水杨酸含量标准曲线制备
HPLC法测定水杨酸钠注射液中水杨酸钠的含量
水杨酸钠（sodium salicylate）又名邻羟基苯甲酸钠，为 白色或微显淡红色的细微鳞片，或白色粉末及球状颗粒， 用于风湿症等。水杨酸钠注射液由水杨酸钠加适宜的抗 氧剂和金属络合物制成的灭菌水溶液。静脉注射用于马、 牛、羊、猪、犬的风湿症，是 1 种解热镇痛药。目前，查阅到 水杨酸钠相关分析研究内容均不涉及高效液相色谱法[1-6]， 仅查阅到水杨酸钠注射液的国内标准。其含量测定采用 双相滴定法。该法操作烦琐，且乙醚存在刺激性大、沸点 低、易燃等不安全性。为了避免使用乙醚对人体产生的刺 激麻醉作用及其危险性，同时提高专属性，本试验拟采用 高效液相色谱法对水杨酸钠含量进行测定，为水杨酸钠含 量的测定提供可行的方法。
(Hubei Province Institute of Veterinary Drug, Hubei Wuhan 430070)
Abstract: The experiment established a high performance liquid chromatography method to determine the content of sodium salicylate in sodium salicylate injection. An octadecylsilane-bonded silica gel column was used with wateracetonitrile-glacial acetic acid (197∶100∶3) as the mobile phase, a flow rate of 1.0 mL/min, a column temperature of 30 ℃, and a detection wavelength of 230 nm. The results show that sodium salicylate has a good linearity in the range of 25~500 mg/L, the correlation coefficient is R=0.999 7, the average recovery rate is 99.8% (n=9), and the RSD is 0.3%. The method is simple, accurate and reproducible, and can be used for the quality control of sodium salicylate injection. Key words: Sodium salicylate injection; Determination; HPLC
血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定
血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定一、引言在医学和生物化学领域，血液中特定成分的测定一直是至关重要的研究方向之一。
水杨酸作为一种非类固醇抗炎药，在治疗风湿性关节炎、类风湿关节炎等疾病方面有着广泛的应用。
对血浆中水杨酸含量的准确测定具有重要的临床意义。
而高效液相色谱法（HPLC）作为一种高效、灵敏的色谱分析技术，被广泛应用于药物测定、生化分析等领域。
本文将针对血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定进行深入探讨，帮助读者全面了解该测定方法的原理、步骤和意义。
二、原理及步骤1. 水杨酸的高效液相色谱法测定原理水杨酸作为一种有机酸，具有较好的紫外吸收性。
高效液相色谱法常常利用紫外检测器进行检测。
色谱柱上填充的固定相与流动相相互作用，能够使水杨酸在流动相中的分离和检测成为可能。
在血浆样品预处理后，使用高效液相色谱法进行分析，可以快速、准确地测定血浆中水杨酸的含量。
2. 测定步骤（1）样品准备：取一定量的血浆样品，进行蛋白沉淀和提取处理，得到水杨酸的纯净样品。
（2）色谱条件设置：选择合适的高效液相色谱仪和色谱柱，设置合适的流动相和检测波长。
（3）色谱分析：将经过处理的样品注入色谱仪进行分析，记录色谱峰的出现和峰面积。
（4）数据处理：根据色谱峰面积和标准曲线，计算出血浆中水杨酸的含量。
三、实验意义血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定在药物治疗监测、临床研究等方面具有重要意义。
通过该方法可以精确测定血浆中水杨酸的浓度，帮助医生调整药物剂量，监测药物代谢过程，并进行药物动力学研究。
该方法也为药物研发和临床药理学研究提供了技术支持和检测手段。
四、个人观点和理解高效液相色谱法作为一种强大的分析技术，不仅可以应用于药物测定，还可以应用于环境检测、生化分析等多个领域。
血浆中水杨酸的测定方法可以说是其中的一个典型应用，其高灵敏度、高分辨率和高准确性为基于色谱分析的研究工作提供了有力支持。
该方法也在一定程度上推动了药物治疗和临床研究的进行，对于促进医学科学的发展起到了积极的作用。
复方纳米粒中庆大霉素与水杨酸含量测定
置１６组不同浓度的庆大霉素溶液，在５２９ Ｉｌｍ处测 定吸光度，得到的标准曲线为Ｙ＝０．０１８８ｘ＋０．
０１７７５，Ｒ＝０．９８７２４，检测浓度的线性范围均为ｌ
一１６ ｍｓ／ｍＬ。
２结果与讨论 在纳米粒的制备过程中，由于投药量小，经
过离心后上清液中庆大霉素和水杨酸含量都很小； 差示分光光度法操作简便，标准曲线线性良好， 上清液中庆大霉素与水杨酸的含量在其线性范围 内，精密度与回收率实验结果也表明了这种检测 方法是可行。在比色法测定庆大霉素的标准曲线 过程中，测定了１６组供试品，当庆大霉素的浓度 为８ ｒｎｇ，ｍＬ时吸光度仅为０．１６８；由于吸光度低而 增大了误差，其拟合系数与差示分光光度法中标 准曲线拟合系数相比偏小；因此在上清液中庆大 霉素与水杨酸的含量范围内很难用比色法进行精 确测定两者的含量。所以差示分光光度法是更适 合测定庆大霉素／水杨酸／壳聚糖复方纳米粒的包 封率。
庆大霉素，水杨酸／壳聚糖复方纳米粒稳定性 好，粘膜吸附性强，体外实验表明此复方纳米粒 能同时缓释释放庆大霉素和水杨酸，可望达到降 低庆大霉素耳毒性的作用。包封率是纳米粒的重 要表征之一，高速离心法是测定包封率的常用方 法，一般是将纳米粒经高速离心，再测定其上清 液中药物（庆大霉素和水杨酸）的含量。庆大霉素
在磷酸盐缓冲液于２４８砌处有最大吸收峰；水杨
酸在２９７ ａｍ和２３２ ｎｍ处有强吸收，但水杨酸在 ２３２ ｎｍ的强吸收对２４８ ｎｌｎ处的庆大霉素的最大吸 收有严重干扰，这样就对准确测定庆大霉素带来 一定的难度。
目前测定庆大霉素含量的方法有紫外吸收法、 比色法、高效液相色谱法、旋光法、微生物检定 法。其中微生物检定法的操作繁琐，用时长，费用 高；高效液相法需要对庆大霉素进行衍生化，并 且壳聚糖可能对色谱柱造成损害；壳聚糖属于多 糖类物质同样具有旋光性，所以旋光法也不是一 种良好的方法。本实验分别采用比色法与紫外差 示分光光度法对上清液中庆大霉素的含量进行了 测定，并对此两种方法进行了分析对比。 １实验部分 １．１试剂与仪器
水杨酸的制备
水杨酸的制备一、水杨酸的概述水杨酸是一种有机化合物，化学式为C7H6O3，具有白色结晶状或粉末状，具有特殊的气味和味道。
水杨酸是从柳树皮中提取的天然产物，也可以通过人工合成得到。
水杨酸在医药、化妆品、食品等领域有广泛的应用。
二、水杨酸的制备方法1. 柳树皮法制备水杨酸将干燥的柳树皮切碎，放入加热器中进行蒸馏。
蒸馏过程中，通过冷凝器冷却收集蒸发出来的液体。
经过多次蒸馏和结晶分离得到纯度较高的水杨酸。
2. 合成法制备水杨酸（1）苯基羧酸重排法：将苯甲酸与氢氧化钠或碱金属盐混合加热至高温，使其发生重排反应生成水杨酸。
（2）菲嗪法：将苯环上带有硝基（NO2）官能团的菲嗪与碳酸钠反应，经过还原和酸化，得到水杨酸。
（3）萘酚法：将萘和氧化剂反应生成萘酚，再将其与碳酸钠反应，经过还原和酸化，得到水杨酸。
三、柳树皮法制备水杨酸的具体步骤1. 搜集柳树皮：选择生长在无污染的环境中的柳树，在春季或秋季采集其干燥的树皮。
2. 切碎柳树皮：将采集到的柳树皮切成小块或碾成粉末状。
3. 蒸馏提取：将切碎的柳树皮放入加热器中进行蒸馏。
蒸馏过程中，通过冷凝器冷却收集蒸发出来的液体。
经过多次蒸馏和结晶分离得到纯度较高的水杨酸。
4. 纯化处理：将得到的水杨酸进行纯化处理，去除其中的杂质和不纯物质。
可以使用重结晶、溶剂萃取等方法进行纯化处理。
四、合成法制备水杨酸的具体步骤1. 苯基羧酸重排法制备水杨酸的步骤：（1）将苯甲酸与氢氧化钠或碱金属盐混合加热至高温。
（2）使其发生重排反应生成水杨酸。
（3）通过结晶分离、过滤等方法得到纯度较高的水杨酸。
2. 菲嗪法制备水杨酸的步骤：（1）将苯环上带有硝基（NO2）官能团的菲嗪与碳酸钠反应，生成菲嗪-碳酸钠盐。
（2）经过还原和酸化，得到水杨酸。
（3）通过结晶分离、过滤等方法得到纯度较高的水杨酸。
3. 萘酚法制备水杨酸的步骤：（1）将萘和氧化剂反应生成萘酚。
（2）将萘-萘氢氧化物与碳酸钠反应，生成碳酸盐。
实验一-乙酰水杨酸的合成
实验一、乙酰水杨酸(阿司匹林)的合成、鉴定与含量的测定一、实验目的(1) 学习O-酰化〔酯化〕单元反应的特点和基本知识。
(2) 了解阿司匹林的性质和工业制法，掌握O-酰化制备阿司匹林的实验方法。
(3) 掌握水杨酸酰化反应的原理及实验操作以及乙酰水杨酸的鉴定、提纯及含量测定的方法。
(4)了解紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振法在有机合成中的应用，掌握紫外-可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。
(5) 进一步熟悉基础化学实验的重结晶及熔点测定等基本操作。
二、实验原理乙酰水杨酸〔acetyl Salicylic acid 〕，通常也称为阿司匹林(aspirin)，是由水杨酸(邻羟基苯甲酸)和乙酸酐合成的。
早在18世纪，人们已从柳树皮中提取了水杨酸，并注意到它可以作为止痛、退热和抗炎药，不过对肠胃刺激作用较大。
19世纪末，人们成功地合成了乙酰水杨酸，直到目前，阿司匹林仍然是一个广泛的具有解热镇痛作用的药物。
水杨酸是一个具有酚羟基和羧基双官能团化合物，能进行两种不同的酯化反应，当与乙酸酐作用时，可以得到乙酰水杨酸〔即阿司匹林〕；如与过量的甲醇反应，生成水杨酸甲酯，它是第一个作为冬青树的香味成分被发现的，因此通称为冬青油。
本实验将进行前一个反应的试验。
反应式:COOHOH +(CH 3CO)2H SO COOHOCCH 3O +CH 3COOH在生成乙酰水杨酸的同时，水杨酸分子之间可以发生酯化反应，生成少量的聚合酯: COOHOH n +C O O OC O OC OO+H 2O乙酰水杨酸能与NaHCO 3反应生成水溶性钠盐，而副产物聚合酯不能溶于NaHCO 3，这种性质上的差异可用于阿司匹林的纯化。
可能存在于最终产物中的杂质是水杨酸本身，这是由于乙酰化反应不完全或由于产物在别离步骤中发生水解造成的。
它可以在各步纯化过程和产物的重结晶过程中被除去，与大多数酚类化合物一样，水杨酸可与FeCl 3，形成深色配〔络〕合物，而阿司匹林因酚羟基已被酰化，不再与FeCl 3发生颜色反应，因而未作用的水杨酸很容易被检出。
超高效液相色谱法测定人体血浆中水杨酸含量的方法学研究
超高效液相色谱法测定人体血浆中水杨酸含量的方法学研究董晓茜;夏素霞;邢天舒;唐思;张世良;王月敏【摘要】目的:建立人体血浆中水杨酸含量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定方法.方法:采用Waters Spursil C18(100 mm×2.10 mm,3μm)色谱柱;乙腈∶水(含0.2％磷酸)=20.7∶79.3为流动相,用前经0.22 μm的滤膜过滤,超声脱气;流速为0.3 ml/min;检测波长为304 nm;柱温为35℃,进样量5μl.结果:此方法最低检测浓度为0.018 mg/L,线性范围为0.018 ～28.200 mg/L,方法平均回收率在95.52％～104.63％,日内及日间精密度的相对标准差均＜10％.结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和复方制剂的药代动力学和生物利用度研究.【期刊名称】《沈阳医学院学报》【年(卷),期】2012(014)002【总页数】3页(P93-95)【关键词】超高效液相色谱法;水杨酸;血浆【作者】董晓茜;夏素霞;邢天舒;唐思;张世良;王月敏【作者单位】辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁中医药大学门诊部;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034【正文语种】中文【中图分类】R969.4铝镁司片主要成分阿司匹林。
由于阿司匹林口服后在体内很快转化为其活性代谢产物水杨酸，故在进行阿司匹林的血药浓度研究时大多测定血浆中水杨酸的浓度［1］。
根据文献［2－4］，人体血浆中水杨酸的测定的方法包括HPLC、LC-MS/MS、GC-MS等，考虑到HPLC法保留时间长，LC-MS/MS重复性不好，GC-MS操作繁琐。
水杨酸软膏和凝胶剂的体外释药及其经皮吸收实验
实验三十三水杨酸软膏和凝胶剂的体外释药及其经皮吸收实验一、目的和要求1．了解软膏及凝胶基质对药物释放的影响。
2．熟悉测定软膏剂和凝胶剂体外经皮渗透的方法。
3．熟悉药物经皮渗透量及渗透速率参数的计算方法。
二、实验药品与器材药品水杨酸；硬脂酸，单硬质酸甘油酯，白凡士林，羊毛脂，三乙醇胺，吐温80，羧甲基纤维素钠，卡波普，羟丙甲纤维素（HPMC），甘油。
器材752-紫外线分光光度计，智能透皮实验仪TP-2A（南京红蓝电子科技中心），微孔滤膜（0.8μm），试管（10ml），注射器（5ml），吸量管（1ml），挂道，手术剪，手术镊，蒸发皿。
实验动物与试剂小白鼠（体重18～25g）。
6%Na2S（脱毛剂），硫酸铁胺显色剂，淀粉等。
三、实验内容（一）软膏剂和凝胶剂处方及制备过程处方1（O/W包型乳剂基质）水杨酸 2.0g硬酯酸 4.8g单硬脂酸甘油酯 1.4g白凡士林 2.4g羊毛脂0.4g三乙醇胺0.16g吐温800.04g纯化水加至50g制备以硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白凡士林、羊毛脂为油相，于蒸发皿中，置水浴加热至80℃左右；另将三乙醇胺、吐温80、纯化水加至烧杯中，于水浴加热至80℃左右。
等温下将水相缓缓倒入油相，并在水浴上反应5～10min，然后室温下不断搅拌至乳白色半固体基质形成，分次加入水杨酸，研磨混匀。
处方2（水溶性基质）水杨酸 1.3g羧甲基纤维素钠 1.2g甘油 3.0g纯化水加水20g制备工艺将CMC-Na置乳钵中，加入适量纯化水溶胀片刻，研磨均匀，加入甘油适量，研匀。
称取水杨酸适量用水溶解，然后分次加入至上述基质中，研磨混匀即可。
处方3（凝胶基质1）处方4（凝胶基质2）水杨酸5%水杨酸5%羟丙甲纤维素14%羟丙甲纤维素28%卡波普97128%卡波普97114%丙二醇QS丙二醇QS纯化水QS纯化水QS凝胶剂的制备将卡波普、羟丙甲纤维素（HPMC）分别用纯化水浸泡，三乙醇胺调节卡波普溶液的pH至5～6，卡波普与HPMC以2∶1或1∶2比例混合均匀，加入适量丙二醇，置乳钵中研磨均匀得凝胶基质。
HPLC法测定三种制剂中水杨酸的含量
HPLC法测定三种制剂中水杨酸的含量白林;蔡乐;徐风华;王欢欢【摘要】目的：建立测定三种制剂（水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏）中水杨酸含量的方法。
方法：采用HPLC法，色谱柱：Diamonsil C18（250 mm ×4.6 mm，5μm）；流动相：甲醇-0.1 mol·L-1磷酸二氢钠（30：70）；检测波长：231 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱温：35℃；进样量：10μL。
结果：水杨酸与其它杂质峰分离良好，水杨酸在12.32~123.20μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r =1.0000）；水杨酸在水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏的平均回收率分别为100.55%、99.96%、99.13%，RSD分别为0.95%（n=9）、0.96%（n=9）、1.15%（n=9）。
结论：采用该方法测定三种制剂中的水杨酸含量，简便易行，结果准确，可作为三种制剂中水杨酸的质量控制方法。
%Objective:To establish the HPLC method for determining the content of salicylic acid in three preparations (salicylic acid ointment, salicylic acid and sulfur ointment, compound sulfur sublimate ointment). Methods:HPLC analysis was carried out with Diamonsil C18 column (250 m m × 4.6 mm, 5 μm), the mobile phase consisted of methanol-0.1 mol·L-1 sodium dihydrophosphate solution (30 : 70), the detection wavelength was set at 231 nm, the flow rate was 1.0 mL·min-1, the column temperature was35℃and the sample size was 10μL. Result s: The sample was separated well from impurities by this HPLC method. The calibration curve of salicylic acid was linear in the range of 12.32-123.20μg·mL-1 (r=1.000 0). The average recoveries and the RSD of salicylic acid were 100.55%and 0.95%(n=9) inthe salicylic acid ointment, 99.96%and 0.96%(n=9) in the salicylic acid andsulfur ointment, 99.13%and 1.15%(n=9) in sulfur sublimate ointment, respectively. Conclusion:This method is accurate and feasible, which can be applied as the quantitative method for the determination of salicylic acid in three preparations.【期刊名称】《中国药物应用与监测》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】3页(P283-285)【关键词】高效液相色谱法;制剂;水杨酸;含量测定【作者】白林;蔡乐;徐风华;王欢欢【作者单位】解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853【正文语种】中文【中图分类】R917水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏收载于《中国人民解放军医疗机构制剂规范》[1]，三种制剂处方中均含有水杨酸，其共同的特点是抗真菌、止痒，常用于皮肤癣症、真菌感染及皮炎湿疹等。