高效液相色谱仪期间核查记录
高效液相色谱仪期间核查规程
高效液相色谱仪期间核查规程1 目的保证高效液相色谱仪计量的准确度。
2 范围适用于高效液相色谱仪的期间核查。
3 期间核查项目和技术要求3.1. 泵流量设定值误差应Ss≤±2%；流量稳定性误差应SR≤±2%。
3.2. 定性测量重复性误差(5次定量环进样)应RSD≤1.5%。
3.3. 定量测量重复性误差(5次定量环进样)应RSD≤1.5%。
4 核查步骤4.1. 泵流量设定值误差Ss，流量稳定性误差SR的核查。
4.1.1. 仪器与用具分析天平，万分之一，秒表，精度0.01秒，10ml容量瓶。
4.1.2. 操作程序4.1.2.1. 将泵、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相。
4.1.2.2. 按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先精密称定过重量的容量瓶收集流动相，同时用秒表记录，准确收集10～25分钟，再精密称定其重量。
收集时间应符合下表规定，每个设定值重复测定3次。
4.1.3. 结果计算按下列公式计算SS和SR：Fm=（W2-W1）/（P.t）SS=（Fm-FS）/FS×100%SR=(Fmax-Fmin)/F×100%W2为容量瓶+流动相的重量(g)W1为容量瓶的重量P为实验条件下的流动相密度(g/cm3)t为收集流动相的时间(min)PFm流量实测值(ml/min)FS流量设定值Fmin同一组测量中流量最小值Fmax同一组测量中流量最大值F为同一组测量中流量的算术平均值4.1.4. 结果判断：SS和SR值应符合下表规定流量设定值(ml/min) 1.0测量次数 3收集流动相时间(min) 5允许误差 SS 2%SR 2%4.1.5. 注意事项:收集时间应将“秒”换算为“分”代入公式计算。
4.2. 定性、定量测量重复性试验4.2.1. 色谱条件色谱柱：C18流动相：乙腈：水（55：45）流速：1ml/min波长：350nm进样量：20ul（定量环或是自动进样）4.2.2.操作程序将仪器连接好，使之处于正常的工作状态，待基线稳定后，用进样阀的定量环注入20ul，浓度为1ug/ml左右的甲醛衍生物溶液或稳定的待分析样品溶液，连续进样5次，记录甲醛的峰保留时间和峰面积。
高效液相色谱-质谱联用期间核查操作规程
高效液相色谱-质谱联用仪期间核查操作规程1 目的为了确保高效液相色谱-质谱联用仪检测性能在仪器两次检定期间内处于正常状态，对仪器设备进行期间核查，以确保检测结果的准确性和有效性。
2 范围适用于高效液相色谱-质谱联用仪的期间核查。
3核查项目检测器：分辨力、信噪比、峰面积重复性、保留时间重复性。
4 核查依据JJF 1317-2011 液相色谱-质谱联用仪校准规范、液相色谱-质谱联用仪操作指导书。
5 核查方法5.1 测定条件：温度：15～30℃，相对湿度20～80%。
仪器室不得有明显的机械振动,无电磁干扰。
标准物质：利血平溶液标准物质，相对扩展不确定度由于5%（k=2）移液器或移液管：量程范围100uL或200uL，B级或以上；容量瓶：10mL或25mL，B级或以上。
5.2 分辨力将仪器运行稳定后，根据仪器说明书的推荐条件设置参数，将扫描范围设为606~612,直接注入，注入5ng利血平，观察质谱图，记录m/z为609质谱峰，并计算其50%峰高处的缝宽，得到W1/2，作为分辨力的结果。
5.3 信噪比根据附录B设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
观察色谱图，记录其色谱峰峰高作为Hs。
同时记录信号峰后1min~3min时间内的基线输出信号的最大值与最小值之差，作为Hn。
根据公式计算信噪比S/N，连续测量6次，以6次测量S/N的平均值作为信噪比的结果。
S/N= Hs /Hn式中：Hs——为提取离子m/z的色谱峰峰高H n ——为基线噪声值信噪比测量条件表5.3 峰面积重复性与保留时间重复性：根据附录B 设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z 设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下述公式计算相对标准偏差RSD.RSD=1001)1/()(12⨯⨯--∑=x n x x ni i %6 评定标准6.1 三重四级杆串联质谱： 6.1.1 分辨力ESI+≤1u ；6.1.2 信噪比ESI+≥30:1；ESI-≥10:1；APCI+≥30:1 6.1.3 峰面积重现性≤10% 6.1.4 保留时间重复性≤1.5%； 7 核查周期在仪器设备两次检定之间，每六个月核查一次。
高效液相色谱仪期间核查操作规程
高效液相色谱仪期间核查操作规程文件编码：版本号：02目录一、目的 (1)二、适用范围 (1)三、内容 (1)四、附件 (5)五、变更历史 (5)一、目的为了使高效液相色谱仪保持良好的运行状态，企业内部定期对仪器进行校准；本规程规定了公司高效液相色谱仪期间核查的项目、方法及周期，使质量部校准小组有章可循。
二、适用范围本规程适用于公司高效液相色谱仪的期间核查工作。
三、内容1.制定依据1.1.《中国药典》2010年版二部1.2.《高效液相色谱法操作规程》（C08-0128）1.3.《液相色谱仪检定规程》（JJG705-2002）1.4.《药品生产验证指南》（国家食品药品监督管理局）2003年版2.通用技术要求2.1.仪器外观仪器上应有仪器的名称、型号、制造厂名、产品系列号等标牌。
2.2.仪器电路系统仪器电源线、信号线插接紧密，各开关、按键、旋钮等功能正常，指示灯灵敏，显示器正常。
3.计量器具控制3.1.校准条件3.1.1.环境条件a.校准室应清洁无尘、无易燃、易爆、腐蚀性气体，通风良好；b.室温在15-30℃，校准过程中温度变化不超过3℃（对示差折光检测器温度变化不超过2℃，室内湿度在10%-75%RH范围内；c.仪器应平稳放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好；d.电源电压为（220±22）V。
3.1.2.校准设备a.秒表：分度值不大于0.1s；b.分析天平：最大载荷应大于220g，最小分度值应小于0.01mg；c.容量瓶：10ml 9个。
以上计量器具需经检定合格3.1.3.标准物质1×10-4、1×10-7萘/甲醇溶液1×10-3丙三醇/水溶液大豆油对照品（中检所）4.校准项目、接受标准及周期（表1）5.期间核查方法5.1.外观检查按2.1、2.2条的要求，用目视、手动检查5.2.输液系统检查5.2.1.泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差S R检查按下表2的要求以纯化水为流动相，启动仪器，设定流量，待压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表2规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、式（2）、式（3）计算Ss和SRFm=(W2-W1)/ρr·t 式(1)S S =︱F-FS︱/FS× 100% 式(2)S R =(Fmax-Fmin) /F × 100% 式(3)式中: Fm:流量实测值，ml/min ;W2:容量瓶+流动相的质量，g;W1:容量瓶的质量，g;ρr:实验温度下流动相的密度，g/cm3 ;FS:流量设定值，ml/min;T:收集流动相的时间，min;Fmax:同一组测量中流量最大值，ml/min;Fmin:同一组测量中流量最小值，ml/min ;F: 同一组测量的算术平均值，ml/min；5.3.检测器5.3.1.紫外检测器、二极管阵列检测器a.基线噪声和基线漂移将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，柱温35℃，流速为1.0ml/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30分钟，计算基线漂移和噪声。
液相色谱仪期间核查方案
液相色谱仪期间核查方案1仪器设备：液相色谱仪2仪器型号：①waters ACQUITY UPLCTM 型超高效液相色谱仪（由TUV检测器、PDA检测器和EMPOWER 色谱工作站组成）；②北京东西电子LC5500型高效液相色谱仪（由TUV检测器和LC5500色谱工作站组成）.3 固定资产管理编号：02010204核查进行的时间：是计量检定周期（2年）内做三次核查；.5该方案适用于液相色谱仪的期间核查6核查方法：用标准物质(1×10-4 g/ml萘/甲醇溶液)进行整机的性能(定性,定量重复性)的检定将仪器各部分联结好,选用C18色谱柱,根据仪器配置的检测器,选择流动相和测量参数;紫外检测器和二极管阵列检测器用100%甲醇为流动相,流量为1.0ml/min,检测波长为254nm,基线稳定后由进样器注入10~20ul的1×10-4g/ml 萘/甲醇标准溶液;连续测量6次,记录色谱峰的保留时间和峰面积.计算相对标准偏差RSD.式中:RSD定性（定量）___________定性(定量)测量重复性相对标准偏差Xi_____________ 第i次测得的保留时间或峰面积;X_______________6次测量结果的算术平均值i_______________测量序号7 核查方法的要求定性测量重复性(六次测量)RSD6:不超过1.5%.定量测量重复性(六次测量)RSD6:不超过3.0%.8核查设施环境条件:环境条件１检定室应清洁无尘,无易燃，易爆和腐蚀性气体，排风良好。
２室温在15~30℃，检定过程中温度变化不超过3℃，室内湿度在20%-85%RH 范围内。
3 仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。
4电源电压为（220±20）V,频率为（50±0.5）Hz。
液相色谱仪期间核查实验方法-new
液相色谱仪期间核查实验方法A. 基线漂移的测定1. 紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器：选用C18色谱柱，以100％甲醇为流动相，流量为1.0mL/min ，检测器波长选在254nm ，检测灵敏度调到最高档。
开机预热，待仪器稳定后记录基线30min 。
基线漂移用1h 内基线偏离原点的值（AU/h ）表示。
2. 荧光检测器：选用C18色谱柱，以85％甲醇/水溶液为流动相，流量为1.0mL/min ，激发波长选在345nm ，发射波长选在455nm ，检测灵敏度调到最高档。
仪器预热稳定后，记录基线30min 。
用检测器自身的物理量（FU ）做单位表示。
3. 差示折光率检测器：选用C18色谱柱，以去离子水水溶液为流动相，流量为1.0mL/min ，参比池充满流动相，检测灵敏度调到最高档。
仪器预热稳定后，记录基线30min 。
用检测器自身的物理量（RIU ）做单位表示。
B. 最小检测浓度的测定根据检测器不同选择相应浓度的标准溶液:紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器：1×10-4g/mL ，1×10-7g/mL 的萘/甲醇溶液荧光检测器： 1×10-6g/mL ，1×10-9g/mL 的硫酸奎宁/高氯酸水溶液 差示折光率检测器：1×10-3g/mL ，1×10-5g/mL 的丙三醇/水溶液选用C18色谱柱，不同检测器按上述流动相设置，流量为1.0mL/min ，开机预热稳定后，用微量注射器从进样口注入一定量的标准溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算得最小检测浓度C L （按20uL 进样量计算）。
H 20cV N 2C d L式中：C L ——最小检测浓度，g/mL ；Nd ——基线噪声峰-峰高，mm ；C ——标准溶液浓度，g/mL ；H ——标准溶液得色谱峰高，mm ；V ——进样体积，uL 。
C. 定性（定量）重复性的测定将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数：紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器以100％甲醇为流动相，流量为1.0mL/min ，检测器波长选在254nm ，基线稳定后由进样器注入5-10μL 的1×10-4g/mL 的萘/甲醇溶液；荧光检测器以85％甲醇/水溶液为流动相，流量为1.0mL/min ，激发波长选在345nm ，发射波长选在455nm ，基线稳定后由进样器注入5-10μL 的1×10-6g/mL 的硫酸奎宁/高氯酸水溶液；差示折光率检测器以100%的水溶液为流动相，流量为1.0mL/min ，注入5-10μL 的1×10-3g/mL 的丙三醇/水溶液。
高效液相色谱仪期间核查记录表
核查பைடு நூலகம்
条件：色谱柱：C18；流动相：甲醇；流速：1mL/min;波长：254nm；进样量20丄
项目
规定值
测量值
定性重复性 测量
RSDW1.5%
峰保留时间
RSD
定量重复性 测量
RSDW1.5%
峰面积
RSD
核查人:
审核人:
液相色谱仪核查记录表
核查日期
环境温度/湿度
仪器名称型号
P仪器编号
核查项目
1.外观2.柱温箱温度3.基线噪声、基线漂移4.检测限5.定量重复性
核查依据
液相色谱仪期间核查规程
标准物质
外观：
泵流 量设 定值 误差
Ss、流量 稳定 性误 差Sr的核 查
流量设定值
瓶重
(g)
瓶+样
(g)
时间 (mi n)
流量实测值
(mL/min)
Ss
Sr
标准
结论
0.5mL/min
Ss<
±3%、
Sr<3%
1.0 mL/min
Ss<
±2%、
Sr<2%
1.5 mL/min
Ss<
±2%、
Sr<2%
注：p=0.7917(20C)、W1瓶重、W2瓶+样(g)、t:时间(min)、Fm:流量实测值(mL/min)、
Fm=(W%W1)/(p.t)、Ss=(Fm- Fs)/Fsx100%Sr=(Fmax—Fmin)/Fx100%
基线漂移和 基线噪声的
核查
条件：色谱柱：C18;流动相：甲醇；流速：1mL/min;波长：254nm
最新液相色谱仪期间核查作业指导书资料
1目的对高效液相色谱仪运行情况进行检查，保证其正常使用，确保检验数据准确可靠。
2范围适用于本公司高效液相色谱仪在两次检定之间或修理后的运行检查。
3职责3.1检测中心液相主要使用人负责液相色谱仪期间核查的准备工作、操作及记录。
3.2检测中心设备管理员负责统筹安排及记录归档。
4计量性能要求4.1 输液系统泵流动稳定性应符合表1的要求。
表1 泵流量稳定性S的指标要求仪器的检测器的主要技术指标见表2。
表2 液相色谱仪检测器的主要技术指标4.3 整机性能仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表3。
表3 液相色谱仪整机性能指标要求5 通用技术要求5.1 仪器外观仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出产日期等内容的标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证标志。
5.2 仪器电路系统仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。
6 计量器具控制计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。
6.1 核查条件6.1.1 环境条件6.1.1.1 核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。
6.1.1.2 室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃（对示差折光率检测器，室温变化不超过2℃），室内相对湿度20%—85%。
6.1.1.3 仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。
6.1.1.4 电源电压为（220±22）V，频率为（50±0.5）Hz。
6.1.2 核查设备6.1.2.1 秒表：最小分度值不大于0.1s。
6.1.2.2 分析天平：最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。
6.1.2.3 数字温度计：测量范围为（0—100）℃，最大允许误差为±0.3℃。
以上器具需经计量检定合格。
6.1.3 其他要求6.1.3.1 核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯的丙酮和异丙醇，紫外分光光度计，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml，甲醇中胆固醇溶液200μg/ml和500μg/ml 和胆固醇等。
Waters2695高效液相色谱仪的期间核查_王安琪
科技论坛任何测量设备/仪器，由于材料的不稳定、或元器件的老化、或使用中的磨损、或使用与保存环境的变化等原因，都可能导致其计量性能的变化。
在校准间隔期内，由上述各影响源引起的测量设备计量性能变化，既可能是相互叠加的，也可能是相互抵消的，或还与各影响源对测量设备影响的权重相关。
因此，其变化是多种多样比较复杂的。
则需要进行一定的检查来确保设备/仪器的准确度。
高效液相色谱仪是精密仪器，仪器的部件老化磨损以及长时间使用都会对仪器造成影响，仪器测定数据的不准确，使之结果不可信。
并且为了解仪器状态，维护仪器设备在两次校准期间校准状态的可信度，减少由于仪器稳定性变化造成的结果偏差，对在用的主要仪器设备进行运行检查和在两次检定（校准）之间进行核查，以保证检测仪器设备及相关检测结果的准确性和可靠性。
则我们需对其定期做期间核查，来确保仪器在实验过程中不会成为影响数据结果准确可行的障碍。
我们以Waters2695高效液相色谱仪为例来谈一谈高效液相色谱仪的期间核查。
首先我们需要检查Waters2695高效液相色谱仪的外观，仪器的外观应完整，无破损，应具有铭牌，并注有仪器名称、型号、编号、制造厂商等，并有仪器的状态标识牌。
仪器的各调节按钮、按键、开关、指示灯、显示屏均应工作正常。
仪器的管路及连接接口应无漏液现象。
仪器的外观检查主要是保证仪器的完好，并且是否符合检定标准。
其次我们需要检查Waters2695高效液相色谱仪的工作环境，仪器工作环境温度应控制在10～30℃，相对湿度应为40%～70%。
仪器摆放的室内不得存放与实验无关的易燃、易爆和强腐蚀的物质。
仪器的周围不得有强烈的机械振动和电磁干扰。
如果实验室的温湿度不合格，亦或是存在易燃易爆，亦或是有对仪器进行干扰的物质存在，都会对仪器本身造成损坏，并且影响期间核查及平时检验的结果。
最后我们需要进行Waters2695高效液相色谱仪性能检查，在进行性能检查时，需将仪器按操作要求开机，并待机器运行稳定30min 后，再进行以下实验：１柱温箱Waters2695高效液相色谱仪拥有可自动控温的柱温箱，我们需要检查柱温箱的控温功能是否达到仪器的设定。
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条件：色谱柱：C18；流动相：甲醇；流速：1mL/min;波长：254nm
项目
规定值
测定值
基线漂移
≤5×10－3AU/h
基线噪声
≤5×10－4AU
检出限的核查
条件：色谱柱：C18；流动相：甲醇；流速：1mL/min;波长：254nm；进样量20µL
测定值g/mL
注：C1=2×Nd×C/H；C1最小检测浓度；Nd基线噪声峰-峰高；C标准溶液浓度；H标准溶液色谱峰高；C1≤1×10－7g/mL
液相色谱仪核查记录表
核查日期
环境温度/湿度
仪器名称型号
仪器编号
核查项目
1.外观2.柱温箱温度3.基线噪声、基线漂移4.检测限5.定量重复性
核查依据
液相色谱仪期间核查规程
标准物质
泵流量设定值误差Ｓｓ、流量稳定性误差SR的核查
流量设定值
瓶重（g）
瓶＋样（g）
时间（min）
流量实测值（mL/min）
Ｓｓ
SR
标准
结论
0.5mL/min
Ｓｓ≤±3%、SR≤3%
1.0 mL/min
Ｓｓ≤±2%、SR≤2%
1.5 mL/min
Ｓｓ≤±2%、SR≤2%
注：ρ=0.7917（20℃）、W1：瓶重、W2：瓶＋样（g）、t:时间（min）、Fm:流量实测值（mL/min）、Fm=(W2－W1)/(ρ.t)、Ss=（Fm－Fs）/Fs×100%、Sr=(Fmax－Fmin)/F×100%
定性、定量测量重复性核查
条件：色谱柱：C18；流动相：甲醇；流速：1mL/min;波长：254nm；进样量20µL
项目
规定值
测量值
定性重复性测量
RSD≤1.5%
峰保留时间
RSD
定量重复性测量
RSபைடு நூலகம்≤1.5%
峰面积
RSD