U系列色谱柱介绍
超高效液相色谱原理
超高效液相色谱原理
超高效液相色谱（Ultra-High Performance Liquid Chromatography, UHPLC）是一种高效的液相色谱分析技术。
超高效液相色谱的原理是利用特殊的色谱柱和高压泵进行分离，使得液相流动速度更快，分离效率更高。
具体原理如下：
1. 色谱柱选择：UHPLC常用的色谱柱粒径一般为1.8-
2.6 μm，相比传统液相色谱的
3.5-5 μm，更小的粒径可以提高色谱分离效率。
2. 高压泵：UHPLC使用高压泵提供高压力驱动液相流动，一
般工作压力可达到6000 psi或更高。
高压使得液相在色谱柱中
流动更快，加快分离过程。
3. 短柱长：UHPLC一般采用较短的色谱柱（通常为1-5 cm），与传统液相色谱相比，短柱可以减少柱内扩散，使得分离效率更高。
4. 快速检测器：UHPLC通常配备高灵敏度的快速检测器，如
紫外-可见光检测器（UV-VIS），质谱检测器等。
快速检测器
可以实时监测样品的测定信号，加快分析速度。
总的来说，UHPLC通过使用特殊的色谱柱、高压泵和快速检
测器等设备，提高了液相流动速度和分离效果，从而实现超高效的液相色谱分析。
聚二甲基硅氧烷色谱柱型号 安捷伦
聚二甲基硅氧烷色谱柱是色谱技术中常用的一种柱子，特别是在液相色谱技术中得到广泛应用。
本文将介绍安捷伦公司生产的几种聚二甲基硅氧烷色谱柱的型号和特点，帮助读者更好地了解和选择适合自己研究领域的色谱柱。
一、型号介绍1. ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱是一种高效液相色谱柱，采用高质量经过表面改性的聚二甲基硅氧烷材料制成。
该色谱柱具有良好的化学稳定性和耐热性，能够在高温下进行分离，适用于对疏水性化合物进行分离和分析。
2. XBridge BEH C18色谱柱XBridge BEH C18色谱柱是一种经典的C18相色谱柱，适用于对中等极性化合物进行分离和分析。
该色谱柱具有良好的机械强度和化学稳定性，能够在高流速下进行高效分离。
3. HSS T3 C18色谱柱HSS T3 C18色谱柱是一种超高效液相色谱柱，具有极好的抗碱性和化学稳定性，能够在酸性和碱性条件下进行高效分离和分析。
该色谱柱适用于对极性化合物和离子性化合物进行分离。
二、特点分析1. 高效分离能力安捷伦生产的聚二甲基硅氧烷色谱柱具有优异的分离能力，能够对各种类型的化合物进行高效分离，保证分析结果的准确性和可靠性。
2. 良好的耐热性和化学稳定性这些色谱柱具有良好的耐热性和化学稳定性，能够在高温和各种溶剂条件下进行分离，不易受到化学物质的腐蚀，使用寿命长。
3. 广泛适用性不同型号的聚二甲基硅氧烷色谱柱适用于不同的分离和分析要求，能够满足科研和生产实验室对各种类型样品的分离要求。
三、应用领域1. 药物分析聚二甲基硅氧烷色谱柱广泛应用于药物研发和质量控制领域，能够对药物成分进行快速准确分离和分析。
2. 环境分析对于环境领域的复杂样品，聚二甲基硅氧烷色谱柱能够有效分离和分析各种环境污染物，保障环境监测的准确性。
3. 食品安全在食品安全领域，聚二甲基硅氧烷色谱柱能够对食品中的添加剂、农药残留等进行快速准确的分析，有助于保障食品安全。
超高液相色谱色谱柱c4型号
超高液相色谱色谱柱c4型号超高液相色谱（UHPLC）是一种高效、快速的分离技术，能够提高分离效率和分辨率，缩短分析时间，减少溶剂消耗，提高分析效率。
而色谱柱是UHPLC系统中的关键部件之一，其性能直接影响到分离的质量和效率。
本文将介绍一种常用的UHPLC色谱柱——C4型号。
一、C4型号的基本介绍C4型号是一种反相色谱柱，其填充材料为碳链基团，具有较强的亲疏水性，能够分离极性和非极性化合物。
C4型号的色谱柱常用于生物分子、药物、天然产物等复杂样品的分离和纯化，具有较高的选择性和灵敏度。
C4型号的填充材料为高纯度的硅胶微粒，表面经过特殊处理，具有较强的疏水性，能够与疏水性分子发生相互作用，实现分离。
C4型号的填充材料具有较高的稳定性和耐久性，适用于高效液相色谱和超高效液相色谱分离技术。
二、C4型号的优势1.高效分离能力C4型号的填充材料具有较强的疏水性，能够与疏水性分子形成相互作用，实现高效分离。
C4型号的色谱柱能够分离具有不同亲疏水性的化合物，提高分离效率和分辨率。
2.较高的选择性C4型号的填充材料具有中等的亲疏水性，能够选择性地分离具有不同亲疏水性的化合物。
C4型号的色谱柱能够分离复杂样品中的目标物质，提高纯度和灵敏度。
3.较长的使用寿命C4型号的填充材料具有较高的稳定性和耐久性，能够经受高压、高温和高pH值的影响。
C4型号的色谱柱具有较长的使用寿命和较稳定的分离性能。
4.广泛的应用领域C4型号的色谱柱适用于生物分子、药物、天然产物等复杂样品的分离和纯化。
C4型号的色谱柱在食品、医药、化工等领域具有广泛的应用价值。
三、C4型号的使用注意事项1.避免使用过高的流速和压力，以免损坏色谱柱。
2.避免使用过高的pH值和盐浓度，以免影响填充材料的稳定性和分离性能。
3.避免使用过高的温度，以免影响填充材料的稳定性和分离性能。
4.避免使用不适合的溶剂和样品，以免影响分离效果和色谱柱的使用寿命。
四、结语C4型号是一种常用的UHPLC色谱柱，具有高效分离能力、较高的选择性、较长的使用寿命和广泛的应用领域。
色谱柱介绍PPT课件
OH
R
O
Si
OH
R
侧链基团：二异丁基或二异丙基 提供空间位阻可避免硅胶在低PH 下水解、破坏。
1.PH范围：1-8 2.使用了空间位阻大的硅烷 3. 未封端
优点：可以在低PH下分析酸性、碱性 和中性组分，峰形优异。
第29页/共70页
5.不同品牌色谱柱介绍
➢ Agilent Eclipse XDB,
❖苯基柱的适用范围：
1.用于分析芳香族化合物，对这类化合物有独特的分离性。 2.可以分析小分子的肽类和蛋白。
第22页/共70页
4.常见色谱柱介绍
4.4 氰基柱
CH3
SiO2
O Si CH2 CN
3
CH3
氰基柱，既可用于正相色谱，又可用于反相色谱。其在用于正相色谱时，可使
用如正己烷的低极性流动相，在用于反相色谱时，可使用甲醇或水的强极性流
合物和非离子化合物的分离。
由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高， （硅羟基的PKa低），导致碱性化合物发生拖尾。
第4页/共70页
2.色谱柱物理性能
B 型硅胶：纯度高、酸性较弱的硅胶。 这种硅胶是以无金属的工艺制备而来，只含有微量的金属 可用于分离离子化合物和可电离的化合物，特别是碱性化和物。
第17页/共70页
❖C18柱
4.常见色谱柱介绍
SiO2
CH3
O Si CH2 CH3
17
CH3
定义：C18,简称“ODS”柱，即十八烷基键合硅胶填料。 这种填料在反相色谱中发挥着极为重要的作用，它可完成 高效液相色谱70-80%的分析任务。由于C18是长链烷基键 合相有较高的碳含量和更好的疏水性，对各种类型的生物 大分子有更强的适应能力，应用最为广泛。
气相色谱柱固定相简介
气相色谱柱固定相简介毛细管色谱柱最常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。
1、聚硅氧烷聚硅氧烷由于其用途广泛、性能稳定性，是目前最常用的固定相。
标准的聚硅氧烷是由许多单个的硅氧烷链接而成。
每个硅原子与两个功能集团相连，最常见的功能集团为甲基和苯基，此外还有氰丙基和三氟丙基。
这些功能集团的类型和数量决定了色谱柱固定相的性质。
最基本的聚硅氧烷是由100%甲基取代的，相应的柱子牌号有：HP-1、BP-1、DB-1、SE-30等。
若有其他取代基取代甲基时，该取代基的数量一般由一个百分数来表示。
例如：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷表示其包含有5%的苯基集团和95%的甲基集团（“二”是表示每个硅原子包含有两个特定集团）。
相应的柱子牌号有：HP-5、BP-5、DB-5、SE-54等。
如果甲基的百分数没有表征，则表示它们的含量是100%(如50%苯基-甲基聚硅氧烷表示甲基的含量为5 0%)。
相应的柱子牌号有：HP-50+、BPX-200、DB-17等。
2、聚乙二醇聚乙二醇是另外一类广泛应用的固定相。
有些我们称之为“WAX”或“FFAP”。
聚乙二醇的稳定性、使用温度范围都比聚硅氧烷要差一些。
聚乙二醇固定相色谱柱的寿命较短，而且容易受温度和环境(有氧环境等)的影响。
但由于它的极性比较强，对极性物质有特殊的分离效能，所以仍是我们常用的固定相之一。
为了提高分离效能，还有用pH阳离子改性聚乙二醇固定相。
FFAP柱就是一类用对苯二甲酸改性的聚乙二醇作为固定相的(DB-FFAP)。
这种色谱柱常用于分析分离酸性化合物。
另外，我们也用碱性化合物对聚乙二醇固定相改性用来分析分离碱性化合物(CAM)。
相应的柱子牌号有：HP-Wax、DB-Wax、Carbowax-10，HP-INNOWax、DB-WAXetr、Car bowax-20M，HP-FFAP、DB FFAP、OV-351等。
UPLC色谱柱技术介绍
• AAA, OST, PST, PrST and Glycan
Transferability between HPLC and UPLC
HSS T3 HSS C18
HSS C18 SB HSS PFP HSS Cyano
XBridge HPLC and ACQUITY UPLC BEH columns
• BEH 130Å C18, C8, Shield RP18, Phenyl, HILIC and Amide • BEH 300Å C18 and C4 • BEH 200Å SEC
BEH HILIC BEH Amide
• HSS C18, T3, C18 SB,PFP,Cyano • CSH C18, Fluoro-Phenyl and Phenyl-Hexyl
3x107 2x107 1x107
Without VanGuard™ Pre-column
H3C O
H
H
S
HO
ON
With VanGuard™
Pre-column
N H3C
CH3
0
0.60
0.80
1.00
Diltiazem
2.0x106 SIR m/z 415.2
1.20
1.40
Minutes
1.5x106
色谱柱使用维护
©2014 Waters Corporation
23
ACQUITY UPLC 颗粒平台
BEH 亚乙基桥杂化颗粒
130Å, 200Å, 300Å
HSS 高强度硅胶颗粒
100Å
CSH 表面带电杂化颗粒
最新UPLC色谱柱介绍
©2011 Waters Corporation
6
新式可追溯性的eCord 技术
系绳
支架
eCord 永久附在色谱柱上 智能芯片自动下载关键参数到色谱柱历 史文件 提供色谱柱全程使用历史 信息不可删除 存在芯片上的信息可减少记录纸张
包嵌式16 mm微芯片
©2011 Waters Corporation
©2011 Waters Corporation
硅胶的pH应用范围 杂化颗粒的pH应用范围
Neue et. al. American Laboratory 1999 (22) 36-39.
17
增加化合物的保留并提高灵敏度： High pH Mobile phase
2
0.1% NH4OH
5
%
HIGH pH
Primary Manufacturer
Better traceability & control of entire process
Waters
Silica (Hybrid) Bonding Column Packer
Bonder
Column Packers
Distributors
Source & control of particle greatly influences chromatography
0
1
Nortriptyline
Minutes
2
3
Amitriptyline
pH 8
20
pH control critical
8
10
0
1
Minutes
2
3
Nortriptyline
气相色谱柱知识详解
v1.0 可编辑可修改气相色谱柱知识详解第一节气相色谱柱的类型气相色谱法（gas chromatography, 简称GC）亦称气体色谱法，气相层析法。
其核心即为色谱柱。
气相色谱柱有多种类型。
从不同的角度出发，可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的化学性能等进行分类。
色谱柱使用的材料通常有玻璃、石英玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等，根据所使用的材质分别称之为玻璃柱、石英玻璃柱、不锈钢柱和聚四氟乙烯管柱等。
在毛细管色谱中目前普遍使用的是玻璃和石英玻璃柱，后者应用范围最广。
对于填充柱色谱, 大多数情况下使用不锈钢柱，其形状有U型的和螺旋型的，使用U 型柱时柱效较高。
按照色谱柱内径的大小和长度，又可分为填充柱和毛细管柱。
前者的内径在24mm，长度为110m左右；后者内径在，长度一般在25100m。
在满足分离度的情况下，为提高分离速度，现在也有人使用高柱效、薄液膜的10m短柱。
根据固定液的化学性能，色谱柱可分为非极性、极性与手性色谱分离柱等。
固定液的种类繁多，极性各不相同。
色谱柱对混合样品的分离能力，往往取决于固定液的极性。
常用的固定液有烃类、聚硅氧烷类、醇类、醚类、酯类以及腈和腈醚类等。
新近发展的手性色谱柱使用的是手性固定液，主要有手性氨基酸衍生物、手性金属配合物、冠醚、杯芳烃和环糊精衍生物等。
其中以环糊精及其衍生物为色谱固定液的手性色谱柱，用于分离各种对映体十分有效，是近年来发展极为迅速且应用前景相当广阔的一种手性色谱柱。
在进行气相色谱分析时，色谱柱的选择是至关重要的。
不仅要考虑被测组分的性质，实验条件例如柱温、柱压的高低，还应注意和检测器的性能相匹配。
有关内容我们将在以后章节中加以详细讨论。
第二节填充气相色谱柱填充气相色谱柱通常简称填充柱，在实际分析工作中的应用非常普遍。
据资料统计，日常色谱分析工作大约有80%是采用填充柱完成的。
填充柱在分离效能和分析速度方面比毛细管柱差，但填充柱的制备方法比较简单，定量分析的准确度较高，特别是在某些分析领域（例如气体分析、痕量水分析）具有独特用途。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
13
Unitary种类介绍：
Unitary C18包含： 1 2 3
Unitary C18 （常规产品，常规C18，通用C18，通用选择性） Unitary C8（常规产品，常规C8，通用C8，通用选择性） Unitary Silica（常规产品，通用硅胶，通用选择性） Unitary Diol（常规产品，二醇基，通用选择性） Unitary NH2（常规产品，常规氨基，通用氨基，通用选择性）
拖 尾 因 子
“高纯硅胶 ”区
3
2
1
0
100 200 300 金属杂质含量, ppm
400
9
产品特点：
Unitary的高柱效，来源于严格的工艺控制
U系列色谱柱以华谱公司经过严格工艺控制，经过独特的表面键合技术和色谱柱装填技
术生产而成，具有很高的柱效，能提供更尖锐的色谱峰、更好的分辨率和更高的检测灵敏 度。
色谱柱：Unitary C18 规格：150 mm×4.6 mm i.d., 5 μ m 流动相：甲醇/水，85/15 流速：1.0 mL/min 柱温：30 ℃ 样品：尿嘧啶，邻苯二甲酸二甲酯， 硝基苯，二苯胺，萘，芴 （N=90000/m）
10
产品特点：
Unitary的种类齐全，来源于科学的创新精神
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ——技术服务系列色谱柱
S系列色谱柱是以样品分离需求为导向的特色技术服务系列，为您开发最优填料，提 供最优色谱问题解决方案。
4
华谱色谱柱家族：
种类齐全的色谱全线产品 C18，C8，硅胶，二醇，氨基…… 优异的稳定性 优异的批次重复性
简单的选择，品质的承诺
对于常规的分析分离，您只需要简单选择一下色谱柱 的种类和规格，而优异的性能则是我们对您的承诺。
AU
色谱条件：
0.15 0.10 0.05 0.00 10.00 20.00 30.00 分钟 40.00 50.00 60.00
五味子脂甲
名称 五味子脂甲
色谱柱 Unitary C18
保留时间(min) 31.065
对称因子 1.13
理论塔板数 14000
Unitary C18 分析头孢地尼
VWD1 A, Wavelength=254 nm (D:\ 袁影\DATE...25-头孢地尼 2012-09-27 16-39-03\1209025-头孢地尼-UNITARYC182.D)
4
5
Unitary种类介绍：
U系列色谱柱填料类型及基本参数
15
应用案例：
Unitary C18
激素
糖皮质激素类、氢化可的松
抗生素
注射用头孢拉定 乙酰螺旋霉素
肽类
醋酸去氨加压素
中药
葶苈子 藿香正气软胶囊 人参茎叶皂苷 银杏总黄酮
其他
盐酸二甲双胍 孔雀石绿 对乙酰氨基酚 甲磺酸帕珠沙星
16
Unitary Silica/Diol
/ / 13653 14104 4157 10574 12294 13082
/ / / 4.7 1.5 3.9 1.7 2.2
10.336 13.357 15.652 16.734 20.013 21.305 22.933
Unitary C18 分析葶苈子
mAU
色谱条件： 色谱柱：Unitary C18，150 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器： Agilent 1260 流 速：1.0 mL/min 柱 温：30 oC 检测波长：254nm 进样量：10 µL 流动相： A: 0.1%醋酸水 B:乙腈 梯 度：
Hydrophilic
Click Mal
不断研发，不断创新……
Click XIon-A
华谱色谱柱家族：
——常规系列色谱柱
U系列色谱柱是解决常规液相色谱分离问题的首选，具有良好的色谱性能，齐全的键 合相种类，适用于常规样品分析。
——引领系列色谱柱
X系列色谱柱针对液相色谱分离中共性难点问题，体现色谱柱填料技术发展方向，重 点解决极性化合物和碱性化合物的分离，同时关注色谱柱稳定性与使用寿命等问题。
200
10
20
30
40
min
色谱柱 实验结果 Unitary C18
保留时间(min) 24.139
对称因子 3.8
分离度 /
理论塔板数 24000
时间（min） 0 2 22 32
流动相A（%） 95 95 75 50
流动相B（%） 5 5 25 50
Unitary C18 分析头孢克肟
0.014 0.012 0.010
盐酸哌唑嗪 盐酸哌替啶 糖 ±a生育酚 维生素K1、K3 维生素A醋酸酯
17
Unitary C18 分析6-APA
色谱条件： 色谱柱：Unitary C18，250 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器：Alliance 2695_2489 流 速：1.0 mL/min 柱 温：40 oC 检测波长：220 nm 进样量：8µL 流动相：A：pH 7.0的磷酸盐缓冲液（称取磷酸二氢钾 1.35 g和磷酸氢二钠3.35g，溶于1000mL的 水中） B：乙腈 梯 度：
色谱柱：Unitary C18 规格：150 mm×4.6 mm i.d., 5 μ m 流动相：0.025 M磷酸溶液（用三乙胺调节 pH值至3.0）－ACN（87: 13） 流速：1.0 mL/min 柱温：30℃ 样品：诺氟沙星
产品特点：
Unitary的近乎完美的批次间重复性，来源于我们对承诺的坚持
94 94 60
流动相B（%）
6 6 40
Unitary C18 7.160 8.319 9.123
Unitary C18 分析醋酸奥曲肽注射液
色谱条件： 色谱柱：Unitary C18，250 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器：Agilent 1260 流 速：1.0 mL/min 柱 温：25 oC 检测波长：210 nm 进样量：20 µL 流动相：A:（取10%四甲基氢氧化铵溶液20 mL，加水880 mL， 用10%磷酸溶液调节pH 至5.4）-乙腈（900:100） B:（取10%四甲基氢氧化铵溶液20 mL，加水380 mL， 用10%磷酸溶液调节pH 至5.4）-乙腈（400:600） 梯 度：
时间（min）
流动相A（%）
流动相B（%）
名称 醋酸奥曲肽
色谱柱 Unitary C18
保留时间(min) 11.805
对称因子 1.47
理论塔板数 19000
0
30
73
55
27
45
Unitary C18 分析南五味子
0.25 0.20
色谱柱：Unitary C18，250 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器： 1525EF_2707_TCM_2489 流 速：1.0 mL/min 柱 温：30 oC 检测波长：254 nm 进样量：20 µL 流动相：A：四氢呋喃 B：水 等 度：A/B（38:62，v/v）
S-Peptide
XAqua C3
XCharge SCX
2006
2009
2010
XCharge SAX XUnion Diol Click Mal-CF
2011
Click CD
XCharge WCX XAmide Click TE-CD Click XIon-300, Click XIon-A300 Click XIon-200 Click XIon
6
常规分离分析液相色谱柱的首选 -U系列液相色谱柱
涵盖大量常规标准分析方法 全面兼顾色谱工作者实际需求
7
Unitary色谱柱介绍：
标准方法的稳定重现，您只需确认色谱柱的种类和规格
8
产品特点：
Unitary的优异性能，来源于超纯基质 金属杂质的存在能够活化硅羟基，增加其酸性 待测组分与金属发生螯合作用导致色谱峰拖尾和前延 4
/ 2.44
10000 8700
Unitary C18 分析淫羊藿黄铜提取物
色谱条件： 色谱柱：Unitary C18，150 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器： Agilent 1260 流 速：1.0 mL/min 柱 温：30 oC 检测波长：272 nm 进样量：10 µL 流动相： A: 水 B:乙腈 梯 度：
华谱色谱柱家族：
迎接挑战 需要科学的方法和工具
困难的存在，是由于一定阶段认识能力和解决手段的局限。 欲善其事，必利其器—针对目前普遍存在的分析分离的难点问题。 X系列品牌色谱柱应运而生，成为迎接挑战的利器！
优良的稳定性和非凡的载样量
机型化合物分离的首选
强极性化合物分离的领先者
碱性化合物分离分析性能的标杆
13.357
20.013
0.008
AU
15.652
16.734
0.016
0.006
9.998 10.336
21.305
色谱条件： 色谱柱：Unitary C18，250 mm × 4.6 mm，5 µm 仪 器： 1525EF_2707_TCM_2489 流 速：1.0 mL/min 柱 温：30 oC 检测波长：254 nm 进样量：10 µL 流动相：A:（取10%四甲基氢氧化铵溶液25 mL，加水 1000mL，用1.5mol/L磷酸溶液调节pH 至7.0） B: 乙腈 等 度： A/B（70:30，v/v）
时间（min）
0 10 20
色谱柱
保留时间(min) 4.208 5.359 5.684