miRNA成熟关键基因DROSHA和DICER的多态性与无精症的相关性要点
miRNA的作用机制及功能研究进展
miRNA的作用机制及功能研究进展王娟（德州学院生物系，山东德州253023）摘要microRNA (miRNA)是内源性的大小在20-25nt的一类非编码RNAs，具有调节基因表达活性的功能，广泛存在于真核生物体内，并在进化中保守。
miRNA的广泛存在与进化上的保守性，暗示它在生命活动中具有必不可少的调节作用，他们参与动植物生长发育、细胞分化、细胞增殖与调亡、激素分泌、肿瘤形成等各种过程。
本文总结了近几年来在miRNA的特征、生物发生、作用机制及功能意义上的研究进展。
miRNA无论在数量上还是功能上，可能都远远超过目前的发现，对其进行深入的研究，将有助于我们对生物体的各种生理病理机制的理解，并最终为疾病的诊断和治疗提供新的思路和理论基础。
关键词siRNA； microRNA； piRNA; 微处理器;核糖核酸内切酶Ⅲ; 基因调控; 生长发育；肿瘤治疗前言2006年，Andrew Fire 和Craig Mello 由于在RNAi（RNA interference，RNAi）及基因沉默现象研究领域的杰出贡献而获得诺贝尔医学奖，这再次将人们的注意力拉到siRNA这样一种小分子RNA上。
小分子RNA包括一个大家族，并在真核生物中具有广泛的调节功能。
目前已经有至少两种小分子RNA被描述：来源于发夹状前体的miRNAs (microRNAs)和由长的dsRNAs 加工而来的siRNAs (small interfering RNAs)。
研究发现，miRNA与siRNA有很多相似之处，但也有很大的不同，二者的区别将在以下文中进行论述。
最近又有文章报道了一种新的小分子RNA的发现[25]——piRNAs (piwi-interacting RNAs),他们特异地在小鼠的生精细胞中大量表达。
这些RNAs比以前发现的大多数小RNAs较大，约26–31nt(nucleotides)，并与Argonaute蛋白家族的Piwi亚枝(Piwi-subclade)成员相联系。
miRNA简介
Micro RNA简介1.关于microRNAmicroRNAs （简称miRNA）是一类进化上高度守的小分子非编码RNA，长度大约22nt左右，具有转录后调控基因表达的功能。
第一个microRNA 于1993 年被发现。
2000年之后，关于miRNA 的研究取得了很大进展，目前已经有1000多个人类被发现，这些miRNA调控至少 30% 以上的基因表达，参与多种生理病理过程。
编码miRNA的基因可能位于功能基因编码区、非编码区，可能成簇表达或独立表达。
在细胞核内，基因组DNA 转录生成较长的pri-pre-microRNA，之后被Drosha酶切割pri-pre-miRNA 成形成长度大约70-100 碱基的、具发夹结构的pre- microRNA。
这些发夹结构的RNA 被核输出蛋白exportin5转运到细胞质，在呗胞浆中的Dicer 酶切割形成19-23nt 大小的成熟的miRNAs 产物。
成熟的单链miRNAs 与一系列蛋白形成miRNA诱导的沉默复合物(miRISC)，结合于靶mRNA的3ˊ-UTR区，阻止所结合的mRNA 的翻译或直接降解靶miRNA。
每个miRNA可以调控多个（甚至上百个）靶基因，而特定靶miRNA也可以同时被多个miRNAs调节。
成熟的miRNA具有如下特点：（1）通常的长度为20～24 nt , 但在3′端可以有1～2 个碱基的长度变化;（2）5′端有一磷酸基团, 3′端为羟基, 这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA 的降解片段区别开来；（3）具有高度保守性、时序性和组织特异性。
序列（特别是种子序列）高度同源的miRNA被归为一个miRNA家族，但这些miRNA并不一定是成簇表达的。
例如miR-34 家族3个成员miR-34a、b、c，其中，miR-34a位于1号染色体1p36基因座位，单独表达；而miR-34b和-34c位于11号染色体11q23基因座位，成簇表达（图1），但它们都具有相同的种子序列（图1），并且都受到转录因子TP53的调控。
MicroRNA—21在糖尿病及其相关并发症方面的研究进展
MicroRNA—21在糖尿病及其相关并发症方面的研究进展microRNA是近年来发现的一类长度19～25个核苷酸的单链小分子RNA，它们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等。
microRNA主要通过与靶基因转录的mRNA部分或者完全互补配对结合，在转录后水平对靶基因的表达进行调节。
其中的microRNA-21在调节糖尿病及其并发症中发挥着重要的作用，本文就将microRNA-21在糖尿病及其相关并发症中的调节作用进行综述。
标签：microRNA-21；糖尿病；并发症微小RNA（microRNA，miRNA）是一组大小19～25 bp，在生物进化过程具有高度保守性的非编码RNA分子，它可以利用碱基配对原则识别靶基因3’非编码区的靶位点，进而抑制目标mRNA和/或降解目标mRNA，在转录后水平调控基因的表达。
1993年，Lee等[1]在线虫发育过程的研究中发现了第一个miRNA，并将其命名为lin-4。
现今，超过800个人类基因被克隆排序[2]，预计miRNA基因数量可超过1000个，并调控着超过30%的人类基因。
而microRNA-21（miRNA-21，miR-21）是近几年研究最为深入的miRNA之一，其高表达于哺乳动物器官组织。
目前miRNA-21在糖尿病慢性并发症如心血管并发症及其微血管并发症包括糖尿病肾病肾病和糖尿病视网膜病变中的作用已逐渐引起关注，本文将这方面进行综述如下。
1 microRNA-21概述人类microRNA-21（miRNA-21）定位在染色体17q23.2，与编码跨膜蛋白的基因VMP1（或TMEM49）、人乳头状瘤病毒16（HVP16）以及编码RNA U6的基因整合位点的位置重叠[3]。
miRNA-21在细胞核内由RNA聚合酶Ⅱ及Ⅲ转录生成，再由核酸酶Drosha加工成发夹状的前体pre-miR-21，最后被转运到细胞质经Dicer酶剪切为成熟的miRNA-21，但是miRNA-21的表达调控又有其独特的方面[4]。
miRNA
MiRNA的特征与功能【摘要】：在小分子RNA中发现了一类与基因表达调节密切相关的分子一微RNA(miRNA)。
miRNA 是一类真核生物内源性小分子单链RNA，长度通常为21—22个核苷酸，能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解或者抑制其翻译，从而对基因进行转录后表达的调控。
由此来控制生物细胞的生长，发育，凋亡，增殖等生理活动。
【关键词】：微RNA miRNA mRNA 转录翻译lin let。
微RNA(microRNA，miRNA)是新近发现的一类小分子RNA，是继小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)之后新的研究热点之一，2002年被美国著名杂志《科学》评为十大科技突破的第一名。
小RNA分子是非编码的RNA分子(noncoding RNA，ncRNA)，其控制着真核细胞的许多功能，影响基因表达、细胞周期和个体发育等多种行为[1]。
小RNA主要包括微RNA(microRNA，miRNA)和小干扰RNA(short interfering RNA，siRNA)两类[2]。
其中miRNA 成为继siRNA之后新的研究热点之一。
miRNA是一类长度很短的非编码调控单链小分子RNA，长度约2l～22个核苷酸(少数小于20个核苷酸)，能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解或者抑制其翻译，从而对基因进行转录后表达的调控[3]。
miRNA由一段具有发夹环结构的长度为70—80个核苷酸的miRNA前体(pre．miRNA)剪切后生成。
它通过与其目标mRNA 分子的3’端非编码区域(3'-untranslated region，3'UTR)互补导致该mRNA分子的翻译受到抑制[4]。
miRNA不直接参与基因的翻译和表达，而是具有调节其他基因表达的活性，从而参与生物体的生理活动，作为生命活动的重要调节因子存在。
尽管作为真核细胞中普遍存在的调控每个细胞约1000-60000个分子%。
miRNA综述1
MiRNA的研究摘要：miRNA是近年来在多种真核细胞及病毒中发现的一类内源性染色体上的非编码单链RNA,miRNA调节了细胞生长，组织分化，最近的研究表明miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。
因而与生命过程中发育、疾病有关。
本文主要从miRNA的特征、生成及加工机制、生物功能、miRNA与癌症、miRNA鉴定及功能研究手段、及miRNA展望等方面作一概述。
关键词：miRNA、生物功能、展望、应用、发育miRNA的简介miRNA是一个大家族，是一类长22nt左右的小分子非编码单链RNA的总称，在线虫，果蝇和植物，哺乳动物等真核生物中都有mirna 的发现。
他不编码任何蛋白质，由大约70bt大小的可形成发夹结构的前体加工而来，能够识别特定目标的RNA，使之降解或者与其结合。
从而抑制蛋白质的合成。
达到调控基因的目的。
miRNA在表达上具有组织和时间的特异性。
是调节其他功能基因表达的重要调控分子，在生物的各项生理活动，生长发育过程中发挥着重要作用。
miRNA长度为21~25nt的短序列,能够通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。
miRNA组织特异性和时序性，决定组织和细胞的功能特异性，表明miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用。
miRNA的发现早在1993年Lee等人在研究秀丽新小杆线虫（c.lwiggsae）的发育过程中发现了Lin-4基因，他的转录产物为22nt的RNA，次RNA不编码任何蛋白质。
但能时序调控胚胎后期发育。
在2000年，Reinhart等人同样又在线虫（c.elegans）中发现了第二个异时性开关基因Let-7,它也能时序调控线虫的发育进程，它能促进幼虫向成虫的转变，它的转录产物是21nt的RNA分子，在线虫L3（ThirdStageLarvae）早期表达量少，而在L4早期和成虫期表达量却很高，近几年来，随着生物信息学的发展，分子克隆技术的改进和模式物种cDNA文库的建立，美国和德国等科研人员又相继在线虫，果蝇，hela细胞，斑马鱼，拟南芥和水稻等真核模式生物和细胞中找到了上百个相类似的小分子RNA，到目前为止据报道的miRNA已经超过了250个。
MicroRNA+调控成骨细胞增殖、凋亡的研究进展
・综述・基金项目：国家临床重点专科建设项目资助；重庆市卫生局科研基金（２０１２－２－０４１）*通讯作者：冯正平，Ｅｍａｉｌ：ｆｅｎｇｚｈｅｎｇｐｉｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍＭｉｃｒｏＲＮＡ调控成骨细胞增殖、凋亡的研究进展李济伶 冯正平*审校重庆医科大学附属第一医院内分泌科，重庆 ４０００１６中图分类号：Ｒ６８１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－７１０８（２０１５）０４－０４９９－０５摘要：微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ）是一类非编码小分子ＲＮＡ，在基因表达调控中起重要作用，它通过与靶ｍＲＮＡ的特异性结合，导致靶ｍＲＮＡ降解或者抑制其翻译，对基因进行转录后调控，从而控制细胞的增殖、分化、凋亡等，参与疾病的发生发展。
成骨细胞是骨形成过程中的重要细胞，其数量或功能的改变明显影响骨代谢。
近年来，ｍｉｃｒｏＲＮＡ与骨代谢的关系备受关注，诸多研究表明ｍｉｃｒｏＲＮＡ在成骨细胞的分化中发挥重要调控作用，但其调节成骨细胞增殖和凋亡的研究相对较少。
本文就ｍｉｃｒｏＲＮＡ调控成骨细胞增殖、凋亡的研究进展进行综述。
关键词：ｍｉｃｒｏＲＮＡ；成骨细胞；增殖；凋亡ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓＬＩＪｉｌｉｎｇ，ＦＥＮＧＺｈｅｎｇｐｉｎｇＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＦＥＮＧＺｈｅｎｇｐｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｆｅｎｇｚｈｅｎｇｐｉｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍＡｂｓｔｒａｃｔ：ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）ｉｓａｃｌａｓｓｏｆｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇｓｍａｌｌＲＮＡｔｈａｔｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ｍｉＲＮＡｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎｔｈｅｇｅｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎａｔｔｈｅｐｏｓｔ－ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｌｅｖｅｌｂｙｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔａｒｇｅｔｔｈｅｍＲＮＡ，ｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔａｒｇｅｔｍＲＮＡｏｒｉｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｉｔｓｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅｒｅｂｙｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇｔｈｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ａｎｄｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔｌｙｉｎｖｏｌｖｅｓｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｔｈｅｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｓａｋｅｙｍｅｍｂｅｒｉｎｂｏｎｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｂｏｎｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｎｕｍｂｅｒｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｍｉＲＮＡａｎｄｂｏｎｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｈａｓｂｅｅｎｃｏｎｃｅｒｎｅｄｍｏｓｔｌｙ．ＭａｎｙｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｍｉＲＮＡｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｍｉＲＮＡｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｉｔｔｌｅ．ＴｈｉｓｐａｐｅｒｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｍｉＲＮＡｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍｉｃｒｏＲＮＡ；Ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ；Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ 微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）是一类进化上高度保守，长约２２个核苷酸的非编码单链小分子ＲＮＡ，通过与靶ｍＲＮＡ的特异性结合导致其降解或抑制其翻译，对基因进行转录后的调控［１－３］。
Dicer调节生殖功能的研究进展_符梅
遗传Hereditas (Beijing) 2016年7月, 38(7): 612―622综述Dicer调节生殖功能的研究进展符梅1，徐克惠2，许文明21. 成都中医药大学，成都6111372. 四川大学华西第二医院，四川大学－香港中文大学生殖医学联合实验室，教育部出生缺陷与相关妇儿疾病重点实验室，成都 610041；摘要:Dicer是微小非编码RNA生成的关键内切酶，介导微小RNA(micro RNA，miRNA)和小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)的产生，通过RNA干扰(RNA interference，RNAi)途径实现转录或转录后水平基因调控，在调节细胞增殖、分化、凋亡等方面起重要作用。
近年来Dicer基因在生殖领域的研究越来越受关注，最近的研究表明Dicer与男性生精细胞发育、精子形成及成熟、精子活力和形态生成、卵泡发育、排卵及黄体形成、性激素合成、输卵管功能、子宫内膜容受性等方面都有密切关系。
繁衍后代需要精子和卵子的共同参与，Dicer可能通过影响精子和卵子的数量或者质量进而导致胚胎发育异常，因此理解Dicer在雄性与雌性生殖的重要调节作用对于理解生殖调节异常相关的疾病如无精子症、复发性流产等的发病机制具有重要的作用。
本文对Dicer在雄性生殖道与雌性生殖中的关键作用进行了综述，旨在进一步从分子层面深入理解Dicer与生殖相关疾病的关系。
关键词: miRNA；Dicer；精子生成；卵母细胞；胚胎发育；基因多态性Research advances of Dicer in regulating reproductive functionMei Fu2, Kehui Xu1, Wenming Xu11. Joint Laboratory for Reproductive Medicine, SCU-CUHK; Key Laboratory of Obstetric & Gynecologic and Pediatric Diseasesand Birth Defects, Ministry of Education, West China Second University Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, China;2. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, ChinaAbstract:Dicer, an RNAse III endonuclease, is critical for the biogenesis of small noncoding RNAs (microRNAs), in-cluding the biogenesis of microRNAs and small interfering RNAs, which transcriptionally and post-transcription ally regu-late mRNA expression through binding to target mRNA and leading to subsequent mRNA degradation. Recent studies showthat Dicer plays important roles in cell proliferation, differentiation and apoptosis. It has been attracted more and more at-tention in the reproductive field. In the male reproduction field, mouse model shows that Dicer is critical for the develop-收稿日期: 2016-01-24; 修回日期: 2016-02-23基金项目:国家重点基础研究计划(973计划) (编号：2012CB944903)和新世纪人才计划项目(编号：NCET-12-0382)资助[Supported by the National Basic Research Program of China (No. 2012CB944903) and the Program for New Century Excellent Talents in University of Ministry of Education(No. NCET-12-0382)]作者简介: 符梅，硕士研究生，专业方向：妇产科学。
microRNAs_心血管疾病重要的调控因子
ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ：心血管疾病重要的调控因子朱 霓１，秦永文１，荆 清２＊（１上海长海医院心内科， 上海２００４３３； ２中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所，上海２０００２５）摘 要：微ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）是一类内源性１９－２５个核苷酸大小的非编码ＲＮＡ分子，在进化中具有高度保守性，并且能够通过碱基匹配原则识别靶基因３＇非翻译区的靶位点，从而抑制编码蛋白靶基因的翻译或（和）降解靶基因。
目前的研究表明，ｍｉＲＮＡ在生物体发育、心血管疾病以及肿瘤发生等过程中起重要作用。
本文对ｍｉＲＮＡ在心血管系统生理病理中的作用做一综述。
关键词：ｍｉｃｒｏＲＮＡ；血管生成；心肌肥厚；心力衰竭；心律失常中图分类号：Ｑ５２２；Ｒ５４１ 文献标识码：ＡmicroRNAs: important regulators in cardiovascular diseasesZHU Ni 1, QIN Yong-wen 1, JING Qing 2*(1 Department of Cardiology, Shanghai Changhai Hospital, Shanghai 200433, China; 2 Institute of Health Sciences,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200025, China)Ａｂｓｔｒａｃｔ： ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ ａｒｅ ａ ｃｌａｓｓ ｏｆ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ １９－２５ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇ ＲＮＡｓ． Ｔｈｅｙ ａｒｅ ｈｉｇｈｌｙ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｙ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｒ／ａｎｄ ｍＲＮＡ ｃｌｅａｖａｇｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｓｅ－ｑｕｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ３＇－ＵＴＲｓ ｏｆ ｔａｒｇｅｔ ｍＲＮＡｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｄｉｎｇ ｇｅｎｅｓ． Ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｍｉＲＮＡｓ ｐｌａｙ ｐｉｖｏｔａｌｒｏｌｅｓ ｉｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ， ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ， ｅｔ ａｌ． Ｔｈｉｓ ｒｅｖｉｅｗ ｆｏｃｕｓ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｃｈａ－ｎｉｓｍ ｏｆ ｍｉＲＮＡｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｈｙｓｉｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｓｙｓｔｅｍ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｍｉｃｒｏＲＮＡ； ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ； ｃａｒｄｉａｃ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ； ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ； ａｒｒｈｙｔｈｍｉａ文章编号 ：１００４－０３７４（２００８）０２－０２１８－０４收稿日期：２００７－０９－０７基金项目：“９７３”项目２００５ＣＢ７２４６０２２００７ＣＢ９４７００２）；国家自然科学基金面上项目（３０５７０３９７， ３０６７０４３７，３０７７０４５７）； 浦江人才计划（０５ＰＪ１４１０５）＊通讯作者：Ｅ－ｍａｉｌ： ｑｊｉｎｇ＠ｓｉｂｓ．ａｃ．ｃｎ随着人类基因组计划的完成，生命科学进入了后基因组时代。
鸡繁殖性状相关基因功能分析及卵巢转录组和miRNAs鉴定
鸡繁殖性状相关基因功能分析及卵巢转录组和miRNAs鉴定鸡繁殖性状相关基因功能分析及卵巢转录组和miRNAs鉴定鸡是世界上最重要的农业家禽之一，在人类的生产和生活中扮演着重要的角色。
繁殖性状是鸡的重要经济性状，因此研究鸡繁殖性状相关的基因功能具有重要的理论和实际意义。
近年来，随着高通量测序技术的快速发展，研究人员能够更深入地了解鸡繁殖性状的基因调控网络。
在这项研究中，我们采用了转录组学和miRNA组学的方法，对鸡卵巢进行了全面的分析和鉴定，以揭示与繁殖性状相关的基因和非编码RNA的功能。
首先，我们对鸡卵巢组织进行了高通量转录组测序。
通过比对序列和从已有数据库中识别的基因注释，我们鉴定了大量与鸡卵巢发育和功能相关的基因。
进一步的差异表达分析显示，这些基因在不同生理阶段和性状表现中存在差异。
我们发现，一些转录因子和信号传导分子在鸡卵巢发育早期和成熟阶段表达异常，这可能对繁殖性状的产生有重要影响。
此外，我们还进行了miRNA的测序和分析。
miRNA是具有调节基因表达功能的非编码RNA分子。
我们发现，在鸡卵巢中鉴定到大量miRNAs，并发现其中一些miRNAs与卵巢发育和功能密切相关。
进一步的靶点预测分析显示，这些miRNAs可能通过靶向调控特定基因的表达来影响鸡的繁殖性状。
为了进一步揭示相关基因的功能和调控网络，我们对关键基因进行了功能分析。
通过基因功能注释和拟南芥（Arabidopsis thaliana）的基因互作网络分析，我们发现一些基因与生殖相关的关键信号通路及调控因子有密切关系。
综上所述，本研究通过转录组和miRNA组学的方法，鉴定了与鸡繁殖性状相关的基因和非编码RNA，揭示了其中一部分的功能调控网络。
这些研究结果为进一步了解鸡繁殖性状的基因调控网络提供了重要的参考，并为选择和改良鸡的繁殖性状提供了基因标记和候选基因。
然而，还有许多需要进一步阐明的问题，例如鸡繁殖性状的调控机制和基因间的相互作用等，这将需要更多的研究来揭示。
DICER1 综合征相关肿瘤的研究进展
DICER1 综合征相关肿瘤的研究进展摘要DICER1综合征于1996年首次报道，是1种罕见的基因遗传性疾病，由于DICER1基因突变导致机体易患各种良恶性肿瘤，主要为多发结节性甲状腺肿、胸膜肺母细胞瘤、囊性肾瘤、卵巢Sertoli‐Leydig细胞瘤、睫状体髓质上皮瘤、子宫颈胚胎型横纹肌肉瘤、分化型甲状腺癌等，其发病机制是由于编码核糖核酸内切酶的DICER1基因发生突变，从而导致微小RNA的合成与表达障碍，诱发肿瘤。
目前，国内对该疾病鲜有报道，国外对该疾病也尚未形成完整的诊疗标准，临床上极易造成误诊和漏诊。
本文对DICER1综合征的遗传基础、相关肿瘤的临床表现、诊断、治疗、监测和管理进行文献综述。
DICER1综合征，也称为胸膜肺母细胞瘤家族性肿瘤易感综合征，是1种罕见的由DICER1基因突变导致机体易患各种良恶性肿瘤的常染色体显性遗传性疾病。
该病于1996年首次在临床发现并得以命名，并于2009年在家系分析中明确该疾病与DICER1 基因遗传突变有关［1］。
目前，DICER1综合征在全球的发病率尚不明确。
而DICER1综合征的临床表现呈多样化，原因与患者可出现1种或多种相关肿瘤，且同一家系患者所出现的肿瘤也各不相同有关［2］。
目前，国内鲜有对DICER1综合征的报道，由于国内医师对该疾病的认识不足，很可能导致这部分患者在临床上被忽视。
本文从DICER1综合征的遗传基础、相关肿瘤的临床表现出发，对其诊断、治疗、监测和管理进行文献综述。
一、遗传基础DICER1综合征是1种常染色体显性遗传病，1个基因拷贝突变就足以增加肿瘤的发生风险。
Hill等［1］于2009年报道了DICER1综合征是由DICER1基因突变所致。
这也是1种与微小RNA（miRNA）成熟相关的基因突变导致人类肿瘤的疾病。
DICER1基因位于14号染色体q32.13，编码核糖核酸酶Ⅲ（RNA 酶Ⅲ）家族中的核糖核酸内切酶DICER 蛋白，DICER蛋白直接参与调控RNA 干扰（RNAi）途径。
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物有ＡＡ、ＡＧ、ＧＧ ３种基因型，其中ＡＡ基因型产物 为２８１ｂｐ一条带，ＡＧ基因型产物为２８１
１２０
ｂｐ三条带，ＧＧ基因型产物为１６１ ｂｐ和１２０ ｂｐ两
条带（图１）。ＤＲＯＳＨＡ ｒｓｌ０７１９位点酶切产物也分为 ＣＣ、ＴＣ及ＴＴ ３种基因型，ＣＣ基因型酶切为１６８ｂｐ
一条带，ＴＣ基因型酶切为１６８
ｒｓ３７４２３３０和ＤＲＯＳＨＡ基因ｒｓｌ０７１９多态位点的基因型和等位基因频率。结果
ｒｓ３７４２３３０位点Ａ等位基因频率显著高于对照组（７２．０％ＶＳ．６４．４％），差异有统计学意义（Ｐ一０．００４），病 例组ＤＩＣＥＲ基因ｒｓ３７４２３３０位点ＡＡ基因型频率高于对照组（５３．０％ＶＳ．４１．８％，９５％ＣＪ：１．０７１～３．１２４）， 差异有统计学意义（Ｐ＝０．０２７），而ＤＲＯＳＨＡ基因ｒｓｌ０７１９位点等位基因频率及基因型频率在两组间的差
３讨论 近年来，ｍｉＲＮＡ成为生殖医学领域研究的热点，
ｍｉＲＮＡ仅占人类基因组的ｌ％～３孵５｜，但可调节人
类６０％的基因表达。男性生殖细胞表达大量的 ｍｉＲＮＡ，包括ＤＩＣＥＲ依赖的ｍｉＲＮＡ和ｓｉＲＮＡ。大
万方数据
中华医学遗传学杂志２０１ ６年６月第３３卷第３期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ．Ｊｕｎｅ
ｒｓｌ０７１９的引物设计参照文献［１］，引物序列见表１。
１．２．２
基因分型ＰＣＲ总反应体系２０“Ｌ包括２ ｍｍｏｌ／Ｉ。），模板ＤＮＡ
Ｘ
０．０５）。
ＴＳｉＩＮＧＫＥＴＭ ＭＡＳＴＥＲ ＭＩＸ １肛Ｌ（１０
１０“Ｌ，正反向混合引物
１＂Ｌ（１０
相对风险分析结果显示病例组Ｄ工ＣＥＲ基因 ｒｓ３７４２３３０位点ＡＡ基因型的频率高于对照组（５３．０％
ＤＩＣＥＲ ａｎｄ
Ｔｏ
ａｓｓｅｓｓ
ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ｍｉＲＮＡ ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ
Ｆｏｒ ３３０ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ
ＤＲＯＳＨＡ ｗｉｔｈ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｐｒｉｍａｒｙ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ
０．０５）。
延伸２０ Ｓ，循环３５次；７２℃延伸１０ ｒａｉｎ，４℃保持。 ＰＣＲ完成后产物在２％琼脂糖凝胶上进行电泳鉴定， 然后Ｄ，ＣＥＲ和ＤＲＯＳＨＡ扩增产物分别用Ｂａｎ工、 ＮＡⅢ酶切，酶切体系（１０／ａＬ）：内切酶（缓冲液稀释后） ４＂Ｌ，ＰＣＲ产物４扯Ｌ，无菌水２肛Ｉ。。３７℃孵育２０ ｈ后 于２％琼脂糖凝胶上进行电泳鉴定基因型。 １．２。３序列分析ＰＣＲ产物序列测定随机取样本总 数５％的未经纯化的ＰＣＲ产物各１０“Ｌ，正向或者反 向引物１０扯Ｌ进行序列测定分析。 １．２．４统计学分析应用拟合优度７２检验，计算基 因型分布是否符合Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。应用基因
目前关于ｍｉＲＮＡ成熟的关键基因ＤＲＯＳＨＡ和 ＤＩＣＥＲｌ的多态位点，如ＤＩＣＥＲ基因ｒｓ３７４２３３０和
ＤＲＯＳＨＡ基因ｒｓｌ０７１９与肿瘤及复发流产等疾病的 相关性已有报道‘１。３３，但在人类精子发生的相关性研究
万方数据
中华医学遗传学杂志２０１６年６月第３３卷第３期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ，Ｊｕｎｅ ２０１６，Ｖ０１．３３，Ｎｏ．３
２．３
ＰＣＲ扩增抽取空腹肘静脉血２ ｍＬ，分装于
ＥＰ管中，一２０℃冷冻保存备用。用全血基因组ＤＮＡ 提取试剂盒抽提基因组ＤＮＡ。检测ＤＮＡ浓度，标化
至１０ ｎｇ／ｇＬ。ＤＩＣＥＲ ｒｓ３７４２３３０和ＤＲＯＳＨＡ
病例组与对照组ＤＩＣＥＲ和ＤＲｏＳＨＡ基因型
频率比较应用拟和优度Ｙ２检验，分别对病例组和对 照组检验ＤＩＣＥＲ ｒｓ３７４２３３０和ＤＲＯＳＨＡ ｒｓｌ０７１９两 个位点基因型分布均符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡（Ｐ＞
ＯＲ值 ９５％Ｃ』 Ｐ值
Ｏ
６
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吼盯吼 鹕｝∞ ２
表３”病例组与对照组ｒｓ３７４２３３０及ｒｓｌ０７１９位点等位基冈频
Ｍ）；Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｌａｎｎｅｄ Ｐａｒｅｎｔｈｏｏｄ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ ６５００２１，Ｃｈｉｎａ（Ｙｅ ＪＪ） Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｘｕ Ｗｅｎｍｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：Ｘｕｗｅｎｍｉｎ９１９７３＠１６３．ｃｏｒｎ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｒｓ３７４２３３０ ｏｆ
ｔｈｅ ＤＩＣＥＲ ｇｅｎｅ，ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙ ｔｈｅ ＡＡ ｇｅｎｏｔｙｐｅ，ｍａｙ ｂｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ．
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ＤＩＣＥＲ ｇｅｎｅ；ＤＲＯＳＨＡ
Ｆｕｎｄ
ｇｅｎｅ；
Ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；
通信作者：许文明，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｗｅｎｍｉｎｇｌ９７３＠１６３．ｃｏｒｎ ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００３—９４０６．２０１６．０３．０２０
【摘要】 法 目的
探讨ｍｉＲＮＡ成熟关键基因ＤｆＣＥＲ和Ｄ尺ＯＳＨＡ多态性与男性无精症的相关性。方
应用ＰＣＲ一限制性片段长度多态性技术，检测３３０例原发性无精症和２８２名正常生育男性ＤＩＣＥＲ基因 病例组中ＤＩＣＥＲ基因
ａｎｄ
６１００４１，Ｃｈｉｎａ（ＦｕＭ，ＸｕＫＨ，Ｘｕ ＷＭ）；Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ
Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｏｆ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ
６１１１３７，Ｃｈｉｎａ（Ｆｕ
表１
ＤＩＣＥＲ和ＤＲＯＳＨＡ基因引物序列（引物序列应标明引物的方向）
方面国内外的报道较少，我们应用ＰＣＲ一限制性片段长 度多态性技术检测３３０例原发性无精症和２８２名正常 生育男性ＤＩＣＥＲ基因ｒｓ３７４２３３０和ＤＲＯＳＨＡ基因 ｒｓｌ０７１９多态位点的基因型和等位基因频率，探讨
ＤＩＣＥＲ ｒｓ３７４２３３０和ＤＲＯＳＨＡ
ｂｐ、１４０ ｂｐ、２８ ｂｐ，因２８ ｂｐ，
ｂｐ太小，因此显示两条带，ＴＴ则为１４０ ｂｐ和２８
因２８ ｂｐ太小，仅显示１４０ ｂｐ一条带（图２）。
２．２基因测序结果ＤＩＣＥＲ基因扩增片段长度（Ａ／ Ｇ）为２８１ｂｐ，酶切产物基因型为ＡＡ、ＡＧ、ＧＧ， ＤＲＯＳＨＡ基因片段长度（Ｃ／Ｔ）为１６８ｂｐ，酶切产物基 因型为ＣＣ、ＴＣ、ＴＴ，测序结果见图３、４。
中华医学遗传学杂志２０１６年６月第３３卷第３期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ，Ｊｕｎｅ ２０１６，Ｖ０１．３３，Ｎｏ．３
・３６５・
・临床遗传学论著・
ｍｉＲＮＡ成熟关键基因ＤＲＯＳＨＡ和ＤＩＣＥＲ的 多态性与无精症的相关性
符梅徐克惠
叶峻杰 许文明
６１００４１成都四川大学华西第二医院四川大学一香港中文大学生殖医学联合实验室、教育部 出生缺陷与相关妇儿疾病重．占、实验室（符梅、许文明、徐克惠）；６１１１３７成都中医药大学第二 临床医学院妇产科（符梅）；６５００２１昆明，云南省计划生育研究所（叶峻杰）
Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ｍｉＲＮＡ ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ＤＩＣＥＲ ａｎｄ ＤＲＯＳＨＡ ｗｉｔｈ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ
Ｆｕ
Ｍｅｉ，ＸｕＫｅｈｕｉ，ｎ Ｊｕｎｊｉｅ，Ｘｕ Ｗｅｒｉｍｉｎｇ
ＳＣＵ－ＨＫＣＵ Ｊｏｉｎｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ
ａｎｄ ２８２
ｆｅｒｔｉｌｅ ｍａｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌｓ，ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ（ＳＮＰｓ）ｏｆ ＤＩＣＥＲ ｒｓ３７４２３３０ ａｎｄ ＤＲＯＳＨＡ ｒｓｌ０７１９
ｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ
ａ
ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ Ａ ａｌｌｅｌｅ
ｆｒａｇｍｅｎｔ
ｒｓｌ０７１９基因单核苷
酸位点多态性与无精子症的相关性。 １对象与方法 １．１对象 （１）病例组：２００９年６月至２０１４年１２月
基因分型结果
ＤＪＣ职ｒｓ３７４２３３０位点酶切产
ｂｐ、１６１ ｂｐ和
在我院男科和生殖中心就诊的成都地区汉族无精症患 者３３０例，夫妻均为未采取任何避孕措施，且１年以上 未孕，女方检测正常。男性染色体核型均为４６，ＸＹ。 按照世界卫生组织推荐的方法，精液经两次以上常规 分析、每次间隔７～２１天、连续两次均未发现精子者诊 断为无精子症；排除睾丸炎、附睾炎、精索静脉曲张、既 往腮腺炎、其他梗阻因素等引起的无精子症。（２）对照 组：同期精液分析参数正常者２８２人纳入对照组。本 研究获得了四川大学华西第二医院医学伦理委员会的 批准，受试者均签署知情同意书。 １．２方法
异均无统计学意义（Ｐ＞ｏ．０５）。结论ＤＩＣＥＲ基因ｒｓ３７４２３３０位点多态性与无精症有关联，ｒｓ３７４２３３０ ＡＡ
基因型可能与无精症的发生存在关联。
【关键词】ＤＩＣＥＲ基因； ＤＲＯＳＨＡ基因； 单核苷酸多态性； 无精症
基金项目：国家重点基础研究计划（２０１２ｃＢ９４４９０３）；新世纪人才计划（ＮＣＥＴ一１２—０３８２）
Ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ
Ｎｅｗ
ｐｒｏｇｒａｍ：Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｂａｓｉｃ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（２０１２ＣＢ９４４９０３）；Ｆｕｎｄ ｆｏｒ
Ｃｅｎｔｕｒｙ
Ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ Ｔａｌｅｎｔｓ ｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ（ＮＣＥＴ一１２－０３８２）
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ