实验室与基本操作(植物组织培养)
植物组织培养实验培训计划
植物组织培养实验培训计划一、实验目的1.了解植物组织培养的原理和方法；2.掌握基本的植物组织培养实验技能；3.培养学员对植物组织培养的实际操作能力。
二、实验内容1.实验前准备1.1 实验室安全知识1.2 培养基的制备1.3 实验器材的消毒与准备1.4 实验组织材料的获取与处理2.组织培养技术2.1 植物组织的消毒2.2 组织的分离与培养2.3 培养条件的控制2.4 培养时间与观察3.实验记录与分析3.1 实验过程的记录3.2 实验结果的分析3.3 实验总结与思考三、实验流程1.理论学习1.1 了解植物组织培养的原理和方法1.2 掌握实验所需的基本知识和技能1.3 学习植物组织培养实验的安全操作规程2.实验操作2.1 实验前准备2.1.1 学习实验室安全知识2.1.2 学习培养基的制备方法2.1.3 学习实验器材的消毒与准备方法2.1.4 学习实验组织材料的获取与处理方法2.2 组织培养技术的操作2.2.1 学习植物组织的消毒方法2.2.2 学习组织的分离与培养方法2.2.3 学习培养条件的控制方法2.2.4 学习培养时间与观察方法2.3 实验记录与分析2.3.1 学习实验过程的记录2.3.2 学习实验结果的分析2.3.3 学习实验总结与思考3.实验总结与讨论3.1 总结实验操作中的经验和教训3.2 讨论实验结果的意义和可能的应用3.3 提出改进实验方法的建议四、实验材料与器械1.实验所需的植物组织样品2.培养基的原料及制备所用器材3.培养条件控制器材4.消毒器械5.实验记录与分析所需的器材五、实验要点和注意事项1.实验室安全操作规程2.培养基的严格消毒3.操作过程中要保持操作台面和器械的清洁4.严格控制培养条件5.实验记录及结果分析的重要性六、实验评价1.实验中学员的实验技能和操作能力2.学员对实验内容的理解程度3.学员对实验结果的分析能力4.学员对实验总结的能力5.学员的安全意识和实验规范性七、实验师资力量1.实验指导老师2.实验助理3.实验技术员八、实验时间安排1.理论学习时间安排：1天2.实验操作时间安排：3天3.实验总结与讨论时间安排：半天九、实验配套设施1.实验室2.器械材料3.培养基配制室4.实验记录分析室十、实验经费预算1.实验材料和器械的购买费用2.实验室费用3.实验师资力量费用十一、实验效果评估1.对学员掌握的实验技能能力和理论知识的评价2.对实验结果的有效性和可行性的评价3.对实验过程中存在的问题和改进意见的总结以上是一份植物组织培养实验培训计划，该计划可根据实际情况进行调整和修改，以适应不同的培训需求。
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作1. 引言植物组织培养实验室是进行植物细胞培养、植物组织培养和植物遗传转化等研究工作的重要场所。
该实验室的组成仪器设备和基本操作对于顺利进行植物组织培养实验至关重要。
本文将详细介绍一个典型的植物组织培养实验室的组成仪器设备及其基本操作。
2. 仪器设备2.1. 无菌操作台无菌操作台是植物组织培养实验室中最关键的设备之一，用于保持操作区域的无菌条件。
它通常由一个工作台和一个无菌工作区组成。
无菌操作台配备了紫外线灯和高效过滤器，可以杀灭空气中的微生物，并防止外界空气中的微生物进入无菌工作区。
2.2. 培养箱培养箱是用于培养和生长植物组织的设备。
它可以提供恒温、恒湿和光照条件，从而满足不同植物组织培养实验的要求。
培养箱通常配备了温度控制器和湿度控制器，可以精确地控制环境参数。
2.3. 培养基配制设备在植物组织培养实验中，需要制备不同种类的培养基用于培养和生长植物组织。
培养基配制设备包括天平、培养基配制器和pH计。
天平用于精确称量各种培养基成分的质量，培养基配制器用于自动配制培养基，pH计用于测量培养基的酸碱度。
2.4. 高压灭菌器高压灭菌器用于对实验室的培养器具、培养基和试剂进行高温高压的灭菌处理。
灭菌是植物组织培养实验的基本操作之一，可以有效杀灭培养器具和培养基中的微生物，保证实验的无菌性。
2.5. 显微镜显微镜是用于观察和分析植物组织培养过程中的细胞和组织结构的设备。
它可以放大样本，使研究人员能够观察细胞中的微小结构。
显微镜通常配备了不同倍数的物镜和目镜，以满足不同观察需求。
2.6. 高速离心机高速离心机用于分离植物组织培养中的混合物。
在植物组织培养实验中，常常需要将悬浮细胞和培养基分离以获得纯净的细胞。
高速离心机通过离心力将混合物中的悬浮细胞沉降到管底，从而实现分离的目的。
3. 基本操作3.1. 灭菌操作在进行植物组织培养实验之前，必须对实验室的培养器具、培养基和试剂进行灭菌处理，以确保实验的无菌性。
第五章植物组织培养技术实验方案
第五章植物组织培养技术实验方案一、实验目的：1.了解植物组织培养的基本原理和方法。
2.掌握植物组织培养的实验操作技巧。
3.培养植物组织并观察其生长和发育情况。
二、实验材料和设备：材料：麦芽糖、琼脂、植物激素（如IAA、ABA、GA3等）、幼绿豆胚轴组织。
设备：平板培养器、显微镜、高压锅、移液器、无菌操作器具等。
三、实验步骤：1.制备琼脂培养基a）称取适量琼脂加入适量蒸馏水中，搅拌均匀。
b）高压锅加热至沸腾，放入琼脂溶液，保持沸腾10-15分钟，使琼脂充分溶解。
c）将高压锅冷却后取出，倒入洁净的培养器中，晾凉并凝固。
2.准备植物组织a）将绿豆种子浸泡于水中，待种子发芽至一定程度。
b）取出绿豆胚轴组织，用刀切割成适当大小的组织片段。
3.制备植物组织培养基a）取适量砂糖和植物激素（如IAA、ABA、GA3等），溶解于蒸馏水中。
b）加入适量制备好的琼脂培养基，搅拌均匀。
4.进行组织培养a）将准备好的植物组织片段放入培养器中，倒入制备好的植物组织培养基，使组织片段完全浸没其中。
b）盖上培养器盖子，用透明胶带密封，防止细菌浸入。
c）将培养器置于适当的温度和光照条件下，进行培养。
5.观察和记录a）每天观察组织的生长和发育情况，记录变化。
b）使用显微镜观察细胞结构和细胞分裂情况。
c）观察是否有细菌感染或其他异常情况。
d）记录实验数据，如生长速率、生长周期等。
四、实验要点：1.所有实验操作都要在无菌环境下进行，避免细菌和其他微生物的污染。
2.组织培养基的配方可以根据不同的植物种类和研究目的进行调整。
3.培养条件也根据不同植物种类的要求进行调整，如温度、光照等。
4.实验中要注意观察并记录实验数据，对结果进行分析和总结。
五、预期结果：通过植物组织培养技术，可以观察到植物组织的生长和发育情况，研究不同因素对植物生长的影响，培养出健康的植物组织，为其他相关研究提供基础数据和实验材料。
六、安全注意事项：1.操作时要小心使用实验器具，避免切伤或烫伤等事故发生。
植物组织培养实验教案
一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，通过人工方法在特制的培养基上进行培养，使其逐渐发育成完整植物体的技术。
本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理，掌握实验操作技能，培养学生的创新意识和实践能力。
二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。
2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。
3. 培养学生的创新意识和实践能力。
三、实验材料与仪器1. 材料：植物茎段、叶片、茎尖等；培养基；植物激素；消毒剂等。
2. 仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：选取健康的植物茎段、叶片或茎尖，去除杂质，清洗干净。
2. 消毒：将实验材料用70%酒精浸泡30秒，再用无菌水清洗，用消毒剂处理1-2分钟。
3. 切割材料：用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。
5. 培养：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制温度、光照等条件，进行培养。
6. 观察与记录：定期观察植物组织的生长状况，记录实验现象。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作，避免污染。
2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。
3. 培养过程中要定期观察，调整培养条件。
4. 实验结果可能存在差异，要注重数据分析与讨论。
教案编写仅供参考，具体实验操作请根据实际情况进行调整。
祝实验成功！六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。
2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。
3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。
七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。
2. 记录实验现象和结果。
3. 分析实验结果，探讨可能的原因。
4. 提出实验中存在的问题及改进措施。
八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。
2. 评价学生对实验操作的熟练程度。
3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。
4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。
1 植物组织培养实验室的构建
医用手提式灭菌锅
不锈钢立式灭菌锅
3、超净工作台
陈列于操作室（接种室）内
类型：垂直式和水平式
作用：无菌操作
（二）药品贮存和配制仪器设备
1、冰箱
作用：低温保存材料，存 放药品、培养基母液、激 素、酶制剂。
2、天平
陈列于制备室中
作用：称取大量元素、微 量元素、酶制剂
3、酸度计
注意！ 实际应用中要通过试验筛选。
基本培养基对西洋杜鹃增殖的影响
三、培养基的配制
（一）培养基母液的配制
1.基本培养基母液 类型：四液式（钙盐最后加入）、三液式、 五液式（钙盐和铁盐单独配制）。 成分：大量元素、微量元素、铁盐、 有机成 分。 贮藏：2~4冰箱内贮藏。 倍数：10X、100X。 标记：名称、配制倍数、日期等。
取容器（搪瓷缸），加入1/3~2/3左右的蒸馏水，加热至沸腾； 称取定量的琼脂和蔗糖加入上述煮沸的水中并不断搅拌， 直到完全溶解。 用移液管量取所需量的母液加入一只干净的烧杯中， 待琼脂完全溶解后加入 用NaOH或稀HCl调节pH值 高压灭菌，（121℃，15 min~20min） 冷却，取出，备用
植物组织培养材料移到田间前，通常 先移到温室进行练苗，待生根成活后， 再移到大田。
二、仪器和设备
（一）无菌操作设备 １、烘箱：
作用：干燥洗后的器皿
高温干热灭菌 测定培养物的干重时烘干培 养材料。
2、灭菌锅
类型：普通医用消毒锅 大的高压灭菌锅
作用：培养基、水和各种用具的消毒
（四）培养设备 1.空调
作用：控制培养温度
2.加湿器和去湿机
控制培养室内湿度状况
3.定时器
植物组织培养实验指导
《植物组织培养》实验指导教师：任峻目录实验一参观植物组织培养实验室实验二培养基母液配制实验三培养基配制与灭菌实验四植物快速繁殖培养实验考核一、课程的性质与任务植物细胞工程实验技术一般包括植物细胞组织离体培养技术、细胞融合技术、细胞拆合技术、外源基因转移技术等一系列重要的基础技术。
通过实验课程的学习，实验方法立足于初学者的专业基础和一般实验室的条件，将《植物细胞组织培养技术》课程的理论知识、一般的实验技能和科学研究的初步方法融为一体。
培养学生理论联系实际、独立思考及实践动手能力。
二、实验的目的与基本要求通过本课程的学习使学生掌握植物细胞工程技术的基本原理和实验操作方法，掌握植物细胞体外培养技术，结合科研和生产实际，提高学生分析问题、解决问题的能力。
以适应今后在教学、科研和生产开发等各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。
在实验教学过程中，要求学生学习态度严谨，操作动作规范，观察记录耐心细致，独立思考，综合分析实验结果，充分理解后认真地完成实验报告。
09本《植物组织培养》实验考核一、考核方式：实验操作。
二、考核时间：三、考核地点：四、监考教师：实验考核以实验操作形式进行，根据实验4或实验5实验的实验结果（失败或成功）决定实验方案，如果失败，分析失败原因，提出改进措施，在重做中进行实验操作考核，如果成功则继续下一步的实验，实施实验操作考核。
二．考核办法：考核方法主要观察学生的实验操作是否正确，污染率是否高，并要求学生写出实验报告，总结实验中常出现的问题。
在3个课时内小组协作完成实验内容。
包括以下几个方面：1．对实验仪器设备的选择及操作。
湿热灭菌操作过程；无菌操作过程。
2.培养基的配制试剂的配制；母液的移取；实验配方计算。
3.培养条件的设置。
4.实验报告的规范性与科学性。
实验一 参观植物组织培养实验室一、实验的目的和要求掌握植物组织培养实验室的设计要点和必备的仪器设备。
二、实验内容：1. 植物组织培养实验室的设计要点。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标1. 让学生了解植物组织培养的原理和过程。
2. 培养学生运用科学方法进行实验操作的能力。
3. 培养学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
二、教学内容1. 植物组织培养的定义和原理。
2. 植物组织培养的过程。
3. 植物组织培养技术的应用。
三、教学重点与难点1. 重点：植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 难点：植物组织培养技术的操作和应用。
四、教学方法1. 采用讲授法讲解植物组织培养的原理和过程。
2. 采用实验法培养植物组织，让学生动手操作。
3. 采用案例分析法分析植物组织培养在生产和生活中的应用。
五、教学准备1. 实验室设备：无菌操作台、培养皿、镊子、剪刀、植物激素等。
2. 实验材料：植物组织、消毒液、培养基等。
3. 教学课件和案例资料。
教案内容：一、导入（5分钟）1. 引导学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
2. 提问：什么是植物组织培养？为什么需要进行植物组织培养？二、讲解（10分钟）1. 讲解植物组织培养的原理。
2. 讲解植物组织培养的过程：离体组织、愈伤组织、胚性细胞团、植株再生。
三、实验操作（15分钟）1. 分组，每组准备一份植物组织样本。
2. 指导学生进行无菌操作，将植物组织接种到培养基上。
3. 学生动手操作，观察并记录植物组织的生长情况。
四、案例分析（10分钟）1. 展示植物组织培养在生产和生活中的应用案例。
2. 引导学生分析案例中植物组织培养的关键技术和应用效果。
五、总结与反思（5分钟）1. 学生总结植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 教师提问，检查学生对植物组织培养的理解和掌握程度。
六、作业布置（5分钟）2. 让学生查阅资料，了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
七、课后反思（教师）1. 总结课堂教学效果，发现问题并及时改进。
2. 收集学生作业，了解学生掌握情况，为下一步教学做好准备。
八、课后作业（学生）1. 完成实验报告。
2. 查阅资料，了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
组培实验报告结果(3篇)
第1篇一、实验简介实验名称：植物组织培养实验实验目的：通过植物组织培养技术，探究植物细胞分裂、分化和再生能力，掌握植物组织培养的基本操作流程，并观察培养过程中植物组织的生长变化。
实验材料：水稻、玉米、小麦等植物叶片、茎段、愈伤组织等。
实验方法：采用植物组织培养技术，对植物叶片、茎段、愈伤组织进行体外培养，观察其在不同培养基、激素浓度、光照条件下的生长和分化情况。
二、实验结果与分析1. 培养基对植物组织生长的影响实验结果表明，不同培养基对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中，MS培养基（Murashige and Skoog培养基）对植物组织的生长和分化效果较好，愈伤组织诱导率和再生植株数量较高。
（1）MS培养基在MS培养基中，水稻叶片愈伤组织诱导率为80%，玉米叶片愈伤组织诱导率为75%，小麦叶片愈伤组织诱导率为70%。
再生植株数量分别为：水稻40株，玉米30株，小麦20株。
（2）改良MS培养基在改良MS培养基中，水稻叶片愈伤组织诱导率为70%，玉米叶片愈伤组织诱导率为65%，小麦叶片愈伤组织诱导率为60%。
再生植株数量分别为：水稻25株，玉米20株，小麦15株。
2. 激素对植物组织生长的影响实验结果表明，激素对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中，生长素（IAA）和细胞分裂素（KT）对植物组织的生长和分化效果较好。
（1）生长素和细胞分裂素浓度对愈伤组织诱导率的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时，水稻叶片愈伤组织诱导率达到最高，为80%。
玉米叶片愈伤组织诱导率达到最高，为75%。
小麦叶片愈伤组织诱导率达到最高，为70%。
（2）生长素和细胞分裂素浓度对再生植株数量的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时，水稻再生植株数量为40株，玉米再生植株数量为30株，小麦再生植株数量为20株。
3. 光照条件对植物组织生长的影响实验结果表明，光照条件对植物组织的生长和分化具有显著影响。
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1 实验室与基本操作(植物组织培养)第一章实验室与基本操作第一节实验室及其基本设备实验室的大小取决于工作的目的和规模：1.以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产影响效率。
2.在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来设计避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
实验室设计标准的组织培养实验室包括：洗涤室(准备室)；配置室；灭菌室；接种室；培养室；观察室等一、准备室作用：材料、培养器械的清洗、培养基准备、灭菌等的准备工作。
普通化学实验室：仪器及设备、化学药品。
纯水仪、冰箱、移液枪、过滤灭菌器、电炉、微波炉、磁力搅拌器、低速台式离心机、电脑等作用：配制培养基。
洗涤室：清洗、贮存器皿设施、鼓风干燥箱等。
作用：玻璃器皿、用具和培养材料的洗涤。
灭菌室：①高压蒸气灭菌装置：如立式、卧式和手提式灭菌器。
作用：培养基、器械、棉塞、无菌纸等灭菌消毒②细菌过滤器作用：进行植物材料分离接种的重要场所，需长期的无菌操作，对组织培养成功起关键作用。
试验设施；超净工作台；紫外灯；固定式和挪移式载物台；消毒器、广口瓶、酒精灯、酒精棉、机械支架；手术剪、解剖刀、解剖针、镊子等超净工作台(alaminarflowhood)工作原理:利用鼓风机驱动空气通过高效过滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。
净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。
作用：进行材料的培养的场所。
其大小、规模可根据工作性质设定。
以充分利用空间和节能为原则。
设备：可调控光、温、湿度等设备。
还有固定式培养架、转床、摇床。
合用于器官(芽、茎、花药等)、愈伤组织、细胞和原生质体的固体培养和液体培养。
作用：细胞学和组织学观察。
设备：需备有高倍显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、各种相机、恒温箱、切片机、恒温水浴、滴瓶、染色缸、载玻片、盖玻片等。
作用：哺育组织与细胞培养出来的材料，组培苗的移栽锻炼。
第二节基本操作1、重铬酸钾洗液：饱和的重铬酸钾洗液： 43 克重铬酸钾溶于 1000 毫升蒸馏水中(饱和溶液)。
按 1：1 体积比将浓硫酸缓慢地倒入饱和重铬酸钾水溶液中。
流程：(12h)水洗→晾干→重铬酸钾洗液→→ 自来水冲净、蒸馏水洗两次→干燥 2、洗涤剂：洗衣粉、洗液3、超声波洗净器：小型玻璃器皿，顽强性污渍。
超声波除污。
(要加水)新的玻璃器皿： 0.1﹪HCl 浸泡 12 小时，洗衣粉、自来水洗、蒸馏水冲。
污染的玻璃器皿：要先高压灭菌后，然后再刷洗。
要避免交叉污染。
1、干热灭菌：利用鼓风干燥箱(烘箱)进行烘烤灭菌的方法。
箱内温度控制在150℃， 120min。
玻璃器皿.2、湿热灭菌：利用高压蒸汽灭菌的方法。
普通温度为121℃，压力 0.1MPa，消毒 15~20min。
培养基灭菌.3、熏蒸灭菌：利用药物熏蒸以达到灭菌的目的。
用甲醛内加入高锰酸钾、百菌清、硫磺熏蒸。
用 3%来苏尔溶液或者 1%漂白粉水溶液，或者0.2% 过氧乙酸溶液喷洒、拖擦地板。
培养室、接种室灭菌.4、过滤灭菌：使溶液通过夹有微孔滤膜的漏斗，滤膜孔径需选用0.3~0.45μm。
在无菌环境下，用真空泵抽滤，其滤液为无菌。
液体培养 (不耐高温活性物质)5、药剂灭菌：用 70~75%酒精、 0.1~0.2%升汞、 10%的次氯酸钠、新洁尔灭、 Cloro 某等药剂灭菌的方法。
培养材料灭菌。
6、烧灼灭菌：用酒精灯烧灼达到灭菌的目的。
接种器具灭菌。
7、射线灭菌：用紫外线照射的方法灭菌。
照射时间普通为 15~30min。
接种时应关闭紫外灯。
室内灭菌。
1.接种室以及工作台灭菌：紫外灯 30 分钟，用时一定要关闭它。
2. 工作台消毒： 70%乙醇，用小型喷壶消毒或者棉球擦拭。
3.点燃酒精灯，开启灭菌器,对使用器械进行烧烤灭菌。
器械冷却后方可使用。
第三节培养基的配置1、无机盐：包括大量元素( N，P，K，Ca、S、Mg)，微量元素( Fe、Mn、Zn、B、Mo、Cu、Cl、Co、I)。
2、有机化合物：碳源(糖类)，维生素类，有机含氮化合物。
3、植物生长调节物质：生长素，细胞分裂素，赤霉素，脱落酸等。
4、附加物类：琼脂，活性炭，椰乳，硝酸银等。
1、无机盐——大量元素和微量元素大量元素：N：用量最多。
常用的有硝态氮和铵态氮， KNO3、NH4NO3 植物组织，从培养基中吸收氮后形成蛋白质。
P：在植物组织培养在的细胞增殖分化大量需要。
主要从 NaH2PO4、KH2PO4 供应。
磷参预核酸、能量代谢。
K：直接影响培养物中酶的活性。
主要由 KCl、KNO3 或者 KH2PO4 供应。
主要包括 Fe、Mn、Zn、B、Mo、Cu、Cl、Co、I 等。
植物对这些元素需要量甚微，稍多会发生毒害。
Fe 是用量较多的一种微量元素，对组织中叶绿素的合成和延伸生长起重要作用。
铁常以 FeSO4 和乙二胺四乙酸钠(Na2-EDTA)的螯合物存在于培养基中。
作用：维持培养基的合适渗透压对初生细胞和原生质体的完整性有十分重要作用。
此外，糖类也是合成有机物的碳源。
最常用有：蔗糖、葡萄糖、果糖、多糖、可溶性淀粉和糊精。
作为氮源，蔗糖普通浓度为 2%~ 3%。
糖的浓度影响组织分化类型：在高浓度(3%~4%)的蔗糖有利于韧皮组织分化；低糖浓度(1.5%~2.5%)时，仅生长出木质部；适中浓度时形成具有木质部和韧皮部。
②维生素类作用：直接参预生物催化剂(酶)的形成、蛋白质、脂肪代谢等重要生命活动。
③有机含氮化合物氨基酸：常用的为：甘氨酸及酰胺类物质。
如谷氨酰胺、天冬酰胺和多种氨基酸混合物。
水解乳蛋白、水解酪蛋白。
3、植物生长调节物质①生长素：吲哚乙酸(IAA)：在培养组织中有吲哚乙酸氧化酶，可使 IAA 解体，而且也可在光下分解，用量稍高。
吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)，人工合成化学物质，用量低(0.1~2mg/L)。
2，4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)，作用比 IBA 和 NAA 强。
②细胞分裂素：激动素(KT)、 6-苄基腺嘌呤(6- BA)、玉米素(ZT)、 2-异戊烯基腺嘌呤(2iP)、噻重氮苯基脲(TDZ) ③赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)和多效唑(PP333)等生长调节物质也在组织培养中应用。
GA3—主要用于促进试管苗的生长； ABA—体胚的发育成熟； PP333—促进壮苗。
在组织培养中，生长素的主要作用是诱导外植体脱分化产生愈伤组织及促进培养物生长，诱导根器官的分化。
细胞分裂素的主要作用是促进细胞的分裂和分化，诱导不定芽和胚状体的分化和形成，延缓组织衰老，增加蛋白质合成。
4、附加物类常用附加物类有:①琼脂:组织培养支持物.本身并不提供任何营养，它是一种高份子的碳水化合物，从红藻等海藻中提取，仅溶解于热水，成为溶胶，冷后(40℃ 以下)即凝固为固体状的凝胶。
在固体培养方式中不可缺少。
普通用量为0.5%~1.0%，有固体条状和粉状两种。
②琼脂糖:可改善培养物的供氧状况。
③聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、维生素 C (Vc)以及硝酸银等，可防止培养材料的褐变.④活性碳(AC)：具有吸附能力，减少有害物质的影响，如可防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡。
也有利于某些植物生根.用量 1-5%.⑤马铃薯萃取液：多用于壮苗的培养，在使用时可将马铃薯去皮、切碎、水煮 20 一 30 分钟，然后将滤液加入培养基中，其用量通常为 100—200g/L。
当培养基中添加了马铃薯萃取液后，可以对 pH 产生缓冲作用，试管苗也生长得更为茁壮。
⑥香蕉：多用于兰花的组织培养，将成熟香蕉果肉捣烂后，添加到培养基中，用量 150—200g/L。
香蕉果泥可缓冲培养基的 pH，对外植体的分化有着较为明显的促进作用。
⑦椰乳： Coconutmilk,CM。
用于较难培养的植物材料的培养基中。
可将椰子的液态胚乳取出、或者高压灭菌，或者无菌过滤。
使用浓度 100-200mL／L。
无机盐数量适宜，硝酸盐、钾和铵盐的含量比其他培养基高。
B5 培养基铵的含量较低。
在豆科植物上应用最多。
培养大豆细胞和组织培养设计。
White 培养基成份比较简单，无机盐和糖的用量低。
(二)培养基按试验目的分为：诱导培养基，继代培养基，分化培养基，生根培养基。
1、诱导培养基(脱分化培养基)：外植体诱导发生愈伤组织的培养基。
水稻诱导愈伤组织时加 2.4-D；而烟草、胡萝卜既需生长素，又需细胞分裂素。
2、继代培养基：诱导出愈伤组织后，使愈伤组织能不断地生长下去的培养基。
3、分化培养：由愈伤组织诱导形成小苗(幼芽或者胚状体)的培养基。
①不加任何激素的基本培养基，即可诱导分化。
如水稻、珍珠粟、甘蔗等植物。
②加较高浓度细胞分裂素和少量生长素培养基。
如烟草、矮牵牛、四季海棠、天竺葵、菊花、倒挂金钟等组织的分化。
③只加细胞分裂素的培养基。
如豌豆、油菜、小麦等。
4、生根培养基：诱导再生小苗生根的培养基。
①在无任何生长激素的基本培养基中就可生出良好的根系。
如烟草、红薯、草莓、枸杞等。
②有些需加入少量的 NAA、IAA 或者 IBA 以诱导根。
③有些需要减低培养基中无机盐的浓度。
如用 MS 培养基中 1/2 或者 1/4 的无机盐诱导生根，常可获得良好的效果。
(三)培养基按其物理性质划分为： 1、固体培养在培养基中加入一定量的凝固剂，使液体培养基固化,普通用于组织或者器官培养.优点：使用方便，占地不大。
缺点：培养外植体只能有部份组织与培养基接触，培养物上下部因接受养分不均匀，引起组织生长的差异。
2、液体培养培养物消毒后直接置于液体培养基中培养 ,普通用于细胞培养。
优点：培养物吸收营养比较充分，容易获得均匀一致的细胞群体。
缺点：转换培养基较麻烦。
液体培养又分为静止培养和振荡培养两种形式： 1、静止培养在液体培养中用滤纸做成纸桥，桥系紧贴培养液表面，四周插入溶液中，直至瓶底部，使营养液借助毛细管力渗入滤纸，培养物置于滤纸桥面，通过纸桥源源不断地供给养分。
2、振荡培养将装有培养物和液体培养基的器皿置于转床或者摇床上进行培养，它既能使培养物在培养过程中均匀的接触吸收培养基成份，又能保持良好的通气条件.摇床有旋转式、半旋转式和往复式三种。
速度比转床快。
(四)培养基的筛选1、筛选：在多种培养基上培养，根据培养物的生长情况，确定较适宜的培养基。
2、调整：根据培养物的生长情况或者培养目的的不同，对培养基进行调整，探索新的培养基。
如：改良 MS、改良 B5 培养基、 N6 培养基等。
三、培养基的制备(一)母液的配制1、大量元素母液：配制原溶液的 10~50 某，挨次溶解，混合定容。
2、微量元素母液：普通配制 100 某，定容。
称量时最好用万分之一的电子天平。