南极磷虾油改善大鼠学习记忆能力研究
南极磷虾油对高脂血症大鼠血脂和抗氧化力的影响_王亚恩

DOI:10.13400/ ki.cj m d.2011.03.011Ch in J Mar Dr ug s,2011J une,Vol.30No.3中国海洋药物杂志2011年6月第30卷第3期南极磷虾油对高脂血症大鼠血脂和抗氧化力的影响■王亚恩,姜国良,徐恺,赵传凯,李立德,刘云*(中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛266003)摘 要:目的探讨南极磷虾油对实验性高脂血症大鼠血脂和抗氧化力的影响。
方法高脂饲料建立高脂血症大鼠模型,分别灌胃50,100和500mg·kg-1南极磷虾油,连续30d,测定大鼠血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LD L-C),高密度脂蛋白胆固醇(HD L-C)、血清一氧化氮(N O)、超氧化物歧化酶(SO D)、谷胱甘肽过氧化物酶(G SH-P X)以及丙二醛(M DA)水平。
结果南极磷虾油能显著降低高脂血症大鼠血清中的T C、T G和LDL-C含量,降低动脉粥样硬化指数(A I)。
提高大鼠血清中N O含量,提高SO D和GSH-PX活性,降低M DA含量。
结论南极磷虾油对高脂血症大鼠具有调血脂的作用和抗氧化作用,其抵抗动脉粥状硬化方面的作用优于深海鱼油。
关键词:南极磷虾油;高脂血症;抗氧化力;大鼠中图分类号:R965 文献标识码:A 文章编号:1002-3461(2011)03-0056-04Effects of the Antarctic krill oil on the seru m lipids and antioxidationability in hyperlipidemia ratsWANG Ya-en,JIANG Guo-liang,XU Kai,ZH AO Chuan-kai,LI Li-de,LI U Yun*(College o f Marine Li f e Sciences,Ocean University of China,Qingdao266003,China)A bstract:Objective To study the effects of Antarctic krill oil on serum lipid and antio xidation in hy per-lipidemia rats.Methods Afte r feeding with high fat diet,the hyperlipemia m odel rats were e stablished, then the rats w ere given by ig.at doses o f krill oil(50,100and500mg·kg-1,respectively)for30 days.The co ntents of total cho lestero l(TC),trig ly ceride(TG),low-density lipopro tein-cholesterol (LDL-C),hig h-density lipoprotein-cho leste ro l(H DL-C),NO,the activities o f superoxide dismutase (SOD),g lutathio ne perox idase(GSH-PX)and the co ntent of malo ndialdehyde(M DA)w ere deter-mined.Results The Anta rctic krill oil could decrease the contents o f TC,TG and LDL-C in serum sig-nificantly,decrease the athe ro genic index(AI)m arkedly,increase serum NO and the activities of se rum SOD and GSH-PX significantly,M eanw hile decrease M DA obviously.Conclusion The A ntarctic krill oil can regulate the serum lipids and increase antio xida tion ability in hy perlipidemia rats,and its effect much better than fish oil in atherosclerosis therapy.Key words:Antarctic krill oil;hyperlipidemia;antioxidatio n ability;rats①■基金项目:广东省科技局项目(No.0609084) 作者简介:王亚恩,男,硕士研究生 E-m ail:yaen521suiyu@*通讯作者:刘云,女,副教授,硕士生导师 Tel:(0532)82031839;E-mail:liuyu n@ 南极大磷虾(E uphausia superba)是生活在南大洋中的一种甲壳类浮游动物,个体不大,但生物量巨大。
《2024年补阳还五汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的机制研究》范文

《补阳还五汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的机制研究》篇一摘要:本研究通过探讨补阳还五汤在改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力方面的作用及其机制,为中药治疗血管性痴呆提供新的思路和实验依据。
实验结果显示,补阳还五汤可显著提高血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,其机制可能与改善脑部血液循环、促进神经元再生及调节神经递质等有关。
一、引言血管性痴呆(Vascular Dementia,VD)是一种常见的神经系统疾病,主要表现为认知功能减退、记忆力下降等症状。
近年来,随着人口老龄化,血管性痴呆的发病率呈上升趋势。
尽管现代医学对血管性痴呆的治疗取得了一定的进展,但仍有较大的提升空间。
中医药在治疗血管性痴呆方面具有独特的优势,补阳还五汤作为中医经典方剂之一,被广泛应用于治疗各种神经系统疾病。
因此,本研究旨在探讨补阳还五汤在改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力方面的作用及其机制。
二、材料与方法1. 材料(1)实验动物:选用健康成年SD大鼠,建立血管性痴呆模型。
(2)药物:补阳还五汤,由当归、熟地黄、枸杞子等中药组成。
(3)试剂与仪器:实验所需试剂和仪器包括各种生化指标检测试剂、行为学测试仪器等。
2. 方法(1)建立血管性痴呆大鼠模型:采用双侧颈动脉结扎法建立血管性痴呆大鼠模型。
(2)分组与给药:将大鼠随机分为模型组、药物组和对照组,药物组给予补阳还五汤灌胃治疗。
(3)行为学测试:通过Morris水迷宫等测试方法评估大鼠的学习记忆能力。
(4)指标检测:检测大鼠脑部血液循环、神经元再生及神经递质等相关指标。
三、实验结果1. 补阳还五汤对血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响实验结果显示,经过补阳还五汤治疗后,血管性痴呆大鼠的学习记忆能力得到显著提高,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。
2. 补阳还五汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的机制(1)改善脑部血液循环:补阳还五汤可显著提高大鼠脑部血液循环,增加脑部血流量,改善脑部缺氧状况。
《2024年补阳还五汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的机制研究》范文

《补阳还五汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的机制研究》篇一一、引言血管性痴呆(VD)是一种常见的神经系统疾病,其特征为认知功能下降,特别是学习记忆能力的显著减退。
随着人口老龄化的加剧,VD的发病率逐年上升,已成为严重影响人类健康的社会问题。
补阳还五汤作为中医药的传统方剂,在改善认知功能、促进神经修复等方面表现出显著疗效。
本研究旨在探讨补阳还五汤对血管性痴呆大鼠学习记忆能力的改善作用及其可能的作用机制。
二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验选用健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、补阳还五汤治疗组。
模型组和治疗组通过手术造成血管性痴呆模型。
2. 药物与干预补阳还五汤按传统方法制备,给予治疗组大鼠灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水。
3. 行为学测试采用Morris水迷宫等行为学测试方法,评估大鼠的学习记忆能力。
4. 检测指标检测大鼠脑内神经递质水平、脑血流动力学参数、神经元损伤情况等指标。
三、实验结果1. 学习记忆能力改善经过补阳还五汤干预后,治疗组大鼠在Morris水迷宫等行为学测试中的表现明显优于模型组,表明补阳还五汤能够显著改善大鼠的学习记忆能力。
2. 脑内神经递质水平变化与模型组相比,治疗组大鼠脑内乙酰胆碱(ACh)、多巴胺(DA)等神经递质水平显著提高,表明补阳还五汤可能通过调节神经递质水平来改善学习记忆能力。
3. 脑血流动力学参数变化补阳还五汤干预后,治疗组大鼠脑血流动力学参数得到改善,脑部供血情况得到优化,有助于改善神经元功能。
4. 神经元损伤情况治疗组大鼠脑内神经元损伤程度较模型组减轻,表明补阳还五汤具有神经保护作用,有助于修复受损神经元。
四、讨论本研究结果表明,补阳还五汤能够显著改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。
这可能与以下机制有关:首先,补阳还五汤通过调节脑内神经递质水平,提高神经元的兴奋性,从而改善学习记忆能力;其次,该方剂能够改善脑血流动力学参数,优化脑部供血情况,为神经元提供良好的生存环境;最后,补阳还五汤具有神经保护作用,能够减轻神经元损伤,促进神经修复。
血管性痴呆大鼠海马NR2B受体与学习记忆的研究进展

7BIOTECHWORLD 生物技术世界1 NR2B 受体特性与学习记忆功能NMDA受体由多个亚单位组成,包括NR1、NR2 (包括NR2A-D)、NR3。
而NR2B亚基作为最重要的调节单位,在神经元突触形成与维持、突触传递可塑性及学习和记忆等调节过程中起重要作用。
Goebl等检测中枢神经系统NR2B mRNA分布时发现,NR2B在与学习记忆有关大脑皮层和海马等部位密度最高,奠定了NR2B受体参与学习记忆的物质基础。
Bliss称NR2B为“聪明基因”,并且证实NR2B亚基过度表达的小鼠学习记忆能力增强,海马组织NR2B基因敲出的小鼠出现空间或非空间的记忆缺陷。
所以说,NR2B作为调节亚单位,在学习和记忆等脑高级功能的调控中起关键作用。
2 脑缺血后NR2B 受体的改变与学习记忆功能在缺血缺氧的病理情况下,NR2B受体的数量及功能发生改变,导致神经元损害和神经功能受损,使得学习记忆功能发生障碍。
研究发现,采用永久性双侧颈总动脉结扎模型模拟大鼠慢性脑低灌注,神经生长因子连用21天,可降低海马NR2B的过度表达,增强脑缺血再灌注大鼠学习与记忆功能[1],说明NR2B表达水平的变化可能是影响学习记忆的机制之一。
同时发现人参皂苷Rg1联合美满霉素也可逆转海马NR2B过度表达,明显改善脑缺血再灌注大鼠的学习记忆能力[2],具有脑保护作用。
大鼠多发性脑梗死10天后给予塞络通胶囊干预60天,可下调大鼠多发性脑梗死恢复期NR2B表达,减轻缺血缺氧诱导NR2B活性升高而引起的神经元损伤[3],改善中枢神经系统学习、记忆功能。
另有研究表明,缺血性血管性痴呆(VD)大鼠海马NR2B含量显著减少,美金刚连用4周可上调NR2B含量[4],说明慢性缺血缺氧损伤引起能量供应不足,存活神经元功能受损,影响受体合成,美金刚通过调节谷氨酸能信号通路并恢复其功能,从而改善慢性缺血导致的认知功能障碍。
综上所述,NR2B在脑缺血缺氧的疾病过程中表现出上调或者下调的变化,原因可能与在不同的模型中缺氧的程度、快慢、持续时间有关。
更年春方对切除卵巢大鼠学习记忆能力的改善作用及部分机理探讨

复旦大学妇产科学专业硕十毕业论文更年春对F日巢切除大鼠学习记忆能力的改善作用及部分机理探讨GroupRatioNSHLE0.0027±0.000310.0029±0.000290.0032±0.00028**6O.0029±0.O0041O.0034±0.00023**66ComparewithNgroup,4印<o.01;ComparewithSgroup,6e矿o.01,6p<0.05由表2可以看出:H组和E组大脑湿重与体重的比值明显大于N!it(p<O.01):且与S组相比其比值也明显增加(P<o.01,p<O.05)。
L组与N组和s组比较无明显变化(p》o.05)。
图1海马形态学的变化Fig1ThemorphologicchangesinhippocampusN组与S组相比海马锥体细胞层、分子层和多形细胞层细胞浓缩出现空泡,细胞排列紊乱。
而H组和E组海马的组织表现较N组改善,而L组海马的组织表现改善不明显。
3.Morris水迷宫实验结果(1)定向航行实验(表3、图2):表3各组大鼠定向航行实验中平均逃避潜伏期的比较(x+-S,n--9)1Iab3EscapeLatenciesinPlaceNavigation嘶alsoffivegroups(x4_-_S,n=9)Grouptl(s)t2(s)t3(s)t4(s)N77.16±13.9874.19±23.3264.18±26.9051.65±20.13S65.28±17.2845.70±13.40*44.54±18.62*36.92±14.81+H59.56±13.76*46.13±15.55*40.34±15.41‘33.62±12.500L53.65±24.91‘50.65±13.70*49.23±18.3546.48±14.10E65.34±12.6247.26±10.49*43.95±13.35*27.99±11.7l+Compare、)vi也Ngroup,印《o.05El-rbam:+产2舯SE图2各组大鼠在定向航行实验中的平均潜伏期的变化(n--9)Fi92EscapeLatgnciesinPlaceNavigationTrialsoffivegroups(n--9、图2和表3所示各组大鼠均随学习次数的增加潜伏逃避期每天呈缩短趋表5显示S组中ERa和ERIBmRNA的含量差异有统计学意义∽O.01),根据平均相对含量ERoznRNA/ER9mRNA=2。
α-亚麻酸对大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响

旦拯笠垡:堡鏖醒盟左题堂墨运坚婴篮塑塑呈控经五的影响笙!翅表2空间搜索实验结果(i±s。
n=10)组别总路程(cm)中心区域(em)穿越次数(次)与正常对照组比较:1)P<O.05・665・2.3海马神经元超微结构观察青花椒籽油组细胞胞浆内溶酶体数毋增加、粗面内质网肥大和增生;线粒体肥大和增生,表现为线粒体嵴的数量增多(见图1)。
对照组粗面内质网有大母的板层小体出现,部分内质网扩张并断裂形成大小不一的囊泡状、湖状和池水状;线粒体嵴密集、扭曲和黏连部分出现髓鞘样结构、晶体包含物和脂滴样结构(见图2)。
图1青花椒籽油组海马神经元结构(x40ooo)图2正常对照组海马神经元结构(x40ooo)3讨论a一亚麻酸属于c03系脂肪酸,在体内主要以二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的形式存在,而DHA除富集于主动脉以外,还大量存在于生殖细胞、大脑皮质及视网膜中,这提示Ot.亚麻酸及其衍生物同这些组织的功能有关∞】。
海马结构是与学习记忆有关的重要脑区,本研究中青花椒籽油组大鼠海马神经元超微结构与对照组相比有明显改变,其大鼠脑海马神经元粗面内质网肥大和增生,表明蛋白质合成增强,内质网发育完善表明细胞分化程度和活性较高,而线粒体的肥大与增生和细胞功能增强、能量需求增高有密切关系。
Ot一亚麻酸在体内可直接进行分解代谢,代谢产物最重要的是DHA和EPA等多不饱和脂肪酸及前列腺索H1。
DHA和EPA参与到神经元细胞膜磷脂中,使细胞膜液态流动性提高,通透性增加,细胞充满活力。
DHA对大脑神经细胞分裂、增殖、神经传导、突触生长和发育起着极为重要作用,是大脑形成和智力开发的必需物质”]。
而青花椒籽油中含有丰富的不饱和脂肪酸∽’,Ot一Ⅱ麻酸含量约33%,实验组大鼠脑海马结构的变化可能与饲料中富含仅一亚麻酸有关。
本研究选用见栓孕鼠开始饲喂青花椒籽油饲料,并连续饲喂两代,主要由于大鼠脑发育的关键时期为妊娠期及}n生后5—25d。
电针对全脑缺血大鼠学习记忆能力和海马神经元超微结构的影响

电针对全脑缺血大鼠学习记忆能力和海马神经元超微结构的影响[摘要]目的:探讨电针治疗血管性痴呆(VD)的疗效及可能机制。
方法:实验用4 血管阻断模型,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,并用电镜观察鼠脑海马神经元的超微结构变化。
结果:模型大鼠表现明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长;在原平台象限跨越平台次数未明显高于其余3个象限;海马神经元超微结构发生明显改变,神经元损害严重。
电针及尼莫通组能显著缩短定位航行试验的逃避潜伏期;在原平台象限跨越平台次数显著多于其余3个象限,与假手术组比无显著差异;海马神经元超微结构变化相对较轻,神经元受损程度明显轻于模型组。
[主题词]电针;海马/超微结构;学习/针灸效应;记忆/针灸效应;脑缺血/针灸疗法血管性痴呆(VascularDementia,VD)是指各种脑血管疾病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合征。
学习记忆能力的下降,通常是痴呆的早期表现。
目前较为普遍的观点认为,主要是由于多梗塞后对某些中枢结构的损害以及影响了中枢之间的联系而导致痴呆。
针灸疗法对VD的智能及社会活动能力康复有积极作用,能明显提高患者的学习记忆能力,但有关机理方面的动物实验研究尚缺乏[1]。
为探索针刺治疗VD的疗效和可能机制,我们采用4 血管阻断(4 Vesselocclusion,4 VO)全脑缺血法,建立近似人类学习记忆障碍的大鼠模型,用水迷宫定量测量治疗与非治疗组之间学习记忆能力的差异,并观察鼠脑海马神经元超微结构的变化,为针灸临床防治VD提供实验室依据。
1材料1.1动物及分组成年健康雄性SD大鼠50只,体重200~250g,由广州中医药大学实验动物研究中心提供。
模型制作存活大鼠按体重随机分为假手术组、电针组、尼膜通组各10只,模型组11只。
1.2仪器SDQ 30双极射频电凝器(上海手术器械厂),Morris水迷宫,JEM 1200EX电子显微镜(日本),D860电针仪(上海)。
固本健脑法对MCI大鼠学习记忆能力及海马Caveolin-1的影响

固本健脑法对MCI大鼠学习记忆能力及海马Caveolin-1的影响固本健脑法对MCI大鼠学习记忆能力及海马Caveolin-1的影响摘要:轻度认知功能障碍(MCI)是老年人中普遍存在的一种病理状态,表现为记忆、学习和思维能力的轻微下降,容易转变为阿尔茨海默病。
固本健脑法是一种传统中医方法,被认为具有提高学习记忆能力的作用。
本研究旨在探究固本健脑法对MCI大鼠学习记忆能力及海马Caveolin-1的影响。
方法:将56只雄性SD大鼠随机分为对照组、MCI模型组、固本健脑法组和阿托品组。
采用D-半乳糖肉苁蓉、丹参、姜黄和人参等中药配方制备固本健脑法。
采用Morris水迷宫实验和Y型迷宫实验评估大鼠的学习记忆能力。
通过免疫组化和Western blot等方法检测大鼠海马Caveolin-1的表达。
结果:MCI模型组大鼠在Morris水迷宫实验和Y型迷宫实验中的台数、潜伏期和错误次数明显高于对照组(P<0.05)。
与MCI模型组相比,固本健脑法组大鼠在Morris水迷宫实验和Y型迷宫实验中的台数、潜伏期和错误次数显著减少(P<0.05)。
免疫组化结果显示,固本健脑法组大鼠海马Caveolin-1的表达显著高于MCI模型组(P<0.05)。
Western blot结果与免疫组化结果一致。
结论:固本健脑法能显著改善MCI大鼠的学习记忆能力。
此外,固本健脑法可能通过提高海马Caveolin-1的表达来发挥其作用。
关键词:固本健脑法;MCI;大鼠;学习记忆能力;海马Caveolin-1引言:轻度认知功能障碍(MCI)是一种老年人中常见的病理状态,表现为学习、记忆和思维能力的轻微下降。
MCI是阿尔茨海默病的前体病理过程,约有15-20%的MCI患者会转变为阿尔茨海默病。
目前,没有特效的药物可以治疗MCI,因此寻找有效的治疗方法非常重要。
传统中医中,固本健脑法被广泛应用于改善学习记忆能力。
固本健脑法是一种综合运用中药材调配的治疗方法,主要包括D-半乳糖肉苁蓉、丹参、姜黄和人参等中药。
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南极磷虾油改善大鼠学习记忆能力研究刘 云,王亚恩,李立德,徐 恺,田 丹,姜国良*(中国海洋大学海洋生命学院,山东 青岛 266003)摘 要:目的:观察南极磷虾油对Wistar 大鼠学习记忆能力的影响。
方法:采用Morris 水迷宫法及Y-型迷宫刺激法观察,比较南极磷虾油和深海鱼油对大鼠学习记忆能力的作用。
结果:Morris 水迷宫实验显示南极磷虾油能够显著减少大鼠寻找平台潜伏期时间并且增加垮台次数和目标区域游泳时间所占比例(P <0.05或P <0.01);Y-型迷宫刺激实验表明南极磷虾油能够显著减少大鼠达标所需次数,显著提高48h 后的实验正确率(P <0.05或P <0.01)。
结论:南极磷虾油可显著改善大鼠学习记忆能力,且效果优于深海鱼油。
关键词:南极磷虾油;学习记忆;Mo rris 水迷宫;Y-型迷宫刺激器;Wistar 大鼠Antarctic Krill Oil Improves Learning and Memory of RatsLIU Yun ,WANG Ya-en ,LI Li-de ,XU Kai ,TIAN Dan ,JIANG Guo-liang*(College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)Abstract :Objective: To observe the effect of Antarctic krill oil on the improvement of learning and memory of rats. Methods:The effect of Antarctic krill oil and deep sea fish oil on learning and memory of rats was evaluated by Morris-water maze and Y-shaped maze methods. Results: Antarctic krill oil could significantly reduce the latency of escaping onto the platform, and increase the frequency of crossing the platform and the proportion of swimming time of rats in the target area of Morris-water maze. Y-shaped maze results indicated that Antarctic krill oil could significantly reduce the number required for achieving the goal and improve the correct response rate after 48 h. Conclusion: Antarctic krill oil can improve learning and memory of rats and the effectiveness is better than that of deep sea fish oil.Key words :Antarctic krill oil ;learnimg and memory ;Morris-water maze ;Y-shaped maze ;Wistar rats中图分类号:Q519 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2011)15-0273-04收稿日期:2011-12-10作者简介:刘云 (1969—),女,副教授,博士,研究方向为实验动物学。
E-mail :liuyun@ou *通信作者:姜国良(1963—),男,教授,学士,研究方向为海洋生物技术。
E-mail :gljiang@南极大磷虾(Euphausia superba )是南大洋南极海域所发现的磷虾一种。
它是目前地球上海洋生物最大聚集的动物之一,也是至今发现分解蛋白质最强的酶生产者。
在研究过的4种磷虾目的种类中,南极大磷虾幼体脂肪酸总含量最高,并且,其不饱和脂肪酸是目前自然界中唯一以磷脂型态结合ω-3(EPA 、DHA)和多样性超强抗氧化物(磷脂型虾青素astaxanthin)的分子结构,而饱和脂肪酸含量较低,在不饱和脂肪酸中,含有人体必需脂肪酸的亚油酸的比例较大,是一种食用安全、营养价值较高的虾类[1-4]。
有人利用磷虾油与甲壳素一起制备微颗粒饵料和鱼类保鲜剂[5-6],也有人研究南极磷虾油的药用价值,发现其可以降脂肪肝、降血脂和高血糖等,对非酒精性脂肪肝的治疗有一定的价值[7-8]。
但未见南极磷虾油对学习记忆功能影响的报道。
本实验采用Morris 水迷宫法和Y-型迷宫刺激法观察并比较南极磷虾油和深海鱼油对大鼠学习记忆能力的影响,以期为南极磷虾油的开发利用提供参考。
1材料与方法1.1材料与试剂南极磷虾由本实验室提供,2010年初从南极海域捕捞;南极磷虾油 自制;麦金利深海鱼油 荣成市鸿洋神海洋生物技术产业有限公司;脑复康(吡拉西坦)片 天津金世制药有限公司。
Wistar 大鼠 ,60只,(53.22±5.05)g ,购于鲁抗医药实验动物中心(合格证号:SCXK 鲁20080002)。
1.2仪器与设备Morris 水迷宫系统 上海吉量软件科技有限公司;♂MG-2 Y-型迷宫刺激器江苏省沙洲县三兴声电公司。
1.3方法1.3.1南极磷虾油的提取采用无水乙醇提取法提取南极磷虾中的虾油。
取冰鲜南极磷虾经75℃热风烘干后机械粉碎,将磷虾粉末以料液比1:9比例浸入65℃无水乙醇中浸提3h,再经过滤分离收集上清液,最后将上清液蒸馏后烘干得到南极磷虾油。
1.3.2实验动物分组60只雄性Wistar大鼠自由饮水摄食3d以适应环境后,按体质量每组10只进行随机分为6组:空白对照组、深海鱼油组、南极磷虾油组(低、中、高剂量)以及脑复康组,分组后开始灌胃相应药物,其中空白对照组灌胃蒸馏水,深海鱼油组灌胃10%鱼油(100mg/kg,以体质量计);南极磷虾油组分别灌胃10%南极磷虾油(100、500、1000mg/kg,以体质量计);脑复康组灌胃10% 吡拉西坦溶液(300mg/kg,以体质量计)。
1.3.3实验动物饲养条件大鼠分笼饲养,动物房内温度控制在(22±3)℃,湿度(60±15)%,自然采光,生活环境保持清洁,定期通风换气;垫料保持干燥卫生,隔天更换垫料。
大鼠自由饮水和摄食。
连续灌胃60d,每周称质量,灌胃顺序遵循分组的顺序,确保每组每天在同一时间给样。
1.3.4Morris水迷宫实验法测定装置由Morris水迷宫(MWM)和图像自动监测系统(MMEAS )组成。
MWM装置为直径160cm,高50cm 不锈钢圆形水池。
根据直角坐标划分水池为4个象限。
实验前将水池灌以清水至预定高度(约30cm),水温控制在(23±1)℃之间,在第4象限正中离池壁33cm处放一个直径为9cm,高为30cm的圆形透明平台,平台顶低于水面lcm。
水池上空通过一摄像机与监视器和计算机连接。
计算机可以自动跟踪并记录下大鼠游泳轨迹,当设定的训练时间已到或大鼠已爬上平台,计算机停止跟踪,软件自动计算出大鼠在水池中所游过的路径长度,找到平台所需的时间(即潜伏期)和游泳速度。
实验时保持环境安静,迷宫外参照物(如门、窗、实验者等)保持不变。
用Morris水迷宫对大鼠空间学习记忆能力进行测试。
1)定位航行实验:用于测量大鼠对水迷宫学习和记忆的获取能力。
实验历时5d,训练时随机选择一个入水点,将大鼠头朝池壁放入水中,记录大鼠寻找并爬上平台时所需要的时间(即逃避潜伏期),规定每次的实验时间为90s,如果大鼠在规定的90s内找不到平台,须将其引导至平台,让其在平台上站立10s(这时逃避潜伏期记为90s)。
2)空间搜索实验:用于测量大鼠学会寻找平台后,对平台空间位置记忆的保持能力。
在最后1次训练后隔一周后撤除水下平台,然后在原入水点将大鼠面向池壁放入水中游泳90s,测其跨过平台相应位置的次数和目标区域游泳时间所占的比例。
1.3.5Y-型迷宫刺激法Y-型迷宫刺激器为三等臂式电迷路箱,各臂末端均装有信号灯。
箱底铺有供通电刺激用的铜栅。
通过控制器开关,可使三臂交替作为安全区(不通电,灯亮)。
实验固定在下午1:00开始,保持周围环境安静,避免刺激。
将大鼠放入迷宫刺激器的一臂,适应环境1min 后给予50 V左右电刺激。
其余两臂中的任一臂给予灯光信号,示为安全区。
大鼠进入安全区为正确反应,否则为错误反应。
学习测试是以测试达到连续10次中有9次正确反应前所需的电击次数表示学习能力。
记忆再现测试是48h后用同样的方法对每只大鼠检测10次,记录其中正确的次数以反应大鼠的记忆保持能力。
1.3.6数据处理数据处理利用SPSS 17.0软件, 将测得数据进行F 检验分析,然后用t检验进行差异显著性分析。
2结果与分析2.1大鼠体质量差异比较在整个灌胃及实验过程中,各组动物饮食活动正常。
各组动物体质量随时间而增加,脑复康组的平均体质量较其他组轻,但差异不明显(表1)。
组别第1天第21天第35天第49天空白对照组53.79±4.11147.79±26.81213.76±49.47289.71±59.03深海鱼油组53.56±6.21137.38±19.17199.10±33.48246.75±49.15南极低剂量52.34±3.27154.90±11.36223.01±21.91276.46±43.36磷虾中剂量53.83±4.46145.81±25.80202.53±37.11261.03±50.42油组高剂量54.82±3.78152.91±26.17207.84±57.21273.29±48.10脑复康组51.85±5.50126.65±32.90173.19±44.18236.84±61.87表1 各组大鼠不同时间的体质量(n=10)Table 1 Body weights of rats at different time points in each group(n=10)g2.2南极磷虾油对大鼠学习记忆能力的影响2.2.1Morris水迷宫定位航行实验在5d的定位航行实验中,随着训练次数的增加,所有实验组大鼠寻找平台的平均潜伏期都呈下降趋势。