生物人教版选修1课件：2.1 微生物的实验室培养
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【人教版】生物选修一：2.1《微生物的实验室培养》课后习题(含解析)
【优化设计】2018—2019学年高中生物专题2 课题1 微生物的实验室培养课后习题（含解析）新人教版选修1课时演练·促提升1。
含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为( ）A。
异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、能源C.自养微生物的碳源、氮源、能源D。
异养微生物的碳源、氮源、能源解析：含C、H、O、N的大分子有机化合物一般是蛋白质，因此可给异养微生物提供碳源、氮源、能源。
答案:D2。
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤解析：培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温，用干热灭菌;接种环可通过灼烧灭菌达到迅速、彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶可采用巴氏消毒法,使营养成分不被破坏.答案：A3.下列说法正确的是( ）A。
为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B。
培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C。
固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落解析:培养基是微生物生长繁殖的营养基质，根据培养基的物理性质不同，可将培养基分成固体培养基、液体培养基和半固体培养基；液体培养基不加凝固剂。
答案：D4。
三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。
下列选项错误的是（)培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A。
该实验采用的是固体培养基B.该实验可采用稀释涂布平板法接种C。
Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D。
Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:培养基中均加入了琼脂,故为固体培养基;微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法;Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照,自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。
高中生物选修1《生物技术实践》课件2.1微生物的实验室培养
1．连一连
2．判一判 (1)培养基中碳源物质不可能同时是氮源。( × ) 解析：有些碳源可同时是氮源。
(2)培养基中只要有碳源、氮源、无机盐和水就能满足微生物的 生长需要。( × )
解析：培养基中一般含有碳源、氮源、无机盐和水，但对于某 些微生物来说，还需要特殊营养物质才能满足其生长需要。
(3)液体培养基含有水，而固体培养基不含水。( × ) 解析：液体培养基与固体培养基都含有水，它们的区别为是 否添加凝固剂。
(3) 平 板 划 线 法 ： 通 过 _接__种__环___ 在 琼 脂 固 体 培 养 基 表 面 连 续 ___划__线___的操作，将聚集的菌种逐步__稀__释____分散到培养基的表 面。其具体操作是：
①将__接__种__环__放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 ②在火焰旁冷却__接__种__环__，并打开棉塞。 ③将试管口通过_酒__精 ___灯__火__焰__。 ④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。 ⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。 ⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将蘸有菌种的接种环迅速伸 入平板内，划三至五条__平__行____线，盖上皿盖。注意不要划破培养 基。
质配成)
工业生产 分类、鉴定
用途
选择培养基 鉴别培养基
培养基中加入 某种化学物 质，以抑制不 需要的微生物 的生长，促进 所需要的微生 物的生长
培养、分离出特定微生 物(如培养酵母菌和霉 菌，可在培养基中加入 青霉素；培养金黄色葡 萄球菌，可在培养基中
加入高浓度食盐)
根据微生物的 代谢特点，在 培养基中加入 某种指示剂或
3．消毒和灭菌
消毒
灭菌
概念
使 用 较 为 __温__和____ 的 物 理 或 化 学 方 法 杀 死 物 体 _表__面_____ 或内部的部分微生物(不包括 __芽__孢__和__孢__子__)
人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
人教版高中生物选修一专题二课题1微生物的实验室培养 课件(共35张PPT)
B.石油
C.二氧化碳
D.花生粉饼
解析 自养微生物能利用无机碳源。
12345
解析答案
12345
3.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者
阻止其他种类微生物生长的培养基称做( C )
A.鉴别培养基
B.加富培养基
C.选择培养基
D.基础培养基
解析 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。
灭 干热灭菌 160～170 ℃条件下， 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属
菌
加热1～2 h
用具等
高压蒸 汽灭菌
在高压蒸汽灭菌锅内， 121 ℃，100 kPa， 灭菌15～30 min
培养基等
紫外线灭菌 30 W照射30 min
小型接种室、接种箱等
活学活用
3.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。 下列叙述错误的是( B ) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止
问题导析
解析答案
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二 无菌技术
要防止外来的杂菌污染培养物，离不开无菌技术，要防止培养物污染 人体和环境，也离不开无菌技术。 1.目的：防止外来杂菌 的污染。 2.方法：消毒 和 灭菌 。
知识梳理
项目
消毒
灭菌
概念
使用较为温和的 物理或化学方法 杀 死物体表面 或 内部 的部分微生物(不 包括 芽孢 和 孢子)
解析答案
12345
4.不同的微生物对营养物质的需要各不相同，但一般都需要水、碳源、 氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述，正确的是( ) A.氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素 B.有些碳源也可以给微生物的生长提供能源 C.无机盐是微生物不可缺少的营养物质，所以无机盐越多越好 D.固体培养基中不含水分
4-2.1生物选修1课堂教学课件-微生物的实验室培养
名目繁多、种类各异
（一）按对培养基成分的了解作分类 天然培养基 组合培养基 半组合培养基
（二）按培养基外观的物理状态作分类
液体培养基 固体培养基 半固体培养基 脱水培养基
（三）按培养基对微生物的功能作分类 基础培养基 加富培养基 增殖培养基
选择性培养基
鉴别性培养基
天然培养基
这是指一些利用动、植物或微生物体或其提取物制成 的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其 确切化学组成的培养基。 例如，培养多种细菌的牛肉膏蛋白胨培养基， 培养酵母菌的麦芽汁培养基等。
到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还
要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物
进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物
很容易混入。
外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫 做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的 技术，彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。
此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还 要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基 因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的 实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。
天然培养基的优点：
营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉 。
缺点：
是成分不清楚、不稳定，不适宜做精细的科学实验。
天然培养基只适合于一般实验室中的菌种培养、发酵工 业中生产菌种的培养和某些发酵产物的生产等。
组合培养基
又称合成培养基或综合培养基（synthetic media），是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高
细菌细胞质的主要成分: 核糖体
贮藏物
多种酶类和中间代谢物 质粒 各种营养物和大分子的单体等
植物界： 显微藻类 动物界： 原生动物
人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共43张PPT)
微生物需要的五大类营养要素物质： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 1.碳源
⑴概念 ：凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。
⑵来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等
⑶作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
2.氮源
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 back
——
伊 红 美 蓝 培 养 基
（四）无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防 止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌
⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。
培养基的种类
划分标准
培养基种类
液体培养基
半固体培养基
物理性质
固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
用途
工业生产 观察微生物的运 动、分类鉴定
微生物分离、 鉴定、活菌计 数、保藏菌种
化学成分 用途
天然培养基 合成培养基
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长, 促进所需要的微生物的生长
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或 化学药品,用以鉴别不同种类的
微生物
工业生产 分类、鉴定 培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种 类微生物
液体培养基：
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
半固体培养基：
无动力
固体培养基：菌落
⑴概念 ：凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。
⑵来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等
⑶作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
2.氮源
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 back
——
伊 红 美 蓝 培 养 基
（四）无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防 止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌
⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。
培养基的种类
划分标准
培养基种类
液体培养基
半固体培养基
物理性质
固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
用途
工业生产 观察微生物的运 动、分类鉴定
微生物分离、 鉴定、活菌计 数、保藏菌种
化学成分 用途
天然培养基 合成培养基
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长, 促进所需要的微生物的生长
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或 化学药品,用以鉴别不同种类的
微生物
工业生产 分类、鉴定 培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种 类微生物
液体培养基：
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
半固体培养基：
无动力
固体培养基：菌落
选修一2.1微生物实验室培养(上新课用)
自养型：不加碳源（CO2碳源） 异养型：有机碳源
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
⑶适宜的pH值：加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸。
细菌培养基pH中性或偏碱性pH为：6.5-7.5，霉菌培 养基呈酸性pH为：5.0-6.0。放线菌pH为：7.5-8.5。
二 、无菌技术：
• （看教材15页回答）
• 1.获得纯净培养物的关键是什么？ • 2.无菌技术包括哪四大方面？ • 3.消毒与灭菌有什么区别？
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅 在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养 微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养 基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
四、大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞,形成单个菌落
1.定义： 单个 固体培养基上 或少数菌体 大量繁殖
子细胞群体
酒紫8精0外℃、线、氯1气5m、in石炭酸等
物高压品蒸，汽16灭0～菌170℃ 1培～养2小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
二、无菌技术 防止外来杂菌的污染
2.消毒与灭菌：
消毒
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法， 定义 杀死部分有害菌体 杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
灼烧灭菌
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min 化70学~7药5℃剂、30min
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
⑶适宜的pH值：加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸。
细菌培养基pH中性或偏碱性pH为：6.5-7.5，霉菌培 养基呈酸性pH为：5.0-6.0。放线菌pH为：7.5-8.5。
二 、无菌技术：
• （看教材15页回答）
• 1.获得纯净培养物的关键是什么？ • 2.无菌技术包括哪四大方面？ • 3.消毒与灭菌有什么区别？
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅 在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养 微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养 基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
四、大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞,形成单个菌落
1.定义： 单个 固体培养基上 或少数菌体 大量繁殖
子细胞群体
酒紫8精0外℃、线、氯1气5m、in石炭酸等
物高压品蒸，汽16灭0～菌170℃ 1培～养2小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
二、无菌技术 防止外来杂菌的污染
2.消毒与灭菌：
消毒
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法， 定义 杀死部分有害菌体 杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
灼烧灭菌
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min 化70学~7药5℃剂、30min
新人教版高中生物选修1-2.1_微生物的实验室培养(共53张PPT)
蛋培白养包基括的动营物蛋养白构（成酪:碳蛋源白、、氮肉源类、）水、、植无物机蛋盐＋特殊营养物质
白（豆类）、微生物蛋白（酵母）等三种。能
为1微.基生物本提成供分C源：、N碳源源、、生长氮因源子、等水营、养无物质机。盐
⑴碳源
无机碳源：CO2、CO32-、HCO3- 自养微生物 有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、 异养微生物
才能用来倒平板？
灼烧灭菌， 防止瓶口的微生 物污染培养基
3.用左手将培养皿打 开一条稍大于瓶口的 缝隙，右手将锥形瓶 中的培养基(约10～ 20mL)倒入培养皿， 左手立即盖上皿盖。
倒平板注意事项：
3 4 ①温度：50℃左右
②操作：在酒精灯火焰附近 ③冷凝后平板倒置
4.等待平板冷却凝固 （约需5～10min）。 然后，将平板倒过来 放置，使皿盖在下， 皿底在上。
微生物实验室培养的基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
例如：
㈠制备牛肉膏蛋白胨
大肠杆菌的纯化培养 固体培养基
㈡纯化大肠杆菌
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算称量溶化调节pH灭菌倒平板无菌检查
1.计算：培养基用量 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方
依配方计算各成分琼的脂用量 20.0g
2.称量：牛 牛肉 肉膏 膏黏 、稠蛋，白用胨称易牛量吸肉纸潮膏称，取要快5、g 加盖
蛋白胨 10g
3.溶化：牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解 →取纸
Nacl
5g
→蛋白胨、NaCl→琼脂、搅拌 →补水定容 4.调pH、分装、封口：加棉塞H2、O 包牛定皮容纸至、1橡00皮0m筋l 勒紧
100 ℃煮沸5～6 min
白（豆类）、微生物蛋白（酵母）等三种。能
为1微.基生物本提成供分C源：、N碳源源、、生长氮因源子、等水营、养无物质机。盐
⑴碳源
无机碳源：CO2、CO32-、HCO3- 自养微生物 有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、 异养微生物
才能用来倒平板？
灼烧灭菌， 防止瓶口的微生 物污染培养基
3.用左手将培养皿打 开一条稍大于瓶口的 缝隙，右手将锥形瓶 中的培养基(约10～ 20mL)倒入培养皿， 左手立即盖上皿盖。
倒平板注意事项：
3 4 ①温度：50℃左右
②操作：在酒精灯火焰附近 ③冷凝后平板倒置
4.等待平板冷却凝固 （约需5～10min）。 然后，将平板倒过来 放置，使皿盖在下， 皿底在上。
微生物实验室培养的基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
例如：
㈠制备牛肉膏蛋白胨
大肠杆菌的纯化培养 固体培养基
㈡纯化大肠杆菌
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算称量溶化调节pH灭菌倒平板无菌检查
1.计算：培养基用量 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方
依配方计算各成分琼的脂用量 20.0g
2.称量：牛 牛肉 肉膏 膏黏 、稠蛋，白用胨称易牛量吸肉纸潮膏称，取要快5、g 加盖
蛋白胨 10g
3.溶化：牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解 →取纸
Nacl
5g
→蛋白胨、NaCl→琼脂、搅拌 →补水定容 4.调pH、分装、封口：加棉塞H2、O 包牛定皮容纸至、1橡00皮0m筋l 勒紧
100 ℃煮沸5～6 min
新人教版生物选修一课题-微生物的实验室培养-ppt精品课件
（1）概念：无菌技术泛指在培养微生物的操 作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）获得纯净培养物的关键： 防止外来杂菌的入侵。
（3）避免杂菌污染的方法
1.对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清 洁和消毒。
2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 进行灭菌。
3.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近进行。
课题1 微生物的实验室培养
教学目标
一、了解有关培养基的基础知识，进行无菌技 术的操作，进行微生物的培养。
二、 掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板 划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无 菌操作，成功地培养微生物。
一、基础知识 二、实验操作 三、结果分析与评价 四、课题延伸
1、培养基可以分为哪两类？ 2、培养基一般都含有哪些营养物质， 此外还要满足哪些要求？
（2）固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂 琼脂配制成的固体状态的基质。
你知道固体培养基的来历吗？
为了能直接观察培养物的形态及生长情况，科 学家希望能将微生物培养在固体表面上，就像微生 物生长在橘子皮或土豆上一样。最初，德国医生罗 伯特·科赫试着用明胶作培养基的凝固剂。 但是， 人们很快发现，明胶在20 ℃以上就变软了，很难进 行分离微生物的划线操作。而大多数细菌的培养温 度都不低于25 ℃。科赫的同事Walter Hesse发现琼 脂比明胶更适合做培养基的凝固剂。这个改进的方 法很快就被大家采纳。
菌落：
❖ 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结 构的子细胞群体，叫做菌落。
❖ 菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落 特征因种而异
3.培养基的营养构成：
培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐(包括微 量元素)。
（2）获得纯净培养物的关键： 防止外来杂菌的入侵。
（3）避免杂菌污染的方法
1.对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清 洁和消毒。
2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 进行灭菌。
3.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近进行。
课题1 微生物的实验室培养
教学目标
一、了解有关培养基的基础知识，进行无菌技 术的操作，进行微生物的培养。
二、 掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板 划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无 菌操作，成功地培养微生物。
一、基础知识 二、实验操作 三、结果分析与评价 四、课题延伸
1、培养基可以分为哪两类？ 2、培养基一般都含有哪些营养物质， 此外还要满足哪些要求？
（2）固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂 琼脂配制成的固体状态的基质。
你知道固体培养基的来历吗？
为了能直接观察培养物的形态及生长情况，科 学家希望能将微生物培养在固体表面上，就像微生 物生长在橘子皮或土豆上一样。最初，德国医生罗 伯特·科赫试着用明胶作培养基的凝固剂。 但是， 人们很快发现，明胶在20 ℃以上就变软了，很难进 行分离微生物的划线操作。而大多数细菌的培养温 度都不低于25 ℃。科赫的同事Walter Hesse发现琼 脂比明胶更适合做培养基的凝固剂。这个改进的方 法很快就被大家采纳。
菌落：
❖ 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结 构的子细胞群体，叫做菌落。
❖ 菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落 特征因种而异
3.培养基的营养构成：
培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐(包括微 量元素)。
2021高中生物人教版选修一课件：专题2 课题1 微生物的实验室培养
01微生物的实验室培养课题1ꢀ微生物的实验室培养刷基础题型1ꢀ培养基的成分及种类分析1．[黑龙江大庆实验中学2019高二下月考]下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是(ꢀꢀ)CA．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响D．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性解析培养微生物的培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子，但是培养某些特殊微生物的时候可以缺少部分成分，如能利用空气中CO2的自养生物，培养基中可以不提供碳源；能进行固氮作用的微生物，培养基中可以不提供氮源等，A错误。
固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误。
微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响，C正确。
培养不同的微生物需要有一些不同的特殊条件，培养细菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，D错误。
2．[四川宜宾南溪区二中2019高二下月考]下列叙述错误的是(ꢀꢀ)BA．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D．培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件解析维生素是乳酸菌生长繁殖所必需的，其自身又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；培养霉菌时应将培养基的pH调至酸性，碱性条件下霉菌不易繁殖，甚至会死亡，B错误；细菌生长繁殖所需要的pH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性，C正确；产甲烷杆菌是一类以产生大量甲烷气体作为能量代谢终产物的特殊原核微生物，广泛存在于各种极端厌氧环境中，厌氧微生物在有氧气存在时，无氧呼吸受抑制，因此培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件，D正确。
题型2ꢀ无菌技术3．[吉林延边2019高二下月考]在培养基配制和微生物接种的过程中，确保无杂菌污染被称为无菌操作。
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预习交流 1
由组成细胞的必需元素的种类理解微生物培养基的基本成分。 (1)构成细胞的基本元素有哪几种?由此推测培养基中应含有哪些基本 的成分? 提示:构成细胞的基本元素有 C、H、O、N 4 种,由此推测培养基应含有 提供 C 的物质(碳源)、 提供 N 的物质(氮源)、 提供 H 和 O 的物质(H2O)。 (2)组成细胞的大量元素中,除了 C、H、O、N 外,还有哪些元素?据此推 测,培养基中还应含有除问题(1)基本成分外的何种成分? 提示:还有 P、S、K、Ca、Mg 等元素,据此推测培养基中还应含有提供 P、S、K、Ca、Mg 等元素的物质(无机盐)。 (3)以硝化细菌和乳酸菌为例,比较自养微生物和异养微生物培养基中 碳源的不同。 提示:自养微生物的碳源是含碳的无机物,主要是 CO2、 NaHCO3 等,而异 养微生物的碳源则是含碳的有机物,如糖类、脂肪酸等。
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二、无菌技术
1.概念:获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术就是 围绕如何解决该问题展开的。 2.消毒:用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的一部分微 生物(不包括芽孢和孢子)。 3.灭菌:指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢 和孢子。 4.无菌技术主要包括以下四方面 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进 行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理过的材料用具与周围的物品相接触。
专题 2
微生物的培养与应用
课题 1
微生物的实验室培养
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1.记住有关培养基的基础知识。 2.学会无菌技术的操作。 3.进行微生物的培养。
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(2)步骤。 ①无菌操作:将接种环放在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 ②取菌种:a.在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉 塞。 b.将试管口通过火焰,达到防止杂菌污染的目的。 c.将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液。 d.将试管口通过火焰后塞上棉塞。 ③平板划线:a.将皿盖打开一条缝隙,把接种环伸入平板内,划 3~5 条平 行线,盖上皿盖。注意不要划破培养基。 b.灼烧接种环冷却后从第一区域划线的末端开始向第二区域划线。重 复上述过程,完成三、四、五区域的划线。注意不要将最后区域的划线 与第一区域划线相连。 ④培养:将平板倒置,放入培养箱中培养。
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预习交流 2
“无菌操作”与人们的生活休戚相关,无时、无处不在。 (1)在人们的日常生活中有哪些“无菌操作”的例子?请列举两例。 提示:被褥、鞋袜要常晒;肉制品储存时用盐腌等。 (2)在人们的生产实践中有一些“无菌操作”,请列举两例。 提示:家畜阉割后,要在其伤口涂抹一些酒精或白酒;初冬杨树树干涂刷 生石灰水等。 (3)在人体自身健康防护中,也有“无菌操作”,请列举两例。 提示:打针时,注射部位要用酒精棉球擦洗;饭前便后要洗手。
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四、分离纯化大肠杆菌
1.微生物分离纯化的方法很多,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板 法。 2.菌落:由一个(细菌、真菌、放线菌等)细胞繁殖而来的子细胞群体,称 为菌落。 3.平板划线法: (1)概念:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的 菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
一、培养基
1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同要求,配制出供其生长繁殖 的营养基质。 2.分类:依据培养基的物理性质可分为 (1)液体培养基:液体状态的基质。 (2)固体培养基:在液体状态的基质中加入凝固剂琼脂可制成琼脂固体 培养基。微生物在固体培养基表面生长形成肉眼可见的菌落。 3.营养 (1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的 物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。 (2)在提供上述营养的基础上,培养基还要满足微生物生长对 pH、特殊 营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 维生素,培养霉菌时需要将培养基的 pH 调至酸性,培养细菌时需要将培 养基的 pH 调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条 件。
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KEQIAN YUXI DAOXUE KETANG HEZU(1)对一些不耐高温的液体,如牛奶,可用巴氏消毒法。 (2)接种环、接种针或其他金属用具,可进行灼烧灭菌。 (3)能耐高温的、需要保持干燥的物品可进行干热灭菌。 (4)高压蒸汽灭菌:一般在压力 100 kPa,温度为 121℃的条件下,维持 15~30 min。 (5)除了以上方法外,实验室里还用紫外线或化学药物进行消毒。
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三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1.计算:计算各种成分的用量。 2.称量:牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮,称取时动作要迅速。 3.溶化:制备固体培养基需要加入琼脂。加热熔化过程要不停地用玻璃 棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。 4.灭菌:培养基需要高压蒸汽灭菌,而培养皿需要进行干热灭菌。 5.倒平板:在培养基冷却到 50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板。