葛根总黄酮提取工艺
葛根总黄酮提取工艺条件的研究
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St udy on Extr act in g Techn ology Con d it ion of Flavon oids f r om Puerar ia
1 实验材料
1 . 1 材料与试剂 野葛根购于合肥市医药公司 ,盐酸 、乙醇 、氯仿、甲醇等均为分析纯 ;D10 1 . 大孔吸附树脂 (天津农药股份有限公司) ; 葛根素对照品来自中国药品生物制品检定所 (批号 :753 - 200007) .
1. 2 仪器 8453 - 紫外可见分光光度计 (美国惠普公司) ; KP - 48 型三用石英紫外线检测仪 (北京科普) .
【关键词】 野葛根 ;葛根总黄酮 ;正交试验 ;提取工艺 【中图分类号】 R282 . 71 【文献标识码】A 【文章编号】1 6732070 4 (20 07) 12200 24203
葛根总黄酮的提取方法很多 ,如醇回流法 、醇渗漉法 、浸渍法 、超声辅助萃取法等 ,各有特点. 醇回流法生
产周期短、成本低 、辅助或无效成分的浸出较多 ,故干浸膏得率高 ,但异黄酮含量低 . 醇渗漉法生产周期长 、溶 剂用量大 ,故干浸膏得率不高 ,但浸膏中的异黄酮含量高 ,操作简便. 浸渍法生产周期长 、溶剂用量较大 ,干浸
图 1 葛根素紫外吸收扫描图谱 Fig. 1 UV - spectrogr am of pue rarin
2. 3. 2 标准曲线的制备 精密称取干燥至恒重的葛根素 20m g ,置 50ml 容量瓶中 ,加 95 %乙醇溶解并稀释 至刻度 (对照液) . 精密吸取 0. 5、1 、1. 5 、2、2. 5、3. 0ml 置于 50ml 容量瓶中 , 分别加入 95 %乙醇 5ml ,摇匀 ,再 加入蒸馏水至刻度. 以 95 %乙醇 1ml 加蒸馏水至 10ml 溶剂作空白对照 ,于 250nm 处测定吸收度 ,以浓度 C
葛根总黄酮提取工艺比较研究
葛根总黄酮提取工艺比较研究杨丽维;陈颖;张峻【摘要】本研究采用乙醇浸提法和超声波辅助乙醇提取法对葛根黄酮进行提取,以期筛选出较佳的提取方法.通过试验对比,确定乙醇浸提法的工艺条件为乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50℃,提取时间30 min.超声波辅助提取法的工艺条件为超声功率200 W,乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50 ℃,超声时间20 min.在条件相近的前提下,超声波辅助提取法的葛根黄酮提取率为8.03％,比乙醇浸提法提取率提高了54％.可见,超声波辅助提取法提取效果较好,具有节时、简便、提取率高等优点.【期刊名称】《天津农学院学报》【年(卷),期】2016(023)003【总页数】4页(P27-30)【关键词】葛根;黄酮;乙醇浸提;超声波辅助提取【作者】杨丽维;陈颖;张峻【作者单位】天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384【正文语种】中文【中图分类】TS218葛根（Pueraria lobata（Willd.）Ohwi），别名鹿藿、黄斤、鸡齐，为豆科植物野葛的根，是一种常用的传统中药，也是药食两用的天然植物资源[1]。
理化分析表明，葛根中主要有效成分为黄酮类物质以及异黄酮类化合物，其中包括葛根素、大豆甙等。
这些有效成分具有预防心脑血管疾病，舒张平滑肌解痉，抗促癌及诱导癌细胞分化，抗氧化，解酒、解热及增强机体免疫力等功能[2]。
随着医药科学的发展，葛根有效成分的提取及开发利用价值备受研究者的关注。
葛根的主要应用一方面是加工各种淀粉类产品，二是提取葛根黄酮，将其作为食品、生物医药的重要原料[3]。
目前报道从葛根中提取有效成分的方法主要有：加热回流法、渗漉法、碱液法、浸提法（包括水提法、有机溶剂提取）、酶解法和物理强化辅助提取等，但普遍存在能耗大，时间长，效率低等问题[4]。
葛根素的提取方法
葛根素的提取方法葛根素具有良好的药用、保健作用。
目前，许多研究人员、研究机构都在探求高效、简便的提取葛根素的方法。
在此，我将对葛根素的提取方法作一总结。
1 葛根总黄酮的提取及纯化野葛根中除含有异黄酮化合物外还含有15％－19％的淀粉，在提取总黄酮时，淀粉为主要杂质，影响葛根黄酮的含量。
最早，柴田承二等提取葛根黄酮的方法是采用甲醇进行热回流提取，以醋酸铅沉淀法处理。
Jun-ei Kinjo等采用甲醇热回流提取，水饱和正丁醇萃取法精制葛根总黄酮。
张尊听等用甲醇冷浸法从野葛根中提取葛根总黄酮。
郭建平等比较了以甲醇、95％乙醇、70％乙醇为溶剂，采用冷浸法、热回流法、铅盐沉淀法、甲醇冷浸水饱和正丁醇萃取法、甲醇冷浸－水饱和正丁醇萃取－硅胶柱层析法从葛根中提取纯化总黄酮。
认为冷浸法、回流法较铅盐沉淀法收得率高且操作简便，冷浸法又较回流法简便，收得率高。
本人认为，甲醇有毒，操作时要注意，乙醇比甲醇更适合作为葛根素总黄酮的提取剂。
李剑君等比较了水、乙醇作为溶剂和铅盐沉淀法从葛根中提取总黄酮，提出了以乙醇溶液为溶剂进行逆流萃取的工艺路线，并且采用正交试验法确定出最佳的乙醇浓度、温度和时间。
现在很多研究人员都在用正交法分析提取葛根素的最佳条件，主要是寻求从葛根提取总黄酮这一步中乙醇浓度（％）、溶剂量（倍）、提取时间（h）和提取次数（次）的最佳组合。
每个实验室所测得的最佳提取条件不尽相同，本人认为所谓的最佳条件并不是绝对的。
在大批量提取葛根中葛根素的生产过程中，还要综合考虑多方面的因素，以求成本最低，收益最大。
2 从提取液中分离出葛根素并纯化从葛根获得的提取液仍是混合物，有葛根素的衍生物、大豆苷元的衍生物，还有杂质等。
需要进一步从中分离纯化葛根素。
2.1酸水解法张尊听等以盐酸水解总提物，使其中的葛根素衍生物、大豆苷元衍生物转化成葛根素和大豆苷元，在这酸性溶液中，葛根素和大豆苷元以盐的形式存在，葛根总黄酮中的其他酸性成分和脂溶性成分以沉淀的形式存在，过滤可以除去。
新鲜葛根中总黄酮和淀粉的提取工艺研究
彼 的状 况 ，仅 限 于对 淀粉 和 黄酮类 化 合 物 中的某
种 成分 的利 用 ， 造成 了资源 的浪费 。 为 充分 发挥 葛 根 的保 健 作用 ，根据 葛 根韧 皮 部和木 质部 中总黄 酮 和淀 粉 的分 布情 况 。研究 从 新 鲜葛 根韧 皮部 、木 质 部 中提取 总 黄酮 及 淀粉 的
议 用 ９ ％乙醇作 葛根 总黄 酮 的浸提溶 剂 。 ５
表 ２ 不 同溶 剂 浸 提 总 黄 酮效 果 比较
Ｔ ｂ ｅ ２ Ｅ ｃ ｆ ｄｆｅｅ ｔ ｓ ｌ ｅ ｔ ｏ ｏ ａ ａ ｏ ｅ ｘ ｒ ｃｉ ｎ ａ ｌ ｅ ｔ ｏ ｉ ｒ ｎ ｏ ｖ ｎ ｎ ｔｔｌ ｆ ｖ ｎ ｓ ｅ ｔ ｔ ｌ ａ ｏ
Ｖ０ ． Ｎｏ ３ １８ ．
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新鲜葛根 中总黄酮和淀粉 的提取 工艺研究
张 雁 池建 伟 张 名位 魏振 承
（－ ｆ 东省 农 业 科 学 院农 业 生 物 技 术 研 究 所 国 家农 业 部 功 能 食 品 重 点 开放 实验 室 广 州 ５ Ｏ ４ ） １６ Ｏ
１ 材 料 和 方 法
１１ 材 料 ．
葛根 ： 鲜 粉 葛分别 产 于广 东省 始兴 县 、 山 新 鹤 县、 高明市 ， 西 区明宁 县 ， 建省 三 明市 。 中用 广 福 其 于提 取研究 的粉葛 产于 广东 省始 兴县 。 葛根 素标 准 品 ：由中 国药 品生 物制 品检 定所
分—— 黄 酮类 化合物 ， 因此具 有 一定保 健 功效 。 在 葛根淀 粉 提取 工艺 中 ，不 仅要 考 虑提 高淀 粉 提取
率 ， 要考 虑总 黄酮 的保 留情况 。 还
被破 坏 ， 解成 对 羟基 苯 甲酸 和苯 二酚 ， 分 因此在 碱 液浸 泡工 艺 中 ，Ｈ值 应控 制在 适 当的范 围 内 ｐ 以 淀 粉 提取 率 和 总 黄 酮 保 留情 况 为 指 标 ． 采 用 Ｌ （ 正交 试 验设 计 考 核 葛根 淀粉 提 取 的 碱液 ９３） 浸 泡工 艺 ， 结果见 表 ４和 表 ５
葛根总黄酮提取工艺的比较
收稿日期:2009 07 13; 修订日期:2009 09 20基金项目:湖北省高等教学优秀中青年科技创新团队项目(No .T200909);湖北省自然科学基金重点项目(No .2008CDA060)作者简介:甘 琳(1984 ),女(汉族),湖北荆州人,现为武汉工程大学在读硕士研究生,学士学位,主要从事天然产物的提取分离研究工作.*通讯作者简介:池汝安(1959 ),男(汉族),福建三明人,现任湖北省 楚天学者 计划特聘教授,博士学位,主要从事分离科学与技术研究工作.葛根总黄酮提取工艺的比较甘 琳1,周 芳2,张越非1,池汝安1*(1.武汉工程大学化工与制药学院,绿色化工过程省部共建教育部重点实验室,湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室,湖北武汉 430073;2.武汉工程大学国际学院,湖北武汉430073)摘要:目的优选葛根总黄酮的提取工艺。
方法采用水浴回流、微波和超声波辅助3种方法提取葛根总黄酮,正丁醇萃取纯化。
结果微波辅助提取所得总黄酮提取率最高,提取率为91.68%,纯化后,总黄酮纯度为87.56%;超声波辅助提取次之,提取率为87.88%;水浴回流提取最低,提取率为85.35%。
结论微波辅助提取法节能、高效,且污染小,具有应用前景。
关键词:葛根; 总黄酮; 水浴回流法;微波法; 超声波法中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008 0805(2010)04 0929 03Extraction Technology Co m parison of Total F lavonoids fro m Radix puerariaeGAN Li n 1,Z HOU F ang 2,Z HANG Y ue fe i 1,CH I R u an 1*(1.School of Che m icalE ng ineering&Phar macology,W uhan Institute of Technology,K ey Labora tory for G reen Che m ical P rocess o f M i n istry of Education,H ubei K ey Lab of N ovel R eactor &G reen Che m ical T echnology ;2.School of Internation,Wuhan Universit y of Eng ineering,Wuhan,430073,China )Abst ract :O bjective T o opti m ize the ex tracti on process o f tota l fl avono ids fro m radi x p uerariae .M ethods W a ter circu m fl uence ,m icro w ave-assisted ,u ltrasonic w ave-assisted and n-Butano l were e m ployed i n the ex trac ti on and purificati on processes o f to tal flavono i ds .Resu lts The ex tracti on rate o f t o ta l flavono ids obta i ned by m icrow ave -ass i sted w as hi gher t han the others,the y i e l d w as 91.86%,and t he purity was up to 87.56%afte r purificati on .T he ex tracti on rates of ultrason i c wave-assi sted and w ater c i rcu m fl uence w ere 87.88%,85.33%,respecti ve l y .Con cl u si on M icrow ave-assisted m ethod i s energy-sav ing ,effic i ent and has littl e poll uti on ,w hich can be used t o ex tract t o ta l fl avono i ds .K ey w ords :R ad i x Puerar i ae ; To ta l fl avone ; W ater c ircu m fl uence ; M icro w ave ; U ltrasonic wave葛根属豆科植物野葛Puerar i a lobata (W ill d .)O h w i 的块根[1,2],其所含有效成分总黄酮能降低心肌耗氧量,增加冠脉、脑血管血流量,明显缓解心绞痛、抗心律失常等[3],对防治心肌梗塞、心律失常等也有重要疗效[4,5]。
葛根总黄酮提取工艺研究
葛根总黄酮提取工艺研究张喜梅，李琳，陈玲，苗晓杰（华南理工大学轻工与食品学院，广东 广州 510640）摘要：本论文采用传统浸提法，以乙醇为溶剂，考察溶剂体积分数、提取时间、固液比、提取温度和葛根粉粒度对葛根总黄酮提取率的影响，并在单因素实验的基础上，通过正交试验，确定了葛根总黄酮的提取工艺。
结果表明，提取温度、提取时间、固液比、乙醇体积分数以及粒度对葛根总黄酮的提取率均有影响，优化的葛根总黄酮的提取工艺为：提取温度为80 ℃，提取时间为120 min，乙醇体积分数为70%，固液比为1:12，粒度为80目。
关键词：葛根；总黄酮；提取中图分类号：TS201.2；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2008)01-0042-04Study on the Extaction of Total Flavones from Pueraria Lobata OhwiZHANG Xi-mei, Li Lin, CHEN Ling, MIAO Xiao-jie(College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640) Abstract: The total flavones were extracted with alcohol as the solvent from Pueraria Lobata Ohwi. The effects of the extraction conditions such as the concentration of ethanol, the extraction time, the ratio of Puerariae to solution of ethanol, extraction temperature and the size of Pueraria Lobata Ohwi were studied. The proper condition was determined by orthogonal experiment. The results were as following: The extraction temperature was 80 ℃, the extraction time was 120 min, the concentration of ethanol was 70%, the ratio of Puerariae to solution of ethanol was 1:12, and the size of Pueraria Lobata Ohwi was 80.Key words: Pueraria Lobata Ohwi; total flavones; extraction黄酮类化合物是植物的次级代谢产物，在自然界中分布广泛，普遍存在于植物的叶子和果实中。
葛根总黄酮提取新工艺的研究
收稿日期:2006-01-06作者简介:白兰莉(1974-),女,硕士研究生1文章编号:1006-0456(2006)03-0227-04葛根总黄酮提取新工艺的研究白兰莉,蒋柏泉,黄庆荣,肖正强,邱宝玉(南昌大学环境科学与工程学院,江西南昌330029)摘要:采用微波辅助浸取新工艺从葛根中提取总黄酮.通过单因素和正交实验相结合的方法,研究了新工艺的实验条件.结果表明:在常压下,当微波功率为700W,葛根粒度为80目,预泡1h ,固液比为1z 25,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40s ,间歇辐射3次,可得到最佳提取率83.92%,比传统回流浸取和超声浸取葛根总黄酮工艺具有快速、节能和浸取率高等优点.关键词:微波;浸取;葛根;总黄酮中图分类号:TS201.1 文献标识码:A葛根是一种药食两用的山地植物,其含有的总黄酮不仅应用于医药工业,还广泛应用于食品工业、日用化工等领域[1-6].在国内生产中,提取葛根总黄酮主要采用传统的醇提、浸提和铅盐沉淀等工艺,能耗大,时间长,效率低.而微波浸取技术是一种利用微波能与传统有机溶剂浸取相结合的新的浸取技术.与传统技术相比,因其具有浸取效率高、选择性强、节省时间、节省溶剂、节能、污染小等许多优点,应用范围已从最初的环境分析样品制备迅速扩展到食品、化工和农业、天然产物等领域[7].当前,微波技术已可用于包括黄酮等几大类天然化合物的提取,引起了科技工作者们的广泛关注[8].微波技术用于葛根总黄酮的提取目前在国内也有少量研究,有的采用改进的微波装置,也有的用不同的实验设计方法来考察微波提取葛根总黄酮的最佳工艺条件[9-11].而本实验采用普通微波炉装置,通过单因素和正交实验相结合的方法,考察了在常压下,微波功率、乙醇浓度、固液比、辐射时间等主要因素对微波辅助浸取葛根总黄酮效果的影响,以确定在此新条件下的最优微波浸取条件,探索一条简便易行的微波浸取新工艺.并与传统回流浸取和超声浸取等工艺进行了比较.1 材料、试剂与仪器1.1 材料与试剂葛根片,江西横峰皇同有机葛开发有限公司提供;葛根素对照品,购自中国药品生物制品检定所;试剂均为分析纯.1.2 实验仪器WD700(MG-5062S1)型微波炉(LG 电子天津电器有限公司),53W UV /V I S 紫外分光光度计(上海光学仪器厂),KQ 3200超声波清洗器(江苏昆山定山湖检测仪器厂).2 实验方法2.1 总黄酮的含量测定葛根总黄酮的含量测定采用以葛根素为对照品的紫外分光光度法.2.1.1 标准曲线的建立准确称取葛根素对照品5m g ,置于25mL 容量瓶中,加入95%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别精确吸取0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1.0mL 于10mL 容量瓶中,并各加95%乙醇1.0mL ,再加蒸馏水稀释至刻度,摇匀.另取95%乙醇1.0mL 置10m L 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,作空白对照.在250nm 波长处测定吸光度.以吸光度A 值与浓度C 值线性回归,得标准曲线方程为:A =0.02566+62.57379C,r =0.99992.1.2 样品溶液中总黄酮含量的测定精确吸取一定量的葛根提取液置于10m L 容量瓶中,加入95%乙醇1.0mL,用蒸馏水稀释至刻度,按上述操作方法,在250n m 波长处测定吸光度,根据标准曲线方程计算样品溶液中总黄酮的含量.2.1.3 葛根原料中总黄酮含量的测定准确称取粉碎干燥过80目筛的葛根药材粉末0.5g ,加30%乙醇50mL ,加热回流30m in ,滤过,第28卷第3期2006年9月南昌大学学报#工科版Journal o fN anchang U n i versity(Eng i neering &T echno l ogy)V o.l 28N o .3Sept .2006精确吸取滤液适量,按样品溶液测定方法测定葛根原料中的总黄酮含量.浸取率=浸取液中葛根总黄酮量葛根原料中总黄酮量@100%2.2 微波浸取的实验方法准确称取粉碎干燥的葛根粉2g 于250mL 锥形瓶中,加入一定浓度体积的乙醇作溶剂,预泡一段时间后,在设定的微波功率下辐射几十秒,取出冷却、过滤,得到浸取的样品溶液,测定浸取液吸光度,并计算黄酮浸取率.按照此法首先对影响黄酮浸取率的主要因素,即微波功率、辐射时间、乙醇浓度、固液比等,分别进行单因素实验考察;再在单因素实验的基础上,优化组合进行正交试验,确定最佳浸取条件.3 结果与分析3.1 微波浸取的单因素实验3.1.1 微波功率对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25(1g z 25mL)均加入60%乙醇溶液50mL ,预浸泡1h ,分别在微波功率为700W 、560W 、420W 、280W 、140W 下辐射60s(此微波炉最大输出功率为700W,实际作用功率按微波火力百分数折算计),测温,并测定各次吸光度,计算浸取率.实验可知,开始微波功率增大时,温度也随之升高,当达到420W 以上后,溶液开始沸腾,温度达78.5e ,且恒定不再升高.由图1可看出,随着微波功率增大,黄酮浸取率也随之增大,在功率最大为700W 时,浸取率最大.图1 微波功率对黄酮浸取率的影响F ig .1 E ffect of m icrowave po w er on extracting rate of total isoflavones3.1.2 辐射时间及次数对黄酮浸取率的影响1)称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25均加入60%乙醇溶液50mL,预浸泡1h,设定微波功率为700W,分别辐射30s 、40s 、50s 、60s 、70s ,测温,并测定各次吸光度,计算浸取率.由图2可看出,随辐射时间的延长,总黄酮浸取率也逐渐增加,到60s 时浸取率最高,然后下降.实验可知,微波辐射至20s 时,观察到溶液即开始沸腾,推断由于乙醇水溶液为共沸混合物,因此在常压下,测得以上各次末温均为78.5e ,考虑连续辐射时间长易暴沸,且溶剂挥发较多,辐射时间取40s 较适宜.图2 微波辐射时间对黄酮浸取率的影响Fig .2E ffec t of m i cro w ave radiation ti m e on extrac ti ng rate of total isof l avone s2)称取2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25加入60%乙醇溶液50mL,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,第一次辐射40s 后,取出冷却,测定吸光度;然后再次辐射40s ,取出冷却,测定吸光度;如此间歇重复5次,计算各次浸取率.由图3可看出,随辐射次数的增加,总黄酮浸取率也逐渐增加,3次以后增加较缓,考虑到节省时间,以辐射3次较适宜.图3 微波次数对黄酮浸取率的影响F ig .3 E ffect of m icrowave treat men t ti m es onextrac ti ng rate of total isof l avone s#228#南昌大学学报#工科版2006年3.1.3 乙醇浓度对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25分别加入50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶液50mL,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,均辐射40s ,测定各次吸光度,并计算浸取率.由图4可看出,乙醇浓度对黄酮浸取率影响较大,乙醇浓度为60%时,黄酮浸取率最高,浓度再增加,浸取率反而下降.因此,乙醇浓度取60%较适合.图4 乙醇浓度对黄酮浸取率的影响F ig .4 E ffect of alcohol concen tration onextracting rate of total isoflavones3.1.4 固液比对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比分别为1z 15、1z 20、1z 25、1z 30、1z 40分别加入相应体积的乙醇溶液,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,均辐射40s ,测定各次吸光度,并计算浸取率.由图5可看出,在固液比为1z 20时,辐射40s ,黄酮浸取率最高.图5 固液比对黄酮浸取率的影响F i g .5 E ffec t of ra ti o of solid to li qu i d on extracti ngrate of total isof l avone s3.2 微波浸取的正交实验在单因素实验的基础上,对提取葛根总黄酮的主要因素:微波功率、乙醇浓度、固液比、辐射时间按表1进行L(34)正交实验设计,由表2中的实验结果和极差分析可知,各因素影响的主次为:B >C >A>D,即乙醇浓度、固液比、微波功率、辐射时间;最佳条件为B1C3A3D2,即正交实验的最佳工艺条件为:微波功率为700W,溶剂乙醇浓度为60%,固液比为1g z 25mL,辐射时间为40s ,间歇处理3次.其中固液比对葛根总黄酮浸取率的影响结果与单因素实验的结果有差异,经重复实验验证,其它条件同上,分别取固液比为1g z 20mL 和固液比为1g z 25mL ,辐射时间为40s ,间歇处理3次,比较发现固液比为1g z 20mL 时总黄酮浸取率为83.53%,固液比为1g z 25mL 时总黄酮浸取率为83.92%左右,说明正交实验所得工艺条件最佳.这可能是按正交实验设计,微波辐射次数增加为3次,有部分溶剂挥发,对固液比不同的体系,其总黄酮浸取率的影响不同,以及多因素作用时各因素之间存在交互作用的结果.表1 因素与水平Tab .1Factors and leve ls因素水平A 微波功率/WB 乙醇浓度/%C 固液比/(g #mL -1)D 辐射时间/s 1420601z 1530(3次)2560701z 2040(3次)3700801z 2550(3次)表2 正交实验数据与结果Tab .2 O rthogonal exper i m en tal datas and result序号A 微波功率/W B 乙醇浓度/%C 固液比/(g #mL -1)D 辐射时间/s 浸取率/%1420601z 1530(3次)76.292420701z 2040(3次)74.863420801z 2550(3次)71.274560601z 2050(3次)78.405560701z 2530(3次)80.426560801z 1540(3次)69.097700601z 2540(3次)83.928700701z 1550(3次)75.089700801z 2030(3次)69.84均值K 174.1379.5473.4975.52均值K 275.9776.7874.3775.96均值K 376.2870.0778.5474.92R2.159.475.051.044 结论1)在本实验条件下,葛根黄酮浸取率均随微波功率和辐射时间增加而增加,但随乙醇浓度和固液比增加而存在一最佳值.本实验微波辅助浸取葛根总黄酮的最优工艺条件为:在常压下,当葛根粒度为#229#第3期 白兰莉等:葛根总黄酮提取新工艺的研究80目,预浸泡1h ,微波功率为700W,固液比为1g z 25m L ,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40s ,间歇处理3次,总黄酮提取率达83.92%.2)本实验还做了传统回流浸取和超声浸取工艺提取葛根总黄酮的研究.在固液比为1z 25、乙醇浓度为70%和回流浸取时间为3h 的实验条件下,传统回流浸取工艺的浸取率为82.38%;在固液比为1z 15、乙醇浓度为60%和超声浸取时间为30m in(2次)的实验条件下,超声浸取工艺的浸取率为82.48%.可见,与传统回流浸取和超声浸取工艺相比,微波浸取新工艺具有节时、节能和浸取率高等优点.3)为充分利用葛根资源,在后续实验中,将从本实验过滤所得滤渣中回收葛根淀粉,对提取的黄酮液将进一步分离纯化,得到高质量的葛根黄酮.参考文献:[1] H ao Jing Rong ,H an F .D e i nze reta l Identifica ti on of Isfla -vones i n t he Roo ts of Puerar i a loba ta[J].P lant M edica ,1998,64:620-627.[2] 郭建平,孙其荣,周全.葛根药理作用研究进展[J].中草药,1995,26(3):163-165.[3] 邓晓娟,刘晓龙,吴秀清,等.葛根资源的研究与开发利用[J].基层中药杂志,2002,16(2):48-49.[4] 詹永,杨勇.葛根异黄酮的提取方法与应用[J].广州食品工业科技,2004,20(2):169.[5] K ennedy John F ,L in Y u-T ien .A dvance i n f ood andnutriti on resea rch [D ].N e w Y o rk :A cade m ic P ress Inc ,1997,35:111-113.[6] 徐进,张卫明,马世宏,等.葛根在化妆品中的应用初探[J].中国野生植物资源,2000,19(3):11-13.[7] 张成,贾绍义.微波萃取技术及其应用[J].化学工业与工程,2004,12(6):444-448.[8] Pan X ue j u ,N i u Guoguang ,L i u Hu iz hou .M i cro w ave-as -sisted ex tracti on of tansh i nones from sa l v ia m ilti o rrh i za Bunge w ith ana l ysis by h i gh-per f o r m ance li qu i d ch ro m a -tography[J].Ch ro m a t og raphy A ,2001,922:371-375.[9] 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nor m a l pressure .The ne w techn i q ue has the advantages of faster leach i n g ,lo w er energy consumpti o n and higher leachi n g effic iency co m pared w it h no r m a l re fl u x and ultra -sonic l e aching m ethods .K ey W ords :m icro w ave ;l e aching ;puerar i a l o bata ;to tal iso flavones#230#南昌大学学报#工科版2006年。
葛根总黄酮提取工艺研究
黄酮类化合物是植物 的次级代谢产物 ，在 自然 界
中分布 广泛 ，普遍存在于植物 的叶子和果实 中。葛根
厂。
紫外 分光光度 计（ Ｖ ２ ０ Ｐ ） Ｕ －１２ Ｃ ：上海尤 尼柯仪器
有 限公司 。
既是 中药材，又 是营养丰富的食用原料 。其被 《 农 神 本 草经 》列为中品 ，并为 中国药典所收载［２ １］ －。
摘要：本论文采用传统浸提 法，以乙醇为溶剂， 考察溶剂体积分数、提取 时间、固液比、提取温度和 葛 根粉粒度对葛根总黄酮
提取率的影响 ， 并在单 因素 实验的基础上，通过正 交试验 ， 确定 了葛根 总黄酮的提取工艺。结果表 明，提取温度 、 提取时间、固液比、
乙 醇体积分数以及粒度对葛根总黄酮的 提取率均有影响，优化的葛 根总黄酮的提取工艺为： 取温度为 ８ ℃， 提 Ｏ 提取时间为 １０ ｉ， ２ ｍｎ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｈ ｏａ ａ ｏ ｅ ｒ ｘ ｒｃｅ ｔ ｌｏ ｏ ｓ ｔ ｅ ｓ ｌｅ ｔｆｏ Ｐ ｅ ａ ｉ ｏ ａａ Ｏｈ ． ｅ ｅ ｅ ｔ ｆｔ ｅ ｅ ｔ ｃ ｏ ｓｒ ｃ ：Ｔ ｅ ｔ ｔｌｆ ｖ ｎ ｓ ｗｅ ｅ ｅ ｔ ｔｄ ｗｉ ａ ｃ ｈ ｌａ ｈ ｏ ｖ ｎ ｒ ｍ ｕ ｒ ｒ Ｌ ｂ ｔ ｗｉ Ｔｈ ｆ ｃｓ ｏ ｈ ｘ ｒ ｔ ｎ ｌ ａ ｈ ａ ａｉ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓｓ ｃ ｓｔ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｏ ｅ ａ ｏ ， ｅｅ ｔ ｃ ｏ ｍｅ ｔ ｅｒ ｔ ｆ ｕ ｒｒ ｅｔ ｏｕ ｉｎ ｏ ｅ ａ ｏ ， ｘ ｒ ｃｉｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｎ ｅ ｏ ｄｔ ｎ ｕ ｈａ ｏ ｃ ｎｒ ｉ ｆ ｔ ｎ ｌｔ ｘ ｒ ｔ ｎ ｔ ， ｉ ｏ Ｐ ｅ ａｉ ｓ ｌ ｔ ｆ ｔ ｎ ｌ ｅ ｔａ ｔ ｉ ｈ ａｏ ｈ ｈ ａｉ ｉ ｈ ａｏ ａ ｏ ｏ ｈ ｏ ｅ ｅａ ｕ ｅａ ｄ ｔ ｈ ｓ ｅｏ Ｐ ｅ ａ ｉ ｂ ｔ ｗｉ ｒ ｔ ｄｅ ． ｅｐ ｏ ｅ ｏ ｄ ｔ ｎｗａ ｅｅ ｍｉｅ ｙｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅ ｉ ｎ ． ｅｒ ｓ ｌ ｒ ｌ ｗｉｇ Ｔ ｅ ｉ ｆ ｕ ｒ ｒ Ｌｏ ａ ａＯｈ ｅｓ ｉｄ Ｔ ｒ ｐ ｒ ｎ ｉ ｏ ｓ ｔｒ ｎ ｄｂ ｒ ｇ ｎ ｌ ｐ ｒ ｚ ａ ｗｅ ｕ ｈ ｃ ｉ ｄ ｈ ｅ ｍｅ ｔ Ｔ ｕ ｔ ｗｅｅａ ｆ ｌ ｎ ： ｈ ｅ ｓ ｓ ｏｏ ｈ
表面活性剂辅助提取葛根总黄酮的工艺研究
酮的最佳提取工艺 为乙醇浓度５ ０％，料液 比１３ ，聚 山梨酯２ ． ５％，提取 时间３ ｎ ： ０ ０００ ７ ０ｍｉ。结论 本 实验最佳工艺提取率可
达３ ． ／，且节 能、省 时。 ９８ ｍｇｇ ０ 关键词 ：表面活性剂 ：葛根 ：总黄酮 ；正交试验 中图分类号 ：Ｒ ８ ．１ ２ ２７ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ７ ．７ Ｘ （０ １ １０ １—３ ６ ２９ ９ ２ １ ）１．４ ４０
表 面 活性 剂是 一类 即使 在很 低 浓度 时也 能显 著 １材料与仪器 降低 表 （ ）面 张力 的物质 ，具有 增 容 、润 湿 等作 界 葛根 （ 济南建 联 ，粉碎 ，过 １ 号筛备用 ）；葛根
用【。现在有研 究者利用表 面活性剂 的增溶 、润湿作 素标准 品 （ １ ｊ 中国食 品药 品检定研 究院 ）；Ｓ 、聚 山 ＤＳ 用 ，开展 了表面活性剂协 同提取天然产物活性成分 的 梨酯２ 、聚 山梨酯６ 、聚 山梨酯８ ，司盘２ 、司盘６ ０ ０ ０ ０ ０ 研 究 ］ 以冀用 溶有 少量表 面活性 剂 的溶剂代 替高 。，
浓度溶剂提取天然药物 ，以降低提取成本 ，提 高提取
率。
（ 国药集 团化学试剂 ）。 Ｕ．０ ０ ３ １紫外分 光光度 计 （ 日本 日立 ）；ＫＱ ２ ０ ．５ Ｅ
ｃ ｎ ｅ ｔａｉ ｎ ｏ ｔ ｎ ｌ ｓ５ ％， ｈ ａｉ ｆ ｅ ａｉ ｏ ｓ ｌ ｎ ｓ ｌ３ ， ｅｄ ｓ ｇ ｆＴ ｅ ０ｗａ ０ ５ ｔ ｅ ｏ ｃ ｎ ｔ ｆｅｈａ ｏ ｒ ｏ ｗａ ０ ｔ ｅｒ ｔｏ ｏ ｒ ｒａｔ ｏｖｅ ｔ ｐｕ ｗａ ： ０ ｔ ｏ ａ ｅ ｏ ｗｅ ｎ ２ ｓ０．７ ％， ｈ ｈ
ｅ ｔａ ｔｏ ｅ ｈｎ ｌ ｇ ａ ｅ ｅｍ ｉ ｅ ｙ ａ ￣ｈ ｇ ｎａ ｘ ｒｍ ｅ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ｔ ｅ ｎ ２ ａ ｈ ｓ ｕ ｆ ｃａ ｔ ｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｔ ｃ ｏ ｏ ｙ ｗ ｓ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ ｂ ｎ ｏ ｏ ｏ ｌｅ ｐｅ ｉ ｎｔ ｓ ｌｓ ｗ ｅ ０ ｗ ｓｔ ｅ ｂｅ ｔｓ ｒａ ｔ ｎ ｉ ｓ ｉｔｎ ｏ ｅ ｒ ｃ ｏ ａ ａ ｏ ｓ ｆｏ ｐｕ ｒ ｒａ Ａｎｄ ｔ ｐ ｉ ａ ｘ ｒ ｃｉ ｎ ｔ ｃ ｏ ｏｇ ａ ｓ ｆ ｌ ｗ ｓ ｈ ｎ ａ ｓｓｉ ｇ ｔ ｘｔａ ｔｔ ｔ ｌｆ ｖ ｎｅ ｍ ｅ ａ ｉ ． ｌ ｒ ｈｅ ｏ ｔｍ ｌｅ ｔａ ｔｏ ｅ ｈｎ ｌ ｙ ｗ ｓａ ｏｌ ｏ ：ｔ ｅ
葛根中总黄酮提取工艺
葛根中总黄酮提取工艺研究摘要葛根中总黄酮含量相对同类产品较高，其利用价值也较高。
总黄酮具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用本文通过对葛根中总黄酮几种提取方法（超声辅助提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法）的研究和比较，从而确定出一种较好的提取方法——醇提取法。
为提高原材料利用率，增加经济效益提供有用的数据。
关键词总黄酮；超声辅助提取法；醇提取法葛根为豆科多年生落叶藤本植物葛的干燥根[1] , 属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品[2] ,其主要有效成分为葛根素、大豆素、大豆苷等异黄酮类化合物, 具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用[3 ～5 ]。
总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。
黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。
它们对健康的好处有：抗炎症、抗过敏、抑制细菌、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心与脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等。
天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能时入脂肪组织，进而体现出如下功能：消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。
葛根总黄酮提取法有醇回流法、醇渗漉法、浸渍法、超声辅助萃取法等,但利用超声辅助提取中药有效成分具有生产周期短、效率高、设备简单、成本低的优点[6 ,7]。
本文主要介绍了超声提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法，并对葛根中总黄酮的开发利用前景作出了一些说明。
1.超声辅助提取法1.1工艺流程[8]葛根→破碎→超声提取→过滤→减压浓缩→过柱→水洗脱→乙醇洗脱→减压浓缩→真空干燥→总黄酮提取物。
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PQRSTQSUTVWSQXTYZY[\Y]^YYV_TV‘abc\
dYZefg/hYei/fjjj
工艺条件!鲜葛根 "##$%醇用量 以鲜 葛 根 重倍 数
表 4 不同提取工艺的效果
计 %减 压 浓 缩 控 制 温 度 & ’#( ) *+, 葛根总黄酮含量的测定 *+,+* 标准曲线的制备 精密称取干燥至恒重的葛 根 素 -.$/于 0-.1容 量 瓶 中/加 2-3乙 醇 溶 解 并 稀 释至 刻 度/摇 匀) 精 密 吸 取 #+4/#+0/#+"/#+5/#+-/ #+6/#+7/4+#.1分 别置于 4#.1容量 瓶中/用 4#+#.1 2-3乙 醇 精 密 加 水 至 4##.1的 溶 液 稀 释 至 刻 度/摇 匀) 以 上 述 溶 剂 做 空 白 对 照/在 0-#8. 处 测 定 吸 收 度 /回 归 方 程 为 !9: #+4520; #+#"2</=: #+222’) *+,+> 葛根提取物总黄酮含量的测定 精密称取各 法 提 取 物 4-#.$/相 当 于 葛 根 黄 酮 约 -#.$/分 别 置 于 0-#.1容量瓶中/加 2-3乙醇溶解并稀释至刻 度/ 摇 匀)精 密吸取 #+-.1分 别置于 4#.1容量 瓶 中/用 4#+#.12-3乙醇精密加水至 4##.1的溶液稀释至刻 度/摇匀)以上述溶剂做空白对照/在 0-#8. 处测 定 吸 收 度 /从 标 准 曲 线 上 换 算 出 葛 根 黄 酮 的 含 量 ) *+? 葛根提取物的薄层层析
M 渣 "它 用 浓 OCQ8E
M %&PL 调 ROJG&L 离心 L 滤 液 上 硅 胶 柱 层 析 L 水洗
M 离心 L 滤液调 ROEG&L 过滤 L 滤液减压浓缩至干L 总黄
M 沉淀"弃
M 沉淀"弃
M 沉 淀 "弃
M 洗 脱 液 "弃
L U%P 乙 醇 洗 脱 L 洗 脱 液 减 压 浓 缩 至 干 L 总 黄 酮 物
L 过滤 L
的 根"具 有 解 肌 退 热@生 津 透 疹@升 阳 止 泻 的 功 效)A’B
M 回收醇
M 沉 淀 "弃
葛根 的 主要有效 成 分 是 葛 根 素@大 豆 甙@大 豆 甙 元 等
饱和碱式乙酸铅 L 过滤 L 沉 淀 悬 浮 于 $&&<5U%P乙 醇 中
多 种 异 黄 酮 类 物 质 ) 这 些 物 质 对 改 善 高 血 压 @动 脉 硬 化 患 者的脑血流@扩 张 冠 脉 血 管 和 脑 血 管"调 节 血 液
M "5M
葛根总黄酮提取工艺
作者： 作者单位： 刊名：
英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数：
曾祥群， Zeng Xiangqun 江西鹰潭市工业技术研究所,鹰潭,335001
食品工业科技 SCIENCE AND TECHNOLOGY OF FOOD INDUSTRY 2000(3) 35次
参考文献(6条)
FGKGZ 水提法
鲜葛根L清洗L干燥L破碎L水浸提L 过滤 L
M 滤液去合并液
%PX.8O 水溶液
N.!8O(C 乳
M 渣"再提取 L 过滤 L 滤液合并L 合并液减压浓缩至 %&P L
M 渣"它用
M 回收醇
浓 OCQ8E
M 渣"再提取 L 过滤 L 滤 液 合 并 L 合 并 液 减 压 浓 缩 至
V J&W )
鲜 葛 根 L 清 洗 L 干 燥 L 破 碎 L 醇 回 流 L 过滤 L
FGKGK 铅盐法
鲜 葛 根 L 清 洗 L 干 燥 L 破 碎 L U%P乙 醇 回 流 L 过滤
滤液减压浓缩至干L总黄酮物
M 渣 "它 用
万方数据
M 渣 "它 用
M 回收醇
] $$]
N食 品 工 业 科 技 O
精 密 称 取 葛 根 素 4#.$和 各 法 提 取 物 相 当 于 葛 根 总黄酮 4#.$/分别 置于 4#.1容 量 瓶中/加 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 /摇 匀 )分 别 点 样 于 硅 胶 薄 层 板 @7A. B 47A.C/以 展 开 剂 氯 仿D甲 醇D水 @’E 0+-E #+0-C展 开/在紫外灯 0-58. 下观察荧光/记录斑点位置) > 结果与讨论 >+* 不同提取工艺的效果见表 *)
M 滤液沉淀黄酮
X.CQ8E
M 滤 液 "弃
循 环有显著效果)提取葛根总黄酮的研究已有报
道)ACDEB我们对大叶粉葛的总黄酮提 取 工 艺 进 行 了 深
入 研 究 "确 定 了 最 佳 工 艺 条 件 )
F 材料与方法
FGF 材料与仪器
葛根 本地栽培的大叶粉葛H葛根素标准品 中
国 药品生物 制 品 检 定 所H硅 胶 I 青 岛 海 洋 化 工 厂H
1.李石生 野葛藤茎化学成分研究[期刊论文]-中草药 1999(06) 2.曾明 葛属植物藤茎的化学成分分析[期刊论文]-中国中药杂志 1999(03)
3.郭建平 查看详情 1995(10) 4.王昌利 查看详情 1995(06)
5.陆宁 查看详情[期刊论文]-食品工业科技 1998(01)
6.卫生部药典委 中华人民共和国药典(一部) 1995
M 沉 淀 "弃
M 沉 淀 "弃
M 回收醇
L总黄酮物
工 艺 条 件S鲜 葛 根 $&&THU%P乙 醇 回 流 C次"每
次 C9"醇 量 每 次 J%&<5H减 压 浓 缩 控 制 温 度 V J&WH
饱 和 中 性 乙 酸 铅 加 入 Y&<5H饱 和 碱 式 乙 酸 铅 加 入
$&<5"X.CQ8E加入 CG&T)
^食 品 工 业 科 技 _
‘abcdacedfgcahdijiklimniifodfpqrsl
tij7uv"wi7x"uyyy
葛根总黄酮提取工艺
曾祥群
!江西鹰潭市工业技术研究所"鹰潭 $$%&&’(
##############################################
摘 要 对葛根总黄酮提取工艺进行了研究"确定了最佳工艺条件) 关键词 葛根 葛根总黄酮 提取工艺 正交试验
M 回收醇
酮物
工艺条件S鲜葛根 $&&TH溶媒采用甲醇或 U%P乙 醇"每 次 用 量 J%&<5"回 流 C次"每 次 C9H再 用 N.!8O(C乳 $&&<5提 取 ’次H减 压 浓 缩 控 制 温 度
工 艺条 件S鲜 葛 根 $&&TH水 [&&<5浸 提 ’C9H%P X.8O 水溶液浸提 &G%9H减压浓 缩控制 温度V J&WH 水 洗 @U%P 乙 醇 洗 脱 时 控 制 流 速 和 用 量 ) FGKG\ 正交试验
其他试剂 均为分析纯H
J%C型紫外分光光度计 上海分析仪器厂)
FGK 工艺流程和工艺条件
FGKGF 醇提法
鲜葛根L 清洗L 干燥L 破碎L 醇回流L
过滤
L
M 滤液"去合并液
M L 脱铅 L
过滤
L 沉 淀 于 $&&<5U%P乙 醇 中 回 流
M 滤 液 "去 合 并 液
C9L 过滤 L 滤 液 合 并 L 合并液离心 L 滤液减压浓缩至干
醇提法I铅 盐 法I水 提 法 得 到 的 葛 根 总 黄 酮 提 取 物 经 硅 胶 薄 层 层 析/均 得 到 位 置 相 近 的 至 少 ’个 斑 点 /斑 点 大 小 @荧 光 深 浅 C略 有 差 异 ) , 结论
葛 根 总 黄 酮 除 药 用 外 /还 可 添 加 于 方 便 食 品 或 饮 料 中 )提 取 葛 根 总 黄 酮 的 方 法 同 样 适 用 于 葛 根 藤 茎 和 叶 中 总 黄 酮 的 提 取)K-/6L充 分 且 有 效 地 利 用 葛 根 总 黄
##############################################
葛 根 是 豆 科 多 年 生 缠 绕 藤 本 植 物 葛 *+,-.-/. 012.3.!4/5567(89:/或 *+,-.-/.;91<=1>//?,>39
饱和中性乙酸铅
L 滤液减压浓缩至 %&P L
M 除杂质
本文读者也读过(7条) 1. 李增富.吴荣锋.LI Zeng-fu.WU Rong-feng 葛根总黄酮的提取研究[期刊论文]-应用化工2008,37(11) 2. 周率.张彬.周武.黎新江.欧阳辉桂 葛根总黄酮的提取及其抗氧化性能研究[期刊论文]-安徽农业科学 2008,36(17) 3. 刘圣.陈礼明.李矗.唐丽琴.张善堂.陈敬.汪友明.LIU Sheng.CHEN Li-ming.LI Chu.TANG Li-qin.ZHANG Shantang.CHEN Jing.WANG You-ming 正交试验优选-大孔树脂分离葛根总黄酮工艺[期刊论文]-中国医院药学杂志 2006,26(6) 4. 李芙蓉.吕博 葛根中总黄酮的微波提取及含量测定[期刊论文]-新疆中医药2002,20(6) 5. 刘敏彦.董超.高秀强.秦拢.许红辉.王玉峰.李晓燕.Liu Minyan.Dong Chao.Gao Xiuqiang.Qin Long.Xu Honghui .Wang Yufeng.Li Xiaoyan 中药葛根提取工艺研究[期刊论文]-中国药业2008,17(3) 6. 张喜梅.李琳.陈玲.苗晓杰.ZHANG Xi-mei.Li Lin.CHEN Ling.MIAO Xiao-jie 葛根总黄酮提取工艺研究[期刊论 文]-现代食品科技2008,24(1) 7. 刘火安.王伯初.贾云.戴传云.王宾豪.LIU Huo-an.WANG Bo-chu.JIA Yun.DAI Chuan-yun.WANG Bin-hao 葛根总 黄酮提取工艺的研究[期刊论文]-生物技术通讯2006,17(1)