测序基本步骤

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一代测序流程

一代测序流程

一代测序流程一代测序是指通过一种高通量测序技术,对DNA或RNA样本进行测序,从而获取样本的全基因组或转录组信息。

一代测序技术的发展,为科研工作者和临床医生提供了更多的遗传信息,有助于揭示疾病的发病机制、诊断和治疗方法的研究。

一代测序流程主要包括样品准备、文库构建、测序仪测序、数据分析和结果解读等步骤。

下面将对一代测序流程进行详细介绍。

首先是样品准备。

样品可以是DNA、RNA或其它类型的核酸。

在样品准备阶段,需要对样品进行提取、纯化和定量,确保样品的质量符合测序的要求。

此外,还需要对样品进行质控,检测样品的完整性和纯度,以确保后续步骤的顺利进行。

接下来是文库构建。

文库是指将样品中的DNA或RNA片段连接到测序适配器上,构建成文库,为后续的测序提供样品。

文库构建的关键步骤包括DNA片段的剪切、末端修复、连接适配器和PCR扩增等。

在文库构建过程中,需要严格控制各个步骤的条件和时间,以确保文库的质量和可靠性。

然后是测序仪测序。

文库构建完成后,样品就可以送入测序仪进行测序。

测序仪会根据测序平台的不同,采用不同的测序技术进行测序,如Illumina、Ion Torrent、PacBio等。

在测序过程中,测序仪会逐个读取文库中的DNA或RNA片段,并生成原始的测序数据。

接着是数据分析。

测序仪生成的原始测序数据需要进行数据分析,将原始数据转化为可解读的生物信息学数据。

数据分析的步骤包括序列质量控制、序列比对、变异检测和功能注释等。

通过数据分析,可以获取样品的基因组或转录组信息,识别基因突变、表达差异和功能通路等生物学信息。

最后是结果解读。

在数据分析完成后,需要对分析结果进行解读,理解样品的生物学意义。

结果解读需要结合实验设计和科研目的,对数据分析结果进行综合分析和解释,从而得出科学结论,并为后续的研究或临床诊断提供参考。

总的来说,一代测序流程是一个复杂的过程,涉及样品准备、文库构建、测序仪测序、数据分析和结果解读等多个环节。

二代基因测序流程和试剂

二代基因测序流程和试剂

二代基因测序流程和试剂(原创实用版)目录1.二代基因测序的概述2.二代基因测序的流程3.二代基因测序的试剂4.二代基因测序的应用领域5.我国二代基因测序的发展状况正文二代基因测序的概述二代基因测序,也称为下一代基因测序(NGS),是继 Sanger 测序之后发展起来的一种高效、快速的基因测序技术。

二代基因测序技术具有高通量、低成本、高精度等特点,使得基因测序在全基因组测序、转录组测序、基因表达谱分析等领域得到广泛应用。

二代基因测序的流程二代基因测序的流程主要分为以下几个步骤:1.样品准备:将待测样品提取出 DNA,并进行质量和浓度检测。

2.文库构建:将 DNA 片段进行断裂、末端修复、连接接头、PCR 扩增等步骤,构建出文库。

3.测序:将文库片段进行高通量测序,通常采用 Illumina、PacBio、Oxford Nanopore 等技术。

4.数据处理:对测序得到的原始数据进行质量控制、去除接头序列、过滤低质量序列等步骤,得到高质量的序列数据。

5.数据分析:将高质量的序列数据进行比对、拼接、注释等步骤,得到最终的测序结果。

二代基因测序的试剂二代基因测序所需的试剂主要包括:DNA 提取试剂盒、文库构建试剂盒、PCR 扩增试剂、测序反应试剂等。

其中,文库构建试剂盒通常包括末端修复酶、连接酶、接头等。

PCR 扩增试剂包括引物、dNTPs、缓冲液等。

测序反应试剂包括测序平台特定的测序反应液、模板 RNA、酶等。

二代基因测序的应用领域二代基因测序技术在多个领域得到广泛应用,包括:基因组学、转录组学、表观遗传学、基因表达谱分析、基因突变检测、病原体检测等。

在基因组学领域,二代基因测序可以进行全基因组测序,揭示物种的基因组结构和功能;在转录组学领域,二代基因测序可以进行转录组测序,研究不同组织、不同发育阶段、不同处理条件下基因的表达情况。

我国二代基因测序的发展状况我国在二代基因测序领域取得了显著的发展。

2014 年初,国家卫计委和食药监督管理总局共同出台文件叫停二代基因测序服务,并着手推进试点工作。

rnaseq流程步骤

rnaseq流程步骤

rnaseq流程步骤RNA测序(RNA-Seq)是一种高通量测序技术,用于研究RNA样本中的转录组。

它可以提供关于基因表达水平和转录本结构的全面信息。

RNA测序流程包括实验设计、样本准备、RNA提取、测序、数据处理和分析等步骤。

一、实验设计实验设计是RNA测序流程的第一步,它决定了研究的目的、样本的选择和处理方式。

在实验设计中,需要确定研究的组织或细胞类型、处理组和对照组、样本数量以及测序的深度等重要参数。

二、样本准备样本准备是RNA测序流程的关键步骤之一。

在样本准备中,需要对样本进行处理,以保证提取到高质量的RNA。

常见的样本处理方法包括组织冻存、细胞裂解和RNA的稳定化等。

同时,为了减少样本间的差异,还需要进行样本的随机排列和复制。

三、RNA提取RNA提取是RNA测序流程的核心步骤之一。

在RNA提取中,需要使用RNA提取试剂盒或其他方法从细胞或组织中提取RNA。

提取到的RNA需要经过DNase处理,以去除DNA污染。

同时,为了获得高质量的RNA,还需要进行RNA的浓缩和纯化。

四、测序测序是RNA测序流程的关键步骤之一。

RNA测序可以使用不同的测序平台,如Illumina、Ion Torrent和PacBio等。

在测序之前,需要对RNA样本进行建库,包括RNA的反转录、cDNA合成、文库构建和PCR扩增等步骤。

然后,将建好的文库进行高通量测序,生成原始的测序数据。

五、数据处理数据处理是RNA测序流程中的重要步骤之一。

在数据处理中,需要对原始的测序数据进行质量控制和过滤,去除低质量的reads和污染序列。

然后,将过滤后的reads进行比对到参考基因组或转录组,以确定每个reads的来源。

最后,根据比对结果进行基因表达水平的计算和统计分析。

六、数据分析数据分析是RNA测序流程中的最后一步。

在数据分析中,需要对基因表达水平进行差异分析和聚类分析,以找到差异表达的基因和样本间的相似性。

同时,还可以进行基因富集分析、调控网络分析和转录本组装等进一步的分析。

高通量测序流程和原理

高通量测序流程和原理

高通量测序流程和原理高通量测序是一种快速、准确地测定DNA或RNA序列的技术,它在生物学研究、医学诊断和药物研发等领域发挥着重要作用。

本文将介绍高通量测序的流程和原理,帮助读者更好地理解这一技术。

高通量测序的流程主要包括样品准备、文库构建、测序仪测序和数据分析四个步骤。

首先,样品准备阶段需要从生物组织中提取DNA或RNA,并进行纯化和定量。

接下来是文库构建,这一步骤包括将DNA或RNA片段连接到测序适配器上,并进行PCR扩增,然后通过尺寸筛选和纯化得到文库。

然后,文库被加载到测序仪中进行测序,测序仪会通过不同的化学方法和光学检测技术获取DNA或RNA片段的序列信息。

最后,通过数据分析软件对测序得到的数据进行处理,包括序列拼接、比对、变异检测等步骤,最终得到样品的DNA或RNA序列信息。

高通量测序的原理是基于DNA或RNA的合成和测序技术。

在测序过程中,DNA或RNA片段会被适配器连接,并通过PCR扩增得到文库。

然后,文库中的DNA或RNA片段会被固定在测序仪的表面上,并进行碱基的逐个添加和检测。

测序仪会通过光学检测技术记录每个碱基的信号强度,并将其转化为序列信息。

最后,数据分析软件会对这些信号进行处理,得到样品的DNA或RNA序列信息。

高通量测序技术的发展使得科研人员能够更快速、更准确地获取大规模DNA或RNA序列信息,从而推动了基因组学、转录组学和表观基因组学等领域的发展。

同时,高通量测序技术也在临床诊断和个性化医疗中发挥着越来越重要的作用。

总的来说,高通量测序的流程主要包括样品准备、文库构建、测序仪测序和数据分析四个步骤,其原理是基于DNA或RNA的合成和测序技术。

这一技术的发展对于推动生物学研究、医学诊断和药物研发具有重要意义,相信随着技术的不断进步,高通量测序技术将会在更多领域展现出其巨大的潜力。

单细胞测序之基本的数据处理基本流程

单细胞测序之基本的数据处理基本流程

单细胞测序之基本的数据处理基本流程1.数据质控:数据质控是单细胞测序数据处理的第一步,其目的是对原始数据进行过滤和剔除质量差的细胞。

常见的数据质控指标包括读取数、基因表达数、基因覆盖度、外源RNA比例、低质量细胞比例等。

读取数和基因表达数可以用来评估测序深度和数据完整性,基因覆盖度可以用来评估测序覆盖的均匀性,外源RNA比例可以用来评估细胞捕获的纯度,低质量细胞比例可以用来评估细胞的RNA完整性。

2.数据预处理:数据预处理是单细胞测序数据处理的第二步,其目的是对原始数据进行标准化和去噪。

常见的数据预处理方法包括基因表达的归一化、批次效应的移除、PCR放大偏差的校正等。

基因表达归一化是指通过一系列数学变换将细胞之间的基因表达进行标准化,以解决测序深度的差异带来的问题。

批次效应的移除是指通过线性模型或非线性模型将不同批次的数据调整到同一水平,以消除批次效应对单细胞聚类和差异表达的影响。

PCR放大偏差的校正是指通过数学建模和统计推断将PCR放大过程中引入的偏差进行校正,以提高数据的准确性。

3.单细胞聚类:单细胞聚类是单细胞测序数据处理的第三步,其目的是将相似的细胞归为同一类别。

常见的单细胞聚类方法包括层次聚类、K 均值聚类、Gaussian 混合模型聚类等。

单细胞聚类的基本原理是通过定义相似度度量和聚类算法,将细胞之间的相似性转化为距离或相似性矩阵,然后将相似的细胞归为同一类别。

聚类的结果可以通过可视化和生物学功能注释来进一步理解细胞的类型和状态。

4.差异分析:差异分析是单细胞测序数据处理的最后一步,其目的是比较不同细胞类型或状态之间的基因表达差异。

常见的差异分析方法包括差异基因分析、差异表达矩阵构建和富集分析等。

差异基因分析是指通过统计方法比较不同细胞类型或状态之间的基因表达水平,以识别具有显著差异的基因。

差异表达矩阵的构建是指将差异基因根据其差异表达的程度和模式进行聚类和可视化,以揭示不同细胞类型或状态之间的表达特点和变化趋势。

全基因组测序流程

全基因组测序流程

全基因组测序流程
1 全基因组测序
全基因组测序的全称为Whole Genome Sequencing(WGS),是一
种通过分析基因组中每一条核酸序列,来研究物种及其相关基因的技术。

WGS技术可以揭示产生个体的全部遗传信息,对理解复杂疾病、遗传研究、肿瘤细胞分离等有重要意义。

2 WGS流程
WGS流程由四大步骤:基因组制备、测序生成、数据分析、解析准备。

1)基因组制备:在做全基因组测序之前,需要首先准备新鲜收集
的细胞样本、微生物或动物组织样本,过程中常使用DNA抽提技术和
微流技术进行处理,以获得样品中的有效DNA。

2)测序生成:将经过DNA抽提的样本,或捐赠的自然样本,都会
经过一定的过程进行萃取后,分别进入测序和组装。

除了采用Sanger
测序和pyro sequencing等常规技术外,近年来,产生测序技术出现
较大进展,基本上都采用了massive parallel sequencing(MPS)技术,可以获取数以百万计的序列数据,节省了大量的时间和费用。

3)数据分析:这一步需要将生成的原始序列比对到参考基因组中,以及将低质量的序列移除,通常会采用bioinformatics、Python、R
等计算工具进行分析。

4)解析准备:最后可以解析样本的基因组,发现影响疾病遗传机制及基因变异的差异,以作进一步的分析。

3 总结
全基因组测序是一种研究物种及其相关基因的技术,它需要经历四步技术。

第一步要生成可用于测序的有效DNA;第二步要采用MPS技术,生成数量庞大的序列数据;第三步采用计算工具进行数据分析;最后进行解析准备,发现潜在的基因变异进而对其进行分析。

rnaseq流程步骤

rnaseq流程步骤

rnaseq流程步骤RNA测序(RNA-seq)是一种用于研究转录组的高通量测序技术。

它可以帮助我们理解基因表达和转录调控的机制,并揭示基因功能和调控网络。

本文将介绍RNA测序的流程步骤。

1. 样品制备RNA测序的第一步是样品制备。

样品可以是细胞、组织或者其他生物学材料。

首先,需要提取RNA,通常使用酚-氯仿法或商业化的RNA提取试剂盒。

提取的RNA可以是总RNA,也可以是多聚A+ RNA,取决于研究的目的。

2. RNA质量检测提取的RNA需要进行质量检测,以确保RNA的完整性和纯度。

常用的方法有比色法、凝胶电泳和生物分析仪。

RNA的A260/A280比值应在1.8-2.2之间,表示RNA的纯度较高。

3. RNA文库构建RNA测序需要构建RNA文库,即将RNA转录为cDNA,并进行文库的建立。

常用的文库构建方法有两种:全长文库和选择性文库。

全长文库包括了RNA的全部信息,而选择性文库只包括了某些特定的RNA,如mRNA或非编码RNA。

4. 文库测序构建好的RNA文库需要进行测序。

目前常用的测序技术有两种:第一代测序和第二代测序。

第一代测序技术包括Sanger测序和454测序,具有高准确性但测序量较少。

第二代测序技术包括Illumina测序、Ion Torrent测序和PacBio测序等,具有高通量但准确性稍低。

5. 数据质量控制测序得到的原始数据需要进行质量控制,以排除低质量的序列。

常用的数据质量控制工具有FastQC和Trimmomatic。

这些工具可以检查序列的质量分数、序列长度分布和测序错误等,并根据设定的阈值进行过滤和修剪。

6. 数据比对和定量质控后的序列数据需要进行比对和定量。

比对是将测序reads与参考基因组序列进行比对,以确定每个reads的起源。

常用的比对工具有Bowtie、STAR和HISAT等。

定量是根据比对结果,计算每个基因或转录本的表达水平。

常用的定量工具有HTSeq和featureCounts等。

测序仪的原理与使用流程

测序仪的原理与使用流程

测序仪的原理与使用流程1. 测序仪的原理测序仪是一种用于测定DNA或RNA序列的设备。

它通过一系列复杂的化学反应和光学信号读取来确定碱基的顺序。

下面是测序仪的工作原理:1.DNA扩增:测序前需要将待测序列进行扩增,常用的方法有PCR(聚合酶链式反应)和文库构建法。

2.定向测序:定向测序是指选择一个起始点,由这个点开始一次测定一个较短的DNA片段的序列。

这个过程可以重复多次,最后通过合并这些片段得到完整的序列。

3.测序方法:目前常用的测序方法有Sanger测序、Illumina测序、IonTorrent测序和PacBio测序等。

4.Sanger测序: Sanger测序是使用荧光标记的二进制链终止法来测定DNA的序列。

通过添加不同颜色的荧光标记的碱基到扩增DNA链上,根据读取到的信号来确定每个碱基的顺序。

5.Illumina测序: Illumina测序利用逆转录和PCR扩增的方法将DNA片段固定在透明的流动单元上,然后将测序引物加入测序反应体系中。

在逐步加入不同的荧光标记的碱基时,通过扫描来记录每个碱基的信号。

6.Ion Torrent测序: Ion Torrent测序是通过检测DNA链合成过程中释放的氢离子来确定碱基的顺序。

这个方法通过观察每个碱基加入时的氢离子释放情况,来记录DNA的序列。

7.PacBio测序: PacBio测序是一种实时测序方法,通过观察聚合酶合成DNA链时释放出的荧光信号来确定碱基的顺序。

2. 测序仪的使用流程以下是测序仪的一般使用流程:步骤一:样品准备1.DNA或RNA提取:将待测序的样品进行DNA或RNA的提取和纯化。

2.DNA/RNA浓度和质量检测:使用分光光度计或荧光测量仪检测提取的DNA或RNA的浓度和质量。

(不需要出现网址)3.文库构建:根据测序需求,对提取的DNA或RNA样品进行文库构建,包括DNA片段的修剪、链接、可能的文库扩增,生成适合测序的DNA样品。

步骤二:测序前的准备1.芯片/流单元准备:根据测序平台的要求,准备好芯片或流动单元。

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蛋白质一级结构(primary structure)的测定
• 蛋白质测序的发展简史
自从1953 年Sanger首次完成胰岛素的 氨基酸顺序测定以来,目前已有很大改进。 但是Sanger花费多年时间才基本搞清胰岛 素的一级结构,现在由于方法改进及自动 化分析仪器的产生,现在已有数百种蛋白 质的氨基酸序列问世。
利用两套或多套肽段的氨基酸顺序彼此间的交错 重叠,拼凑出整条多肽链的氨基酸顺序。 • — — — — — — — — — — — 多肽
• 氨基酸序列
重叠法:小片段重叠的原理主要 用于一级结构的测定
七、确定原多肽链中二硫 键的位置
一般采用胃蛋白酶水解原来的含二硫键 的蛋白质 选用该法的好处: • 该酶的专一性比较低,切点多,生成肽 段包括含有二硫键的肽段比较小,对后 面的分离、鉴定比较容易; • 该酶的作用pH在酸性范围,有利于防止 二硫键发生交换而造成的麻烦。
耦联: 使用苯异硫氰酸酯(PITC)在pH9.0的碱性 条件下对蛋白质或多肽进行处理,PITC与肽 链的N-端的氨基酸残基反应,形成苯氨基硫 甲酰(PTC)衍生物,即PTC-肽。 水解: P,释放出该氨基酸残基 的噻唑啉酮苯胺衍生物。
萃取: 将该衍生物用有机溶剂(例如氯丁烷)从反应 液中萃取出来,而去掉了一个N-端氨基酸残基 的肽仍留在溶液中。 转化: 萃取出来的噻唑啉酮苯胺衍生物不稳定,经酸 作用,再进一步环化,形成一个稳定的苯乙内 酰硫脲(PTH)衍生物,即PTH-氨基酸。
羧肽酶 CpA CpB CpC 来源 胰脏 胰脏 植物或微 生物 专一性 能释放除Pro、Arg、Lys外的所有 的C-端氨基酸 主要水解C-端为Arg、Lys的肽键 相当广泛,几乎能释放C-端的所有 氨基酸
还原成氨基醇法
• 多肽C-端氨基酸可被硼氢化锂(LiBH4) 还原成α-氨基醇,用层析法可以鉴定氨 基酸种类。 • Sanger早期测定胰岛素C-末端氨基酸采 用此法。
一、氨基酸组成
蛋白质经盐酸水解后成为个别氨 基酸,用离子交换树脂将各种氨基酸分 开,测定它们的量,算出各氨基酸在蛋 白质中的百分组成或个数。
二、末端测定的具体方法
二硝基氟苯法(DNP法) 肼解法 化学法 二甲基氨基萘磺酰氯法 (Dansyl-氯法) 还原成氨基醇法
酶解法
亮氨酸氨肽酶法 细胞外氨肽酶法
Edman降解法测序每次只能测定几十个氨基酸残基, 所以要测定较大蛋白质的氨基酸序列,需要将其降解为 一些肽段,经HPLC分离出各个肽段,然后再进行 Edman降解测序。
五、鉴定每个肽段氨基酸 顺序
ABCDE
*ABCDE
部分水解
*A,*AB,*ABC,*ABCD,*ABCDE
完全水解
*A,*A+B,……*A+B+C+D+E *A,*A+*B,……*A+*B*+*C+*D+ *E
DNFB
肽段经过分离纯化后, 即可进行氨基酸测序。但是 获得数据之后,还不能得出 整条多肽链的氨基酸排列顺 序,因为尚不清楚这些片段 在多肽链中的先后次序。一 般需要用到多种水解法,并 分析出各肽段的氨基酸顺序, 然后经过组合排列对比,最 终得出完整肽链中的氨基酸 序列。
六、确定肽段在多肽链中 的次序
氨基酸序列测定的基本步骤(化学方法)
分析已纯化蛋白质的氨基酸残基组成 测定多肽链的氨基末端和羧基末端 为何种氨基酸
把肽链水解成片段
测定各肽段的氨基酸排列顺序 综合运用多种水解法分析肽段中的氨基酸顺序
测序前的准备工作
要求: 样品纯度:97%以上 相对分子质量:允许误差在10%左右 (一)多肽链的拆分 几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质;可用 8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍或高浓度的盐处理,即可使寡聚蛋白质 中的亚基。 如果多肽链间通过共价键(S—S)连接在一起,可采用氧化剂或还 原剂将其断裂。 (二)测定蛋白质分子中多肽链的数目 通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系,即 可确定多肽链的数目。 (三)二硫键的断裂 几条多肽链通过二硫键交联在一起,可在8mol/L尿素或6mol/L盐酸 胍存在下,用过量的β-巯基乙醇处理,使二硫键还原为巯基,然后 用烷基化试剂保护生成的巯基,以防它重新被氧化。
蛋白质一级结构的比较可以揭示进化 的关系
蛋白质一级结构 是由编码它的基因确 定的,蛋白质一级结 构之间的差别可以反 映出进化关系。亲缘 关系密切的蛋白质的 氨基酸序列非常类似, 一级结构中氨基酸残 基序列差别越大,它 们的亲缘关系就越远。 细胞色素c是由一条含 有104至111个氨基酸 残基的多肽链组成的, 由于细胞色素c几乎存 在于所有的需氧生物 中,所以通过在分子 水平上比较来自不同 种属的细胞色素c,可 以看出它们之间的进 化关系。
C-末端之肼解法
• 多肽与肼在无水条件下加热,C-端氨基酸即从肽链 上解离出来,其余的氨基酸则变成肼化物。肼化物 能够与苯甲醛缩合成不溶于水的物质而与C-端氨基 酸分离。 • 肼解过程中,谷氨酰胺、天冬酰胺、半胱氨酸等被 破坏而不易测出,C-末端的精氨酸转变为鸟氨酸
羧肽酶法
• 羧肽酶是一种肽链外切酶,它能从多肽链的C-端逐个地 水解。根据不同的反应时间测出酶水解所释放出的氨基 酸种类和数量,从而知道蛋白质的C-端残疾顺序
羧肽酶A法 羧肽酶B法 羧肽酶C法
二硝基氟苯法(Sanger法)
2,4-二硝基氟苯在碱性条件下,能够与肽链 N-端的游离氨基作用,生成黄色二硝基苯衍 生物(DNP-氨基酸)
氨基肽酶法
• 氨肽酶是一种肽链外切酶,它能从多 肽链的N-端逐个地向里水解。
• 根据不同的反应时间测出酶水解所释 放出的氨基酸种类和数量,按反应时 间和氨基酸残基释放量作动力学曲线, 从而知道蛋白质的N-端残疾顺序
三、水解肽链成肽段
水解酶或化 水解部位 学试剂 胰蛋白酶 羧基侧 作用的氨基酸 赖氨酸、精氨酸 芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色 氨酸和酪氨酸) 甲硫氨酸
胰凝乳蛋白 羧基侧 酶 溴化氰 羧基侧
•水解后得到的肽段,可用离子层析或其他层析方法将其分离 纯化。比如用双向电泳可以得到肽图,由此可知肽段的多少。
四、 Edman降解法测定肽 段的氨基酸序列
反向遗传法分析多肽链的氨基酸序列
基本原理:中心法则 基本步骤: 1、分离编码蛋白质的基因 2、测定DNA序列 3、排列mRNA出序列 4、按照三联密码原则推演氨基酸序列
为什么进行蛋白质测序?
基因组测序,为了破译遗传密码.现在密码已破,那进行蛋白质组测序有必要
吗? 基因研究贯穿了整个20世纪,100多年里,双螺旋结构的提出,中心法则的发 现,直至基因组的重大突破,使基因研究达到了前所未有的深度与广度. 然而,基因只是信息的携带者,蛋白质才是执行者.基因组计划有其固有的局限性, 基因组测序是否正确,要从其表达的蛋白来验证,否则,只是一堆乱码而已.3.5万 左右基因中一半以上是理论推断,需要从蛋白质角度确认.而且,从蛋白质研究的 自身发展来看,我们无法逃避蛋白质组表达谱分析,只是时间问题而已. 以前,对蛋白质的研究是优于基因的,因为PCR,测序自动化使其发展猛.80 年代末,Hillen Kamp发展的激光解析质谱,Fem J设计的电喷雾质谱可以高效,精 确的测量生物大分子的质量,并测定部分序列,进而用于数据库的检索.Mann M 等再此基础上通过建立"肽质量指纹图谱与肽序列标签"等技术实现了质谱对蛋 白质进行大规模准确快速自动化的测序. 结构生物学是生命科学领域又一个新的研究热点,飞速发展的蛋白质结构 分析技术是研究蛋白质功能的基础。随着蛋白质组时代的来临,许多基因组分 析留下的悬而未决的问题,可能通过直接的蛋白质的分离和鉴定而得到解决。
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