不同产地西洋参中总皂苷含量的比较研究_许维娜
西洋参茎叶皂苷碱降解成分研究(Ⅱ)

西洋参茎叶皂苷碱降解成分研究(Ⅱ)马双刚1,2徐绥绪2姜永涛1 宋少江2 白景3刘珂1( 1. 山东省天然药物工程技术研究中心,山东烟台 264003;2. 沈阳药科大学中药药学院,辽宁沈阳 110016;3. 锦州医学院,辽宁锦州 121001)摘要:目的研究西洋参茎叶皂苷碱降解成分。
方法采用硅胶柱色谱并结合HPLC分离纯化,通过波谱分析鉴定其化合物结构。
结果继续西洋参茎叶皂苷碱降解产物中分离得到另外4个微量成分,分别鉴定为:达玛-20(21) ,24-二烯-3β,12β-二醇(Ⅰ)、达玛-20(21) ,24-二烯-3β, 6α,12β-三醇(Ⅱ)、20(S)-达玛-25(26)-烯-3β,6α,12β,20,24ξ-五醇(Ⅲ),20(S)-达玛-23-烯-25-过氧羟基-3β,6α,12β,20-四醇(Ⅳ)。
结论碱降解20位S构型未改变,化合物(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)均为首次用碱解法从西洋参茎叶皂苷中得到。
化合物(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)为三个新化合物,并利用2D-NMR技术分别对其氢和碳的化学位移进行了全归属。
关键词:西洋参;皂苷元;碱降解;达玛-20(21) ,24-二烯-3β, 6α,12β-三醇;20(S)-达玛-25(26)-烯-3β,6α,12β,20,24ξ-五醇;20(S)-达玛-23-烯-3β,6α,12β,20-四醇;NMR全归属Studies on p roducts by a lkaline d egradation from Ginsenosides in the l eaves and s tems of Panax quinquefolium (Ⅱ)MA shuang-gang1,2, XU sui-xu2,JIANG yong-tao1, SONG shao-jiang2, BAI jing3, LIU ke1(1. Shandong Engineering Research Center for Natural Drugs, Yantai Shandong 264003;2. School of Chinese Medical, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang Liaoning 1100163.Jinzhou Medical College , Jinzhou Liaoning 121001)[ABSTRACT] AIM: To study products by alkaline degradation from ginsenosides in the leaves and stems of Panax quinquefolium L. METHOD: Isolation and purificatin were carried out on silica gel and HPLC; the chemical constituents we re structurally elucidated by spectral analysis. RESULT: In continuation of our studies on products by alkaline degradation from ginsenosides in the leaves and stems of Panax quinquefolium , four minor compounds were elucidated as: dammar-20(21),24-diene-3β,12β-diol (Ⅰ), dammar-20(21),24-diene-3β, 6α,12β-triol (Ⅱ),20(S)-dammar-25(26)-ene-3β, 6α,12β,20,24ξ-pentanol (Ⅲ),20(S)-dammar-23-ene-25-hydroperoxyl-3β,6α,12β,20 -tetrol (Ⅳ). CONCLUSION: The configunation of20-position of ginsenosides was not changed by alkaline degradation. All the compounds were obtained by alkaline degradation from ginsenosides in the leaves and stems of Panax quinquefolium for the first time. The complete assignments of 1H and 13C NMR chemical shifts of compounds Ⅱ-Ⅳ, three new compounds, were acquired by means of 2D NMR spectra.Key words: Panax quinquefolium L., ginsenosides, alkaline degradation, aglyon; dammar-20(21),24-diene-3β, 6α,12β-triol ;20(S)-dammar-25(26)-ene-3β, 6α,12β,20,24ξ-pentanol ;20(S)-dammar-23-ene-25- hydroperoxyl-3β,6α,12β,20 -tetrol (Ⅳ); NMR complete assignments前已报道[ 1]从西洋参(Panax quinquefolium L. )茎叶皂苷碱降解产物中分离得到5种皂苷元,本文继续报道得自西洋参茎叶皂苷碱解产物中的另外4种微量达玛烷型皂苷元,其中化合物(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)为三个新化合物,且以化合物(Ⅲ)、(Ⅳ)为苷元的人参皂苷在西洋参中尚未发现。
西洋参中皂苷类成分的研究

西洋参中皂苷类成分的研究作者:鲍建材、刘刚、郑友兰、张崇禧西洋参(Panax quinquefolius L.)系五加科人参属植物,原产于加拿大和美国,由于其具有广泛的生物活性和独特的药理作用,多年来一直深受世界各国人民的喜爱。
西洋参中的化学成分比较复杂,包括皂苷类、挥发油类、氨基酸类、糖类和聚炔类等,但主要是皂苷类成分。
人类对西洋参的研究可追溯到19世纪,早在1854年美国一学者便从西洋参中分离得到了第一个皂苷类成分,但对西洋参全面深人的研究却始于20世纪70年代。
迄今为止,中外学者已从西洋参中分离鉴定出的皂苷类成分有3种:达玛烷型(Dammarane),齐墩果烷型(Oleanane),奥克梯隆醇型(Ocotillol)。
而分离出的人参皂苷40余种。
根中皂苷的研究1976年,李向高从美国产西洋参中分离得到3种皂苷元,即人参二醇、人参三醇和齐墩果酸皂苷元。
1978年日本学者真田修一等从日本长野引种的西洋参中分离出人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、RC、Rd、Re。
1982年Besso,H.等分离出7种皂苷,即Rg1、Rg2、Rb3、Rb1、F2,绞股蓝皂苷Ⅺ和西洋参皂苷R1(quenquinoside-R1)。
张崇禧从国产西洋参中分得人参皂苷RO、Rb1、Rb3。
Rc、Rd、Re等。
1983年魏均娴等从西洋参根中分得Ro、Rb1、Rg1、Re和pseudo-ginsenoside-F11(简称P-F11),P-F11是西洋参中的特有成分,是鉴别西洋参和人参的显著标志。
1985年松浦等从西洋参根中分离出13种皂苷,包括人参皂苷Rb1。
Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、F2。
拟人参皂苷F11(pseudoginsenoside-F11),绞股蓝苷XVⅡ(gynostenoside-XV Ⅱ)和一种新的皂苷,即西洋参皂苷R1。
1987年徐绥绪等从辽宁栽培的西洋参根中分得:RO、Rb1、Rb2、Rd、Re、Rg1。
0 不同产地西洋参中人参皂苷Rg1,Re,Rb1含量测定比较

1 1 0 7 0 4 . 2 0 0 9 2 1 ) , 均 购 白 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定
表示 , 两 组 间均 值 比较采 用 独 立样 本 t / t ’ 检验 : 计 数
化 学 反 应 形 成 的 新 物 质 或 降解 物 等 , 可 能会 析 出 新 的有 效 成 分 , 这 是 颗 粒 剂 中 所 不 具 备 的 。然 而 , 传 统 中药 水 煎剂 的某 些特 殊 煎 煮方 法 操 作繁 琐 , 煎 煮 时 间及 方法 均 相 对 复杂 , 很难 严 格 按照 正 确 的煎 煮方 式进行 , 可 能 会 因为 煎 煮 不 当 而 影 响 药 物 疗
限 公司 ) 。 1 . 2 试 剂 人 参 皂 苷 对 照 品 R g l(批 号 :
成份是人参皂苷 , 本 文 采 用 高 效 液 相检 测’ 法, 选 择 C 柱, 紫 外检 测 器 , 检 测 不 同产 地 西 洋 参 中人 参 皂
苷 Rg l 、 R e 、 R b 1 含量 , 现报 道 如下 。 1 仪器 与器 材
资料 以频 数 ( , ) 和 率 值 或 构成 比( 尸) 表示 , 无 序 分 类 资 料采 用 P e a r s o n 检验, 四格 表 资料 改用 F i s h e r 确
切概率法, 均 由S P S S 1 3 . 0 统 计 软件 进 行 统计 分 析 ;
有 序 分 类 资 料 以频 数 ( , ) 和 平均 Ri d i t 值( ) 表示 ,
—1 5 7一
不 同产地西洋参 中人参皂苷 R g l , R e , R b l 含量测定 比较
苗 慧 , 朱龙平 , 陈建文
( 中山大 学药 学 院 , 广东 广州 5 1 0 0 0 6 )
HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量

HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量吴晓云ꎬ刁飞燕ꎬ李秀慧ꎬ刘春霖ꎬ李启艳(山东省食品药品检验研究院ꎬ山东济南250101)摘要:目的㊀建立同时测定西洋参类保健食品中人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf含量的高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-PAD)ꎮ方法㊀采用KromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)色谱柱ꎻ以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱ꎻ流速1.0mL min-1ꎻ检测波长203nmꎻ柱温35ħꎮ结果㊀10种人参皂苷的浓度在其各自线性范围内ꎬ与峰面积呈良好的线性关系ꎬr值均ȡ0.99ꎮ该方法平均回收率为93.0%~101.8%ꎬRSD均小于4.0%(n=6)ꎮ结论㊀本法准确可靠㊁灵敏度高㊁重现性好ꎬ可作为西洋参类保健食品的质量控制方法ꎮ关键词:高效液相色谱-二极管阵列检测法ꎻ保健食品ꎻ西洋参ꎻ人参皂苷中图分类号:R927.2㊀文献标识码:A㊀文章编号:2095-5375(2020)06-0336-005doi:10.13506/j.cnki.jpr.2020.06.006Simultaneousdeterminationof10ginsenosidesinhealthfoodofPanaxQuinquefoliumbyHPLC-PADWUXiaoyunꎬDIAOFeiyanꎬLIXiuhuiꎬLIUChunlinꎬLIQiyan(ShandongInstituteforFoodandDrugControlꎬJinan250101ꎬChina)Abstract:Objective㊀ToestablishanHPLC-PADmethodforthedeterminationof10ginsenosides(ginsenosideRg1ꎬRg2ꎬRg3ꎬRb1ꎬRb2ꎬRb3ꎬRcꎬRdꎬReandRf)inhealthfoodofPanaxquinquefolium.Methods㊀TheanalysiswascarriedoutonananalyticalcolumnKromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)withgradientelutionbyacetonitrile(A)-water(B)ꎬatthedetectionwavelengthof203nmandaflowrateof1.0mL min-1.Thecolumntemperaturewas35ħ.Results㊀Allcali ̄brationcurvesshowedgoodlinearitywithintheirlinearranges(rȡ0.99).Theaveragerecoverieswerebetween93.0%~101.8%ꎬRSD<4.0%(n=6).Conclution㊀ThismethodwasaccurateꎬhighlysensitiveandreproducibleꎬandcanbeusedtocontrolthequalityofhealthfoodofPanaxQuinquefolium.Keywords:HPLC-PADꎻHealthfoodꎻPanaxQuinquefoliumꎻGinsenoside㊀㊀西洋参为五加科人参属植物ꎬ是名贵的中药材ꎬ人参皂苷是其主要活性成分ꎬ主要有人参皂苷Rg1㊁Rb1㊁Rb2㊁Rc㊁Rd和Re等ꎮ以西洋参为原料的保健食品具有缓解体力疲劳ꎬ增强免疫力㊁抗氧化和抗肿瘤等作用[1]ꎮ目前ꎬ西洋参类保健食品的剂型有硬胶囊㊁软胶囊㊁片剂和口服溶液等ꎬ主要以总皂苷作为标志性成分ꎬ总皂苷的测定主要采用香草醛-高氯酸或硫酸显色后用紫外分光光度法测定[2]ꎬ该方法存在专属性差ꎬ操作复杂和干扰因素多等缺点ꎮ为此ꎬ徐灿辉等[3]改进了西洋参类保健食品中人参皂苷测定方法ꎬ建立了西洋参类保健食品中7种参皂苷含量高效液相色谱(HPLC)测定的方法ꎮ此外ꎬ人参皂苷测定方法还有超高效液相色谱(UP ̄LC)[4]㊁高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)[5-6]等ꎮ在众多资料中ꎬ主要研究西洋参根茎叶提取物中人参皂苷含量ꎬ但对西洋参类保健食品中10种人参皂苷含量测定的报道较少ꎮ本试验通过参考西洋参药材中皂苷测定的有关文献[7-9]ꎬ建立高效液相色谱法同时测定多种剂型西洋参类保健食品中10种人参皂苷ꎬ为质量标准的提升提供依据ꎮ1㊀试验部分1.1㊀仪器㊀液相色谱仪(Agilent1260高效液相色谱仪ꎬ美国安捷伦公司)ꎬ配二极管阵列检测器㊀作者简介:吴晓云ꎬ女ꎬ主管药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬE-mail:wuxiaoyun823@126.com㊀通信作者:李启艳ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬTel:0531-81216708ꎬE-mail:152****8118@163.com(PAD)ꎻ电子天平(MettlerToledoMSꎬ梅特勒-托利多)ꎻ数控超声波清洗器(KQ-500DE型ꎬ昆山市超声仪器有限公司)ꎻ恒温水浴锅(北京永光明)ꎮ1.2㊀试药与供试品㊀乙腈(色谱纯ꎬHoneywell)ꎻ甲醇(色谱纯ꎬHoneywell)ꎻ超纯水ꎻ正丁醇(分析纯ꎬ国药集团)ꎻ氨水(分析纯ꎬ国药集团)ꎮ标准品:人参皂苷Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rg1㊁Rg3㊁Rd㊁Re由中国食品药品检定研究院提供ꎬ含量分别为95.9%㊁93.8%㊁97.0%㊁96.3%㊁100%㊁94.4%㊁97.4%ꎬ人参皂苷Rg2㊁Rc㊁Rf由上海甄准生物科技有限公司提供ꎬ含量分别为98.02%㊁99.11%㊁99.62%ꎮ供试品均由市场购得ꎬ名称与剂型见表1ꎮ表1㊀12种供试品的名称和剂型名称剂型S01康富来牌西洋参口服液口服溶液S02金日牌西洋参口服液口服溶液S03新光牌西洋参口服液口服溶液S04日圣牌西洋参氨基酸口服液口服溶液S05无限能牌西洋参胶囊硬胶囊S06雪佳牌西洋参珍珠胶囊硬胶囊S07康富丽牌洋参淫羊藿软胶囊软胶囊S08福来了牌西洋参含片片剂S09喜之源牌西洋参含片片剂S10金日牌西洋参含片片剂S11康富来牌洋参含片片剂S12百合康牌螺旋藻洋参片片剂2 方法与结果2.1㊀色谱条件㊀色谱柱:KromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎻ流动相:乙腈(A)-水(B)ꎬ梯度洗脱(0~40minꎬ17%Aң19%Aꎻ40~60minꎬ19%Aң29%Aꎻ60~75minꎬ29%Aꎻ75~100minꎬ29%Aң40%Aꎻ100~105minꎬ40%Aң17%A)ꎻ流速1.0mL min-1ꎻ检测波长203nmꎻ柱温35ħꎻ进样量:10μLꎮ2.2㊀对照品储备液及对照品混合工作液配制㊀分别精密称定人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf对照品适量ꎬ置于25mL量瓶中ꎬ用甲醇溶解并定容ꎬ制成人参皂苷单体浓度分别为2.409㊁2.141㊁0.04712㊁1.947㊁1.758㊁2.138㊁2.250㊁2.062㊁2.077㊁2.008mg mL-1的对照品储备液ꎮ分别取10种人参皂苷对照品储备液适量ꎬ加甲醇稀释制成6个浓度的混合对照品工作液ꎮ2.3㊀供试品溶液的制备2.3.1㊀片剂㊁胶囊剂供试品溶液的制备㊀片剂㊁胶囊剂ꎬ取内容物研磨混匀后ꎬ片剂2gꎬ胶囊剂1gꎬ精密称定ꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ精密加水饱和正丁醇50mLꎬ密塞ꎬ放置过夜ꎬ超声处理(功率250Wꎬ频率50kHz)30minꎬ滤过ꎬ弃去初滤液ꎬ精密量取续滤液20mLꎬ用氨试液洗涤两次ꎬ每次20mLꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ2.3.2㊀口服溶液供试品溶液的制备㊀口服溶液ꎬ精密量取8.0mL供试品至分液漏斗中ꎬ用水饱和正丁醇振摇提取3次ꎬ每次10mLꎬ合并正丁醇提取液ꎬ用氨试液洗涤2次ꎬ每次10mLꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ2.4㊀线性关系考察㊀分别取6个浓度的混合对照品工作液ꎬ进样10μLꎬ记录峰面积ꎬ以对照品浓度X(μg mL-1)为横坐标ꎬ对照品的峰面积Y为纵坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ求得回归方程ꎮ得到10种人参皂苷在相应线性范围内均具有良好的线性ꎬ相关系数都在0.99以上ꎬ结果见表2ꎮ表2㊀标准曲线方程的结果成分标准曲线方程相关系数(r)线性范围/μg mL-1Rg1Rg2Rg3Rb1Rb2Rb3RcRdReRfY=1.770X+4.613Y=3.084X+2.021Y=2.381X-0.3584Y=2.377X+29.67Y=2.433X+1.319Y=2.520X+2.210Y=2.806X+3.629Y=2.303X-12.93Y=2.856X+6.063Y=3.982X+2.2570.99990.99990.99990.99980.99990.99990.99990.99980.99990.99994.818~240.94.282~214.11.178~47.123.894~194.73.516~175.84.276~213.84.500~225.04.124~206.24.154~207.74.016~200.82.5㊀试样重复性试验㊀准确量取6份口服溶液供试品(S01)8.0mL至分液漏斗中ꎬ以下按 2.3.2 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ准确称取6份胶囊剂供试品(S05)1gꎬ6份片剂供试品(S08)2gꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ以下按 2.3.1 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ分别取3种剂型供试品溶液10μL注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ计算供试品中10种人参皂苷的含量ꎮ3种剂型供试品中人参皂苷含量RSD(n=6)均小于3%ꎬ结果表明方法重复性良好ꎬ结果见表3ꎮ2.6㊀系统适应性考察㊀取10种人参皂苷混合对照品工作液10μL进样ꎬ计算10种人参皂苷的理论板数ꎮ得到人参皂苷Rg3㊁Rg1㊁Re㊁Rf㊁Rg2㊁Rb1㊁Rc㊁Rb2㊁Rb3㊁Rd的理论板数分别为103427㊁50732㊁104490㊁157284㊁120457㊁82876㊁253440㊁260991㊁410628㊁239554ꎬ分离度分别为5.4㊁1.6㊁32.6㊁15.1㊁2.2㊁4.0㊁4.8㊁1.6㊁8.0ꎮ对于供试品ꎬ虽然存在基质干扰影响分离度ꎬ但是3种剂型供试品中10种人参皂苷均能达到基线分离ꎬ分离度均能达到1.5以上ꎮ表3㊀重复性试验结果剂型口服溶液(S01)胶囊剂(S05)片剂(S08)含量平均值/mg mL-1RSD(%)含量平均值/mg g-1RSD(%)含量平均值/mg g-1RSD(%)Rg30.0202.60.9352.40.2112.3Rg10.0402.04.6731.90.1222.5Re0.0511.719.3252.10.2341.7Rf0.0212.9----Rg20.2960.62.6521.30.2171.4Rb10.4350.648.6260.70.4241.2Rc0.1591.011.8421.11.7461.7Rb20.1201.22.1611.61.4711.5Rb30.0542.63.6542.33.0302.5Rd0.4810.821.5001.30.8291.8㊀注: - 表示未检出或低于定量限2.7㊀精密度试验㊀取10种人参皂苷混合对照品工作液10μL连续进样5次ꎬ以测得的峰面积响应值作评价标准ꎬ得到10种人参皂苷的RSD(n=5)均小于3.0%ꎬ表明在本方法仪器条件下ꎬ仪器精密度良好ꎮ2.8㊀稳定性试验㊀分别取供试品S01㊁S05㊁S08ꎬ按 2.3 项下方法操作ꎬ得到供试品溶液ꎬ室温下放置24hꎬ分别在0㊁2㊁4㊁8㊁12㊁24h取10μL进样ꎬ得到10种人参皂苷峰面积RSD(n=6)都在3.0%以内ꎬ表明供试品溶液在24h内稳定ꎮ2.9㊀回收率试验㊀准确量取6份已知含量的供试品(S01)4.0mL至分液漏斗中ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为1ʒ1)ꎬ以下按 2.3.2 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ准确称取已知含量的供试品(S05)0.5gꎬ供试品(S08)1gꎬ各6份ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为1ʒ1)ꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ以下按 2.3.1 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ取10μL注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ得到10种人参皂苷的平均加样回收率(n=6)ꎬRSD均小于4.0%ꎬ结果见表4ꎮ表4㊀回收率结果剂型成分口服溶液(S01)胶囊剂(S05)片剂(S08)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)Rg30.08096.32.10.46893.31.90.21197.92.5Rg10.16098.23.32.33799.12.80.12295.02.6Re0.20496.63.29.666100.33.10.234101.83.6Rf0.08498.81.0-101.21.5-101.33.4Rg21.18494.41.01.32793.71.70.217100.42.1Rb11.74096.41.524.32396.51.40.42595.52.4Rc0.63694.41.35.92398.22.51.75096.22.6Rb20.48096.02.31.08193.92.41.47497.52.8Rb30.21693.02.51.828100.12.63.036101.23.2Rd1.92493.31.510.75498.62.20.83194.02.4㊀注: - 表示未检出或低于定量限2.10㊀检出限与定量限㊀S/N=3时ꎬ得到检出限LODꎬ人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf检出限分别为0.0024㊁0.0021㊁0.0029㊁0.0019㊁0.0018㊁0.0021㊁0.0022㊁0.0021㊁0.0021㊁0.0020μgꎻS/N=10时ꎬ得到定量限LOQꎬ定量限分别为0.0060㊁0.0054㊁0.0074㊁0.0050㊁0.0044㊁0.0053㊁0.0056㊁0.0052㊁0.0052㊁0.0050μgꎮ2.11㊀供试品的测定㊀取12批供试品ꎬ按照按 2.3 制备供试品溶液ꎬ每批平行处理2份ꎬ按上述色谱条件进行测定ꎬ将峰面积代入 2.4 线性回归方程计算含量ꎬ结果见图1~2及表5ꎮ表5㊀供试品中10种成分含量测定结果含量/mg mL-1或mg g-1编号S01S02S03S04S05S06S07S08S09S10S11S12Rg30.0200.0090.0100.0780.9350.1690.4940.2110.2120.2750.4170.489Rg10.0400.0710.015-4.6730.7671.7220.1220.2090.6740.8930.436Re0.0510.2400.066-19.3251.4184.1270.2340.7093.0853.8091.350Rf0.021--0.019-0.025----0.016-Rg20.2960.0620.147-2.6520.5451.0240.2170.1130.0840.2390.261Rb10.4350.6650.631-48.6261.3540.4070.4240.1026.7778.633-Rc0.1590.1200.083-11.8420.6560.6751.7460.6372.0662.7660.093Rb20.1200.0390.019-2.1610.3611.9871.4710.3820.3390.4870.536Rb30.0540.0950.023-3.6540.3696.7583.0301.5650.5900.8342.229Rd0.4810.2730.238-21.5001.4986.0160.8290.9763.2033.7523.154合计1.681.571.230.10115.377.1623.218.284.9117.0921.858.55㊀注: - 表示未检出或低于定量限㊀1.Rg3(20.0min)ꎻ2.Rg1(45.0min)ꎻ3.Re(45.8min)ꎻ4.Rf(65.9min)ꎻ5.Rg2(77.6min)ꎻ6.Rb1(80.0min)ꎻ7.Rc(83.6min)ꎻ8.Rb2(86.9min)ꎻ9.Rb3(87.8min)ꎻ10.Rd(93.0min)图1㊀10种人参皂苷对照品图谱㊀1.Rg3(20.0min)ꎻ2.Rg1(45.0min)ꎻ3.Re(45.8min)ꎻ4.Rf(65.9min)ꎻ5.Rg2(77.6min)ꎻ6.Rb1(80.0min)ꎻ7.Rc(83.6min)ꎻ8.Rb2(86.9min)ꎻ9.Rb3(87.8min)ꎻ10.Rd(93.0min)图2㊀供试品S01中10种人参皂苷图谱3 讨论3.1㊀前处理考察㊀由于保健食品剂型种类多ꎬ而每种剂型的基质比较复杂ꎬ导致10种人参皂苷更难同时分离ꎮ首先ꎬ通过比较3种不同的提取试剂ꎬ水饱和正丁醇㊁甲醇和乙醇ꎬ最终得到水饱和正丁醇提取效率最高ꎮ其次ꎬ选用水饱和正丁醇分别采用回流提取㊁液-液萃取㊁浸泡放置过夜超声提取和直接超声提取4种提取方式进行比较ꎬ结果表明:对于片剂和胶囊剂ꎬ浸泡过夜超声提取与回流提取得到皂苷含量最高ꎬ又因为前者操作简单ꎬ且提取的多糖等杂质较少ꎬ最终采用浸泡过夜超声提取ꎻ对于口服溶液ꎬ回流提取与液-液萃取都能得到较高总皂苷含量ꎬ优先选取重现性好且操作较简单的处理方法ꎬ因此采用水饱和正丁醇振摇多次萃取ꎮ3.2㊀流动相及梯度的选择㊀本文对甲醇-水ꎬ乙腈-水和乙腈-0.1%磷酸溶液3种不同流动相进行比较ꎬ结果表明ꎬ人参皂苷在低波长范围内检测时ꎬ乙腈比甲醇背景噪音低ꎬ可获得较好的分离效果ꎬ并且乙腈与水混合黏度小ꎬ可以有效降低系统压力ꎬ而加入磷酸对整体分离情况没有明显改善且磷酸盐对色谱柱损耗大ꎬ最终选择乙腈-水作为最佳流动相ꎮ10种人参皂苷中Rg1和ReꎬRb2和Rb3较难分离ꎮ人参皂苷Rg1和Re极性非常相似ꎬ较难分离ꎬ且供试品在人参皂苷Rg1和Re附近有杂质干扰ꎬ最终选择合适梯度ꎬ在45min左右达到基线分离ꎮRb2和Rb3是同分异构体ꎬ并且两者含量很低ꎬ容易包裹在杂质峰中ꎬ本试验在保证峰形和柱效的前提下完成了两种皂苷的基线分离ꎮ故最终采用梯度洗脱使每种皂苷达到较好分离效果ꎮ3.3㊀样品测定结果分析㊀由表5可见ꎬ12批供试品10种皂苷含量之和差异很大ꎬ含量最高的为硬胶囊ꎬ片剂和软胶囊次之ꎬ口服溶液最低ꎮ每批供试品中ꎬ单种人参皂苷占10种皂苷比例各不相同ꎬ经过分析发现ꎬRb1㊁Rc㊁Rd㊁Re4种所占比例最大ꎬ7批供试品含这4种皂苷比例为67.0%~88.5%ꎬ4批供试品的比例为39.0%~53.8%ꎬ1种供试品(S04)比例为0ꎮ对于供试品(S04)ꎬ根据«保健食品检验与评价技术规范»(2003年版)中规定的紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎬ得到总皂苷含量为80mg 100mL-1ꎮ本文建立的HPLC-PAD法可对西洋参类保健食品中皂苷成分进行初步鉴定ꎬ最终用紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎮ4 结论本文共收集口服溶液㊁片剂和胶囊剂12批西洋参类保健食品ꎬ通过测定其线性范围㊁系统适用性㊁重复性㊁精密度㊁稳定性㊁检出限㊁定量限和回收率试验ꎬ结果令人满意ꎮ试验表明ꎬ在本文供试品制备方法和色谱条件下ꎬ人参皂苷Rg3㊁Rg1㊁Re㊁Rf㊁Rg2㊁Rb1㊁Rc㊁Rb2㊁Rb3㊁Rd能够达到完全分离ꎬ所建立的方法操作简便ꎬ重复性好ꎬ可以用来对以西洋参为原料的保健食品进行质量控制ꎮ参考文献:[1]㊀尚金燕ꎬ李桂荣ꎬ邵明辉ꎬ等.西洋参的药理作用研究进展[J].人参研究ꎬ2016ꎬ28(6):49-51.[2]杜金凤ꎬ宋鉴达ꎬ朱传翔ꎬ等.比色法测定人参保健饮料中人参总皂苷含量[J].现代食品ꎬ2017ꎬ6(11):79-80. [3]徐灿辉ꎬ何维为.西洋参保健食品中7种人参皂苷的高效液相色谱法测定[J].食品与药品ꎬ2015ꎬ17(4):273-277.[4]崔勇ꎬ李青ꎬ刘思洁ꎬ等.固相萃取-超高效液相色谱法同时测定人参中11种人参皂苷的含量[J].中国卫生检验杂志ꎬ2012ꎬ22(3):475-477.[5]黄艳菲ꎬ刘永恒ꎬ李艳丹ꎬ等.HPLC-MSn法测定加拿大原产地西洋参不同入药部位的人参皂苷含量[J].中国实验方剂学杂志ꎬ2013ꎬ19(11):86-91.[6]张海江ꎬ蔡小军ꎬ程翼宇.高效液相色谱-电喷雾质谱法鉴别人参㊁西洋参和三七的皂苷提取物[J].中国药学杂志ꎬ2006ꎬ41(5):391-394.[7]毕福钧ꎬ钟顺好ꎬ顾利红.RRLC法与HPLC法在红参和西洋参人参皂苷含量测定中的分析比较[J].药物分析杂志ꎬ2010ꎬ30(9):1720-1724.[8]张崇禧ꎬ鲍建才ꎬ李向高ꎬ等.HPLC法测定人参㊁西洋参和三七不同部位中人参皂苷的含量[J].药物分析杂志ꎬ2005ꎬ25(10):1190-1194.[9]薛燕ꎬ闻莉.西洋参根及茎叶皂苷提取物中12种主要皂苷成分的分析研究[J].药物分析杂志ꎬ2009ꎬ29(1):79-81.(上接第335页)参考文献:[1]㊀DUMORTIERGꎬGROSSIORDJLꎬAGNELYFꎬetal.AReviewofPoloxamer407PharmaceuticalandPharmaco ̄logicalCharacteristics[J].PharmResꎬ2006ꎬ23(12):2709-2728.[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版(四部)[S].北京:中国医药科技出版社ꎬ2015:530. 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不同产地地肤子中皂苷的含量分析

and
Esteras Isoenzyme Analysis
HUANGXhn—ron91,XIANGFeng-ningI。XIAC,uaatg-minl,ZHI阻yingl,Sill
(1
Shool of
Jun-yin92
Lifescience,ShndoIlg University,Jinan 250100,Shendong Chiaa;
out
a
the
further analysis of
the
trlaill active components
saikosaponin of somatic
the
sca'eening
of high-medicine-content hybrid cell lines
[Key words]can.t;Bufleurum scorzonertfolium;somatic
万方数据
第27卷第12期 2002年12月
中国中药杂志
China Journal of
vol 27.N012
Chinese
Materia Medica
1k。2002
种不同产地地肤子中momordin lc的含量,采用比 色法测定了其中总皂苷的含量。
1
2.1.6重现性试验 取同一批样品5份,每份约50 mg,精密称定, 分别置10 mL量瓶中,按“供试品溶液的制备”项下 处理并测定,结果该批地肤子中地肤子皂苷Ic平均 含量为2 73%,RSD为1.5%。
Momordin
Ic
fm酬Fruits
Y,et
and
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C—ponent,
Bk/
of
Koch/a
不同产地西洋参总皂苷及单体皂苷Rb1、Re、Rg1的含量测定

不同产地西洋参总皂苷及单体皂苷Rb1、Re、Rg1的含量测定魏晓雨;陈增松;田义新;赵智灵;魏伟【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2016(028)005【摘要】目的测定国内外不同产地西洋参总皂苷及单体皂苷Rg1、Re、Rb1的含量.方法采用比色法测定总皂苷含量,用高效液相色谱测定单体皂苷含量.结果国内外不同产地西洋参中总皂苷及单体皂苷有较大差异,除吉林长白西洋参外,其他产地西洋参资源均符合国家标准.结论西洋参资源质量受生长环境影响较大,我国部分西洋参资源质量低于原产地,因此应加强西洋参的育种工作,为更好的利用和开发西洋参资源奠定实验基础.【总页数】4页(P19-22)【作者】魏晓雨;陈增松;田义新;赵智灵;魏伟【作者单位】吉林农业大学中药材学院,长春130118;长白县人参产业发展服务中心,长白134400;吉林农业大学中药材学院,长春130118;吉林农业大学中药材学院,长春130118;吉林农业大学中药材学院,长春130118【正文语种】中文【相关文献】1.不同时期人参、西洋参根中单体皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2含量的比较 [J], 李乐;张春阁;李小沛;吕林;赵立春;张亚玉2.西洋参中人参皂苷Rg1人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量测定 [J], 刘莉;程龙琼;周世玉3.HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 李岚;陈华4.不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量比较 [J], 李义志;毛春芹;陆兔林;马新飞5.长芦人参、西洋参中总皂苷及单体皂苷Re,Rg1,Rb1的含量测定 [J], 姜婷;刘婷婷;李春雷;任跃英;骆长林;康岩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
不同年生西洋参的植物形态和有效成分含量比较

不同年生西洋参的植物形态和有效成分含量比较摘要:对1-4年生长白县栽培西洋参进行采收,研究不同年生西洋参植物形态和有效成分含量。
用比色法测定总皂苷含量,用常规方法测定折干率。
根据不同年生西洋参有效成分变化和产量形成规律,结果显示,吉林省长白县的西洋参最佳采收年限为4年。
关键词:西洋参;人参总皂苷中图分类号:S567.5+1 文献标识码:A 文章编号:1674-0432(2011)-12-0060-1基金项目:吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目——西洋参加工技术优化研究(吉教科合字[2011]第429号。
西洋参(Panax quinquefolium L.)主要以干燥的根供药用,西洋参以根入药,又称洋参、西洋人参、花旗参、美国人参和广东人参等[1]。
作为西洋参规范化种植的一项关键技术,其中比较重要的是产品质量问题,现有技术中,包括采收时间、加工工艺等共性技术均是影响西洋参产业发展关键因素。
因此有必要在已有的研究基础上,进一步对我国所有代表性西洋参产区的西洋参进行采收的共性问题进行研究。
根据国家有关西洋参质量控制的关键指标,提高我国产西洋参产品质量,弘扬西洋参在我国人民和世界人民医疗卫生事业中的作用。
1 材料与方法1.1 试验材料取吉林省长白县西洋参规范化种植基地的1-4年生的鲜西洋参样品,以皂苷等成分为参考指标,研究不同年生西洋参的生理状况和内在质量,以期确定其适宜采收年限。
1.2 试验方法1.2.1 总皂苷含量的测定总皂苷含量采用比色法[2]。
1.2.2 生理指标的测定总糖、还原糖和淀粉含量的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色法;可溶性糖含量的测定采用蒽酮硫酸法;脂肪含量采用索氏抽提法;以上测定方法均参考文献[3]。
2 结果分析2.1 不同年生的西洋参的植物形态特征比较西洋参随着参龄增长,由于物质、能量的交换和积累而产生形态变化,各项植物形态特征变化均有一定的规律,将1-4年生西洋参不同部位的形态特征进行测定,形态特征具体记载方法参考文献[4],测定数据为20株鲜西洋参的平均值,见表1。
不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量比较

不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量比较【摘要】目的测定不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。
方法利用紫外分光光度法、高效液相色谱法比较不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。
结果不同产地的红参总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量相差相对较大。
结论应该重视红参的种植、采收、加工炮制等的进一步规范化研究。
【Abstract】Objective To compareginsenosides and ginsenosideRg1、Re、Rb1 contents of Red ginsengof different origins.Methods The content of ginsenosides was determined by UV and ginsenosideRg1,Re,Rb1by HPLC.Results The content of ginsenosides and ginsenosideRg1,Re,Rb1of different origins were relatively diffenent.Conclusion We should pay more attention to the standard research of agricultural and processing of red ginseng.【Key words】Red Ginseng;Ginsenosides;Ginsenoside Rg1、Re、Rb1红参(Radix et Rhizoma Ginseng Rubra)为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的栽培品经蒸制后的干燥根及根茎,具有大补元气,复脉固脱,益气摄血之效,临床上用于体虚欲脱,肢冷脉微,气不摄血,崩漏下血;心力衰竭,心源性休克。
红参中主要含有:皂苷类、挥发性成分、脂溶性成分、多糖等,其中皂苷类为主要活性物质基础之一,但市场上的红参中皂苷类成分含量差异相对较大,本实验采用紫外分光光度法、高效液相色谱法比较不同产地红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。
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1 前言 西 洋 参 (Panax quinquefolium L.)又 名 花 旗 参 ,为
五 加 科 (Araliaceae)人 参 属 (Panax)多 年 生 宿 根 草 本 植 物[1]。 西洋参是名贵的药食同源植物,其味苦性寒[2]。 中 医 常 用 其 补 肺 阴 清 虚 火 ,治 疗 久 咳 肺 痿 等 症 [3],因 作用平和,被人们广泛应用而供不应求。 诸多研究结 果表明,西洋参中生理活性最显著的成分是西洋参皂 苷[4]。 近代药理研究证明,西洋参皂苷有抗疲劳,改善 记忆力作用,可用于治疗老年病[5]。 西洋参原产于美 国和加拿大[6]。 我国于二十世纪八十年代初,在北京、 吉林、黑龙江、山东等大部分地区引种栽培西洋参以 满足人们的需求[7]。 由于西洋参在我国已引种多年, 受不同栽培地生态环境、土壤条件和种植技术等多种 因素的影响,有可能使不同产地西洋参品种、质量等 发生变异。 本文通过对比不同产地西洋参总皂苷含
表 2 样品总皂苷含量测定结果 Tab.2 Determination results of total Saponins in samples
产地 吉林长白
山东 吉林通化 吉林抚松 北京怀柔
1 4.383 4.108 3.561 3.174 3.042
2 4.476 4.025 3.608 3.237 3.090
3 平均值 RSD% 4.427 4.429 1.050 4.105 4.079 1.154 3.628 3.599 0.956 3.244 3.218 1.164 3.112 3.081 1.161
3.2 精密度试验和回收率试验结果 精密度试验和回收率试验所取样品均为长白产
区的西洋参样品。 测得结果精密度 RSD 为 0.07%,回 收率在 98.75~102.2 之间。 4 讨论
样品号
1 2 3 4 5 6
样品液总 对照品加 实际测得 回收率/
皂苷量/mg 入量/mg 值/mg
%
0.0108 0.0300 0.0412 101.3
0.0108 0.0400 0.0503 93.75
0.0108 0.0500 0.0617 101.8
0.0108 0.0600 0.0721 102.2
[5] 黄海英.人参 皂苷药 理 作 用[J].世 界 最 新 医 学 信息文摘.2003,2(1):534~536.
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[8] 陈军辉,谢明勇,章志明,等.12 种西洋参中总 皂苷及人参皂苷 Rb1 的测定比较 [J]. 时珍国医国药. 2005,16(9):845~847.
Abstract:Objective In order to understand the influence of different regions to the total saponins’ content by comparing and testing the content in the American ginseng. Methods After using ether to degrease, water saturation normal butanol ultrasonic to extract and purify saponins, taking sulfuric acid - vanillin as chromogenic agent, the colorimetric method was used to test the total saponins’ content in American ginseng,. Results The total saponins’ content of American ginseng from high to low in order is Jilin Changbai region >Shandong >Jilin Tonghua >Jilin Fusong >Beijing Huairou. Conclusion Although it have difference,the difference of total saponins’ content of American ginseng from different regions is not obvious.
由于各栽培地生态环境的不同,西洋参总皂苷的 形成和积累表现在其含量上出现一定差异。 陈军辉等 [8]通 过 实 验 表 明 , 影 响 其 皂 苷 成 分 含 量 的 因 素 有 产 地 的经纬度、日照时间、无霜期、降水量、土壤特性及西 洋参的采收季节、采收年限、干燥方法、保存方法等。 本实验研究结果显示,我国东北、山东和河北地区的 西洋参总皂苷含量虽有差异,但大致相近。
12
人许参维研娜究等 :G不IN同S产EN地G西R洋E参SE中A总RC皂H苷 含 量20的12比年较第研4究期2.2 实来自方法 2.2.1 对照品溶液的制备
取适量的人参皂苷 Re 对照品,精密称定,加甲醇 溶解制成浓度为 1.0mg/ml 的溶液,备用。 2.2.2 标准曲线的制备
精 密 移 取 对 照 品 溶 液 20μl、40μl、80μl、120μl、 160μl、200μl,分 别 置 于 刻 度 试 管 中 , 水 浴 低 温 将 溶 剂 挥干后, 加入新鲜配制的 8%香草醛乙醇溶液 0.5ml, 72%硫 酸 溶 液 5ml,充 分 振 摇 混 匀 ,置 于 60℃恒 温 水 浴 上加热 10min, 取出 后立即 用 流 水 冷 却 10min,摇 匀。 以试剂作空白,按照分光光度法在最大吸收波长 544nm 处测定其吸光度。以吸光度(A)为纵坐标,以浓 度 (C) 为横坐标绘制标准曲线, 求得回归方程:A= 4.1123C-0.0459,r=0.9929。 2.2.3 供试品溶液的制备
精密移取供试品溶液 50μl 于刻度试管中, 其余 步骤同 2.2.2 项下标准曲线的制备方法。 在 544nm 波 长处测定吸光度,计算西洋参总皂苷含量,取三次平 均值即为测定结果。 2.2.5 精密度试验
精 密 移 取 同 一 个 样 品 溶 液 50μl 置 于 刻 度 试 管 中, 共 6 份, 按 2.2.2 项下方法连续 6 次测定吸光度 值,计算总皂苷含量。 2.2.6 加样回收率试验
关键词:西洋参;总皂苷;比色法
Comparison research on the total saponins’ content of American ginseng from different regions
XU Wei-na, HAN Xiao-lei, WANG Kai-ping, WANG Zhuo, DONG Wan-peng, TIAN Yi-xin* (College of TCM Materials, Jilin Agriculture University, Changchun, Jilin 130118, China)
精密移取已知含量的样品溶液 50μl, 分别置于 10ml 刻度试 管中,共 6 份,再 分别精确 加 入 Re 对 照 品 溶 液 30μl、40μl、50μl、60μl、70μl、80μl, 按 2.2 项 下方法连续 6 次测定吸光度,计算回收率。
表 1 回收率试验 Tab.1 Recovery experiment
参考文献
[1] 马晓北.西洋 参[M].天津:天津 科学技术出 版 社,2005.
[2] 黄 兆 胜 . 中 药 学 [M]. 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社 . 2002.
[3] 李向高.西洋 参的研究[M].北 京:中国科学 技 术出版社.2001,5.
[4] 刘铁城.中国 西洋参[M].北京 :人民卫生出 版 社.1995.
人参研究 GINSENG RESEARCH 2012 年第 4 期
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不同产地西洋参中总皂苷含量的比较研究
许维娜 韩晓磊 王凯萍 王 卓 董万鹏 田义新* (吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118)
摘 要:目的 通过测定比较西洋参中总皂苷含量,以了解不同产地对其含量变化的影响。 方法 用乙醚脱 脂,水饱和正丁醇超声萃取纯化皂苷后,以硫酸-香草醛为显色剂,采用比色法测定西洋参中总皂 苷含量。 结果 西洋参总皂苷含量由高到低依次为吉林长白地区﹥山东﹥吉林通化﹥吉林抚松﹥ 北京怀柔。 结论 我国不同产地西洋参总皂苷含量虽有差异,但不明显。
0.0108 0.0700 0.0822 102.0
0.0108 0.0800 0.0925 102.1
3 结果与分析 3.1 西洋参总皂苷含量测定结果
结果显示,吉林长白、山东、吉林通化、吉林抚松、 北京怀柔五个产区的西洋参总皂苷含量值分别为, 4.429%、4.079%、3.599%、3.218%、3.081%,结果见表 2。
精密称定西洋参干燥粉末 2.000g,加入适量乙醚 于索氏提取器中脱脂 1h,回收乙醚液。 药渣自然挥干 乙醚, 加入 2ml 水, 用水饱和正丁醇 20ml 超声处理 ( 功 率 250W, 频 率 50Hz)30min, 离 心 10min, 吸 取 上 清液,共四次。 合并四次上清液,加两倍量蒸馏水摇 匀, 待分层, 取上层液水浴蒸干后称重。 精密称取 0.0500g 于甲醇溶液中溶解后,转移至 10ml 刻度试管 中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。 2.2.4 总皂苷的含量测定
量,以初步揭示西洋参受产地的影响情况。 2 实验材料与方法 2.1 实验材料与设备药品
实验所用样品为西洋参的干燥根, 取自吉林长 白、山东、吉林通化、吉林抚松、北京怀柔五个产区。 经 吉林农业大学田义新教授鉴定为西洋参的干燥根。 经 粉碎后过 60 目筛,作为试验样品。