生物表面活性剂的分离提取
提取植物DNA方法
提取植物DNA方法植物DNA的提取方法是将植物细胞中的DNA分离出来，以便进行进一步的研究。
以下是常用的植物DNA提取方法：1. CTAB法：CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）是一种表面活性剂，可以溶解脂质，破坏细胞膜，从而释放DNA。
首先，将植物样品粉碎，加入CTAB缓冲液中并进行润湿，然后加入蛋白酶，破坏细胞膜。
接下来，加入CTAB-蛋白酶混合液，室温静置，使DNA与CTAB结合。
之后，将混合液经过苯酚-氯仿提取，将DNA从其他组分中分离出来。
最后，使用异丙醇沉淀法将DNA沉淀，洗涤并溶解。
2. 硅胶柱法：硅胶柱法适用于小规模提取和纯化植物DNA。
首先，将植物样品粉碎，加入提取缓冲液中，并加入蛋白酶进行细胞壁降解。
接下来，将溶有脂质的提取液加载到硅胶柱上，使用重力流动分离DNA。
然后，使用洗涤缓冲液去除残余的污染物。
最后，使用低盐缓冲液将DNA从硅胶柱上洗脱，并收集纯化的DNA。
3. 高盐法：高盐法适用于粗提植物DNA。
首先，将植物样品细碎，加入高盐缓冲液中，其中含有高浓度的盐和蛋白酶。
高盐浓度可以破坏细胞膜，并使DNA 从蛋白质中解离出来。
然后，使用异丙醇沉淀法将DNA沉淀，洗涤并溶解。
4. 快速提取法：快速提取法是一种高效和便捷的方式，适用于大规模提取植物DNA。
首先，将植物样品经过快速研磨处理，将DNA释放到提取缓冲液中。
然后，使用聚乙二醇或盐酸沉淀方法使DNA沉淀，然后洗涤并溶解。
这些方法在植物科学研究中被广泛使用。
在选择提取方法时，需要考虑样品量、样品类型、实验目的和所需纯度等因素。
植物DNA的提取方法的选择也可以根据实验室设备和研究经验进行调整，以获得满意的结果。
需要注意的是，植物样品在提取DNA之前需要进行适当的贮存和处理。
样品应在低温下保存，以保持DNA的完整性。
此外，处理样品时要避免污染和酶解，以确保提取的DNA质量。
《精细化工》题库 参考答案
33 . 选择与填空 : 生物表面活性剂的制备主要分为培养发酵、分离提取、纯化三 大步骤。
34. 选择填空 与 问答 : 生物表面活性剂能显著降低表面张力和界面张力 。 除此之外，还具有其
他特有的性能，如具有良好的抗菌性能，许多生物表面活性砸基因非常好，另外，由于
生物表面活性剂是天然产物 ， 还具有更好的监篮篮 。
59. 60.
填空 : 单体香料的评价 : 在对单体香料进行评价时，多从( 1 )香气质量 ; (2)香气强度; (3)香
35 . 36. 37 . 问答 : 表丽活性剂复配的原则是 : 通过几种表面活性剂的混合复阻，可使制剂或配方的效 果更好，各类表面活性剂之间具有较好的配伍性，或者说相容性 。 解释 与选择:染料 : 是能使其他物质获得鲜明而坚牢色泽的有机化合物。 选择填空与 问答:染料应用的途径:基本上有三方面 : 尘盈垒，染料由外部进入到被染物 的内部，而使被染物获得颜色，如各种纤维、织物、皮革等的染色 : ②盖鱼，在物体形成 最后固体形态之前，将染料分散于组成物之中，成型后即量子产率 ， @对被作用的物体具有较好的亲和性，但相
互间不可发生化学作用:④有较好的热化学和光化学稳定性。 49. 问答:荧光增自剂对被作用物能起增白作用的原理: 是因为荧光增白 剂吸附在被作用物上 后吸收了波长为 350nm 左右的紫外光，同时反射了波长 450nm 左右的蓝色或蓝紫色的可见 光，这种反射光与原来被作用物上的泛黄色调相补，给人眼的感觉是物体的白度和鲜艳度 增加了，也就是说物体被增白增艳了。 50. 问答:荧光增白剂的增自 与漂白剂的漂白 :利用荧光增白剂增白物体是一种光学效应，不 会对纤维组织造成损伤。化学漂白剂的漂白，是利用它的氧化作用使纤维中的色素褪色， 显然这种漂白会不同程度地损伤纤维组织。然而 ， 荧光增白剂对 紫外线相当敏感，用其处 理过的产品如长期曝晒在日光下 ，其自度会因 荧光增臼剂分子的逐渐被破坏而下降 。 5 1.问答:荧光增自剂和荧光染料的共同点 是两者都可发出荧光，不同之处在于前者是吸收了 不可见的紫外光，发出波长较短的可见荧光;而后者则吸收可见光井发出波长较长的可见 我光。
一种快速分离检测产脂肽类生物表面活性剂枯草芽孢杆菌的方法
一种快速分离检测产脂肽类生物表面活性剂枯草芽孢杆菌的方法王大威;张健;姜伟;张凤久【摘要】脂肽(Lipopeptide)是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等微生物产生的一类具有较强表面活性的生物表面活性剂.枯革杆菌磷酸泛酰巯基转移酶基因(afp)是枯草芽孢杆菌中参与脂肽代谢的功能性基因.采用sfp基因PCR对从环境中得到的一组产生表面活性剂的微生物进行筛选,结合Tricine-SDS-PAGE电泳对PCR结果呈阳性的菌蛛的代谢粗初提物进行检测,初步鉴定得到两株枯草芽孢杆菌.进一步利用16S rDNA序列的系统发育学分析确定这两种菌株为枯草芽孢杆菌,并利用TLC、HPLC鉴定其产物为脂肽类表面活性剂,从而建立了一套快速分离检测产生脂肽类生物表面活性剂的枯草芽孢杆菌方法.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2011(000)009【总页数】5页(P142-146)【关键词】脂肽;枯草芽孢杆菌;sfp基因;Tricine-SDS-PAGE;电泳【作者】王大威;张健;姜伟;张凤久【作者单位】中海油研究总院,北京100027;海洋石油高效开发国家重点实验室,北京100027;中海油研究总院,北京100027;海洋石油高效开发国家重点实验室,北京100027;中国海洋石油总公司,北京100027;中国海洋石油有限公司,北京100027【正文语种】中文脂肽(Lipopeptide)又名脂酰肽(Acylpeptide)，是由亲水的肽键和亲油的脂肪烃链两部分组成的小肽，由于其特殊的化学组成和两亲型分子结构，脂肽类生物表面活性剂显示了十分优良的特性，在医药、食品、化妆品、环境治理和微生物采油等领域都有广泛的应用[1] 。
大多数脂肽来源于微生物，而其中以来源于细菌的脂肽居多。
目前发现的脂肽类生物表面活性剂有10余种，主要包括Surfactin、Lichenysin、Iturin和Fengysin等[2] 。
生物表面活性剂产生菌株BYS6的分离筛选与鉴定
２１ 第 １ ０ １年 ５期
农业基 础 科 学
生物表面活性剂产 生菌株 Ｂ Ｓ Ｙ ６的分 离筛选与鉴定
门 欣 沈 卫荣 孙 晓宇 韩 丽萍 路 鹏鹏 高怡 文
（ 西 省 微 生 物 研 究 所 ， 西 西 安 ７ ０４ ） 陕 陕 １０ ３
摘 要 采 用延 长 油 田水 处理 站水 祥 和 土样 ， 平板 分 离 筛选到 ５株 具 有 开发价 值 的 生物 表 面 活性 剂产 生 茵 。 中 １ 表 面活性 荆 产 血 其 株 生 茵株 Ｂ Ｓ ． 瓶发 酵后 发 酵液 糖脂 含 量为 ４ ３ ｅ 。 酵 液排 油 效果 显著 ， 油 直径＞ 其 产生 的表 面活性 剂 可将发 酵培 养基表 面张 Ｙ ６摇 ． Ｌ发 ７ ｇ 排 ６ ｍ， ｃ 力从 ６ ． ｍ ／ 降低 至 ３ ． ｍ ／ ， 茵株 Ｂ Ｓ ９ Ｎｍ ９ ２ Ｎ ｍ， ３ 对 Ｙ ６进 行 １ Ｓ Ｄ Ａ序 列 分析 及 系统 发 育 学分析 ， 定 为不 动 杆茵 （ ｃ ｅ ｂｃｅ ｓ． ， ｅ Ｂ ｎ ６ Ｎ ｒ 鉴 Ａ ｉ ｔ ａｔｒ ｐ）Ｇ ｎ ａ ｋ ｎｏ 登 录 号为 Ｈ ３ １ ３ 通 过 Ｔ Ｃ层 析初 步 鉴定 菌株 Ｂ ｓ Ｍ１ ２ ０ 。 Ｌ Ｙ ６的代 谢 产物 为糖 脂 类生 物表 面 活性剂 。 关 键词 生物表 面活性 剂 ： 生 茵株 ； 离 ； 定 产 分 鉴 中图分 类号 Ｔ ４ ３ Ｑ ３ 文献 标 识码 Ａ Ｑ ２ ： ９６ 文章 编 号 １０ — ７ ９ ２ １ ） ５ ０ １ 一 ２ ０ ７ ５ ３ （０ １ １ — ｏ ９ ｏ
Ｉ ｏ ａ ｉ ｎ ａ ｄ Ｉ ｅ ｔ ｉａ ｏ ｆ Ｂｉ ｓ ｒ ａ ｔ ｎ ｏ ｕ ｉ ｇ Ｓ ｒ ｉ ｓ ｌ ｔｏ ｎ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔ ｎ ｏ ｏ ｕ ｆ ｃ ａ ｔ Ｐｒ ｄ ｃｎ ｔ ａｎ ＢＹＳ ｆ ｉ ６
表面活性剂的活性提取(论文写作课)
基金项目：安徽省自然科学基金资助项目（10000007）作者简介：张慧娟（1988－）,女,安徽合肥人,合肥工业大学硕士生；惠爱玲（1978－）,女,安徽合肥人,博士,合肥工业大学教授,硕士生导师生物表面活性剂的活性提取张慧娟 惠爱玲（合肥工业大学农 产品生物化工教育部工程研究中心 合肥 230009）摘 要：生物表面活性剂是一类由微生物产生的具有表面活性的物质，与化学表面活性剂相比，具有无二次污染、环境友好等显著优点。
生物表面活性剂在医药、农业、石油开采、环境修复等方面的应用潜力，已引起人们的广泛关注。
本文对生物表面活性剂的提取方法及近年来生物表面活性剂的研究进展进行了总结，并对未来的发展方向作了展望。
关键词：生物表面活性剂；提取；前景The Isolation of BiosurfactantsZHANG Hui-juan ，HUI Ai-ling(Engineering Research Center of Bio-process in Ministry of Education , Hefei University of Technology, Hefei23009，China)Abstract ：Biosurfactants are natural surface-active compounds mainly synthesized by microorganisms, which have distinct advantages like no secondly pollution and friendly to environment compared with chemical surfactants. With the development of modern biological technology, biosurfactants have been shown a variety of potential applications, including medicine, agriculture, oil production and environmental remediation, so it has already caused many researchers a strong interest in the production of biosurfactants making use of biological technology. A review is made from the isolation of biosurfactants. In addition, on the foundation of the analysis,several suggestions about the development of biosurfactants are proposed. Key words ： Biosurfactant ；Isolation ；1 生物表面活性剂 表面活性剂是一类重要的化工原料, 素有工业味精之称, 它在石油工业、环境工程、食品工业、精细化工等许多领域中占有特殊和重要的地位[1]。
生物表面活性剂的分离提纯及其应用前景
生物表面活性剂的制备、提纯及其应用摘要：生物表面活性剂是由微生物产生的天然产物，具有表面活性高、对环境无污染、生物可降解性及良好的抑菌作用等优于化学合成的表面活性剂的独特性质。
本文对生物表面活性剂的合成方法进行了介绍，对生物表面活性剂在石油工业、环境工业、医药、食品、农业和化妆品工业等领域的应用进行了总结，展望了生物表面活性剂的良好应用前景。
关键词：生物表面活性剂制备提纯应用生物表面活性剂主要是由微生物在好氧或厌氧条件下在碳源培养基中生长时产生的。
这些碳源可以是碳水化合物、烃类、油、脂肪或者是它们的混合物。
生物表面活性剂可分为非离子型和阴离子型, 阳离子型较为少见。
像其它表面活性物质一样, 生物表面活性剂由一个或多个亲水性和憎水性基团组成, 亲水基可以是酯、羟基、磷酸盐、或羧酸盐基团、或者是糖基, 憎水基可以是蛋白质或者是含有憎水性支链的缩氨酸。
根据生物表面活性剂的结构特点, 可将其分为5 类:糖脂、脂肽、多糖蛋白质络合物、磷脂和脂肪酸或中性脂。
和传统的化学合成的表面活性剂相比, 生物表面活性剂有许多明显的优势:(1)更强的表面和界面活性;(2)对热的稳定性;(3)对离子强度的稳定性;(4)生物可降解性;(5) 破乳性。
由于这些显著特点, 使生物表面活性剂在一些方面可以逐渐代替化学合成的表面活性剂, 而且应用也越来越广泛。
1 生物表面活性剂的性质、分类及制备1. 1 生物表面活性剂的特性生物表面活性剂分子结构包含极性基团和非极性基团，是一种具有亲水、疏水两性特点的生物大分子化合物。
生物表面活性剂分子的亲水基和疏水基可以由不同的分子成分组成。
生物表面活性剂与其他表面活性剂比较，主要特性就是无毒性、稳定性好、耐酸耐盐性好、可以被生物降解、对环境无污染及抗菌性。
1. 2 生物表面活性剂的分类生物表面活性剂根据其化学结构的不同，可以分为酰基缩氨酸系、糖脂系、磷脂系、高分子聚合物和脂肪酸系表面活性剂五类，如表1 所示。
产生生物表面活性剂相关菌的分离及鉴定
关 键 词 ：生 物 表 面 活 性 剂 ；铅 ；生 物 有 效 态 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １ ０ － １ ６ ２ ０ ） １０ ３ —４ ０ ２３ ８ （ ０ ８ ０ －０ ４０
中 图 分 类 号 ：Ｓ ５ ． １４ ３
Ｉ ｏ ａ ｉ ｎ ａ ａ ａ ｔ ｒ ｚ ｔｏ ｏ ｏ’ｕ ｆ ｃ ａ ｔ ｐ ｏ ｕ ｉ ｃ ｅ ｉ ｓ ｌ ｔｏ ｎｄ Ｃｈ ｒ ｃ ｅ ｉ ａ ｉ ｆＢｉ 。 ｒ ａ ｔ ｎ － ｒ ｄ ｃ ｎｇ Ｂａ ｔ ｒ ａ ｓ ’
摘
要 ：对 北 京 东 三 岔 矿 区农 田土 壤 基 本 理 化 性 质 、重 金 属 含 量 和 可 培 养 微 生 物 数 量 进 行 调 查 ，并 筛 选 出 ６株
生 物 表 面 活 性 剂 产 生 菌 。结 果 表 明 ：该 矿 区 农 田土 壤 主 要 重 金 属 污 染 物 为 镉 和 铅 ，微 生 物 种 群 受 到 明 显 抑 制 ，
Ｎｅ Ｔｅ ｈ ｏｏ ｙｉ ｒｃ ｌｕ ａ ｐｉａ ｉｎ，Ｂｅ ｉｇ Ｕｎｖ ｒｉ ｆ ｒｃ ｌｕ ｅ ｗ ｃ ｎ ｌｇ ｎ Ａｇ ｉｕｔ ｒｌＡｐ ｌ ｔｏ ｃ ｉｎ ｉｅｓｔ ｏ ｊ ｙ Ａｇ ｉｕｔｒ ，Ｂｅ ｉｇ １ ２ ０ ｉｎ ０ ２ ６，Ｃｈｎ ） ｊ ｉａ
脂肽类生物表面活性剂生产的研究_李媛
2.MedicalCollege, QingdaoUniversity, Qingdao266071, China)
Abstract:Cycliclipopeptideisakindofbiosurfactantsynthesized bymicroorganisms, whichiscomposedwith hydrophilicpeptide chain and hydrophobic fatty acid moieties. In addition to the classicalapplication as surfactant, they also have antibacterial, antifungal, antiviraland antitumoractivitybecause theyhave unique chemicalform and bola-amphiphle structure, which show wide application perspective. Thispapermainly reviewedthestrain, fermentationandproduction, andapplicationofthecycliclipopeptide. Keywords:lipopeptide;strain;fermentation;applicationperspective 中图分类号 :TS202.23 文献标识码 :A 文 章 编 号 :1002-0306(2008)011-0296-04
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进行废物资源化的研究。
开发出可被生物表面活性剂生产菌利用的有机废 物培养基,结合菌种的筛选与优化, 建立 利用当代基因 工程技术, 进行优良基因的组合, 改造出 高 开发出简单、高效的生物表面活性剂分 离、提取技术, 并使其产业化, 降低生产 成本。
如： ① 生物表面活性剂是水溶性还是非水溶 性； ② 阴离子还是非离子； ③ 是胞外结合于细胞壁或是游离于细胞 外还是胞内结合物质 ④ 生物表面活性剂的用途。
如果是用于石油等重工业可直接用粗提
取的发酵液； 但如果是作为乳化剂、保湿剂、起泡剂 等应用于食品和医药行业则对产品纯度 有较高要求，则需要精细提取。
如，用甲基---叔丁基醚萃取 Rhodococcus（红球菌属）产生的生物表面活 性剂, 。甲基——叔丁基醚具有低毒、可 生物降解、易回收、不易燃及不易爆炸 等优良特性。因此, 对于大规模的生物 表面活性剂生产也是良好的萃取剂。
4、超滤
超滤是在压力的作用下让不易过滤的样 品通过膜。这种方法速度快、回收率高。
2 泡沫分离
产生气泡在微生物发酵过程中是不可避 免的，特别是丝状菌生长及芽胞破裂蛋 白、脂类等内容物溢出等发酵过程中， 及产生表面活性剂的过程中尤为显著。
泡沫分离是根据吸附的原理，向含表面 活性物质的液体中鼓泡，使液体内的表 面活性物质聚集在气液界面（气泡的表 面）上，在液体主体上方形成泡沫层， 将泡沫层和液相主体分开，就可以达到 浓缩表面活性物质（在泡沫层）和净化 液相主体的目的。
如，用分子量截止值( MWCO) 为30, 000D 的超滤膜对Bacillus licheniformis（地衣芽孢 杆菌）的变异体产生的生物表面活性剂进行 了提取分析, 同时还使超滤和高效液相色 谱相结合, 可设计一套对生物表面活性剂 的提取、分析方法。
由于生物表面活性剂在临界胶束浓度 ( CMC) 以上时形成微胶束, 使得超滤膜 截取的分子量比生物表面活性剂的分子 量大两个数量级, 而向培养液中加入一 定量的甲醇, 胶束就会分散, 生物表面活 性剂就会通过滤膜。
1 结晶与沉淀
结晶与沉淀是表面活性荆的经典提取方 法之一，利用样品组分中各组份在溶剂 中的溶解度差异，使某些组分从溶液中 生成结晶分离出来。
1 结晶与沉淀
有的糖脂可用盐酸或硫酸将上清液酸化 pH值为2.0-3.0，然后离心分离得到类 蛋白化合物。 如某些菌生产的蛋白质乳化剂均可以由 在上清液中加(NH4)2SO4 沉淀得到。 另外由枯草芽抱杆菌产生的表面活性剂， 可通过将其上清液的pH值调到2后，在 4℃中形成沉淀。
这样让原培养液、超滤滤液、及在培养 液中加入甲醇后的超滤滤液分别通过高 效液相色谱, 得到3 张色谱图。
在原培养液色谱图中出现的峰, 如在滤 液的色谱中消失, 而在加入甲醇的滤液 的色谱图中又出现, 则可证明这个峰是 生物表面活性剂的峰。
而那些只在培养液的色谱图中出现的峰 就不是生物表面活性剂的峰。这种方法 可以排除生物大分子( 如蛋白质等) 的干 扰, 因为生物大分子在甲醇的作用下不 会裂解。
在发酵罐搅动过时，发酵液中的气体由 于表面活性剂的存在使溶液表面张力、 自由能减少，从而使气泡稳定存在。 泡沫分离技术使泡沫分离和发酵过程相 结合, 建立了连续的生产过程。
3、萃取
溶剂萃取是一种常用的提取方法,常用 的有机溶剂有甲醇、乙醇、戊烷、丙酮、 氯仿、二氯甲烷, 这些溶剂既可以单独 使用, 也可以混合使用。
提取的优化
生物表面活性剂潜在的应用领域不断被 拓宽, 但它能不能成功地应用取决于生 物表面活性剂能不能以经济的生产费用 大规模地生产。
培养基的优化研究。
对于特定的生产菌株, 建立各种营养因素( C、 N、 P 等) 及底物的增加和产量及生产费用之间的 关系模 型, 从而确定最经济的培养条件。
生物表面活性剂的分离提取
高娜娜 2014220417
生物表面活性剂
是由微生物产生的具有高表面活性剂 的生物分子。相对于传统的表面活性剂， 其具有较高的表面和界面活性，且具有 选择性好，用量少，无污染等性质。
现研究的生物表面活性剂主要由微生 物以碳水化合物、烃类、脂类等物质为 碳源在培养基中生长时产生的活性物质。
生物表面活性剂其主要可分为非离子型 和阴离子型；
由一个或多个亲水性和憎水性基团组成。 亲水基可以是糖类、羟基、磷酸盐或磷 酸盐基团等， 憎水基可以是蛋白或含憎水性支链的缩 氨酸。
根据其结构可分为：糖脂、脂肽、磷脂 或脂肪酸、多糖蛋白络合物等。
生物表面活性剂的分离提取
分离应该要根据待分离物质的性质而定