质、核仁和核膜等部分。
染色体是DNA和蛋白质的复合物，其中DNA包括基因和非编码序列。
5. 线粒体和叶绿体线粒体是细胞内的能量生产中心，通过氧化磷酸化产生ATP。
叶绿体是植物细胞的特有细胞器，通过光合作用产生ATP和还原能量。
6. 细胞信号传导细胞中的信号传导包括内分泌传导、神经传导和细胞间相互作用等多种方式，主要通过蛋白质、核酸和小分子等信号分子的相互作用实现。
7. 细胞凋亡和坏死细胞凋亡是细胞自身程序性死亡，表现为细胞凋亡因子的释放和内质网的应激等。
细胞坏死是外因导致的异常细胞死亡，与炎症反应和细胞内环境的改变相关。
二、生物大分子结构与功能1. 蛋白质的结构和功能蛋白质包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
蛋白质的功能包括酶的催化作用、结构蛋白的机械支持、激素的信号传导等。
2. 核酸的结构和功能核酸包括DNA和RNA，DNA包括脱氧核糖核酸和蛋白质组成，并负责遗传信息的传递。
RNA包括核糖核酸和蛋白质组成，并负责基因的转录和翻译。
3. 糖类的结构和功能糖类包括单糖、双糖和多糖，主要作为细胞的能量来源和结构支持。
4. 脂质的结构和功能脂质包括甘油三酯、磷脂、类固醇和脂蛋白等，主要作为细胞膜的组成成分和储存能量。
考研医学生物化学知识点详解
考研医学生物化学知识点详解一、分子生物学基础知识1. DNA结构和功能DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内最重要的遗传物质。
它由核苷酸组成，包括脱氧核糖、磷酸基团和碱基。
DNA分子呈双螺旋结构，由两条互补链相互缠合而成。
它在细胞中具有存储、复制和传递遗传信息的功能。
2. RNA结构和功能RNA（核糖核酸）也是由核苷酸组成，但与DNA不同的是，RNA含有核糖糖分子而非脱氧核糖糖分子。
RNA分为信使RNA （mRNA）、转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）等不同种类，它们在转录和翻译过程中发挥关键作用。
3. 蛋白质的合成和结构蛋白质是生物体内最基本的宏观生物大分子，由一系列氨基酸残基通过肽键连接而成。
蛋白质合成过程包括转录和翻译两个阶段，其中mRNA将DNA的信息转录为mRNA，而tRNA和rRNA等核糖体辅助在翻译过程中合成蛋白质。
二、细胞结构和功能1. 细胞膜和细胞壁细胞膜是细胞的外包层，由磷脂双分子层和蛋白质等组成。
它具有选择性透过性，控制物质的进出。
细胞壁位于细胞膜外侧，主要由多糖组成，提供细胞的结构支持和保护作用。
2. 细胞器细胞器是细胞内的功能区域，包括内质网、高尔基体、线粒体、溶酶体等。
内质网参与蛋白质合成和修饰，高尔基体负责分泌和物质转运，线粒体是细胞内的能量合成中心，溶酶体则负责细胞内废物的降解。
3. 细胞核细胞核是细胞的控制中心，含有DNA分子和核糖体等。
它通过核孔调控物质的进出，调控细胞代谢和生命活动。
三、酶的生物化学1. 酶的性质和分类酶是生物催化剂，能够降低化学反应所需的活化能。
酶一般由蛋白质组成，根据底物类型和反应方式的不同，酶可分为氧化还原酶、水解酶、脱羧酶等多种类型。
2. 酶促反应的速率和影响因素酶促反应的速率受到底物浓度、温度和pH值的影响。
当底物浓度越高、温度越适宜、pH近于酶的最适pH值时，酶促反应的速率越快。
四、生物膜的结构和功能1. 磷脂的结构和特点磷脂是构成生物膜的重要组分，由磷酸酯键连接的甘油和两条脂肪酸组成。
生物化学期末考研知识点总结
生物化学期末考研知识点总结●一、糖类(一)★糖的生理功能●1、通过氧化放能为生物体提供能量，如葡萄糖的生物氧化。
●2、作为生物体主要的能源储存方式，如糖原和淀粉。
●3、作为生物体的结构物质，如纤维素，起支持和保护作用。
●4、作为合成其他生物分子的前体成分。
●5、参与的细饱间的分子识别和信号转导。
(二)单糖●重要的单糖：●呋喃糖和吡喃糖：●吡喃糖：在己糖中，含氧6个碳原子的碳化称为吡喃糖，有椅式结构和船式结构，船式结构比椅式结构更稳定的原因是有C-C键的重叠和相邻原子间的作用。
●呋喃糖：在戊糖中，含氧5个碳的碳环的单糖称为呋喃糖。
●甘油醛：有光学活性最简单的单糖●核糖和脱氧核糖：是RNA和DNA的主要组成部分●葡萄糖（G）：是生物体代谢的主要来源●半乳糖：与一分子葡萄糖形成乳糖●果糖（F）：自然界含量最丰富的酮糖●赤藓糖：在藻类地衣等低等植物中存在●物理性质●旋光性：可用来区分单糖●甜度：以蔗糖的甜度为标准●溶解性：易溶于水，难溶于乙醇、乙醚等有机溶剂●化学性质●异构化：在碱性条件下，D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖可以相互转化，在D-葡萄糖和D-甘露糖的转化中，有一个手性碳发生构型的变化，称为差向异构化。
●氧化反应：可以生成醛糖酸和酮醛酸。
●还原反应：可以被还原醇●糖脎反应（亲核加成）：糖脎可以结晶，可以根据结晶的形状判断单糖的类型。
●酯化作用：单糖可以看作多元醇，可以与酸成酯，生物化学上较重要的糖脂是磷酸酯，它是糖代谢的中间产物。
●糖苷化：单糖环上的半缩醛羟基可以与酚或醇上的羟基脱水缩合成缩醛式衍生物，即糖苷。
●糖醛反应（与无机酸的反应）：●Molisch反应：可以用于鉴定单糖的存在●Seliwannoff反应以及溴水：可以辨别醛糖和酮糖●高碘酸氧化反应：可以根据IO₄⁻的消耗和甲酸的合成确定该糖苷是呋喃型还是吡喃型，还可以计算多糖支链的数目(三)★寡糖●糖苷键：α-糖苷键；β-糖苷键●常见的二糖●蔗糖：一分子葡萄糖和一分子果糖以β-2，1糖苷键连接（因没有潜在自由的醛基，所以没有还原性）●麦芽糖：两分子葡萄糖以α-1，4糖苷键连接●乳糖：一分子半乳糖和一分子葡萄糖以β-1，4糖苷键连接(四)★多糖●淀粉●直链淀粉：以α-1，4糖苷键连接，遇碘呈深蓝色，没有分支，水解产物有一种双糖麦芽糖和一种单糖葡萄糖●支链淀粉：以α-1，6糖苷键连接，遇碘呈紫红色，有分支，水解产物只有一种二糖麦芽糖●糖原：与支链淀粉相似，分支程度更高，有支链，遇碘呈红棕色或红褐色，水解产物为葡萄糖●纤维素：以β-1，4糖苷键连接成直连，是植物细胞壁的重要组分●几丁质（壳多糖）：N-乙酰葡萄糖胺以β-1，4糖苷键连接成直连，是昆虫类，甲壳类动物骨骼以及细菌细胞壁的重要成分(五)★糖蛋白●包括：分泌蛋白、膜蛋白●糖和氨基酸的连接：●O连接：单糖的半缩醛羟基与丝氨酸、苏氨酸残基上的羟基连接。
生物化学考研题库【圣才出品】
生物化学考研题库【圣才出品】生物化学作为生命科学领域的重要基础学科，对于考研学子来说，掌握其知识要点和解题技巧至关重要。
本考研题库旨在帮助考生系统复习生物化学知识，提高解题能力，为考研成功打下坚实基础。
一、蛋白质化学（一）氨基酸1、下列哪种氨基酸是碱性氨基酸？（）A 丙氨酸B 赖氨酸C 丝氨酸D 天冬氨酸答案：B解析：碱性氨基酸包括赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）和组氨酸（His）。
2、氨基酸在等电点时，具有的特点是（）A 溶解度最大B 在电场中不泳动C 只带正电荷D 只带负电荷答案：B解析：氨基酸在等电点时，净电荷为零，在电场中不泳动。
（二）蛋白质的结构1、维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是（）A 盐键B 氢键C 疏水作用D 范德华力答案：B解析：蛋白质二级结构（如α螺旋、β折叠等）的稳定主要依靠氢键。
2、具有四级结构的蛋白质特征是（）A 分子中必定含有辅基B 由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成C 每条多肽链都具有独立的生物学活性D 依赖肽键维系四级结构的稳定性答案：B解析：具有四级结构的蛋白质由两条或两条以上具有三级结构的多肽链通过非共价键（如氢键、离子键等）结合而成。
（三）蛋白质的性质1、蛋白质变性后（）A 一级结构改变B 空间结构改变C 溶解度增加D 生物学活性增强答案：B解析：蛋白质变性是指其空间结构被破坏，但一级结构不变，溶解度降低，生物学活性丧失。
2、下列哪种方法常用于蛋白质定量？（）A 凯氏定氮法B 双缩脲反应C 茚三酮反应D 考马斯亮蓝染色法答案：D解析：考马斯亮蓝染色法常用于蛋白质定量，操作简便、灵敏度高。
二、核酸化学（一）核酸的组成1、组成核酸的基本单位是（）A 核苷酸B 核苷C 碱基D 磷酸答案：A解析：核苷酸是核酸的基本组成单位，由碱基、戊糖和磷酸组成。
2、 DNA 中不含有的碱基是（）A 腺嘌呤（A）B 尿嘧啶（U）C 鸟嘌呤（G）D 胞嘧啶（C）答案：B解析：DNA 中的碱基包括腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）和胸腺嘧啶（T），而尿嘧啶（U）存在于 RNA 中。
生物化学考研题库完整版
生物化学考研题库完整版生物化学考研题库完整版生物化学是生物学和化学的交叉学科，研究生物体内化学反应的机理和过程。
考研生物化学是研究生考试中的一门重要科目，涉及的内容广泛且深入。
为了帮助考生更好地备考，本文将提供一份生物化学考研题库完整版，供考生参考。
第一部分：基础知识1. DNA是由哪些核苷酸组成的？2. RNA的主要功能是什么？3. 蛋白质的合成过程是怎样的？4. 请解释DNA复制的过程。
5. 什么是基因突变？有哪些类型？6. 请解释DNA修复的机制。
7. 什么是转录和翻译？8. 什么是酶？酶的功能是什么？9. 请解释ATP的合成过程。
10. 什么是代谢途径？请列举几个常见的代谢途径。
第二部分：生物大分子1. 请解释蛋白质的结构和功能。
2. 什么是酶动力学？请解释酶的底物结合和催化过程。
3. 请解释核酸的结构和功能。
4. 什么是DNA超螺旋结构？请解释其重要性。
5. 请解释多糖的结构和功能。
6. 什么是脂质？请解释脂质的分类和功能。
7. 请解释细胞膜的结构和功能。
8. 什么是胆固醇？请解释其在人体中的作用。
9. 请解释核糖体的结构和功能。
10. 什么是免疫球蛋白？请解释其在免疫系统中的作用。
第三部分：代谢途径1. 请解释糖酵解的过程和产物。
2. 什么是三羧酸循环？请解释其重要性。
3. 请解释脂肪酸合成的过程。
4. 什么是胆固醇合成途径？请解释其重要性。
5. 请解释氨基酸代谢的过程。
6. 什么是尿素循环？请解释其重要性。
7. 请解释核苷酸代谢的过程。
8. 什么是脂质代谢？请解释其重要性。
9. 请解释葡萄糖异生的过程和调控机制。
10. 什么是氧化磷酸化？请解释其在能量代谢中的作用。
第四部分：信号转导1. 请解释细胞膜受体的结构和功能。
2. 什么是细胞内信号传导？请解释其机制。
3. 请解释酪氨酸激酶受体的信号转导机制。
4. 什么是G蛋白偶联受体的信号转导机制？5. 请解释细胞内钙离子信号转导的过程。
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第五章
蛋白质III：蛋白质的性质、分离与鉴定
第一节蛋白质性质
一、蛋白质的酸碱性质
蛋白质等电点（pI）
溶解度最小
二、蛋白质分子的大小
KD，kd，kD，kDa （kilodalton）
寡聚蛋白质（oligometric protein）
超分子复合物（supramolecular complex）
蛋白质分子量可粗略估计（AA平均分子量约为110 dalton）
三、蛋白质的胶体性质
质点范围：1-100 nm
蛋白质胶体系统稳定的原因：
水化层（hydration mantle）
双电层（electric double layer）
第二节蛋白质的分离纯化
一、蛋白质分离提纯的一般原则
高纯度、高活性、高回收率
二、蛋白质的分离方法
（一）根据分子大小不同的分离方法
1.透析（dialysis）和超滤（ultrafiltration）
半透膜（玻璃纸，火棉纸）
透析常用于蛋白质溶液的除盐
超滤常用于蛋白质溶液的除盐、浓缩
3.凝胶过滤（gel filtration chromatography）
分子筛层析，分子排阻层析
交联葡聚糖（Sephadex）
聚丙烯酰胺凝胶（Bio-Gel P）
琼脂糖凝胶（Sepharose，Bio-Gel A）
凝胶过滤原理
根据蛋白质分子大小用凝胶作为介质分离蛋白质的一种柱层析方法。
比凝胶网孔大的分子被排阻在凝胶颗粒外，而最先流出柱外；比网孔小的分子能不同程度的自由出入凝胶颗粒的内外，洗脱路径长，因而得到分离。
（二）利用溶解度差别的分离方法
1. 等电点沉淀
2. 蛋白质的盐溶与盐析
3. 有机溶剂分离法
4. 温度对蛋白质溶解度的影响
（三）根据电荷不同的分离方法
1 电泳（electrophoresis）
在一定的电场和介质中，蛋白质迁移速度与蛋白质分子量、所带电荷及分子形状有关。
迁移率＝某一蛋白条带移动距离/前沿到达距离
a. 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）丙烯酰胺和交联试剂（甲叉双丙烯酰胺）在过硫酸铵催化下聚合而成。
可以控制孔径大小
b. 不连续电泳（discontinuous electrophoresis）
凝胶孔径（浓缩胶，分离胶）、缓冲液、pH
三种效应：电荷效应、分子筛效应、浓缩效应
c. 毛细管电泳（capillary electrophoresis）
50 m内径
d. 等电聚焦电泳（IFE）
蛋白质在具有pH梯度的介质中进行分离。
在电场中，每种蛋白质成分将移向并停留在等于其等电点的pH处，形成一个很窄的区带。
用途：按等电点分离蛋白质
鉴定蛋白质等电点
2.离子交换柱层析
（ion-exchange chromatography）
纤维素离子交换剂
阳离子交换剂: CM-Cellulose(羧甲基纤维素)
阴离子交换剂: DEAE-Cellulose
葡聚糖离子交换剂（Sephadex ion exchanger）兼分子筛效应
（四）根据蛋白质的吸附特性分离
填料有：
羟基磷灰石、活性碳、硅胶、氧化铝等
（五）利用特异生物学亲和力纯化
利用蛋白质所具有的生物学特异性，通过与特异配基专一、可逆结合（非共价结合）分离蛋白质的一种层析方法。
优点：高效、高纯
亲和层析（afinity chromatography）
快速蛋白液相层析
fast protein liguid chromatography(FPLC)
思考题
蛋白质胶体稳定性的原因
凝胶过滤、离子交换柱层析的原理
电泳原理
亲和层析、盐析
蛋白质分离可分别根据其、、、性质进行。
蛋白质在电泳胶上的迁移率与蛋白质分子、和有关。
不连续电泳分离效果好是因为它同时具有、、三个效应。
DEAE-cellulose 是一种。
蛋白质混合物经凝胶过滤后，大分子先于小分子被洗脱。
（）
盐析和透析均可用于蛋白质除盐。
（）
羧甲基纤维素属于阳离子交换剂。
（）
第三节蛋白质的鉴定
一、蛋白质分子量的测定
（一）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS－PAGE
变性电泳
在巯基乙醇存在下，蛋白质亚基分开，多肽链伸展；然后SDS与多肽链以1.4:1的重量比结合成复合物。
SDS与蛋白质的结合改变了蛋白质分子的带电情况和分子形状
因此当蛋白质在电场中移动时，其迁移率仅与其分子量有关。
蛋白质分子量M与迁移率μ的关系式：
Log M = a - b μ
用已知分子量的标准蛋白在同样条件下电泳，分别测其迁移率，做成标准曲线。
测出未知蛋白质的迁移率，从图上查得蛋白质分子量。
SDS-PAGE测定蛋白质分子量的特点：
蛋白质已变性；
对多亚基蛋白，测定的是亚基的分子量。
（二）凝胶过滤
蛋白质分子量与洗脱体积关系式：
Log M = k1-k2Ve
标准蛋白洗脱曲线
测出未知蛋白质的洗脱体积，从图上查出蛋白质分子量。
特点：
测的是天然蛋白质分子量；
适合球状分子。
（三）沉降速度法
蛋白质在离心力作用下发生沉降，沉降速度与蛋白质分子分子量、密度、形状有关。
对特定蛋白质来讲，单位离心力场的沉降速度为一定值，称为沉降系数（sedimentation coefficient）。
沉降系数通常用Svedberg 单位（S）表示。
一个S等于10-13秒。
斯维得贝格（Svedberg）方程：
沉降系数越大
分子量越大。
（四）蛋白质分子量测定新技术
1. Recombinant DNA technology
2. Electrospray Mass Spectrometry
二、蛋白质纯度的鉴定
（一）电泳一条带
（二）沉降分析图谱一个峰
（三）溶解度曲线一个折点
（四）结晶
三、蛋白质含量的测定
1. 凯氏定氮法
2. 双缩脲法
3. Folin-酚法(Lowry法)
4. 考马斯亮蓝法
5. 紫外吸收法
四、蛋白质免疫印迹分析
（immunoblot，western blot）（一）原理
蛋白质的凝胶电泳分离；
抗原-抗体间的特异结合
Western blot 技术要点：
用途：定性蛋白质
蛋白质表达水平
测定混合样品中某蛋白的分子量
抗体的特异性
常见蛋白质脱盐方法：
透析
凝胶过滤
有机溶剂、有机酸沉淀
常见浓缩蛋白质的方法
盐析
超过滤
等电沉淀
冷冻干燥
聚乙二醇法
课堂讨论：
下述结论对不对，为什么？
1. 某蛋白质样品，SDS-PAGE分析出现2条带，表明该样品一定不纯。
2. 某蛋白质样品，PAGE分析仅1条带，表明该样品很纯。
习题
蛋白质浓缩的方法
SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理
凝胶过滤测定蛋白质分子量的原理
名词解释：沉降系数、免疫印迹。