活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒(凝固法)

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活化部分凝血活酶时间测定 ( APTT )标准操作程序SOP文件

活化部分凝血活酶时间测定 ( APTT )标准操作程序SOP文件
CD-SOP-06-03
活化部分凝血活酶时间测定(APTT )
版序:ABCD
页码:第1页,共2页
[检测原理]
在37℃下以白陶土激活因子和以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,在Ca2+参与下,观察乏血小板血浆凝固所需时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。
4,为保证标本质量,统一使用一次性真空采血管采血。
XXXX医院
临床检验实验室
文件编号:
ABCD-SOP-06-03
活化部分凝血活酶时间测定(APTT )
版序:ABCD
页码:第2页,共2页
[参考范围]
男性31.5--43.5s,女性32--43s。
待测者的测定值较正常对照值延长超过10s以上才有病理意义。
(二),全自动分析仪:
1,标本编号后,放在分析仪样品架上。
2,编入样品编号,须检项目及其它。
3,启动分自动分析仪进行检测。
[质量控制]
1,每天同步进行三种质控物检测,以控制室内检测质量,及时发现失控原因,并及时纠正。
2,参加室间质评工作,以使结果与全国水平一致。
3,每批试剂使用前必须应用标准品,质量控制品进行试剂评价。
[临床意义]
用于手术前检查内源性途径凝血因子—Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ;是监测肝素的首选指标,凝血因子治疗以及检测狼疮抗凝物的主要手段。
[操作步骤]
(一),手工操作:
1.取待测血浆,第(1)各0.1ml,混匀,置37℃水浴温育3min,其间轻轻摇荡数次。
2.加入经预温至37℃的0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml,立即开启秒表,置水浴中不断振荡,约30s时取出试管,观察出现纤维蛋白原的时间,重复两次取平均值。
3.同时按上述测定正常对照。

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍用途液体试剂,提纯的大豆和兔脑磷脂,以及血浆激活物。

是一种活化的部分凝血活酶试剂,对狼疮样抑制剂的敏感性升高,用于测定活化部分凝血活酶时间和其它需要使用活化部分凝血活酶试剂的凝固方法。

概要和原理活化的部分凝血活酶时间(APTT),是一种全球通用的筛查方法,主要用于内源性凝血途径异常的评价,也用来检测因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ或者纤维蛋白原等严重的功能障碍。

APTT还广泛用于普通肝素疗效的监测方法中,血液凝固时间延长与肝素的水平成正比。

在口服抗凝剂的患者中,血液循环中因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的水平受到抑制,导致APTT延长。

非特异性抑制剂,如狼疮样抗凝剂,能使APTT延长,但是,此类影响是可变的,而且通常认为与所采用的APTT试剂的性能有关。

总之,APTT是一种重要的临床筛查试验,广泛应用于诊断凝血障碍性疾病、出血和血栓性疾病的治疗监测。

方法原理孵育血浆、适当量的磷脂和表面激活剂能够激活内源凝血系统因子。

添加的钙离子能触发凝血过程,然后测定凝固时间。

标本采集及准备将9份新鲜病人血液和1份0.11或0.13mol/L的枸橼酸钠(3.2或3.8%)混合。

商品化真空采血管含有指定抗凝剂,按血凝研究注意事项使用。

对于特殊的研究,采集技术必须很好。

采集后,立即于室温下按1500转/分,至少离心15分钟离心血液标本。

保存于室温下密封试管中。

若立即进行检测,则血浆可以不分离。

否则,需将血浆与血细胞分离。

分离血浆时,需使用塑料移液器,将其移至塑料试管中。

请勿冰冻。

非肝素化血浆应在采血后4小时内检测。

含有普通肝素的血浆应在采血后1小时内离心,室温下保存,4小时内检测。

乏血小板血浆可在≤-20℃冷冻条件下保存2周。

冰冻血浆应在37℃快速融解,轻柔混匀,立即检测。

样本在37℃下不得超过5分钟。

关于样本准备与保存的详细信息请参考CLSI文件H21-A5。

操作方法每个实验室必须测定其自身测试系统的最佳加热-活化时间。

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书1.实验原理:于37 C下在贫血小板血浆(PPP)中,加入激活剂,激活FXD和FX I,以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在Ca 离子的参与下,观察血浆凝固所需时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)。

2.标本采集:2.1早晨空腹采血(空腹12 小时左右),静脉采血。

2.23. 8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+ 静脉血1.8ml ,混匀。

3.标本存放:1小时内(3000r/min x 10min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2〜8 C保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70 C不超过6个月),只能冻融1次,在37 C 迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。

4.标本运输:低温条件下运输。

5.标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作该项目检测。

6.实验材料:北京世帝科学仪器公司活化部分凝血酶原时间测定试剂盒,主要成分由APTT试剂和氯化钙溶液组成,APTT 试剂的主要成分为鞣花酸和脑磷脂。

7.仪器设备:7.1仪器名称:M200全自动凝血因子分析仪。

7.2仪器厂家:北京世帝科学仪器有限责任公司。

7.3仪器型号:Coagulation analyzer M2007.4仪器技术参数:7.4.1试剂位:16 个,可放置不同规格大小的试剂瓶。

7.4.2样品位:60 个,可放置原试管。

7.5仪器校准程序:7.5.1校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。

7.5.2校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。

8.操作步骤:8.1开机前应先检查清洗液、废液、测试杯、试剂量是否足够。

8.2打开血凝仪电源开关,打开电脑双击图标,输入密码。

8.3试剂按照图形显示的位置摆放。

8.4联机完成后,预温1 0-1 5min 。

8.5点击“输入”选择“项目”再选择单孔或批量,完毕后点击“新增”后,再点击退出。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)产品技术要求pulisheng

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)产品技术要求pulisheng

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)
适用范围:本产品适用于人血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)的测定。

1.1 规格装量
本产品规格装量见表1。

表1 APTT试剂盒规格装量
1.2 产品主要成分
APTT冻干粉/液体试剂(鞣花酸):0.02%脑磷脂、0.03%鞣花酸。

氯化钙:0.025mol/L CaCl
2
2.1 外观
外观应符合如下要求:
a)试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;
b)APTT冻干粉型试剂应为疏松体,复溶后呈混悬液或者微混液体;
c)APTT液体试剂为均匀液体;
d)氯化钙为无色透明液体。

2.2 装量
液体试剂装量应不少于标称量。

2.3 正常血浆测量值
用正常血浆测试,采用鞣花酸为激活剂,凝固时间应不大于35s。

2.4 重复性(液体剂型适用)
用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV)应不超过5%。

2.5 瓶间差(冻干粉剂型适用)
用质控血浆重复测试相同批号试剂,所得结果变异系数(CV)应不超过5%。

2.6 批间差
用质控血浆重复测试不同批号试剂,所得结果变异系数(CV)应不超过10%。

2.7 稳定性
试剂在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。

在规定的贮存条件下保存至有效期后,产品性能应符合2.1~2.5要求。

冻干粉剂型试剂复溶后原包装保存,2℃~8℃保存7天后,产品性能应符合2.1,2.3,2.5要求。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程1.检验原理:待测血浆加入糅花酸激活剂及脑磷脂(部分凝血活酶),37℃温育一定时间,激活内源凝血因子刈,XI等,在Ca?+参与下,最终使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白。

在光学比浊法仪器上测定加入CaCl2凝固所需的时间,即为待测血浆的APn.2.试剂主要组成成分RI:APTT试剂:糅花酸、兔脑磷脂;R2:CacI2溶液:25mmol∕L氯化钙。

3.样本要求3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol∕L枸檬酸钠充分混合均匀。

室温300OrPm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。

3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。

3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。

测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。

4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RACT830标准操作规程)5.参考区间:24—36秒6.检验结果的解释6.1报告APTT秒数(三)和/或比值,检验结果与各实验室的参考值范围相关。

7.2口服肝素、香豆素类药物会使APTT延长。

8.检验方法的局限性8.1凝血过程包括从因子激活到纤维蛋白形成的一系列反应。

因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。

8.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血剂/抗凝剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。

9.产品性能指标重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV)应不超过3.8%。

10临床意义APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验,也可作为内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Vil因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子VIIIIXXII和前激肽释放酶的测定。

同时,APTT测定可用于肝素治疗监控。

APTT延长:见于凝血因子IIVVfflIXXIXII减低,纤维蛋白原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在,是监控肝素治疗的重要指标。

检验科血液凝固功能常见检测与分析方法

检验科血液凝固功能常见检测与分析方法

检验科血液凝固功能常见检测与分析方法血液凝固功能是指在机体受到损伤时,血液形成凝块以停止出血的能力。

正常的血液凝固功能对于人体健康至关重要,而凝血功能异常可能导致出血或血栓形成等严重疾病。

为了及时发现和诊断凝血功能异常,检验科开发了许多常见的血液凝固功能检测与分析方法。

本文将介绍一些常见的检测与分析方法。

一、血小板计数法血小板是血液中参与凝血的重要组成部分。

血小板数量过少或过多都可能导致凝血功能异常。

通过血小板计数法,可以准确地检测出血小板的数量,从而评估凝血功能是否正常。

目前,血小板计数最常用的方法包括血细胞自动分析仪和显微镜计数法。

血细胞自动分析仪是一种高度自动化的设备,可以通过血液样本进行血小板计数和分类。

它可以快速而准确地测定血小板的数量,并且可以自动进行数据分析和结果记录,大大提高了检测效率。

显微镜计数法则相对繁琐,需要人工操作,并且需要将血液样本制成薄片进行观察和计数。

虽然相对复杂,但是这种方法操作简单,成本低廉,适用于一些基础实验室。

二、凝血酶时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)凝血酶时间和活化部分凝血活酶时间是常见的测定血液凝固功能的方法,可以评估凝血因子的活性和凝血酶的生成能力。

凝血酶时间(PT)主要是通过对患者血浆中凝血酶的形成时间进行测定。

PT的延长可能意味着凝血酶的生成能力下降,凝血功能异常。

在实验室中,通常使用凝血时间试剂盒来测定PT,具体操作是将试剂与血浆混合,记录下血浆凝固时间。

活化部分凝血活酶时间(APTT)是测定凝血功能的另一种方法,主要检测体内活化过程中凝血酶形成的时间。

APTT的延长可能意味着凝血因子活性降低或缺乏。

APTT的测定方法与PT类似,通过试剂与血浆混合,记录下凝固时间。

三、凝血酶原时间(TT)和纤维蛋白原测定凝血酶原时间和纤维蛋白原测定是常见的检测血液凝固功能的方法,主要用于评估凝血因子和纤维蛋白原的生成和活性。

凝血酶原时间(TT)通过测定血浆中凝血酶原转化为凝血酶的时间来评估凝血因子的生成能力。

活化部分凝血活酶时间测定试剂盒 (凝固法)产品技术要求beikenhengye

活化部分凝血活酶时间测定试剂盒 (凝固法)产品技术要求beikenhengye

活化部分凝血活酶时间测定试剂盒(凝固法)
适用范围:该产品用于体外测定人血浆的活化部分凝血活酶(APTT)时间。

1.1包装规格
表1 包装规格
1.2产品组成成分
试剂盒由试剂A(冻干粉)和试剂B(氯化钙溶液)组成,各组分见表2。

表2 试剂盒组成
2.1 外观
试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;试剂A为乳白色冻干粉,复溶后为混悬液;试剂B为无色透明液体。

2.2 正常血浆测量值
测试正常血浆,所得结果均值应不大于45s。

2.3 重复性
用正常值和异常值两个水平的质控血浆重复测试试剂盒,结果的变异系数(CV)应不大于5.0%。

2.4 批间差
用正常值质控血浆重复测试不同3个批号试剂盒,批间的变异系数应不大于6.0%。

2.5 瓶间差
用正常值质控血浆重复测试同一批号不同瓶的试剂盒,瓶间的变异系数应不大于6.0%。

2.6 复溶稳定性
复溶后的试剂2℃~8℃保存3天, 应符合2.1、2.2、2.3要求。

2.7 稳定性
试剂储存在2℃~8℃的有效期为18个月,有效期满后一个月以内检测,应符合2.1、2.2、2.3的要求。

试验三活化部分凝血活酶时间测定

试验三活化部分凝血活酶时间测定

二、血凝仪法
【目的】 掌握活化分凝血活酶时间的血凝仪测 定法。 【原理】 APPT 是在体外满足内源性凝血全部条 件后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下,以 白陶土(激活剂)激活因子Ⅻ,以脑磷脂(部分 凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,再 加入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
【操作】 1.分离乏血小板血浆 2.平衡温度 3.温浴氯化钙溶液 4.测定正常人参比血浆的APTT 5.测定待检血浆的APTT 6.报告方式
【注意事项】 1.试剂质量对APTT测定结果影响很大,不同的部 分凝血活酶试剂,其质量也不同。一般选用对因子 Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ在血浆浓度为200~250U/L时灵敏的试 剂。激活剂因规格不一,其致活能力不同,因此 参比值有差异。如果正常人参比血浆APTT明显延 长,则提示APTT试剂质量不佳。 2.采血后应尽快检测,最迟不应超过2h。被检血 浆放置过久,凝固时间有缩短的倾向。 3 .血浆加APTT试剂后的温浴时间不得少于3min 。 时间过短,APTT延长。 4.其它同血浆凝血酶原时间测定。
实验三
活化部分凝血活酶时间测定
一、试管法
【目的】 掌握活化部分凝血活酶时间(APTT) 测 定的试管法。 【原理】 APPT是在体外满足内源性凝血全部条件 后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下,以白 陶土(激活剂)激活因子Ⅻ,以脑磷脂(部分凝 血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,再加 入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
【操作】 1.分离乏血小板血浆 同试管法。 2.平衡温度 同试管法。 3.温浴氯化钙溶液 同试管法。 4 .测定正常人参比血浆的APTT。 5.测定待测血浆的APTT。 6.报告方式 同试管法。
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活化部分凝血活酶时间()检测试剂盒(凝固法)
产品简介:
静脉血离体后至完全凝固所需的时间即为凝血时间,它是反映内源性凝血系统各凝血因子活性的筛选实验。

活化部分凝血活酶时间()是利用在℃以白陶土激活因子Ⅻ,以部分凝血活酶代替血小板提供凝血的催化表面,在参与下,使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,计算缺乏血小板的血浆凝固所需的时间。

活化部分凝血活酶时间()检测试剂盒(凝固法)用于人、动物血液的活化凝血时间的测定,是反映内源性凝血系统较敏感和常用的筛选实验。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:
自备材料:
、离心机
、计时器
、水浴锅
操作步骤(仅供参考):
制备待测血浆:取新鲜待测静脉血,与柠檬酸钠抗凝剂()按混合,轻轻混匀。

离心,收集上层液(缺乏血小板的血浆),转移至塑料试管或离心管,以防止血小板被激活。

同时应设正常对照血浆。

将白陶土脑磷脂平衡至室温,颠倒混匀。

取待测血浆(包括正常对照血浆)、白陶土脑磷脂溶液各,混匀。

置于℃水浴,期间轻轻混匀数次。

加入经温育至℃的(),立刻计时,置于水浴中不断震荡,约时取出,观察出现纤维蛋白丝的时间,重复次取平均值。

参考区间:男性:~;女性:~,待测者的测量值较正常值对照值延长以上具有临床意义。

以上值仅供参考,由于试剂、人群、仪器等不同,会导致参考值不同,建议各实验室建立自己的参考范围。

注意事项:
、以上操作,应同时测定正常对照。

、获得样本后,应及时检测,一般不应超过,℃孵育时间不应少于。

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