(推荐)乙型肝炎病毒耐药基因及分型检测
乙型肝炎病毒耐药基因及分型检测
乙型肝炎现状如何？乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的、以肝脏炎性病变为主，并可引起多器官损害的一种疾病，主要存在于肝细胞内，可引起肝细胞炎症、坏死和纤维化。
乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界性分布，全球约有3.6亿感染者，每年约有100万人死于与HBV相关的肝脏疾病。
我国属于感染的高发区，现有的慢性HBV感染者约9300万例。
乙型肝炎病毒（HBV）基因分型的临床意义HBV根据DNA差异可分为A、B、C、D、E、F、G、H八种类型，不同型别在流行特征，致病性，对药物治疗反应等方面存在差异，其中，我国以B型和C型为主，感染HBV基因型B的患者发生肝纤维化及肝细胞癌的平均年龄要比感染HBV基因型C的患者的年龄大。
通过分型检测，可判断病毒复制活跃程度及突变发生率情况。
研究表明，与HBV-B型相比，C型复制较活跃，不易发生HBeAg血清转换；HBV-B型易产生前C区突变，C型核心启动子区变异发生率更高，与重型肝炎发病机制密切相关，可作为肝癌高危指标之一。
同时，HBV-B、C型患者易产生拉米夫定耐药突变，通过分型检测，可指导临床治疗方案制定，有针对性进行临床治疗，更大程度上提高患者的生活质量。
乙肝的治疗方式有哪些？HBV感染主要的治疗方法是抗病毒治疗，国内外普遍使用的药物有干扰素和核苷（酸）类。
由于干扰素需要反复注射，且副作用较多，近年来，核苷(酸)类似物(NA)已成为抗HBV感染的主要方法之一，NA因其抑制病毒复制能力强、使用方便、耐受性好且疗效确切，适用于不同阶段的肝病患者，是长期治疗的合理选择。
但随着治疗时间的延长，往往会出现病毒耐药株，从而需要监测乙型肝炎病毒耐药基因型，指导临床用药。
乙肝病毒产生耐药的机理是什么？HBV对某种药物的耐药性一般是指由HBV基因组上某些位点的变异导致这种药物对HBV的抑制作用减弱或无作用。
通常分为以下几种：（1）原发性耐药变异：指药物作用靶位的基因及其编码的氨基酸发生变异，导致变异病毒株对治疗药物的敏感度下降；（2）继发性耐药变异(又称补偿性耐药变异)：指由于原发性耐药变异病毒株复制能力下降，在原发性耐药变异的基础上，病毒株也可在其他位点发生变异，这些变异可部分恢复变异病毒的复制能力或可导致变异病毒对药物敏感度的进一步下降；（3）基因型耐药：指检测到已在体外的表型分析研究中被证实与抗病毒药物耐药相关的HBV变异；（4）表型耐药：通过体外复制系统证实检测到的HBV变异会降低其对抗病毒药物的敏感度。
基因芯片检测乙肝病毒分型和耐药突变的准确度灵敏度分析
62安全、有效的抗病毒治疗对于延缓乙型病毒性肝炎病情进展具有重要意义[1]。
然而，HBV 包括多种基因型，不同基因型耐药特点存在差异，耐药严重影响了抗病毒治疗效果[2]。
当前临床明确HBV 耐药突变检测的金标准为DNA 直接测序法，但存在成本高、耗时久等弊端，无法满足快速诊断、大规模推广要求[3]。
本研究就基因芯片检测HBV 分型及耐药突变的准确度及灵敏度进行分析，旨在评估该技术的临床应用价值。
1 资料与方法1.1 一般资料以我院2014年5月—2016年9月参照2010年全国传染病与寄生虫病学术会议拟定的《病毒性肝炎防治方案》确诊的乙型病毒性肝炎患者为研究对象。
入组患者乙肝表面抗原（HBsAg ）及HBV DNA 检测均为阳性（HBV DNA ≥1×103 IU/mL ），排除合并其他类型肝炎及免疫性肝病、胆汁型肝硬化患者及基因芯片检测无信号者[4]共351例入选。
其中男189例，女162例，年龄17～71岁，平均年龄（48.42±10.58）岁。
351例患者均有长期（≥48周）核苷类抗病毒药物使用史，其中208例接受拉米夫定治疗，143例接受阿德福韦酯治疗。
本研究已征得我院医学伦理委员会批准，患者均知情同意并签署知情同意书。
1.2 研究方法1.2.1 标本采集 抽取患者入组次日空腹静脉血4 mL ，分装于4支抗凝管内，分别用于基因芯片法HBV 基因分型、耐药突变检测及基因测序法HBV 基因分型、耐药突变检测。
1.2.2 标本检测 基因芯片：HBV 基因分型及耐药突变检测试剂均购自深圳亚能生物技术有限公司，使用Biomctra基因扩增仪及FYY-3型分子杂交仪（兴化市分析仪器厂），操作均严格按照试剂使用说明书。
扩增循环条件：95℃ 10 min →94℃ 34 s →56℃ 30 s →72℃ 30 s ，重复循环50次。
结果分析使用光学扫描仪[5]。
HBV 膜条探针排列顺序设计见表1。
乙型肝炎病毒分型(B型、C型、D型)和耐药突变基因检测.doc
乙型肝炎病毒分型(B型、C型、D型)和耐药突变基因检测一．检验项目：乙型肝炎病毒分型(B型、C型、D型)和耐药突变基因检测二．检验目的：在进行抗病毒治疗前和抗病毒治疗中进行乙型肝炎病毒分型和耐药突变基因检测，能够：1). 区分中国和其他亚洲国家常见的HBV-B、C、D基因型；2). 检测HBV抗病毒药物5个热点突变位点的6种突变类型；3). 对HBV实行动态监控，辅助确定个性化的临床诊疗方案，进行HBV流行病学研究。
三．临床意义：HBV基因型分为9种（A-I），其分布具有地域性，中国乃至亚洲流行的乙型肝炎病毒几乎都是B、C型，此外还有少量D型，不同的基因型易发生的突变类型不同，与病情转归也密切相关，如基因型C较B更容易引起严重的肝炎或肝癌，对干扰素的应答率A型高于D型，B型高于C型，C型高于D型。
与C型患者相比，B型患者较早出现HBeAg血清学转换，较少进展为慢性肝炎，肝硬化和原发性肝细胞癌。
核苷（酸）类似物，如拉米夫定（Lamivudine，LMV），替比夫定（Telbivudine,LdT），阿德福韦酯（Adefovir,ADV）和恩替卡韦（Enticavir,ETV）等是抗HBV常见药物。
但这些药物都无法彻底清除大多数乙肝病人体内的HBV，患者需要长期维持治疗。
HBV在宿主体内感染以及抗病毒治疗的过程中会发生基因变异，并在宿主体内免疫系统的压力下和在治疗干预过程中进行变异的优势选择，以达到逃逸免疫、对抗药物、实现物种生存的目的，进而发生耐药。
乙肝病人一旦出现耐药突变，其肝功能恶化的比例将显著增高，甚至快速进展至肝衰竭。
四．标本送检要求：4ml黄色帽血清管，空腹采集后立即送检，室温放置不宜超过2小时，如不能立即送检可于4℃保存一周，如需长期保存请放入－20℃冻存，运输过程中请注意保持低温。
五．开单名称：乙型肝炎病毒分型和耐药突变基因检测进入本科室“医生工作站”→选择开单病人“姓名”→选择“项目类别”→选择“检验”→选择“乙型肝炎病毒分型和耐药突变基因检测”→确定或进入本科室“医生工作站”→选择开单病人“姓名”→选择“项目类别”→选择“检验”→选择“实验室”→选择“乙型肝炎病毒分型和耐药突变基因检测”→确定六．收费：570元/例七．送检时间：周一至周日8：00am－12：00am八．送检地点：检验科三楼服务台九．报告时间：抽血后，7个工作日后进入我院计算机检查报告系统，查看检测结果。
乙型肝炎病毒耐药基因及分型检测
乙型肝炎现状如何？乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的、以肝脏炎性病变为主，并可引起多器官损害的一种疾病，主要存在于肝细胞内，可引起肝细胞炎症、坏死和纤维化。
乙型肝炎病毒（HBV）感染呈世界性分布,全球约有3.6亿感染者，每年约有100万人死于与HBV相关的肝脏疾病.我国属于感染的高发区，现有的慢性HBV感染者约9300万例。
乙型肝炎病毒（HBV)基因分型的临床意义HBV根据DNA差异可分为A、B、C、D、E、F、G、H八种类型，不同型别在流行特征，致病性，对药物治疗反应等方面存在差异，其中，我国以B型和C型为主,感染HBV基因型B的患者发生肝纤维化及肝细胞癌的平均年龄要比感染HBV基因型C的患者的年龄大。
通过分型检测，可判断病毒复制活跃程度及突变发生率情况.研究表明，与HBV—B型相比,C型复制较活跃，不易发生HBeAg血清转换；HBV—B型易产生前C区突变，C型核心启动子区变异发生率更高，与重型肝炎发病机制密切相关，可作为肝癌高危指标之一.同时,HBV-B、C型患者易产生拉米夫定耐药突变，通过分型检测，可指导临床治疗方案制定，有针对性进行临床治疗，更大程度上提高患者的生活质量.乙肝的治疗方式有哪些?HBV感染主要的治疗方法是抗病毒治疗，国内外普遍使用的药物有干扰素和核苷（酸）类。
由于干扰素需要反复注射，且副作用较多,近年来,核苷(酸）类似物（NA)已成为抗HBV感染的主要方法之一，NA因其抑制病毒复制能力强、使用方便、耐受性好且疗效确切，适用于不同阶段的肝病患者,是长期治疗的合理选择.但随着治疗时间的延长,往往会出现病毒耐药株，从而需要监测乙型肝炎病毒耐药基因型，指导临床用药。
乙肝病毒产生耐药的机理是什么?HBV对某种药物的耐药性一般是指由HBV基因组上某些位点的变异导致这种药物对HBV的抑制作用减弱或无作用。
通常分为以下几种：(1）原发性耐药变异：指药物作用靶位的基因及其编码的氨基酸发生变异,导致变异病毒株对治疗药物的敏感度下降；（2）继发性耐药变异(又称补偿性耐药变异)：指由于原发性耐药变异病毒株复制能力下降,在原发性耐药变异的基础上，病毒株也可在其他位点发生变异,这些变异可部分恢复变异病毒的复制能力或可导致变异病毒对药物敏感度的进一步下降；（3）基因型耐药:指检测到已在体外的表型分析研究中被证实与抗病毒药物耐药相关的HBV变异；（4)表型耐药：通过体外复制系统证实检测到的HBV变异会降低其对抗病毒药物的敏感度。
乙型肝炎病毒耐药变异与基因型检测在临床上的应用
检测４ ６例 乙肝 患 者 血 清 样 本 ， 用特 异 的 引 物 对待 检 标 本 ＨＢ 区进 行 Ｐ Ｒ 扩 增 后 作 基 因序 列 检 测 ， 用 Ｃ ｒｍａ２ ２ 采 ＶＰ Ｃ 利 ｈｏ ｓ． ３软 件 对 测序 结果 进 行 分析 有 无 突 变 产 生 ， 序 结 果 用 软 件 ｃｕｔｌ１ ８ 测 ｌｓ ｘ ． １进 行 基 因 分 型 分 析 。 结 果 可 通 过 一 次 测 序 反 应 完 成 对 ａ ＨＢ ＤＮＡ Ｐ 区的 基 因检 测 及 基 因型 分 析 。检 出 ＹＭＤ 变 异株 ８例 ， 中 ＹＩ 例 ， ＶＤ Ｖ． Ｄ 其 ＤＤ ５ Ｙ Ｄ ３例 。在 检 测 的 ４ ６例 标 本 中 ２ ３例 为 Ｂ基 因型 ， 阳性 率 为 ５ ． ； ２ 例 为 ｃ基 因 型 ， 阳性 率 ４ ． ； 基 因型 ２ ， ００ 有 １ 其 ５６Ｄ 例 阳性 率 ４ ４ 。Ｂ基 因型 ＨＢ 感 染 者 中 ＨＣ ． Ｖ Ｃ ２例 ， ８ ７ ； 占 ． Ｃ基 因 型 ＨＢ 感 染 者 中 ＨＣ Ｖ Ｃ ８例 ， ３ ． 。 结 论 直接 测 序 法 分 析 ＨＢ 常 见 耐 药 突 变位 点及 基 因 型 准 确 可 占 ８１ Ｖ
ｔ ｅ ｅ ｗｅ ｅ ２ ｈ ｐ ｔ ｃ ｌ ｌ ｒｃ ｒ ｉ ｏ ｈ ｒ ｒ ｅ ａｏ ｅｌ ａ ａ ｃｎ ｍａ（ ． ）ｉ ｅ ｏ ｙ ｅ Ｂ ｐ ｔ ｎ ， ｅ ａ ｏ ｅｌ ｌｒｃ ｒ ｉ ｏ ｕ ８７ ｎ ｇ ｎ ｔ ｐ ａ ｉ ｓ ８ ｈ ｐ ｔ ｃ ｌ ａ ａ ｃｎ ｍａ（ ８ １ ）ｉ ｅ ｏ ｙ ｅＣ ａ ｉｎ ｓ ｅ ｕ ３ ． ｎｇ ｎ ｔｐ ｐ ｔ ｔ． ｅ
武汉地区157例乙型肝炎病毒基因分型和耐药性分析
武汉地区157例乙型肝炎病毒基因分型和耐药性分析宋仕玲;桂文甲;周洪清;黄艺芬;尹淑芬;李靖;吴淑坤【摘要】目的了解武汉市乙型肝炎病毒基因型分布特点和乙型肝炎病毒耐药情况.方法采用基因测序法检测武汉市区157例患者HBV基因型,目标检测基因型为A～H等8个基因型,检测HBV 11个耐药位点:rtL80、rtL169、rtV173、rtL180、rtA181、rtT184、rtA194、rtS202、rtM204、rtN236和rtM250,判断对HBV耐药的核苷类似物.结果武汉市区157例HBV感染者中,检出3种HBV基因型,其中B型占72.61％,C型占26.75％,D型占0.64％.共有68例(43.31％)耐药,其中B 型70.59％,C型29.41％,基因B型和C型的HBV相比,耐药发生差异无统计学意义(x2 =0.379,P＞0.05).对拉米夫定耐药41例,占全部耐药病例的60.29％,其中B型占73.17％,C型占26.83％;204I位点耐药17例,180M+204I位点耐药6例,180M+ 204V位点耐药12例,180M+ 204V/I位点耐药6例.对阿德福韦酯耐药20例,占全部耐药病例的29.41％,基因B型占75.0％,基因C型占25.0％,耐药位点为236T为9例,耐药位点为181T/V为7例,236T和181T/V联合耐药4例.对恩替卡韦耐药5例,占全部耐药病例的7.35％,基因B型3例,基因C型2例.拉米夫定和阿德福韦酯联合耐药2例,占全部耐药病例的2.94％,均为基因C型.替比夫定耐药与其他核苷类似物耐药分析结果重复,共32例,占47.06％,基因B型75.0％,基因C型25.0％.结论武汉市区157例乙型肝炎病毒感染者中男性较多,感染HBV 主要基因型为B型,其次为C型,患者主要表现为拉米夫定、替比夫定和阿德福韦酯耐药.临床应根据患者HBV基因型和耐药情况个体化制定治疗方案.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2015(024)008【总页数】4页(P969-972)【关键词】肝炎病毒;乙型;HBV DNA;基因型;耐药【作者】宋仕玲;桂文甲;周洪清;黄艺芬;尹淑芬;李靖;吴淑坤【作者单位】武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061;武警湖北总队医院感染科,湖北武汉430061【正文语种】中文【中图分类】R512.6+2乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)基因型测定对评估慢性乙型肝炎感染者的疾病进展和制定最佳抗病毒治疗方案很重要，相比而言，肝硬化和原发性肝癌患者感染的乙型肝炎病毒基因分型更多为基因C型和D 型［1-3］。
乙型肝炎病毒基因分型与耐药突变基因位点的检测分析
乙型肝炎病毒基因分型与耐药突变基因位点的检测分析姚玮;王久香;霍星星;周秋梅;黄开泉【摘要】目的分析乙型肝炎病毒(HBV)基因型及耐药突变基因位点,为指导临床抗病毒治疗合理用药提供依据.方法回顾分析2014年3月～2016年10月安徽中医药大学第一附属医院114例乙型肝炎患者HBV基因分型和拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)四种核苷类药物(NAs)耐药及耐药突变位点分布情况、HBV核酸(HBV DNA)定量、HBVE抗原(HBeAg)定量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的浓度、血小板(PLT)的含量.结果 114例乙型肝炎患者中检测出HBV基因C型61例,B型45例,D型3例,B+C混合型1例,B+D混合型1例,其他基因型5例.其中C型多于B型(P<0.05).检出39例NAs耐药,耐药率为34.21％;C型与B型耐药无显著差异.C型患者HBeAg定量高于B型患者(P<0.05),PLT计数低于B型患者(P<0.05).耐药突变位点最多见于rt204I;C型多位点突变高于B型(P<0.05).LAM和LdT联合耐药最多见,两种及两种以上多重耐药高于单一耐药(P<0.01).结论本研究中乙型肝炎患者HBV基因型多为C型,其次为B型.C型患者容易发生肝纤维化,更易发生多位点突变.NAs耐药以LAM和LdT联合耐药为主,多为两种以上联合耐药.检测HBV基因型和耐药突变基因位点对评价乙型肝炎临床治疗效果和指导临床抗病毒治疗合理用药具有十分重要的意义.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2019(021)004【总页数】4页(P428-431)【关键词】乙型肝炎病毒;HBV基因分型耐药突变位点核苷类药物【作者】姚玮;王久香;霍星星;周秋梅;黄开泉【作者单位】230031 安徽中医药大学第一附属医院;230031 安徽中医药大学第一附属医院;230031 安徽中医药大学第一附属医院;230031 安徽中医药大学第一附属医院;230031 安徽中医药大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R512.62HBV是乙型病毒性肝炎的主要病因，全世界约有20亿人曾感染HBV，其中2.4亿人为慢性HBV感染者。
PCR-反向点杂交法检测乙型肝炎病毒的基因耐药变异与基因分型
出血临床 观察 ［ Ｊ ］ ． 中国当代 医药， ２ ０ １ ０ ， １ ７ （ １ ） ： ４ ３ — ４ ４ ．
［ １ Ｏ ］ 林道浙 ， 徐定银 ， 陈积 贤． 泰绫 在 甲状 腺手术 中的应用 ［ Ｊ ］ ． 中
华普外科手术学杂志 ， ２ ０ １ ０， ４ （ ２） ： ２ ０ ０ － ２ ０ ３ ． ［ １ １ ］Ｓ ｉ ｌ ｖ ｅ ｖ ｓ ｔ ｅ ｉ ｎ ＭＥ， Ｃ ｈ ｖ ａ ｐ ｉ ｌ Ｍ．Ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ ａ ｎ ｄ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｘ ｐ ｅ ｉ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｗ ｉ ｓ ｈ ｃ ｏ ｌ ｌ ａ ｇ ｅ ｎ ｌ ｆ ｅ ｅ ｃ ｅ ａ ｓ ａ ｈ ｅ ｍｏ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｃ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ［ Ｊ ］ ．Ｊ Ｔ ｒ ａ ｕ ｍ ａ ， １ ９ ８ １ ， ２ １
［ ７ ］刘远成 ， 叶伟 明， 沈 奎． 痔术 后出血 的预 防及 治疗 ［ Ｊ ］ ． 中医药
临床杂志 ， ２ ０ １ ０， ２ ２ （ ３ ） ： ２ ５ ４ － ２ ５ ５ ． ［ ８ ］贺平 ， 谢敏江 ， 张桢， 等． 地奥 司 明用 于痔外 剥 内扎 术后 ４ ７ （ ９） ： １ ０ ８ １ － １ ０ ８ ２ ． ［ ９ ］卢本银 ， 李扬轶 ， 赖彪 ， 等． 痔上动脉缝 扎术预 防外 剥 内扎术后
血绫是 由纯天然再 生纤维素经化学变性后而成 ， 无 毒、 无害 ， 不 含任何 药 物 ， 遇 血后 与 手 术 创 面 贴 敷 严
密， 然后 逐渐 溶化膨 胀 成半 透 明凝胶 样 ， 具 有很 好 的 物理 、 生理 、 化 学 止血 功 效 ， 除用 于一 般 止 血 外 ， 还用 于 创 面 广 泛 渗 血 和 体 内 某 些 特 殊 部 位 的 止 血 。本研 究 显示 ， 治疗 组术 后 １ 、 ３ 、 ５ ｄ出血 症状
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乙型肝炎现状如何？乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的、以肝脏炎性病变为主，并可引起多器官损害的一种疾病，主要存在于肝细胞内，可引起肝细胞炎症、坏死和纤维化。
乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界性分布，全球约有3.6亿感染者，每年约有100万人死于与HBV相关的肝脏疾病。
我国属于感染的高发区，现有的慢性HBV感染者约9300万例。
乙型肝炎病毒（HBV）基因分型的临床意义HBV根据DNA差异可分为A、B、C、D、E、F、G、H八种类型，不同型别在流行特征，致病性，对药物治疗反应等方面存在差异，其中，我国以B型和C型为主，感染HBV基因型B的患者发生肝纤维化及肝细胞癌的平均年龄要比感染HBV基因型C的患者的年龄大。
通过分型检测，可判断病毒复制活跃程度及突变发生率情况。
研究表明，与HBV-B型相比，C型复制较活跃，不易发生HBeAg血清转换；HBV-B型易产生前C区突变，C型核心启动子区变异发生率更高，与重型肝炎发病机制密切相关，可作为肝癌高危指标之一。
同时，HBV-B、C型患者易产生拉米夫定耐药突变，通过分型检测，可指导临床治疗方案制定，有针对性进行临床治疗，更大程度上提高患者的生活质量。
乙肝的治疗方式有哪些？HBV感染主要的治疗方法是抗病毒治疗，国内外普遍使用的药物有干扰素和核苷（酸）类。
由于干扰素需要反复注射，且副作用较多，近年来，核苷(酸)类似物(NA)已成为抗HBV感染的主要方法之一，NA因其抑制病毒复制能力强、使用方便、耐受性好且疗效确切，适用于不同阶段的肝病患者，是长期治疗的合理选择。
但随着治疗时间的延长，往往会出现病毒耐药株，从而需要监测乙型肝炎病毒耐药基因型，指导临床用药。
乙肝病毒产生耐药的机理是什么？HBV对某种药物的耐药性一般是指由HBV基因组上某些位点的变异导致这种药物对HBV的抑制作用减弱或无作用。
通常分为以下几种：（1）原发性耐药变异：指药物作用靶位的基因及其编码的氨基酸发生变异，导致变异病毒株对治疗药物的敏感度下降；（2）继发性耐药变异(又称补偿性耐药变异)：指由于原发性耐药变异病毒株复制能力下降，在原发性耐药变异的基础上，病毒株也可在其他位点发生变异，这些变异可部分恢复变异病毒的复制能力或可导致变异病毒对药物敏感度的进一步下降；（3）基因型耐药：指检测到已在体外的表型分析研究中被证实与抗病毒药物耐药相关的HBV变异；（4）表型耐药：通过体外复制系统证实检测到的HBV变异会降低其对抗病毒药物的敏感度。
HBV属于嗜肝DNA病毒科，基因组长约3.2kb，是部分双链环状DNA结构。
HBV基因组含有4个部分重叠的开放读框(open reading frame，ORF)，分别为S基因区、C基因区、P基因区和x基因区。
产物为含末端蛋白、间隔区、逆转录酶区和RNA酶H区4部分的HBV聚合酶。
HBV虽然属于DNA病毒，但其复制过程并非DNA—DNA的直接复制过程，而是经过前基因组RNA的中间过程，即DNA—RNA—DNA的复制过程。
在前基因组RNA逆转录为负链DNA的过程中，HBV逆转录酶由于缺乏严格的校正机制，导致HBV复制过程中核苷酸错配率较高，发生变异的频率为每年(1.4～3.2)X105核苷酸替换／位点。
HBV复制的这种过程和特点，决定了同一患者体内不同的HBV株基因序列之间也存在差别。
核苷（酸）类药物主要通过抑制HBV聚合酶的逆转录酶区活性，阻止HBV复制过程中以HBV的前基因组RNA为模板逆转录生成新的病毒DNA，从而发挥抑制病毒复制的作用，HBV前基因组RNA是以HBV的cccDNA 为模板合成的，即NA的药效靶点在cccDNA的下游，所以NA不能直接清除已经存在的cccDNA。
为了持续抑制HBV的复制，NA抗HBV治疗的疗程往往需要数年。
但在长期应用某一抗病毒药物的情况下，产生选择压力，野生株被抑制。
生存下来的突变株占主导，此种药物便失去了疗效，从而导致耐药的发生。
HBV对NA的耐药分析1.拉米夫定(LAM)LAM属于L-构型核苷，是目前用于临床最广、时间最长的药物，其产生的耐药也是最多的。
在LAM初次治疗时，1、2、3、4和5年YMDD突变的发生率约为23％、46％、55％、65％和7l％。
LAM主要的耐药突变位点是rt M204V／I(YMDD变异)，rtM204V变异通常与其补偿突变rt L180M联合出现，rtM204V／I株较野生株复制能力低，而rtL180M的出现使突变株HBV的复制接近野生株的水平圈。
目前报道发现的与LAM 相关的主要耐药突变有rt M204V、rt M204I和rt L180M，其他的突变位点有rt L80V／I、rtI169T、rt V173L、rtTI84S和rtQ215S这些突变通常以下面不同的组合方式出：(1)trM204I／V+rtIJ80M；(2)rtM204I：(3)rtM204V+rtL1810M+rtV173L；(4)rtM204I+rtI80I：(5)rtM204I／V4+rtQ215S±rtL180M：(6)rtM204V+rtL180M+rtV173L+rtl169T；(7)rtA181T：(8)rtM204I／V+rtT184S±rtL180M：(9)rtM204S+rtLl80M。
这些HBV耐药突变株常以准种的形式存在，当使用LAM治疗后，突变株便可成为主要病毒侏。
LAM耐药的分子机制目前推断可能是rtM204位点参与形成了LAM与聚合酶的结合部位，rtM204位点发生突变后主要产生了两方面影响：(1)使dNTP结合位点甲基化，从而产生空间位阻降低了LAM与dNTP底物的亲和力；(2)降低使LAM三磷酸根结合到正在复制的病毒DNA的催化活性，这些原导因致rtM204位点突变株的复制力减低，且与LAM的结合力低于野生侏，从而降低了LAM的抗病毒作用。
2.恩曲他滨（FTC）FTC属低耐药基因屏障药物，在临床应用中应密切关注其耐药情况。
体内与体外研究均表明FTC耐药位点与LAM相同，即rtM204V/I ± rtL180 M变异，FTC治疗1年的基因型耐药发生率为13%～16%，但缺乏长期的耐药数据。
在开始FTC治疗前应充分评估患者的治疗指征，详细了解患者既往治疗史。
免疫耐受期的慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者除非需接受免疫抑制剂治疗等特殊情况，一般不建议进行抗病毒治疗。
首次出现ALT升高的CHB患者，应分析其可能的诱因，慎重开始抗病毒治疗。
FTC治疗期间应督促患者规范服药、定期随访，尽可能提高患者依从性。
如随访发现患者病毒学应答不佳或出现病毒学突破，应及时明确患者是否存在依从性问题。
排除依从性问题后，应及时进行HBV基因型耐药检测以明确FTC耐药情况，相应调整治疗方案。
目前对于FTC耐药挽救治疗证据尚不充分。
参照LAM耐药挽救治疗情况，可考虑加用ADV或TDF抗病毒治疗，亦可考虑换用TDF抗病毒治疗。
3.阿德福韦酯(ADV)ADV属于无环嘌呤类核苷酸类似物。
与LAM相比，在使用ADV初次治疗时，1～5年基因耐药变异的概率分别为0％、3％、6％、18％、29％，耐药发生的时间和机率都远低于LAM。
然而，在已产生了LAM耐药的患者中，单独改用ADV治疗1年和2年，基因耐药变异率分别升高为6.4％和25.4％，ADV联合LAM 治疗可降低耐药突变发生率，对于产生LAM耐药的患者，加用ADV为首选。
与LAM单点突变不同，ADV相关的耐药突变多为多点突变，目前得到学界公认的主要耐药位点有rt A181T、rt A181V和rt N236T，组合方式主要有四种：(1)rtA181V；(2)rtN236T；(3)rtAl81V+rtN236T；(4)rtA181T+rtN236T。
另外rtA181T突变也在长期使用LAM患者的HBV基因中检测到，但是，该突变并未合并rtM204I／V的突变。
有认为这是因为rtAl81V／T突变能改变rtM204密码子的位置，导致一个间接的催化位点空间位阻，从而使LAM的敏感性下降。
有进一步研究表明A181V／T突变株对LAM、LdT和ETV的敏感性都下降，但对TDF仍然敏感。
4.恩替卡韦(ETV)ETV是一种脱氧嘌呤核苷酸类似物，ETV对初治患者很少发生耐药，1-5年的累积耐药发生率分别为0.2％、0.5％、1.2％、1.2％与1.2％。
但对原有LAM耐药的患者，改用ETV，治疗1-5年后的临床耐药率分别为6％～7％、15％～16％、36％、46％和51％。
因此，ETV在LAM失效患者中的耐药发生率明显增加，产生LAM耐药的患者不推荐首选ETV。
这是因为ETV的耐药变异需要在rtM204+rtL180位突变的基础上，再联合rtT184、rtS202、rtM250和rtI169位点上一个或多个的氨基酸突变。
其耐药变异主要有两种模式：(1)rtM250v+rtIl69T+M204v+L18OM；(2) rtT184G+rtS202I+rtM204V+rtL180M。
有体外试验证实，rtM250位点突变可引起ETV的敏感性下降，单独rtI169位点的突变对ETV只低度耐药，但rtI169联合rtM250位点突变则可阻止DNA链延伸，从而降低ETV 敏感性；rtT184和rtS202位点的突变可以改变YMDD附近的核苷酸聚合酶结合袋的几何构像，影响C区的两个催化性天门冬氨酸残基的编码，从而导致对药物的敏感性下降。
ETV需多个位点的突变才能出现耐药，表明它的高基因屏障。
由于ETV抗病毒治疗的有效性及低耐药性，被推荐为乙肝肝硬化失代偿期的一线用药。
5.替比夫定(LdT)LdT与LAM同属于L-构型核苷，与LAM耐药基序相似，都发生在YMDD区，但其耐药发生率低于LAM，对初治患者的第l与第2年累积耐药发生率分别为4％与22％。
而且LdT出现的耐药突变位点仅有rtM204I，尚未发现rtM204V变异。
原因尚不清楚，有研究认为可能与其抗病毒复制的高效能有关。
也有文献报道LdT 相关的耐药突变还可发生在rtL80、rtL180、rtL181、rtL229等位点，其意义还有待进一步明确。
6.替诺福韦(TDF)TDF是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，国外已批准该药用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)和成人的慢性乙型肝炎。
在Ⅲ期临床实验中，替诺福韦治疗2年以上还未被证实有基因型耐药发生，但是此临床实验在治疗72周时对血清仍能检测到病毒者都增加使用了恩曲他滨，所以不能确定72周后单一使用替诺福韦治疗的耐药发生率。
有报道称rtA194T变异与TDF耐药相关，能够改变DNA模板与dNTP底物的结合位点，从而影响DNA合成。