核苷类药物及其合成方法汇总
核酸类药物及其生产工艺
叠 氮 胸 苷 A Z T 合 成 工 艺
2、三氮唑核苷
（Vira301, RibacirinRTC)
商品名称病毒唑，主要应用于小儿呼 吸系统的疾病治疗。显著改善艾滋病 患者的症状，毒副作用小，价格便宜， 比AZT相差50倍。 它对病毒的作用点多，不易使病毒产 生抗药性。
4、Mn2+在限量的情况下培养后期产氨短杆 菌细胞膜容易透过细胞膜，并且嘌呤核苷 酸补救合成所需的酶和中间体核糖－5－磷 酸很容易透过，在细胞外重新合成大量的 肌苷酸； 5、因工业原料和工业水都含较高的Mn2＋， 通过诱变育种的方法选育了对Mn2+不敏感 的变异株，使发酵液Mn2＋ 含量高达 1000g/ml时，肌苷酸的生物合成仍不受影 响。
2、核苷酸的制备 3、核苷的制备
1 发 酵 法 制 备 R N A
2 酶 法 制 备 脱 氧 核 苷 酸
酶 法 制 备 5’ 单 核 苷 酸
双 酶 法 生 产 肌 苷 酸 和 鸟 苷 酸
产氨短杆菌嘌呤核苷 酸生物合成调节机制
3被A阻遏
4受ATP ADP AMP GMP反馈抑制
1被G阻遏 2受GMP反馈抑制
5受GMP ATP的反馈抑制 6受GTP的反馈抑制 注：PRPP——5－磷酸核糖焦磷酸
型 菌 株 发 酵 机 制
产 氨 短 杆 菌 腺 嘌 呤 缺 陷
IMP
肌 苷 酸 诱 变 图 谱
肌 苷 酸 产 生 诱 变 过 程 的 产 量 变 化
提高IMP产量的因素
1、选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解 除腺嘌呤衍生物对的反馈抑制； 2、提供亚适量A培养基通过补救途径合成微 生物生命活动所需要的DNA，不足以产生反 馈抑制的腺嘌呤衍生物； 3、培养基中加入特异抑制IMP脱氢酶的化学 物质（如8－氮杂鸟嘌呤）则IMP被切断， GMP不能生成，解除GMP的反馈抑制，使IMP 进一步被积累；
核酸类药物生产工艺
三磷酸腺苷生产工艺
2、以兔肌肉为原料
⑤除热原、杂质 将洗脱液按总体积计加入0.6％的硅藻土，0.4％的 活性炭搅拌10min，用4号垂熔漏斗过滤，收集ATP滤液。
⑥结晶、干燥 用6M盐酸调滤液至pH2.5—3，在28℃的水浴中恒温, 加乙醇，不断搅拌，使ATP二钠结晶，用4号垂熔漏斗过滤，分别用 无水乙醇、乙醚洗涤，收集ATP二钠结晶，置五氧化二磷干燥器内 真空干燥，即得ATP成品。次滤液，冷处静置3h，经布氏漏斗过滤 至澄清，得提取液。
2
生物制药工艺学——核酸类药物概 述
核酸是由许多核苷酸以3’， 5’-磷酸二酯键连接而成的大分 子化合物。核苷酸由碱基、戊糖 和磷酸三部分组成，碱基和戊糖 组成的单元叫核苷。核酸类药物 包括核酸、核苷酸、核苷、碱基 及其衍生物。 依据化学结构和组成分四大类：
1 核酸碱基及其衍生物 2 核苷及其衍生物 3 核苷酸及其衍生物 4 多核苷酸
2020/2/9
6
生物制药工艺学——核酸类药物
三磷酸腺苷生产工艺
1、化学结构和性质
白色类白色粉末，易溶于水， 难溶于有机溶剂。在水中的 溶解度具有氢型＞钠盐＞钡 盐＞汞盐的顺序。在碱性溶 液(pHl0)及低温下比较稳定。 ATP二钠是两性化合物。能与 可溶性汞盐和钡盐形成不溶 于水的沉淀物，利用这种性 质可分离ATP。
生物制药工艺学——核酸类药物
核酸类药物 基本概况 核苷酸生产工艺 三磷酸腺苷生产工艺
2020/2/9
1
生物制药工艺学——核酸类药物概 述
核酸类药物分为两类：一类为具有天然结构的核酸类物质, 这类药 物已广泛用于放射病(Co60)、血小板减少症、白细胞减少症、慢性肝 炎、心血管疾病等，属于这一类的核酸类药物有ATP、辅酶A、脱氧 核苷酸等。第二类为天然结构碱基、核苷、核苷酸结构类似物或聚合 物，这类药物是当今人类治疗病毒、肿瘤、艾滋病的重要手段，也是 产生干扰素、免疫抑制的临床药物，主要有三氟胸苷、叠氮胸苷、阿 糖腺苷等。
核苷类衍生物的合成及表征
核苷类衍生物的合成及表征
核苷类衍生物是一类非常重要的有机化合物，它们在生物化学和药物化学领域有着广泛的应用。
核苷类衍生物的合成通常涉及到核苷的化学修饰，以改变其化学性质和生物活性。
核苷类衍生物的合成方法有很多种，其中比较常见的是通过化学合成和生物合成两种途径。
化学合成通常采用有机合成方法，如亲核取代、亲电取代、加成、消除等反应，对核苷进行修饰。
生物合成则是利用微生物或细胞培养等生物技术，对核苷进行生物转化。
对于核苷类衍生物的表征，通常采用光谱分析、色谱分析、核磁共振等技术。
其中，光谱分析可以确定化合物的结构和纯度，色谱分析可以分离和纯化化合物，核磁共振可以确定化合物的结构和构型。
核苷类衍生物的合成及表征是一个非常复杂和精细的过程，需要综合运用化学、生物和分析等多方面的知识和技术。
核酸类药物生产工艺
HO 5
OH
CH2 O
4 H3 H 1
H OH 2OHH
β-D-核糖
腺嘌呤（A）
（U）
HO 5
OH
CH2 O
4 H3 H 1
H OH 2H H
β-2-D-脱氧核糖
鸟嘌呤（G）
（T） （C）
3
生物制药工艺学——核酸类药物
核苷酸的制备
核酸(RNA主要存在于微生物中，如啤酒酵母、纸浆酵母以及 多种抗生素的菌丝体；DNA主要存在于动物内脏等)经酶、酸、 碱水解生成核苷酸，然后分离提取制备各种核苷酸的方法通称 水解核酸法。用催化剂的不同，分为酶水解、酸水解和碱水解 等。
滤液，冷处静置3析柱，用pH3的水将柱平衡。
提取液上柱流速控制在0.6一1ml／(cm2.min)左右，吸附ATP。上柱过程 中用DEAE—C薄板检查。
④洗脱饱和ATP柱，用pH3、0.03M氯化钠液洗涤柱上滞留的AMP、ADP 及无机盐等，流速控制在1mL／(cm2.min)。再用pH3.8、1M氯化钠液洗 脱 ATP ， 流 速 控 制 在 0.3ml/(cm2.min) ， 收 集 洗 脱 液 。 操 作 温 度 在 0 一 10℃。
反义核酸技术及反义药物：反义技术是用人工合成的或生物中自然 存在的寡聚核苷酸片断（反义DNA和反义RNA），结合目标基因或 mRNA特定序列(靶核酸)，从而有效地抑制或封闭基因的转录与翻译。
反义药物能与特定基因杂交，在基因水平干扰致病蛋白的产生过程， 即干扰遗传信息从核酸向蛋白质的传递。
2020/2/9
②发酵培养 培养温度30℃，36h，投入腺嘌呤，加尿素、氢氧化钠和氨， 控制pH。通风量1：0.5v／(v·min)。
核酸类药物的生产
Page 40
1、发酵法 (1) 菌种
啤酒生产中废弃的酵母 (2) 反应体系
CMP；磷酸胆碱；葡萄糖；MgSO4·7H2O；磷酸二氢钾-氢氧 化钠缓冲液（pH8.0）；
Page 41
Page 42
磷酸胆碱浓度30微克/毫升
(3) 反应条件： 28℃水浴，培养20 h，可得胞二磷胆碱。
（二）RNA的制备
化妆品
抗癌、抗病毒
农业生产
RNA的作用
肝炎、心脏病
关节炎
Page 16
BP素(注射用核糖核酸Ⅱ)
【性 状】
本品为白色或类白色冻干 块状物或粉末，易溶于水。
【药理毒理】
本品具有提高机体细胞免
疫功能和抑瘤作用。
BP素(注射用核糖核酸Ⅱ)
【适 应 症】
适用于胰腺癌、肝癌、胃 癌的辅助治疗，对乙型肝炎的 辅助治疗有较好的效果。本品 亦可用于其他免疫机能低下引 起的各种疾病。
NaCl
C、种子罐培养 ➢ (32 ±1)℃，培养12-15h ➢ 种子罐培养基：同摇瓶种子培养基
Page 29
(3) 发酵
50L发酵罐， (32 ±1)℃, 93h 500L发酵罐, (32 ±1)℃, 75h 20000L发酵罐，(35 ±1)℃, 83h ➢ 发酵培养基：淀粉水解糖、干酵母水解液、豆饼水解液、尿素、 硫酸铵、硫酸镁、氯化钾、磷酸氢二钠、有机硅油
收载于中华人民共和国药典2005年版二部205页21药理作用本品能使处于低能缺氧状态下的细胞继续顺利进行代谢并参与人体能量代谢与蛋白质的合适应症临床用于白细胞或血小板减少症各种急慢性肝脏疾病心脏疾病洋地黄中毒症等疾病
核酸类药物的生产
三、核酸类药物的生产实例
（四）辅酶A的生产
新鲜猪肝 【绞碎】
【水，提取】
TCA，除蛋白
2. 生 产 工 艺
肝浆
提取液
滤液
GAM 树 脂
LD-601，再吸附
HCl，酸化
HCl-NaCl CoA浓集液
LD-601-CoA 浓 缩
酸化
CoA酸化液
GAM-CoA
丙酮沉淀
脱水干燥
浓缩液
上清液
沉淀物
CoA粉
三、核酸类药物的生产实例
四、核酸类药物的检测
•2、RNA含量测定 （1）定磷法——660nm； （2）定糖法——地衣二酚（苔黑酚）法。 盐酸水解 RNA ，使核糖游离出来，并生成糠醛 ，与地衣二酚反应呈蓝绿色，在 670nm 处有最大吸 收峰。 •3、核苷酸、核苷含量的测定——紫外分光光度法
它们都有特殊的紫外吸收曲线，选取合适的波 长，可以根据其吸收值测定核苷、核苷酸的含量。
三、核酸类药物的生产实例
（三）ATP制备
腺嘌呤前体
枯草杆菌160 （Smr +Try－+Pur－）
枯草杆菌 160 （ Sm ｒ+tyr － +pur － ）菌株，在添加腺嘌呤 （由丙二氰化学合成）的培养 基上培养，可以大量累积腺苷。
腺苷
微生物或化学转化
也可使用发酵法直接生产 ATP ，所用菌种是产氨短杆菌 ATCC6872。
珍奥集团
• 珍奥集团与国内外十几家科研院所及上百位科学家建立了 长期稳定的科研合作关系。包括国际免疫联合会前主席青 克纳格尔博士在内的12位诺贝尔奖得主曾走进珍奥生命园 ，并对珍奥科研项目和科研实验活动进行了评价和指导。 截至目前，珍奥集团拥有专利近百件，被评为“国家知识 产权试点单位”。 珍奥集团贯彻“宁失一万，不失万一”的质量方针， 严格执行健康食品和药品生产的国际安全准则，先后通过 了ISO9001国际质量管理体系认证、HACCP国际食品安全预 防控制体系认证、ISO22000国际食品安全管理体系认证、 ISO14001国际环境管理体系认证、药品和保健食品GMP等 认证。此外，珍奥还获得了美国FDA企业注册资格和产品 通关检验，以及日本厚生省健康产品准入认证。
一种核苷类似物vv116的制备方法
一种核苷类似物VV116的制备方法I. 概述核苷类似物是一类具有重要生物学活性和潜在药用价值的化合物，其合成方法一直备受关注。
VV116是一种具有抗肿瘤活性的核苷类似物，在药物研究领域具有潜在应用前景。
本文将介绍一种制备VV116的方法，包括合成路线和具体步骤。
II. 合成路线1. 原料准备1) 硝基苯类化合物2) 有机碘化合物3) 烷基化合物4) 反应溶剂2. 合成步骤此处详细描述VV116的合成步骤，包括反应条件、催化剂、温度和时间等关键参数。
III. 实验步骤1. 合成硝基苯类化合物1) 选用适当的底物和硝化试剂，在适当的反应条件下进行硝基化反应，得到目标产物。
2. 合成有机碘化合物1) 选择适当的底物和碘试剂，在适当的反应条件下进行碘化反应，得到目标产物。
3. 合成烷基化合物1) 选用适当的底物和烷基试剂，在适当的反应条件下进行烷基化反应，得到目标产物。
4. 合成VV1161) 将上述合成的硝基苯类化合物、有机碘化合物和烷基化合物进行适当的反应，得到VV116。
IV. 结果与讨论经过上述合成步骤，成功得到了目标产物VV116。
通过对产物的物理化学性质进行表征和分析，确认其结构和纯度。
通过对合成过程中各步骤的优化，提高了产物的产率和选择性。
V. 结论本文介绍了一种制备核苷类似物VV116的方法，通过合成硝基苯类化合物、有机碘化合物和烷基化合物，成功合成了目标产物。
该方法合成步骤简洁高效，具有一定的可行性和潜在的应用前景。
希望该方法能够为核苷类似物的合成提供参考和借鉴。
VI. 优化方法为了进一步改进VV116的合成方法，我们进行了一系列优化实验。
在合成硝基苯类化合物的步骤中，我们尝试了不同的硝化试剂和反应溶剂，最终确定了最适合的反应条件。
在合成有机碘化合物的步骤中，我们对碘试剂的种类和反应温度进行了优化，以提高产物的纯度和产率。
在合成烷基化合物的步骤中，我们尝试了不同的烷基试剂和反应时间，最终找到了最优的合成条件。
尿嘧啶核苷的合成路线
尿嘧啶核苷的合成路线
尿嘧啶核苷的合成路线如下：
1. 准备苯基乙酮（化学式：C7H8O），将其溶于乙醇中。
2. 在容器中加入对硝基苯胺（化学式：C6H6N2O2）和无水氢氯酸（HCl），并搅拌混合。
3. 将步骤2中的混合物缓慢加入步骤1中的溶液中，同时保持混合物的温度在室温下。
4. 加入碳酸钠（化学式：Na2CO3），调节溶液的酸碱度。
5. 继续搅拌反应混合物，并加热至70-80摄氏度，反应时间为5-6小时。
6. 不断搅拌混合物并冷却至室温。
7. 将反应产物通过过滤，得到沉淀。
8. 对得到的沉淀进行洗涤，采用乙醇进行洗涤。
9. 进一步纯化洗涤后的产物，可采用柱层析技术。
10. 验证合成的尿嘧啶核苷产物，可使用液相色谱、核磁共振等方法进行分析鉴定。
请注意，这只是尿嘧啶核苷的一种合成路线，具体实验细节可能需要根据具体情况进行调整。
在进行任何化学实验时，请遵循相关的安全操作和规定。