正交法优化槐米中芦丁的超声提取工艺_付起凤
根据单因素试验及超声清洗器的功能范围 ， 本实 验选择固定料液比 （ 1 ∶ 20 ） 、 超声频率 （ 40kHz ） 及提取 次数（ 2 次） ， 考察影响槐米中芦丁的超声提取工艺的 70℃ 、 60℃ ， 主要影响因素范围， 即提取温度为 80℃ 、 20min、 30min， 提取时间为 10min、 提取功率为 200W、 4 ［2 ］ 300W、 400W， 据 此 选 用 L9 （ 3 ） 正 交 试 验 设 计 ， 见 表 4。 2． 5． 2 2． 5． 2． 1 正交试验与结果分析 正交试验
浓度 基金项目：黑龙江中医药大学教育教学基金 （ 2010 ） 作者简介：付起凤（ 1965 － ） ， 女， 高级实验师， 硕士， 主要从事化学实验教学 工作。 收稿日期：2012 － 05 － 14 修回日期：2012 － 06 － 02 （ μg / ml） 5
向 500ml 的烧杯中加 400ml 蒸馏水， 在电炉子上 加热至沸腾， 缓缓加入 20． 0g 槐米粗粉并不断搅拌， 继 续煮沸 2min， 然后将烧杯转移到超声清洗器中进行超 声提取后， 静置， 取上层絮状物抽滤， 并干燥后得粗品 芦丁， 将该产物于 100ml 圆底烧瓶中并加入 15 ～ 20ml 甲醇进行回流冷凝 40min， 趁热过滤得滤液， 将其放冷 至结晶完全后过滤得精品芦丁， 将其于 105℃ 干燥至 恒重得干燥的精品芦丁。 色谱条件 固定 相： Hypersil ODS2 C18 色 谱 柱 （ 4． 6mm × 150mm， 5 μm） ； 保护柱 （ 大连物化所 依特利公司 ） ； 流 2． 2 应用前经 动相： 甲醇 － 1% 冰醋酸 （ 40 ∶ 60V / V ） 溶液， 0. 45 μm 微 孔 滤 膜 过 滤， 并 超 声 脱 气； 流 速： 1． 0ml / min； 检测波长为 257nm； 进样量为 10ml； 柱温为 30℃ 。 该色谱条件的对照品及样品的色谱图见图 1 ， 图 2。 2． 3 标准曲线的制备 取在 105℃ 干燥至恒重的芦丁对照品 50． 0mg 于 50ml 容量瓶中， 用色谱甲醇溶解并稀释至刻度， 摇匀， 配制成 1mg / ml 的溶液， 作为储备液。 分别取适量储 10 ， 25 ， 100 ， 150 ， 300 μg / 备液加入色谱甲醇配制成 5 ， ml 的芦丁色谱甲醇溶液。 按前述色谱条件取 10 μl 进 样， 测定峰面积。以浓度 X 为横坐标， 以峰面积 Y 为 纵坐标， 绘制标准曲线， 见表 1 。结果如图 3 所示。
图3 标准曲线图
面积（ S ） 和保留时间的相对标 准 偏 差 分 别 为 0. 28% （ ＜ 1． 5% ） 、 0． 77% （ ＜ 1． 5% ） 。仪器精密度良好。 2． 4． 2 重复性实验 分别取 3 份槐米药材粗粉约 20． 0g， 精密称定， 按 样品 4 的条件提取， 再依供试品溶液的制备方法操作 ， 得 3 份供试品溶液， 随行芦丁对照品 （ 浓度为 100 μg / ml） 溶液作对照， 在波长 257nm 处测峰面积值， 计算 RSD 为 2． 53% 。重复性较好。
表3
编号 1 2 3 称样量（ g） 20． 051 0 20． 024 8 20． 041 4 样品峰面积 2 012 517 1 937 496 1 987 628
重复性考察结果
对照品峰面积 1 726 466 1 726 466 1 726 466 含量（ % ） 6． 47 6． 32 6． 25 平均（ % ） 6． 35 RSD（ % ） 2． 53
效液相色谱法对槐米提取物中芦丁进行含量测定 见表 5 。
表4
因素 水平 1 2 3
［3 ］
。
L9 （ 3 4 ） 正交试验因素水平表
B 提取时间（ min） 10 20 30 C 提取功率（ W） 200 300 400
A 提取温度（ ℃ ） 80 70 60
L9 （ 3 4 ） 正交试验表
C 1 2 3 2 3 1 3 1 2 12． 70 15． 22 15． 75 4． 233 5． 073 5． 250 1． 017 D（ 误差） 1 2 3 3 1 2 2 3 1 14． 56 13． 98 15． 13 4． 853 4． 660 5． 043 0． 383 芦丁含量（ % ） 3． 15 3． 97 4． 42 6． 50 6． 66 5． 34 4． 67 4． 21 4． 75 ∑y = 43． 67 N =9 CT = 211． 89
付起龙江 摘 哈尔滨 150040 ）
要：目的： 优选槐米中芦丁的超声提取工艺 。方法： 以槐米中提取出芦丁百分含量为评价指标 ， 以芦 4 丁为对照品， 以高效液相色谱法测定超声法提取槐米中芦丁的含量。 采用 L9 （ 3 ） 正交试验， 对影响超 提取时间、 提取功率 ） 进行优选。 结果： 药材粗粉在提 声法提取槐米中芦丁效果的三个因素 （ 提取温度、 取温度 70℃ 、 提取时间 20min、 超声功率 400W 时提取效果最好。 结论： 本实验为优化槐米中芦丁的超 声提取工艺提供了参考依据。 关键词：槐米； 芦丁； 超声提取； 高效液相色谱法； 正交试验设计 中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1002 － 2406 （ 2012 ） 06 － 0049 － 03 槐米 （ Flos Sophorae ） 为 豆 科 植 物 槐 （ Sophora japonica L） 的干燥花及花蕾， 该药性微寒、 味苦， 具有凉 血止血， 清肝泻火的功效， 用于便血、 痔血、 血痢、 崩漏、 ［1 ］ 吐血、 衄血、 肝热目赤、 头痛眩晕 。 药理研究表明， 槐米中所含主要成分为芦丁 （ Rutin， 维生素 P ） ， 又称 ， （ 1 ∶ 8 000 ） ， 芸香 苷 芦 丁 难 溶 于 冷 水 略溶于沸水 （ 1∶ 200 ） 。本实验是根据芦丁在冷水和热水中的溶解 度差异较大的特性， 以槐米为原料， 采用超声法进行提 用空气冷凝回流法进行精制。 用高效液相色谱法 取， 测定芦丁的含量。 通过正交设计法对超声提取时间、 提取温度、 提取频率进行三因素三水平试验 ， 以此来确 定超声法提取槐米中芦丁的优良工艺 。 1 仪器与试药 LC － 2010AHT 高效液相色谱分析仪（ 日本岛津 ） ； KQ － 500DE 型数控超声波清洗器（ 昆山市超声仪器有 限公司） ； SHB － IIIB 循环水式多用真空泵 （ 郑州长城 科工贸有限公司） ； DHG － 9140A 型电热恒温鼓风干燥 箱（ 上海一恒科技有限公司 ） ； AB204 － N 型万分之一 电子天 平 （ Metter Toledo CORPORATION ） ； 槐 米 药 材 （ 购于哈尔滨宝丰药店 ） ； 芦丁对照品 （ 购于中国药品 生物制品有限公司 ） ； 甲 醇 为 色 谱 纯； 冰 醋 酸 为 分 析 纯； 实验用水为二次蒸馏水。 2 方法与结果 2． 1 槐米中芦丁的提取方法
对照品色谱图
图2
样品色谱图
表2
编号 峰面积 保留时间（ min） 1 1 726 466 5． 758 2 1 720 845 5． 825 3 1 731 213 5． 712
精密度实验结果
4 1 719 248 5． 796 5 1 725 314 5． 802 均值 1 724 617． 2 5． 778 6 RSD% 0． 28 0． 77
表6
因素 A B C D（ 误差） 误差 离均差平方和 8． 503 0． 046 1． 770 0． 220 0． 22
正交试验方差分析
自由度 2 2 2 2 2 F值 38． 650 0． 209 8． 045 1． 000 P ＜ 0． 05 显著性 *
取次数（ 2 次 ） 的条件下， 提取温度为 70℃ ， 提取时间 为 20min， 提取功率为 400W 时， 提取效果最佳。 3 讨论 本实验以槐米为研究对象， 考察了以水为溶剂， 采 ， 用超声提取法来提取槐米中芦丁成分 并以槐米中提 以芦丁为对照品， 采用 取出芦丁百分含量为评价指标， 高效液相色谱法测定提取芦丁的含量； 并利用正交试 验的方法来优选出提取槐米中芦丁的最佳工艺 。经查 确定出槐米中芦丁提取工艺的主要影响因素 阅文献， 可以包括为提取温度、 提取时间、 提取功率及提取频率 根据实际情况选用了前三个因素 ， 并采用 等多个因素， L9 （ 3 4 ） 正交试验表， 进行了多次试验， 最后综合结果分 析， 得到超声法提取槐米中芦丁的最佳工艺 ， 即在固定 料液比（ 1∶ 20 ） 、 超声频率 （ 40kHz ） 及提取次数 （ 2 次 ） 的条件下， 提取温度为 70℃ ， 提取时间为 20min， 提取 功率为 400 W 时， 提取效果最佳。 为优化槐米中芦丁 的超声法水提取工艺提供了参考依据 。 用超声法提取槐米中的芦丁时， 适宜的超声提取
表5
实验号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Kj1 Kj2 Kj3 K1 K2 K3 Rj A 1 1 1 2 2 2 3 3 3 11． 54 18． 50 13． 63 3． 847 6． 167 4． 543 2． 320 B 1 2 3 1 2 3 1 2 3 14． 32 14． 84 14． 51 4． 773 4． 947 4． 837 0． 174 因素
中 医 药 信 息 Information on Traditional Chinese Medicine
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2． 5 2． 5． 1 正交试验考察提取工艺 正交试验设计 取槐米药材粗粉 20． 0g， 精密称定， 按照上述槐米 再依供试品溶液的制备 中芦丁的提取方法进行提取，
对照品浓度（ μg / ml） 100 100 100
供试品溶液的配制： 取样品 5． 0mg， 精密称定， 加 入色谱甲醇溶解并稀释至 50ml ， 制成每 1ml 含 100 μg 芦丁的溶 液， 用 微 孔 滤 膜 过 滤， 直 接 进 样， 用外标法 测定。 2． 4． 1 仪器精密度实验 取芦丁对照品溶液（ 浓度为 100 μg / ml） ， 选用同一 重复进样 5 次， 测定 色谱条件及同一进样量 （ 10 μl ） ， 供试品的峰面积 （ S ） ， 计算其精密度的 RSD% 。 其峰
槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清（⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006）1.摘要:本实验以槐⽶为原料，采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
该⽅法提取率⾼达26.3%，对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析，并与标准品做对⽐，结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。
2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。
芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。
有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。
其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。
黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。
黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有：①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。
芦丁是其主要成分，含量为16%-25%。
芦丁属于黄酮类化合物，结构中含有多个酚羟基，呈酸性，苷元为槲⽪素，糖基为芸⾹糖。
芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶，95-97℃脱⽔，熔点314℃，可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮，不溶于⽯油醚和⽔。
芦丁可溶于碱液中，呈黄⾊酸化后⼜析出，故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。
然后利⽤在冷⽔中不溶，在热⽔中微溶的溶解度差精制，可获得纯度⾼的微细针状结晶，最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。
4.实验部分4.1实验药品槐⽶（市售），氧化钙AR（西陇化⼯股份有限公司），盐酸AR（西陇科学有限公司），四硼酸钠AR（⼴东省台⼭市化⼯⼚），甲醇AR（天津市⼤茂化学试剂⼚），三氯甲烷AR（成都市科隆化学品有限公司）,氯仿（分析纯，成都市科龙化⼯试剂⼚），⼄醇（分析纯）4.2实验仪器JJ200电⼦天平（常熟市双杰测试仪器⼚），SHZ-D（III）循环⽔式多⽤真空泵（河南爱博特科技发展有限公司），ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器（河南爱博特科技发展有限公司），薄层⾊谱展开缸，紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司）4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀：称取槐⽶10.0g，在研钵中稍加研碎后，置于500ml烧杯中，加⼊250ml⽔，加热搅拌下添加⽯灰乳，保持PH=8-8.5。
正交设计和响应面法优化荞麦中芦丁提取工艺的比较
70
1∶30
80
0.2316
90
90
1∶30
80
0.0986
60
80
1∶30
100
0.1258
60
80
1∶40
90
0.2207
90
80
1∶40
80
0.1627
90
70
1∶40
90
0.2348
90
90
1∶20
90
0.2428
90
70
1∶30
100
0.1408
60
70
1∶30
90
0.1824
90
80
1∶30
应用 Design–Expert 7.1.3 软件对表 2 中的数据进 行多元回归拟合。得到响应值提取率对编码自变量提 取时间（A）、提取温度（B）、液料比（C）和乙醇体积分 数（D）的二次多项回归方程：
芦 丁 提 取 率 /（mg/g）=0.32+0.031A+0.013B+ 8.075×10–3C +0.018D –0.012AB –2.125×10–3AC + 0.056AD+2.600×10–3BC+0.074BD+0.017CD–0.035A2– 0.040B2–0.046C2–0.091D2
Comparison of the optimal extraction process of rutin from buckwheat by orthogonal and response surface design experiments
HUANG Ju，ZHAI Shu-min （School of Chemistry & Chemical Engineering，Xuzhou Institute of Technology，Xuzhou 221111，Jiangsu，China）
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。 溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中 1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、 冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙 醚、苯和石油醚等。
注意观察现象：未加热时，瓶悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
从槐花米中提取芦丁
实验 从槐花米中提取芦丁 P.198【实验目的】通过从槐花米中提取芦丁的实验，掌握用酸碱调节提取中药活性成分的方法。
【实验原理】槐花米又名槐米，是槐花的花蕾。
性凉、味苦，功能凉血、止血，主治肠风、痔血、便血等症。
槐花米的主要活性成分是芦丁。
芦丁又名芸香苷，不仅存在于槐花米中（含量达10-20％），在荞麦叶等中，也有存在。
结构式如下：OHO OH OHOH O O CH 2从结构式中不难看出，芦丁实际上是由黄酮与糖（葡萄糖和鼠李糖）形成的苷。
由于含有黄酮结构，所以，呈黄色。
黄酮部分连有许多酚-OH ，故易溶于碱液，酸化复析出，这是本实验采用酸-碱调节法来提取芦丁的依据。
纯芦丁为淡黄色针状结晶，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，熔点为188℃（理论值），带三个结晶水的熔点为174-178℃。
芦丁能增强毛细管的韧性，适用于毛细管脆弱的患者。
【实验步骤】称取15g 槐花米，用粉碎机研成粉状。
置于250ml 烧杯中，加入150ml 饱和石灰水[1]，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤[2]。
滤渣再用100ml 饱和石灰水煮沸10分钟，抽滤。
合并两次滤液，用5％盐酸调节至pH3-4[3]。
放置1-2小时，使沉淀完全，抽滤，并用水洗涤2-3次，即得芦丁粗品。
将粗品置于250ml 的烧杯中，加水150ml ，在石棉网上加热至沸，不断搅拌，并慢慢加入约50ml 饱和石灰水，调节溶液pH 值为8-9，待沉淀溶解后，趁热过滤。
滤液置于250ml 的烧杯中，用5％盐酸调节至pH4-5，静置30分钟。
芦丁即以浅黄色结晶析出，抽滤，并用水洗涤1-2次，烘干，称重[4]，测熔点。
【注解】[1] 加入饱和石灰水既可达到用碱液提取芦丁的目的，同时，还可除去槐花米中的多糖粘液质。
[2] 抽滤时，宜先小心倾出上层清液，再慢慢倒出带结晶的溶液，以防结晶过早堵住滤纸孔。
后面的抽滤均需如此。
[3] 注意小心滴加，约需7-8ml稀盐酸。
槐米中芦丁的提取及工艺优化论文
槐米中芦丁的提取及工艺优化论文一、引言1.槐米的来源槐树又称国槐、槐花树等。
是我国特产树种之一。
株高15?25米,胸径2米以上。
枝叶密生,羽状复叶。
圆锥花序顶生,花蝶形,夏季开黄白色花,略具芳香。
荚果肉质,含珠状不开裂,黄绿色。
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾及花。
全国各地区产,以黄土高原和华北平原为多。
夏季花未开放时采收其花蕾,称为“槐米”;花开放时采收,称为“槐花”(见图-1)。
采收后除去花序的枝、梗及杂质,及时干燥,生用、炒用或炒炭用。
其性凉、味苦,功能凉血、止血,主治肠风、痔血、便血等症。
槐米所含芦丁(云香苷),能增加毛细血管的韧性,适用于毛细血管脆弱的患者。
果实称槐实或槐角,俗称“槐连豆”,性能和主治与槐花相似。
我地区槐树种植广泛,特别在城市建设中,多用来作绿化树种,槐树多,槐米产量自然高,全县每年收购量达万公斤以上。
我地区收购的槐米,花蕾饱满,晒干后绿中呈黄,质地十分优良。
上世纪八十年代,曾出口到外地[1]。
1.1化学成分1.1.1槐花与槐米所含成分基本相同,主含三萜皂:赤豆皂甙Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ,大豆皂甙I、Ⅲ,槐花皂甙Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[2]。
1.1.2黄酮类化合物:芦丁(Rutin?),槲皮素Quercetin,芸香甙(Rytub),异鼠李素,异鼠李素-3-芸香糖甙,山奈酚-3-芸香糖甙。
又含白桦脂醇,槐花二醇。
1.1.3脂肪酸类:花油中含月桂酸Dodecanoic acid,十二碳烯酸,肉豆蔻酸,十四碳烯酸十四碳二烯酸,棕榈酸,十六碳烯酸,硬脂酸,十八碳二烯酸,十作碳三烯酸,花生酸等脂肪酸和β-谷甾醇。
另含鞣质[3]。
1.2槐米的药理作用1.2.1槐米的抗菌作用槐米水浸剂能够明显缩短出血和凝血时间,制炭后促进凝血作用更强;其煎液有减少心肌耗氧量,保护心功能的作用。
另对堇色毛癣菌、许兰黄癣菌、奥杜盎小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌、星状奴卡菌等皮肤真菌有不同程度的抑制作用[4]。
优化槐米中芦丁提取工艺的实验研究
ｐ ｅ ｒ ｃ ｅ ｎ ｔ ａ ｇ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｒ ｕ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｓ ｏ ｐ ｈ ｏ ｒ ａ ｊ ａ ｐ ｏ ｉｃ ｎ ａ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｃ ａ ｔ ｏ ｒ ａ ｎ ｄ Ｒ ｕ ｔ ｉ ｎ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ，
ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｗａ ｓ ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ ｔ ｏ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｒ ｕ ｔ ｉ ｎ ｌｔ ｕ ｒａ ｓ ｏ ｉｃ ｎ ａ ｌ ｌ ｙ ｅ ｘ ｒａ ｔ ｃ ｔ ｅ ｄ
ｏＰ ＴＩ ＭＩ ＺＡ ＴＩ ｏＮ ＴＨＥ ＥＸＴＲＡＣＴＩ ｏＮ ＰＲｏＣＥＳ Ｓ ｏＦ ＲＵＴＩ Ｎ Ｉ Ｎ Ｓ ｏＰ ＨｏＲＡ Ｊ ＡＰ ＯＮＩ ＣＡ
ＷＥ Ｉ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ － ｃ ｕ ｎ ， ‘ ＣＨＥ Ｎ Ｙｏ ｎ ｇ
，
ＱＬ ｒ Ｅ Ｚ ｕ － ｌ ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｙ Ｕ Ｙ ａ ｎ ＿ ｈ ｅ ， Ｐ Ａ ＮＧ ｄ ａ ｎ ． ｑ ｉ ｎ ｇ ， Ｚ ＨＡ ＮＧ Ｘｉ ｎ
摘
要 ：目的 优选 槐米中芦丁的提取工艺 。 方法
以槐米 中提取 出芦 丁百分含 量为评价指标，以芦丁为对照 品，
以高效液相色谱法测定超声提取槐米 中芦丁的含量 。采用 （ ３ ４ ） ｊ ￣ 交实验 ，对影 响超声提取槐米 中芦 丁效果 的三
个因素（ 溶剂浓度、料液比、提取时间） 进行优选。结果
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｉｃ ｎ ｅ ｘ ｒ ｔ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｒ ｕ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｓ ｏ ｐ ｈ ｏ ｒ ａ ｊ ａ ｐ ｏ ｎ ｉ ｃ ａ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｔ ｈ ｅ
提高芦丁提取效率的优化设计[1]
济 宁 医 学 院 学 报
J OURNAL OF J INING MEDICAL UNIVERSI TY Vol1 32 No. 4 2009
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提高芦丁提取效率的优化设计
王慧云 孙珊珊 王 雪 石茂建 尹红霞 (济宁医学院药学院 ,山东 日照 276826)
提 要 目的 筛选出对芦丁提取具有较好协同作用的非离子型表面活性剂 ,优化卢丁提取工艺 。方法 考察常见非离子型表面活性剂对卢丁提取效率的影响 ,以筛选出的提取效率较好的非离子型表面活性剂作为协 同剂 ,采用 L 9 ( 34 ) 正交试验 ,对影响槐花米提取效果的诸因素 (药材的粉碎度 、表面活性剂用量 、溶剂用量 、加热 时间) 进行优选 。结果 Tween220 对芦丁的提取具有明显协同作用 。药材粉碎度和表面活性剂用量为显著性 影响因子 ,其他两个因素虽有影响 ,但均为非显著性影响因子 。结论 在本实验条件下芦丁的最佳提取工艺条 件为 :药材用量 10g 、药材为细粉 、Tween220 用量 0. 05g 、溶剂 200ml 、提取时间 30min 。
1 实验部分
1. 1 仪器与药品
仪器 :754 紫外可见分光光度计 (上海精密科
学仪器有限公司) ;BS 224S 型电子分析天平 (北京
塞多利斯仪器系统有限公司) ; 0 万能粉碎机
(天津市泰斯特仪器公司) ,万能电阻炉 (山东省龙
实验一、槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
实验一槐米中芦丁的提取、分离和鉴定一、概述槐米系豆科植物槐树（Sophora japonica L.）的花蕾（槐米）。
具有清热、 凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风热 目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。
近年来被用作治疗高血压的辅助药物。
药理实验证明，槐花米具有调节毛细血管的渗透作用，抗炎作用，解痉、抗 渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。
槐花米中主要含有黄酮苷，皂 苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁 （Rutin ）含量最高，达12〜20%主要化学成分的结构及理化性质：芦丁（ rutin ）: QfoO e • 3"0,浅黄色针状结晶，mp174- 178C （含三分子 水）；188C （无水物）。
难溶于冷水（1: 8000〜10000），可溶于热水（1: 180〜 200），热甲醇（1: 10），冷甲醇（1: 100），热乙醇（1: 60），冷乙醇（1: 650）; 难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin ）: C 5H 0O • 2HO,黄色结晶，mp31〜314C （ 2分子结 晶水），316C （无水物）。
能溶于冷乙醇（1: 290），易溶于沸乙醇（1: 23），可 溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
二、实验部分（一）实验目的1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。
2、 掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。
3、 掌握芦丁与槲皮素的鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使 用方法。
（二）实验原理1、芦丁的提取原理：芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性，故用碱提酸沉法。
K=Glc-(6-l)-GlcR=H2、芦丁的分离原理：芦丁在沸水中溶解，在冷水中析出。
3、芦丁的鉴定原理：芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用Molish 反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析，Rf 值也应不同。
从槐花米中提取芦丁实验报告
从槐花米中提取芦丁实验报告槐花米是一种常见的中药材，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种药理作用。
其中，芦丁是一种重要的有效成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
本实验旨在通过提取槐花米中的芦丁，探究其提取效果及其应用前景。
1. 实验目的本实验的主要目的是通过提取槐花米中的芦丁，评估提取效果，并探究其应用前景。
2. 实验材料与方法2.1 实验材料本实验所需材料包括槐花米、乙醇、去离子水。
2.2 实验方法2.2.1 槐花米样品的制备将槐花米样品晾干，研磨成粉末状备用。
2.2.2 芦丁的提取取一定量的槐花米粉末，加入适量的乙醇，进行浸提。
浸提时间可根据需要进行调整，一般为24小时。
之后，将浸提液过滤，得到提取液。
2.2.3 提取液的浓缩将提取液置于旋转蒸发仪中，进行浓缩处理。
浓缩温度和时间可根据需要进行调整。
2.2.4 芦丁的纯化将浓缩后的提取液溶于适量的去离子水中，进行柱层析。
通过选择合适的固定相和流动相，分离和纯化芦丁。
2.2.5 芦丁的鉴定通过紫外-可见分光光度计对纯化后的芦丁进行鉴定，确定其纯度和含量。
3. 实验结果与讨论经过提取、浓缩和纯化，成功从槐花米中获得了纯度较高的芦丁。
通过紫外-可见分光光度计进行鉴定，确定了芦丁的纯度和含量。
同时，还可以通过质谱等技术手段对提取的芦丁进行进一步的鉴定和分析。
芦丁作为一种天然的活性物质，具有广泛的应用前景。
首先，芦丁具有良好的抗氧化作用，可以有效清除自由基，保护细胞免受氧化损伤。
其次，芦丁还具有抗炎作用，可以抑制炎症反应，减轻炎症症状。
此外，芦丁还具有抗肿瘤、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有积极的影响。
4. 实验结论通过本实验，成功从槐花米中提取了芦丁，并评估了提取效果。
芦丁具有广泛的应用前景，可以应用于抗氧化、抗炎、抗肿瘤等领域。
然而，芦丁的提取工艺和纯化方法还有待进一步优化，以提高提取效率和纯度。
总之，本实验为槐花米中芦丁的提取提供了一种有效的方法，并展示了芦丁的药理作用和应用前景。
槐米中芦丁的提取方法
槐米中芦丁的提取方法
提取槐米中的芦丁可以采用以下方法：
1. 热水浸提法：将槐米粉末加入适量的热水中，浸泡一段时间后，用滤纸或布过滤，收集滤液。
滤液中含有芦丁等水溶性成分。
2. 乙醇浸提法：将槐米粉末加入适量的乙醇中，加热回流浸泡一段时间后，用滤纸或布过滤，收集滤液。
滤液中含有芦丁等乙醇溶性成分。
3. 超声波辅助浸提法：将槐米粉末与适量的溶剂（如水、乙醇）混合后，利用超声波的作用加速浸提过程。
超声波的振动作用可以促使槐米中的芦丁等成分更好地溶解在溶剂中。
4. 色谱法：使用柱色谱或液相色谱等分离方法，将浸提得到的槐米滤液进行进一步分离和纯化，得到纯度较高的芦丁。
这些方法都是一些常用的提取槐米中芦丁的方法，根据需要可以选择适合的方法进行实验操作。