氯仿甲醇法提取
磷脂脂肪酸plfa测定方法
磷脂脂肪酸（PLFA）是一种生物标志物，可以用于指示土壤微生物群落的结构和功能。
PLFA 测定方法通常包括以下步骤：
1. 样品采集：采集土壤样品，并将其保存在适当的条件下。
2. 提取：使用适当的有机溶剂（如氯仿、甲醇等）从土壤样品中提取磷脂脂肪酸。
3. 净化：使用硅胶柱或其他适当的方法对提取物进行净化，以去除杂质。
4. 分离：使用气相色谱或液相色谱等技术对磷脂脂肪酸进行分离。
5. 鉴定：使用质谱或其他适当的技术对分离出的磷脂脂肪酸进行鉴定。
6. 数据分析：对鉴定出的磷脂脂肪酸进行数据分析，以确定土壤微生物群落的结构和功能。
需要注意的是，PLFA 测定方法的具体步骤可能因不同的实验条件和设备而有所不同。
因此，在进行 PLFA 测定之前，需要仔细阅读相关的实验手册和文献，并根据实际情况进行适当的调整。
食品分析技术2
无氮抽出物：是指不包括粗纤维在内的总碳水化合物，主要是指淀粉、糖原和糊等。
总碳水化合物（%）=100-（水分%+粗蛋白质%+粗灰分%+粗脂肪%）
无氮抽出物（%）=总carb-粗纤维%=100-（水分+粗蛋白质+粗灰分+粗脂肪+粗纤维%
4、滴定，将馏液加热到60—65℃以酚酞作指示剂，用0.1N NaOH测定至微红 色，于30秒内不裉色为终点。为了准确，须作空白试验。（蒸馏瓶中加入蒸 馏水50ml，相同条件下蒸馏）
5、计算：x(%)=(V1-V2)*N*0.06/W *100 X——挥发酸含量 N——NaOH当量浓度 0.06——醋酸的毫克当量
（三）、碱性乙醚提取法：
又称罗斯（罗兹）—哥特里氏法（Rose-Gottlieb method),准确度
高，适用范围广，是乳与乳制品中脂利用氨水—乙醇溶液溶解非脂成分（如pro，氨水使酪蛋 白钙盐变成可溶解的盐，乙醇使溶解于氨水的pro沉淀析出 ），使脂 肪游离出来，用乙醚提取脂肪。
特点：氯仿—甲醇溶剂的提取效率最高，试剂温和。
（五）、牛乳脂肪测定仪：
乳脂率测定仪
牛乳成分分析仪
第八章 碳水化合物的测定
碳水化合物在植物界分布很广，种类很多，谷类食物和水果、蔬菜的主要组分就是carb， （合理膳食组成中，碳水化合物应占其总热能的50—70%。但不大于70%，其中食糖的 热能不能超过15%）
四、测定方法：索氏提取法、直滴或抽提法、脂肪自动测定仪法（特卡托 （Tecator)脂肪自动测定仪）
（一）索氏提取法：经典方法（主要提取游离脂肪酸）
1、原理：将经过预处理的样品用无水乙醚或石油醚回流提取，使样品的脂肪 进入溶剂中，蒸去溶剂后所得到的残留物即为脂肪（粗脂肪）本法提取的脂 溶性物质为脂肪及脂物质的混合物（除含有脂肪外，还含有磷脂、色素、树 脂、固醇、芳香油等醚溶性物质），因此称为粗脂肪。
中药化学成分预实验实验报告
中药化学成分预实验实验报告
一、实验目的
通过对中药化学成分的预实验，初步了解中药中所含有的化学成分，为后续的分离和鉴定工作提供依据。
二、实验材料
1. 中药样品（例如：丹参、黄连、甘草等）
2. 实验试剂：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、氯仿等
3. 实验仪器：索氏提取器、薄层色谱板、紫外灯、试管、滴管等
三、实验步骤与观察
1. 索氏提取法：采用索氏提取器，以乙醇作为溶剂，提取中药样品中的脂溶性成分。
观察提取液的颜色和质地，记录提取液中可能存在的成分。
2. 溶剂萃取法：将中药样品分别用石油醚、乙酸乙酯、氯仿进行萃取，观察不同溶剂萃取后得到的萃取液的颜色和质地，初步判断各萃取液中所含有的化学成分。
3. 薄层色谱法：将中药样品进行薄层色谱分离，在紫外灯下观察斑点的颜色和位置，初步确定样品中可能存在的化合物。
四、实验结果与讨论
根据实验观察和记录，初步确定中药样品中可能含有的化学成分。
例如，丹参可能含有丹参酮类化合物，黄连可能含有小檗碱类化合物，甘草可能含有甘草甜素等。
讨论这些成分的生理活性及其在中药中的作用。
五、实验结论
通过本次预实验，初步了解了中药中所含有的化学成分，为后续的分离和鉴定工作提供了依据。
在实验过程中，应进一步优化实验条件和方法，提高分离和鉴定的准确性和可靠性。
食品分析与检测试题及答案
食品分析与检测试题及答案一、填空题(计 30 分，每小题 2 分)1、采样遵循的原则是( ) 。
2、肉制品新鲜度常用检验方法有( ) 、( ) 、( ) 、( ) 。
3、采样一般分三个步骤进行，分别得到的样品为( ) 。
4、分析柑橘类果实及其制品时，用( ) 酸表示， K=0.064， K 是换算为主要酸的系数，即指( ) 。
5、用工业酒精配制白酒的鉴别主要检测对象是( ) 。
6、已知测定蔗糖溶液的糖锤度为 35.8oBx，则该糖液的重量百分浓度为( ) 。
7、食品分析的方法有哪些( )？8、对于颜色深的食品，测定其酸度的方法有( ) 。
9、对于含磷脂较多的鱼、贝、肉、蛋等，测定其脂肪含量可采用的方法是( ) 。
10 、测定痕量水分的食品中的水分含量的方法是( ) 。
11、在测定磷酸盐含量比较高的食品的灰分时，为了使灰化完全，可采取的措施有( ) 。
12、食品中的总酸度是指( ) 。
13、食品感官分析按照应用目的可分为( )按照方法的性质可分为( ) 。
14、食品分析的一般程序为( ) 。
15、快速测定蛋白质的方法名称有( ) 。
二、是非题(计 10 分，每小题 1 分)1 、测定所有食品中的脂肪含量时都可以用索氏抽提法。
( )2、在测定冰淇淋膨胀率时，加入乙醚的体积为 2.0ml，滴加蒸馏水的体积为 22.0ml，则冰淇淋膨胀率为 92.3% 。
( )3 、测定脂溶性维生素一般在酸性条件下进行前处理。
( ) 4、测定食品中的钾、钠含量时，可用原子发射光谱法测定。
( ) 5 、有效酸度是指食品中所有酸性成分的总量。
( )6 、测定含磷脂的结合态脂类的样品中的脂肪含量用巴布科克法。
( )7 、用高效液相色谱法测定食品中的糖精时，根据色谱图以保留时间定性，以峰高、峰面积定量。
( )8 、用原子吸收分光光度法可以测定矿物元素的含量。
( )9、VB2 在一定条件下，产生荧光，在 525nm 波长下可以测定其荧光值，从而可以在 525nm 波长下测定食品中 VB2 的含量。
实验3卵磷脂的提取和鉴定
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从组织或细胞中提取卵磷脂。
在提取过程中，卵磷脂会从组织 或细胞中释放出来，并溶解在有
机溶剂中。
通过离心和过滤等操作，去除杂 质和其他磷脂成分，得到纯度较
高的卵磷脂。
卵磷脂的鉴定方法
薄层色谱法
将提取的卵磷脂点样在薄层板上，用 适宜的展开剂展开，然后通过显色反 应（如喷洒硫酸氢钠、高锰酸钾等） 进行鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和作用
生理功能
卵磷脂是生物膜的主要成分，具有保 护细胞膜、促进脂质代谢、降低血脂 等作用，对维持人体正常生理功能至 关重要。
作用
卵磷脂在人体内具有重要的生理作用 ，如促进大脑发育、提高记忆力和智 力水平、抗疲劳等，同时还有抗氧化 、抗衰老的作用。
探究不同提取条件对卵磷脂提取效果的影响
步骤6
通过显微镜观察卵磷脂的形态和结构，并使用色谱柱进 行进一步分析。
04 实验结果与分析
卵磷脂提取效果的测定
01
02
03
卵磷脂含量
通过测定提取液中卵磷脂 的含量，可以评估卵磷脂 的提取效果。
提取率
提取率是卵磷脂实际提取 量与理论提取量的比值， 反映了提取效率。
纯度
通过色谱分析等方法测定 卵磷脂中的杂质含量，以 评估卵磷脂的纯度。
结果分析与讨论
提取效率分析
实验结果显示，使用离心分离技术能 够有效地去除杂质，提高卵磷脂的纯 度。但提取效率较低，可能是由于有 机溶剂用量较大或提取时间较长所致。
鉴定方法比较
红外光谱和质谱分析均能准确鉴定卵 磷脂的主要成分，但质谱分析具有更 高的灵敏度和特异性，能够更准确地 鉴定卵磷脂中的微量成分。
提取脂质的几种方法
Folch法提取脂质
1.组织称重。
2.剪碎组织，按照1g组织加入20ml溶剂比例加入氯仿和甲醇（2:1）
混合溶液。
混匀15-20min后1500-2000r/min离心5min收集溶液。
3.溶液加入0.2体积的水（20ml溶液加4ml水）或0.9%NaCl溶液清
洗，涡旋几秒钟，以2000rpm离心10min得到两相液面。
吸取上清液，用于分析检测神经节苷脂类或小的极性分子。
如果有必要（为移除标记分子），用甲醇和水（1:1）清洗两相液交界面1至2次，注意不要冲洗到下层液体内。
4.收集的下层液即氯仿层含有脂质，用N2吹干氯仿即得脂质。
文献采用正相液相色谱法和大气压化学电离质谱分析测定神经酰胺时说按Folch法，以氯仿和甲醇（2:1,1:1,1:2）三个不同比例来提取脂质，每种混合溶液提取2小时。
Bligh和Dyer的方法（也是我们之前用的方法）
1.皮肤组织称重,胰酶37℃消化1h，用镊子分离表皮和真皮，弃去
真皮。
2.剪碎表皮组织，加入
3.75ml氯仿和甲醇（1:2）混合溶液。
匀浆
15min。
加氯仿1.25ml，混匀30s。
再加水1.25ml，混匀30s。
3.1500r/min离心15min，吸取下层氯仿层，收集在棕色小瓶中，N2
挥干溶剂，即得总脂质。
注：
本次试验Forch法取两只正常组的雌雄鼠制备两个样，B&D法也是取两只正常组的雌雄鼠制备两个样。
预先准备好需要的溶剂、移液管、棕色小瓶和离心管（离心管最好用玻璃的）。
脂类测定
心机中，离心5min(1000r/min)，取出后向瓶中
加60℃热水至分离的脂肪层在瓶颈部刻度处，再
用同样的转速旋转2min，取出置60℃水浴中保温
5min，取出，立即读数。所得数值即为脂肪的
百分数。
(四)说明与注意
1）硫酸的浓度要严格遵守规定的要求，如过浓会使乳炭 化成黑色溶液不易读数；过稀则不能使酪蛋白完全溶解， 会使测定值偏低或使脂肪层浑浊。 2）硫酸除可破坏脂肪球膜，使脂肪游离出来外，还可增 加液体相对密度，使脂肪容易浮出。 3）加热和离心的目的是促使脂肪离析。 4）罗兹—哥特里和巴布科克法和盖勃法都是测定乳脂肪 的标准分析方法。对比研究表明，前者的准确度较后者 高，后两者中巴布科克法的准确度比盖勃法的少高点， 两者差异显著。
溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测
定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干
时也有引起爆炸的危险。
④乙醚中过氧化物的检查方法：
A.取6ml 乙醚，加2ml 10%的碘化钾溶液，用 力振摇，放置1分钟，若出现黄色，则证明有过氧 化物存在。 B.乙醚＋少量Fe2++少量kCNS—红色现象生成， 则证明有过氧化物存在。 除过氧化物： 含过氧化物乙醚＋少量Feso4－－除去过氧化物 （蒸馏）
B.装样品的滤纸筒一定要严密，不能 往外漏样品，但不要包得太紧影响溶
剂渗透。
C.滤纸筒高度不要超过回流弯管
② 对含糖及糊精多的样品，要先以冷水使糖及糊 再一起放入抽提管中。
精溶解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干， ③ 抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无
过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水
三萜含量的测定方法
三萜的检测方法
1、实验原理：
食品中三萜类物质经氯仿萃取后在香草醛-浓硫酸的作用下，生成橙色物质，其颜色深浅与三萜含量成正比。
2、试剂与材料
香草醛、氯仿、甲醇、浓硫酸均为分析纯试剂；
硫酸溶液：在100ml量筒中取水28ml，加浓硫酸至100ml，按硫酸稀释方法，小心进行。
香草醛溶液：香草醛8g加甲醇溶解定溶至100ml。
3、标准物质
齐墩果酸SIGMA 纯度≥97％
4、仪器
水浴锅、分光光度计
5、绘制标准曲线：
标准溶液：精密量取齐墩果酸标准品10mg，以氯仿定溶至100ml。
标准曲线：吸取标准溶液0.0，0.10，0.20，0.50, 1.00，1.50ml加热挥去溶剂，加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。
取出后冰水放置15分钟,于1cm比色皿中，以标准液0.0管为参比调节零点,于波长550±2nm处测定吸光值，求直线回归方程。
6、样品处理
固体样品：精密吸取样品0.2000-0.5000g，加氯仿约25.0ml，超声1小时，
冷却后，用氯仿定溶25.0m1，过滤：滤液备用。
液体样品直接用氯仿萃取，取氯仿层备用。
7，测定
精密移取样品制备液0.1-1.0m1于玻璃试管中，加热挥发掉溶剂加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5.0ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。
于lcm色皿中，以试剂空白液为参比调节零点，于波长550±2nm处测定吸光值，按下列公式计算.
8、计算公式
cv1
W（%）= ————
mv2。
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氯仿/甲醇法提取
称取干燥、粉碎的南极磷虾置于匀浆机，按1:6(m/V)料液比分别加入氯仿/甲醇（2:1，V/V）、无水乙醇和正己烷于室温（25 ℃）搅拌浸提。
过滤后用少量提取溶剂冲洗滤渣，合并滤液。
采用无水乙醇和正己烷提取的滤液真空旋转蒸发，温度为40 ℃。
采用氯仿/甲醇法提取的滤液中要加入10%氯化钠溶液，振荡摇匀后静置过夜，溶液分层明显，收集下层氯仿层，通过无水硫酸钠脱水后移至旋蒸瓶，于40 ℃下真空旋转蒸发。
每100克新鲜或冷冻样品将组织在Waring Blendor中用混合物均化2分钟，100毫升氯仿和200毫升甲醇。
然后向混合物中加入100毫升氯仿和混合30秒后，加入100ml蒸馏水并继续混合30秒。
过滤匀浆。
通过在Coors No. 3布氏漏斗上的Whatman No.1滤纸轻微吸力。
过滤通常很快，当残留物变成时干燥，在烧杯底部施加压力，以确保最大限度地重新加入溶剂的混合物。
将滤液转移至500毫升量筒中，并且，在允许几分钟完全分离和澄清后，记录氯仿层的体积（至少150ml）和酒精通过抽吸去除图层。
少量氯仿层也是移除以确保完全移除顶层。
氯仿层含有纯化的脂质。
对于定量脂质提取，保留在组织残留物中的脂质是通过将残余物和滤纸与100ml氯仿混合来回收。
将混合物通过原始布氏漏斗和混合器过滤。
将罐和残余物用总共50ml氯仿冲洗。
这种滤液是在除去醇层之前与原始滤液混合。