DNA测序常见问题分析及解决办法总结
请提供详细资料我们会根据结果具体分析。
常见问题
具体情况
可能的原因
处理办法
备注
样品准备问题
菌培养不好或失败
抗性不对或菌已死
核对抗性,尽可能提供载体信息。
或菌培养条件特殊
重新提供菌液,或提供2ug纯化质粒。
质粒提不出
质粒拷贝数极低或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
质粒产量很低
低拷贝数质粒或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
自带质粒或已纯化PCR产物量极低
是否为电泳法定量,
质粒:电泳检测浓度大于100ng/ul,体积大于20ul。
测OD值法不可靠,电泳检测
总量是否足够
已纯化PCR产物:根据片段长度提供足够量的模板,一般要求是100ng/反应/Kb,进行多个反应的应相应增加量。
测序出现双峰或信号中断
双峰
重复序列,如polyT、polyA或几个碱基重复
质粒产量极低
客户自己提供2ug纯化好的质粒
PCR产物定量极低
重新电泳检测已纯化的PCR产物,确认有足够的量,或提供PCR原液由公司进行纯化
测序结果正常,与预期不符
找不到引物
质粒模板
检测是否为空载体,从其互补链上寻找,克隆位点离测序引物太近,长插入片段未测通。
PCR模板
不可能找到所用的测序引物,短片段可以从互补链上找到另一段的引物,长片段由于测不通,无法找到相应序列想得到全序列,短片段可以从两端进行测序,长片段需要经克隆后进行测序。
用反向引物中出现套峰
可能是样品非单克隆,挑其他克隆测序。
PCR产物测序中,某一点后序列变乱
可能是存在移码突变,这是正常的,也可以克隆后测序。
PCR产物中一个或多个位置有套峰
序列中存在突变,这是正常的,也可以克隆后进行测序。
PCR产物测序前部分双峰
引物二聚体污染或产物不纯,克隆后测序。
模板GT二级结构区后
测反向互补序列,AC结构不影响测序
严重的重复结构
测反向互补序列
模板特性决定的
根据具体情况决定
信号极弱或无信号
模板质量差
重新提供菌液或纯化PCR产物
质粒样品:引物不符
尽量提供载体详细信息,核查引物
引物不适宜测序
测序引物比PCR引物要求高,随机引物和简并引物不能用于测序,较长的PCR引物也不能用于测序。重新设计引物测序,对PCR产物而言建议克隆到载体上用通用引物进行测序
质粒测序时整个结果双峰
引物特异性不好,序列中存在通用引物的同源序列;改用其他引物测序。
质粒和PCR产物测序出现双峰
引物不纯,测序时只要单一引物,请不要将双向PCR引物混合;合成的引物没有纯化,或纯化不好。重新合成引物测序。
信号迅速衰减或中断
模板GC二级结构区后
难以得到好的测序结果,亚克隆成较小的片段进行测序
DNA测序常见问题及分析
DNA测序过程可能遇到的问题及分析对于一些生物测序公司(如Invitrogen等),我们的菌液或质粒经过PCR和酶切鉴定都没问题,但几天后的测序结果却无法另人满意。
为什么呢?PCR产物直接进行测序,在PCR产物长度以后将无反应信号,机器将产生许多N值。
这是由于Taq酶能够在PCR反应的末端非特异性地加上一个A碱基,我们所用的T载体克隆PCR产物就是应用该原理,通常PCR产物结束的位点,PCR产物测序一般末端的一个碱基为A(绿峰),也就是双脱氧核甘酸ddNTP终止反应的位置之前的A,A后的信号会迅速减弱。
N值情况一般是由于有未去除的染料单体造成的干扰峰。
该干扰峰和正常序列峰重叠在一起,有时机器377以下的测序仪无法正确判断出为何碱基。
有时,在序列的起始端的小片段容易丢失,导致起始区信号过低,机器有时也无法正确判读。
在序列的3’端易产生N值。
一个测序反应一般可以读出900bp以上的碱基(ABI3730可以达到1200bp),但是,只有一般600bp以前的碱基是可靠的,理想条件下,多至700bp的碱基都是可以用的。
一般在650bp以后的序列,由于测序毛细管胶的分辩率问题,会有许多碱基分不开,就会产生N值。
测序模板本身含杂合序列,该情况主要发生在PCR产物直接测序,由于PCR产物本身有突变或含等位基因,会造成在某些位置上有重叠峰,产生N值。
这种情况很容易判断,那就是整个序列信号都非常好,只有在个别位置有明显的重叠峰,视杂合度不同N值也不同。
测序列是从引物3’末端后第一个碱基开始的,所以就看不到引物序列。
有两种方法可以得到引物序列。
1.对于较短的PCR产物(<600bp),可以用另一端的引物进行测序,从另一端测序可以一直测通,可以在序列的末端得到该引物的反向互补序列。
对于较长的序列,一个测序反应测不通,就只能将PCR产物片段克隆到载体中,用载体上的通用引物(T7/SP6)进行测序。
载体上的通用引物与所插入序列间有一段距离,因此就可以得到完整的引物序列。
DNA测序常见问题及其分析
测序常见问题及其分析Collected by RobertoRun,12.10.2008(From: HTUTUUUTTH)1、PCR产物测序时出现重叠峰问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序结果移码)图1-1图1-2解决方法:将PCR产物克隆到质粒(如T载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序。
问题图2(PCR产物不纯,含部分序列一致的两种以上的片段,长度不一)图2解决方法:主要原因是PCR产物没有纯化,含有部分序列一致的两种以上长度不一的片段,将PCR产物进行PAGE纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序,便可解决。
问题图3(测序引物有碱基缺失)测序引物有碱基缺失(一般是引物的5'端缺失),和模板的碱基缺失即图1有些类似,所不同的是模板碱基缺失一般是在一段正常测序序列后才出现移码,而引物碱基缺失的话,则从测序一开始就出现移码,表面在图形上便是一开始就是严重的峰形重叠。
解决方法:重新合成引物,或将引物进行PAGE纯化2、克隆测序时出现峰形重叠原因:所挑选的重组子不是单克隆,所提供的测序用质粒中含有两种以上插入片段不同的质粒;或是是送测序的菌液污染解决方法:重新挑单克隆的菌落(划线分离单菌落),提质粒或送菌液再次测序。
3、样品有杂合/突变位点模板中有杂合型突变,也就说模板本身在这个位点出现突变;或者是从基因组中扩增出来的杂合位点。
如果模板有杂合(突变或缺失),那么测序图形中其他的位點一般都是單一的峰形,然后突然在某一個位點出現重叠峰(如图中箭頭所示)。
解决方法:建议将DNA片段克隆到载体再测序。
4、poly A/T和C/G cluster导致的套峰和测序信号衰减图4-1图4-3图4-4RACE测序时经常遇到图4-1和图4-4的情形,解决方法:从另一端测序;但如果这样的序列出现在中间,呵呵,目前还没有很好的解决方法,要看测序公司的本事了。
DNA测序常见问题分析及解决办法总结
DNA测序常见问题分析及解决办法总结PCR类型测序模板注意事项PCR类型测序模板注意事项•总反应体积建议为50uL或100uL,扩增结束后取3ul用1%左右的琼脂糖电泳检测,应为单一的条带。
3ul样品总量不低于50ng(非常小的PCR产物可以酌情减小),PCR产物产量过低说明PCR扩增结果不是很理想,应改进条件重新扩增。
•对于有杂带和扩增弥散的PCR产物,需经琼脂糖电泳将目的片段切下来并回收,建议将PCR 产物作克隆后进行测序。
有杂带的和扩增弥散的PCR产物即使通过琼脂糖电泳纯化,测序仍有可能出现双峰等异常结果。
•经上述检测合格的PCR产物,需经过琼脂糖电泳纯化去除未反应的引物,dNTP,引物二聚体等影响测序反应的组分。
有多种纯化方法可供选择,Promega,Qiagen和生工等公司都有相应的产品可供选择。
纯化后的PCR产物经电泳检测估计总量应不低于200ng/Kb(非常小的PCR产物可以酌情减小)。
•与质粒模板相比,PCR产物彼此间差异很大,因此,每个PCR模板应尽可能提供相应的PCR 退火温度和PCR产物的长度,以供测序时参考。
•PCR模板一般不应短于200bp,过短的PCR产物应经克隆后进行测序。
•纯化好的PCR产物应溶于双蒸水中,TE缓冲液会严重影响测序反应。
•若让公司对PCR产物进行纯化,PCR产物需满足∶总量不低于1ug/kb,片段长度不低于200bp •各种PCR测序模板均应提供相应的测序引物,并尽可能提供引物的全序列,并将引物浓度准确稀释到5pmole/ul 。
引物浓度的换算关系∶总ng数 = pmole x 分子量/1000由于PCR产物测序相对较难,为使您能拿到一个好的结果,请尽量满足上述要求。
DNA测序常见问题分析及解决办法总结测序常见问题分析序列中出现N值的常见原因:通常有以下几种情况将造成测序结果中N值较多:•PCR产物直接进行测序,在PCR产物长度以后将无反应信号,机器将产生许多N值。
DNA测序技术的使用中常见问题
DNA测序技术的使用中常见问题DNA测序技术是一项重要的科学工具,被广泛应用于生物医学研究、进化学、司法科学等领域。
然而,在使用DNA测序技术的过程中,常常会遇到一些问题。
本文将介绍DNA测序技术使用中常见的问题,并提供相应的解决方案。
1. 样品质量问题在DNA测序之前,样品质量是至关重要的。
低质量的样品会导致测序结果的偏差和错误。
常见的样品质量问题包括样品的纯度不高、浓度不足或者样品受到了污染。
解决方案:- 提高样品纯化方法:使用恰当的纯化试剂和技术来提高样品的纯度,例如使用芳香族化合物或异维酮类物质。
- 检测样品浓度:使用光谱法或者比色法来测量样品中DNA的浓度,确保其符合测序要求。
- 避免样品污染:在样品处理过程中,严格遵守无菌操作规程,使用经过无菌过滤器过滤的试剂和器具。
2. 序列读取长度问题DNA测序技术可以产生从数十个碱基对到上百万个碱基对的序列。
然而,部分DNA测序技术的读取长度有限,这可能影响到某些研究或应用的结果。
解决方案:- 选择合适的测序方法:不同的测序方法具有不同的读取长度,选择适合自己研究目的的测序方法,以满足相关的研究需求。
- 使用测序技术的新发展:不断发展的测序技术,如第三代测序技术,具有较长的读取长度和更高的准确性,可以解决传统测序方法的限制。
3. 突变检测问题DNA测序技术不仅可以用于确定特定序列的顺序,还可以用于检测和鉴定突变。
然而,突变的检测可能受到多种因素的影响,如检测方法的灵敏度和特异性、突变类型的多样性等。
解决方案:- 选择合适的突变检测方法:不同的突变具有不同的检测方法,如SNP分析、插入和缺失突变的分析等。
选择合适的方法来检测特定类型的突变。
- 结合多种检测方法:结合使用不同的突变检测方法可以提高突变检测的准确性和可靠性。
- 验证突变结果:通过使用其他独立的测序技术或方法来验证突变结果,以确保结果的可靠性。
4. 数据分析问题DNA测序技术生成的数据量巨大,数据分析是一个复杂而耗时的过程。
DNA测序结果中常见的几个问题
1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱,几乎难以辨别?这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致,该干扰峰和正常序列峰重叠在一起;另外,测序电泳开始阶段电压有一个稳定期,所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚,有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生N 值,峰图较杂?由于测序反应的信号是逐渐减弱的,所以序列末端的信号会很弱,峰图自然就会杂乱,加上测序胶的分辨率问题,如果碱基分不开,就会产生N 值,正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列?如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的,因为引物本身是不被标记的,所以在测序报告中是找不到的;如果找不到克隆片段中的扩增引物,可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到扩增引物;另外插入片段的插入方向如果是反的,此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点?可能的原因同上,您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物,当然,若是样品出现意外原因,如空载、载体自连等,克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致,给我的结果与我需要的序列有差距,这是怎么回事? 首先,我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号,如果对应的是您的样品,由于不知您的实验背景,测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断,我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)?是否会影响测序结果?序列图的背景杂带是由荧光染料引起,如果太强会影响测序结果,要看信噪比,我们给的结果信噪比大都在98%以上。
7 、测序结果为什么与标准序列有差别?原因可能有:样品个体之间的差别、测序准确率的问题,自动测序仪分析序列的准确并非100%,建议至少测一次双向,通过双向测序可以最大限度减少测序的错误。
DNA测序结果中常见的几个问题
1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱,几乎难以辨别这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致,该干扰峰和正常序列峰重叠在一起;另外,测序电泳开始阶段电压有一个稳定期,所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚,有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生 N 值,峰图较杂由于测序反应的信号是逐渐减弱的,所以序列末端的信号会很弱,峰图自然就会杂乱,加上测序胶的分辨率问题,如果碱基分不开,就会产生 N 值,正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的,因为引物本身是不被标记的,所以在测序报告中是找不到的;如果找不到克隆片段中的扩增引物,可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到扩增引物;另外插入片段的插入方向如果是反的,此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点可能的原因同上,您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物,当然,若是样品出现意外原因,如空载、载体自连等,克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致,给我的结果与我需要的序列有差距,这是怎么回事首先,我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号,如果对应的是您的样品,由于不知您的实验背景,测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断,我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)是否会影响测序结果序列图的背景杂带是由荧光染料引起,如果太强会影响测序结果,要看信噪比,我们给的结果信噪比大都在98%以上。
7 、测序结果为什么与标准序列有差别原因可能有:样品个体之间的差别、测序准确率的问题,自动测序仪分析序列的准确并非100%,建议至少测一次双向,通过双向测序可以最大限度减少测序的错误。
DNA测序分析常见问题整理
二、模板对测序结果的影响
① 模板不纯 ② 点突变(SNP) ③ 移码突变 ④ 杂合子 ⑤ 非单克隆
正常模板与噪音
PCR正常终止
PCR正常终止 后面的噪音峰
噪音信号高
终止峰
模板不纯(非特异性PCR产物)
● 现象:每个峰下面都有其它颜色 ● 原因:PCR主带与杂带混在一起测序 ● 对策:凝胶电泳回收主带,重新测序
非单克隆
特征:左边清晰,右边全部像杂合子 原因:挑克隆时两个质粒混在一起 对策:新挑克隆,重新制DNA
三、纯化对测序结果的影响
① 染料峰 ② 酒精峰 ③ 荧光物质污染 ④ 钉子峰 ⑤ 有机物污染(瀑布效应)
染料峰
特征:染料峰位于序列的前100bp左右,是残余的A、T、C、G、 4个BigDye峰,其不影响其它序列的可靠性。
“钉子”峰
● 现象:四色并存突然拔起的 尖峰,峰形锐利。 ● 原因:毛细管内有气泡、灰 尘、尿素结晶等,对激光全反射。 ● 对策 – 灌胶时,避免气泡产生; – 上样前,样品先离心; – 毛细管、检测窗口保持清洁; – 胶内有尿素结晶时,注意不要 吸进注射器; – 样品纯化干净。
有机物污染(瀑布效应)
合成时部分引物 多一个碱基
合成时部分引物 少一个碱基
● 现象:每个峰后面有个同样荧光信 号的小“尾巴”。 ● 原因:合成时引物多一个碱基。 ● 对策:重新合成引物
● 现象:每个峰前面有个同样荧光信 号的小“尾巴”。 ● 原因:合成时引物多一个碱基。 ● 对策:重新合成引物
引物(模板)不纯
● 现象:整个峰图噪音都比较高。(区别与小片段的干扰) ● 原因:引物(模板)纯度太低,含有较多杂质 ● 对策: –建议使用HPLC(柱子纯化)或PAGE 纯化的测序引物。 –脱盐纯化的引物纯度较低,适合做普通PCR,但不建议用来测序。
DNA测序中的一些常见问题和对策
其抗 <+ 抗体属中和抗 $%&’# 和 $%&’! 的共同抗原决定簇, 体, 中和病毒的能力最强, 能与 $%& 的 <+ 抗原特异结合, 结 果改变了病毒的表面结构, 阻断了病毒对宿主细胞的吸附,
[@] 使病毒失去了感染能力 。本实验所用的 5678% 中既有能
识别 $%& 的 <;、 也有 <+ 抗原的型共同性特异性单克隆抗体, 能识别 $%& 的 <= 的型特异性单克隆抗体, 体外中和试验也 证明其中和效价为 #( 2 #( , 具有很强的中和病毒的作用
[$, %] 序, 都存在下列问题 。
点琼脂糖凝胶回收并用专用试剂盒纯化, 注意纯化后要进行 电泳检测。 # 测序信号提前共同终止, 测序反应无法继续进行
[@] 、 常见原因: 模板 !"# 中有二级结构形成 8"?& 浓度不
当或模板浓度过大, 导致测序反应提前终止。 对策: 一般商售试剂盒中配套试剂很少出现问题, 若为 自制试剂, 可予替换或重新配制, 再重复实验。由于测序反 应要求模板必须为单链, 所以对于二级结构形成导致的测序 反应共同终止, 可以提高模板变性温度使之充分分解为单 链, 或加入甲酰胺使模板变性充分、 彻底。 $ 无正常测序信号 常见原因: 引物设计不当或模板 3A’ 含量过高。 对策: 测序引物通常分为通用引物和特异性引物。前者 是针对不同克隆载体设计的引物, 一般不会存在上述问题。 特异性引物是指与模板特异性且唯一性结合的引物, 设计原 则如下: ($) 引物长度 ! $= .B, 一般 %)%C .B; ( %) 3A’ 含量 ! 一般为 C)D<)D ( ;@) 避免引物自身形成互补; ( E) C)D , @F 末 端为 3 或 ’ 更为合理。模板 3A’ 含量过高者可采用专门为 高 3A’ 含量模板设计的测序试剂盒。 靠近引物的区域, 其测序信号可能由于引物峰遮盖而无 法阅读, 是 测 序 的 难 点。可 以 尝 试 加 入 /*% G( $)) HH64 , I
DNA测序结果中常见的几个问题
1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱,几乎难以辨别?这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致,该干扰峰和正常序列峰重叠在一起;另外,测序电泳开始阶段电压有一个稳定期,所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚,有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生N 值,峰图较杂?由于测序反应的信号是逐渐减弱的,所以序列末端的信号会很弱,峰图自然就会杂乱,加上测序胶的分辨率问题,如果碱基分不开,就会产生N 值,正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列?如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的,因为引物本身是不被标记的,所以在测序报告中是找不到的;如果找不到克隆片段中的扩增引物,可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到扩增引物;另外插入片段的插入方向如果是反的,此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点?可能的原因同上,您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物,当然,若是样品出现意外原因,如空载、载体自连等,克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致,给我的结果与我需要的序列有差距,这是怎么回事? 首先,我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号,如果对应的是您的样品,由于不知您的实验背景,测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断,我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)?是否会影响测序结果?序列图的背景杂带是由荧光染料引起,如果太强会影响测序结果,要看信噪比,我们给的结果信噪比大都在98%以上。
7 、测序结果为什么与标准序列有差别?原因可能有:样品个体之间的差别、测序准确率的问题,自动测序仪分析序列的准确并非100%,建议至少测一次双向,通过双向测序可以最大限度减少测序的错误。
DNA测序结果中常见的几个问题
D N A测序结果中常见的几个问题公司内部档案编码:[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱,几乎难以辨别这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致,该干扰峰和正常序列峰重叠在一起;另外,测序电泳开始阶段电压有一个稳定期,所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚,有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生 N 值,峰图较杂由于测序反应的信号是逐渐减弱的,所以序列末端的信号会很弱,峰图自然就会杂乱,加上测序胶的分辨率问题,如果碱基分不开,就会产生N 值,正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的,因为引物本身是不被标记的,所以在测序报告中是找不到的;如果找不到克隆片段中的扩增引物,可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到扩增引物;另外插入片段的插入方向如果是反的,此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点可能的原因同上,您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物,当然,若是样品出现意外原因,如空载、载体自连等,克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致,给我的结果与我需要的序列有差距,这是怎么回事首先,我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号,如果对应的是您的样品,由于不知您的实验背景,测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断,我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)是否会影响测序结果序列图的背景杂带是由荧光染料引起,如果太强会影响测序结果,要看信噪比,我们给的结果信噪比大都在98%以上。
