做切片方法
组织切片石蜡切片过程
石蜡切片过程一、石蜡包埋:1.脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70% →80% →90% →95%→100%酒精（无水乙醇）→100%酒精，各级酒精脱水时间30-45 min。
（注意：80%酒精内组织可留之较久，当天如果来不及做完就可以暂时保存一晚上，次日再继续做下去。
70%的酒精可作为更久的保存剂。
）2.透蜡：脱水后组织：50%酒精+50%二甲苯30 - 45min.二甲苯（组织透明即可停止) 15min.50%二甲苯+50%石蜡20-30min.纯石蜡1 45min.纯石蜡2 45min.（透腊之前做好准备工作：准备腊杯，烘箱温度保持55—60℃左右，使石腊熔化，温度不宜过高，以免使组织发脆。
）3.包埋：a.折好纸盒，准备小镊子、酒精灯、解剖针、冷水等。
b.用温热吸管吸取石蜡注入纸盒。
等待底稍微凝固，温镊子夹住样品放入盒子中央，面朝底(可以将蜡一次倒入纸盒，然后待蜡表面起膜后，用温镊子夹住样品放入蜡中，待冷却即可，整个操作过程中，切勿让蜡中起气泡)。
c.两手拿着两端，入冷水一半，吹气，使表面石蜡形成移较厚腊层，然后急速全部进入冷水中3分钟。
d.修正蜡块（上下两个面一定要平行并且光滑）e.固着蜡块二、切片1.切片（切片时，可以在刀片以及刀片周围涂上一点甘油）2.贴片烤片（甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清）（在贴片时，用细吸管取一点点甘油蛋白（越少越好）于载玻片上，然后用手抹匀，手一定要干净。
将切片放在载玻片（光亮面朝向下），然后滴几滴冷水使切片悬于水上。
接着将载玻片放在37℃上烘烤。
常见问题分析：1.切片分离不能形成蜡带：☞室温过低，蜡过硬。
2.蜡带弯曲：☞蜡块口下面不平行，或蜡块不与刀刃平行所致。
3.切片厚薄不一: ☞切片刀或蜡块未固定紧。
4.切成片后，组织与蜡块脱离：☞脱水不干净等。
5.蜡片易粘在切片上或蜡片萎缩：☞室温太高或蜡太软或刀的角度太小。
6.切片破裂：☞浸蜡不足或浸蜡温度过高，或在脱水剂、透明剂中时间过长，引起组织发脆或有杂质，材料脱钙不完全，此种无法补救。
徒手切片的基本要求
、目的与要求1、学习并掌握临时装片的制作方法和步骤。
2、学习徒手切片技术。
3、了解细胞基本结构和厚角组织的特点。
二、材料和用品1、自备材料：解剖器（镊子、解剖针、单面刀片或双面刀片）；洋葱鳞茎、青红椒、芹菜叶柄、女贞叶片或其它植物的叶片、胡萝卜块等。
2、其它材料和用品：显微镜、盖玻片、载玻片、纱布、蒸馏水、吸水纸、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、纯甘油、碘—碘化钾稀溶液、培养皿、吸管。
三、实验内容1、临时装片的制作方法2、徒手切片方法四、实验方法要观察、研究植物细胞、组织和器官的微细结构，以及一些很微小的藻、菌植物等，这些用肉眼是无法看到的，必须借助于显微镜来观察，要用显微镜观察，首先必须制成各种制片，放在显微镜下才能观察。
制片的方法很多，这里着重介绍临时装片法和徒手切片的方法技术。
1、临时装片的制作方法临时装片法是用少量的新鲜植物材料，如单个细胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料（如丝状或叶状的藻类、菌类、蕨类的原叶体和孢子囊、纤细的苔藓植物等等），把这些材料放在载玻片的水滴中，再盖上盖玻片做成玻片标本的方法。
这种方法制成的标本，可以保持材料的生活状态和天然的色彩。
此法一般多做为临时观察使用，也可根据需要选择适宜的染料染色，制成永久制片或用某些化学试剂作组织化学反应。
临时装片的制作方法和步骤如下：（1）清洁玻片：将盖玻片和载玻片用清水洗净，再用纱布擦干，擦玻片时用左手食指和拇指夹住玻片的两边，右手食指和拇指包住纱布，同时擦到的玻片的两面，用力要均匀。
注意：由于盖玻片很薄，所以擦盖玻片时要特别小心，用力要轻，右手食指和拇指要轻轻捻动，以免把盖玻片捏破。
（2）放置材料：先将载玻片平放在桌面上，于载玻片中央滴一滴蒸馏水或稀甘油，然后用镊子镊取或吸管吸取少量要观察的材料（如洋葱鳞叶表皮或水绵……），放在载玻片中央的水滴或甘油中，再用镊子和解剖针将材料展平或分散开，勿使材料折叠或干燥。
（3）加盖玻片及其它处理：为了避免产生气泡，盖盖玻片时，应该以大拇指和食指拿着盖玻片的两个角或用镊子夹住其一端，使盖玻片的一边先与载玻片上的水滴边缘接触，而后徐徐放下另一边，当盖玻片被夹持的一边将贴近载玻片时，则可放手或抽出镊子，使其自然轻轻复盖，这样可以使盖玻片下的空气挤出，免生气泡。
石蜡切片的具体步骤与做法
石蜡切片的具体步骤与做法？石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。
石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法，因此用得最多，它有很多优点：比较省时间，容易操作，可切成极薄的切片（4um以下），能制作连续切片，组织块可包埋在石蜡中永久保存。
缺点是只能用于较小的组织块，较大的组织块不易切好，容易破碎，组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆。
制片时间太长。
石蜡切片的制作过程（一）材料与用具1．材料：鱼皮肤、性腺、肠、肝胰脏等。
2．用具：溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。
（二）实验内容与步骤1．取材及固定取动物体上的小块组织成为组织块。
组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。
切去组织块时动作要轻，切忌用力牵引或挟持，以免组织内部发生变化。
组织块取下后，先用先用0.85％的生理盐水漂洗以戏曲血液与污渍，如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。
由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24小时。
如果是管状器官或是其中有分泌之消化液，则死后应迅速采取，以免组织自溶或上皮剥落。
材料由动物体取下后应当迅速固定，固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部，将组织固定，以保持其原有的结构。
不同的组织应选用适当的固定液。
固定液的用量与组织块体积之比一般在20：1。
不应使组织块贴于容器壁上，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。
2．冲洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。
组织块应用纱布包好，注名，放金属水洗网中用流水冲洗，甲醛固定液固定的组织一般水洗24小时，Bouins固定液固定的组织水洗24小时。
AFA固定液则不需要水洗。
3．脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水，脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，使组织逐渐变硬，便于油类或其他透明及浸入，为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。
如何做好一张HE染色切片
ＨＥ染色 是 目前 国 内外 病理 诊 断上 广 泛 采用 的 常规染 色方 法 。专家们 曾指 出 ：一 张好 的 ＨＥ切片 “ 是保证 正确 病理 诊 断的关 键”】。切 片质量 的好 坏 ， ［ ］ 可直接 影 响疾病 诊 断的及 时与 准确 性 。作 为一 个合 格 的病 理 技术人 员 ， 制 作 出 一 张高 质 量 的 ＨＥ染 能 色切 片 ， 必须 掌握 的技术 之 一 。 是 １ 病 理技 术工 作者 ， ． 首先要 热爱 本职 工作 ， 具有 敬业 精神 ， 才会 虚 心学 习 ， 真钻研 。并认 识 到 医师 认
切片 。
的诊 断与 技术 人员 制 片 的 目的是 一 致 的 ， 是 为 了 都 病人 早 日恢复健 康 。 ２ 制 片人 员要 有 科 学 的态 度 ， 格 的要 求 和 高 ． 严 度 的责任 感 与熟练 的技 术 ， 要 求严 格 遵 守 操作 规 更
程 。
３ ＨＥ制 作 的 全 过 程 包 括 组 织 固 定 、 材 、 ． 取 脱 水 、 明 、 蜡 、 埋 、 整蜡 块 、 片 、 透 浸 包 修 切 贴片 、 片 、 烤 去 蜡、 加水 、 木素 染 色 、 苏 分化 、 洗 、 蓝 、 红 染 色 、 水 返 伊 脱水、 明、 透 封片 等 十 多个 步 骤 ， 一 步都 必 须 仔 细 每 操作 ， 即每一 环节 都必 须高 度注 意 的 问题 阐述 就
易 析 出 ， 响染 色效果 ， 加 温染 液 。 影 可
３ ．病 理 切 片 的 质 量 评 估 ： 京 的 梁 晓俐 ２ ０ 北 ０４ 年 曾经 提 出过两 条标 准 ： ： 片完 整 ， ４６ｔ 厚 一 切 厚 －ｂ ｍ，
做好病理组织切片的方法
２０ ０ ７年 １ １月 第 ｌ ４卷 第 ３ ２期 （ 刊 ） Ｊ Ｍ 旬 Ｐ Ｔ，Ｎ ｖｍｂｒ ０ ７ Ｖ １１ Ｎ ．２ Ｉｓｅ ｖｒ Ｔ ｎ ｏｅ ｅ．２ ０ ， ｏ．４， ｏ３ （ｓｕｄＥ ｅｙ ｅ
・
４ ３・ ４３
做 好 病 理 组 织 切 片 的 方 法
美 观 的感 觉 。 ７ 染 色 要 鲜 艳
甲苯 、 石蜡 ， 一段时间后 ， 其浓度都要 降低 ， 而导致组织 处理不
充分。为此 ， 各种试 剂要定期 更换 ， 根据标 本量 的多 少 ， 或 随 时更换 其 中的一种或 全部 ， 保证 组织脱水 、 透明 、 浸蜡 充分 足 够 。需要指 出的是使 用二 甲苯透 明如果 时间太长或浸蜡 温度
８ ￣ 压 在 浸 蜡 不 足 的 蜡 块 上 ， 时 可 见 有 小 气 泡 溢 出 ， 复 ０Ｃ， 这 反
标本无论大小 ， 体后 均应 及时 固定 ， 离 这是切片成功 的关 键 。标 本固定的好坏直接 影 响制片质 量 的各个环 节 ， 因此 要 及时固定 ， 防止组织发 生干缩变硬或 自溶 、 腐败 。固定 时间因 组织大小而定 ， 一般不超 过 ２ 。 由于淋 巴结 的包膜 阻碍 固 ４ｈ 定 液的渗透 ， 以淋 巴结无 论大小都要切开 固定。 所
一
取 材合 格与否将直接 影响组 织 的脱 水 、 明 、 透 浸蜡 、 片 切 等一 系列环 节。大标 本正确的取材应是 多部 位上 、 、 、 、 下 左 右 中间及瘤组织 与正常组织 的交界 处均 应取 材 ， 取组 织块应 所 该大小适 中 ， 厚薄一致 ， 状规整 。根据 观察 目的 ， 形 皮肤 要有 表皮和真皮 ， 肠壁和 胃壁要有黏膜 和肌层 ， 肾脏要 有皮质和髓 质； 空腔脏 器应剪开 ， 平铺 取材 。骨组织或钙化组 织脱 钙要充 分， 只有组 织变软后 才 可取 材。脱 钙后 的组织 要放 入 ２ ％氢 氧化钠溶液 １ ｉ ０ｍ ｎ除酸处理 ， 流水冲洗 ｌ ｎ］。 并 ０ｍｉ１ Ｊ
植物细胞切片制作方法
植物细胞切片制作方法1. 嘿，想知道植物细胞切片咋做不？这就像搭积木，得一步一步来。
首先呢，你得准备好材料，就像厨师做菜得先备好食材一样。
像我有次给学生演示，材料不齐那可真是抓瞎。
需要一把锋利的刀片，这刀片就像战士的剑，得足够锋利才能切得好。
还得有载玻片和盖玻片，这俩就像小床和被子，细胞就躺在上面呢。
2. 植物材料的选择可重要啦！你不能随便揪一片叶子就了事。
这就好比挑衣服，得精心挑选合适的。
我跟我朋友做实验的时候，他随便拿了个快枯萎的叶子，结果细胞结构都不清晰。
要选新鲜、健康的植物部分，像幼嫩的叶片或者根尖就很不错。
这就像挑运动员，得挑状态好的。
3. 固定植物材料就像给它定个型。
你想啊，如果人拍照乱动，照片就糊了，植物细胞也一样。
我老师教我的时候说，可以用化学药剂来固定，就像给细胞上了个枷锁，让它保持原来的模样。
比如说用福尔马林溶液，把植物材料放进去泡一会儿，就像把调皮的小孩按在座位上。
4. 接下来是脱水，这可是个关键步骤。
就好比把湿衣服拧干，不过比那要精细多啦。
得用不同浓度的乙醇逐步脱水。
我自己做的时候，一开始没掌握好浓度，细胞就像被水淹了的房子，结构都变形了。
要从低浓度到高浓度慢慢过渡，就像爬楼梯，一步一步来。
5. 透明化这个步骤有点神奇哦。
把脱水后的材料放到透明剂里，这就像是给细胞披上了一件透明的纱衣。
我看到实验室的小伙伴没做好这一步，细胞就像蒙了一层雾，啥都看不清楚。
二甲苯就是常用的透明剂，它能让细胞变得通透，就像打开了一扇通往微观世界的窗户。
6. 浸蜡这一步就像给细胞盖房子。
把透明后的材料浸到石蜡里，石蜡就像砖头一样，把细胞围起来保护好。
我同事做的时候，蜡没浸透，就像房子盖了一半，细胞在里面可不安稳啦。
得保证石蜡完全浸透材料，这样切片的时候细胞才不会散掉。
7. 切片的时候，手可得稳啊。
这就像走钢丝，一不小心就全毁了。
我第一次切片的时候，手直发抖，切出来的片子那叫一个惨不忍睹。
把浸好蜡的材料固定在切片机上，然后像切面包一样，一片一片切下来。
做膏方的方法切片
做膏方的方法切片
切片法是制作膏方的一种常见方法，下面是详细步骤：
1. 首先，准备好需要使用的草药材料。
根据你需要制作的膏方，选择所需的草药材料，并确保它们是干燥和新鲜的。
2. 将草药材料分别切碎或切片。
你可以使用刀具或剪刀将草药材料切碎，也可以使用研磨机或搅拌机进行碾磨。
3. 将切碎的草药材料放入一个干净的容器中。
确保容器是干燥和清洁的，以防止杂质的污染。
4. 定量加入其他配方成分。
根据膏方的具体配方，精确测量并加入其他所需的配方成分，例如蜂蜜、植物油或其他液体。
5. 混合均匀。
用勺子或手指将草药材料和其他配方成分混合均匀，以确保所有成分都充分融合在一起。
6. 将混合物用刮板刮平。
在混合物表面使用刮板将其刮平，以确保膏方材料均匀分布，并帮助进一步融合和细化。
7. 将膏方材料放入容器或罐中。
将混合好的膏方材料轻轻地倒入干净的容器或
罐中，并确保封闭容器以避免空气和湿气的侵入。
8. 存储和使用。
将制作好的膏方存放在阴凉、干燥的地方，避免阳光照射和潮湿。
使用时，根据需要取出适量的膏方，涂抹于所需位置。
需要注意的是，制作膏方时应使用干燥和清洁的工具和容器，并确保所选用的草药材料没有受到污染或含有毒性物质。
另外，在制作膏方前，最好先了解每种草药材料的适应症、禁忌和用量，以便安全使用。
如果有需要，可以咨询草药师或医生的建议。
用Voxler做三维切片图
用Voxler做三维切片图
目前在地质工作中有时会涉及到三维切片图件的制作，Voxler 软
件操作简单快捷。
本人以制作不同深度电阻率的三维切片图为例，将其在这方面的简单应用分享给大家，希望得到大家的批评指正。
1、数据的准备
数据格式为四列(即X、Y、Z 和数据列)，数据之间用特定分隔
符区分，也可用固定长度区分，可参照实例(sample.dat)。
2、打开Voxler 进行数据添加运行FLE——LOAD DATA,将1 中整理好的数据导入工作区
3、将数据进行插值
运行
Create——Computational——Gridder，在Network 工作
区添加Gridder 模型，并与刚刚导入的数据连接。
在Gridder 模型的属性窗口中选择合适的差之方法，调整
相应的参数后运行Begin Gridding。
此时网格化的数据已存储与Gridder 模型中。
4、三维切片成图
(1)在Network 工作区中添加三个Ortholmage 模型，并与
Gridder 模型相连，分别将Orientation 属性设置为XYPlane、
XZPlane、YZPlane。
(2)在ColorMap属性中设置适合的颜色等级。
添加BoundingBox 模型并与Gridder 模型相连。
通过调整切片属性(Slice Nunber),
即可显示不同位置的切片等值线图。
(3)根据个人需要进行简单调整修饰后进行保存和输出。
浅谈如何做好病理切片
实 验 与 检 验 医 学
ＣＩ ＥＸＰＥＲＩ ＥＮＴＡＬ Ｍ ＡＮＤ ＬＡＢ０ＲＡＴ０ＲＹ ＭＥＤＩ ＮＥ
Ｖｏ ＿８ ＮＯ２ ｌ２ ． Ａｐ ． ０１ ｒ ２ ０
・
经验交流 ・
浅 谈 如何 做 好病 理 切 片
连 丽琴
力 挤 压 。 则 易 使组 织 受 压 变 形 、 构破 坏 否 结 ３ 脱 水 我 院使 用 Ｌ ｉａ Ｐ ０ ０组 织 脱 水 机 取 材 后 的 组 ａ Ｔ １２ ｃ 织 在 处 理 过 程 中 的各 种 试 剂 均 可 挥 发 ．导致 试 剂 浓 度 降 低 ： 当 试 剂 中混 杂 有 其 他 试 剂 或 组 织 碎 屑 时 ．可 影 响 组 织 的脱 水 、 明 、 蜡 或造 成 组 织 的 污染 ． 至 产 生 误诊 脱 蜡 不净 透 浸 甚 或 试 剂 过 于 陈 旧时 ， 往 会 造 成 切 片 破 碎 或 太 厚 、 色 不 良 往 染
及 油 污 ． 滴 上润 滑 油保 养 待 用 。切 片 刀一 定 要保 持 锋 利 ， 并 达 到 刀 锋无 缺 Ｅ 、 刃 ． ｌ卷 目镜 下呈 细 锯齿 纹 状 ， 片 刀 和蜡 块 之 切
间 的 夹 角在 １ 适 当 漂 片 时 不 能 有气 泡或 皱 褶 ． 充 分 ０度 要
溶 ， 持 组 织 细胞 原 形 及 结构 。因此 ． 术 切 除 的组 织 标 本 一 保 手
求 在 ２ｚ 以 内 ． 能 出 现 切 片 过厚 和裂 隙等 ． １ ， ｍ 不 内窥 镜 取 检标
本 需 切 出 ４个 切 面 以 上 。避 免 切 片 出 现 平行 波纹 、 褶 破碎 皱 空洞 、 薄不 均 、 片 卷 曲 等现 象 。应 对切 片 机 做全 面仔 细 的 厚 蜡 检查 ． 刀 的螺 丝 不 能 松 动 ， 摇 手 轮 的 转速 要 均 匀 ， 可太 夹 手 不 猛太快 ． 以免 跳 刀 和机 身 不 稳 ． 片 机 应 耐 心 擦 除 蜡 的 碎 屑 切
类器官病理切片方法
类器官病理切片方法
类器官病理切片的制作主要包括以下步骤：
1. 取材和固定：病理组织取材愈新鲜愈好，以保证原有的形态学结构。
根据制片材料和目的不同，制作病理外检、科研切片其组织块可以薄取制作教学切片厚取。
固定分为小块组织固定法、注射灌注固定法、蒸汽固定法。
2. 脱水透明：经过固定和冲洗后，组织中含有较多水分，可用石蜡切片、火棉胶切片，必须将组织块内的水分置换出来。
3. 浸蜡、包埋：在切片放蜡块时，应注意组织包埋的方向，组织的层次，纤维、肌肉等的走向应与切片刀平行，较难切的部分应放在上面，如皮肤的表皮，肿块的包膜，胃肠道的浆膜等，这样可以减少组织的断裂现象。
4. 切片、贴片：通常采用微米级的切片机将组织切成极薄的片。
5. 染色：常用的染色方法是苏木素-伊红染色法，这种对任何固定液固定的组织和应用包埋法的切片均可使用。
6. 封片：将染色后的切片用封固剂封固，以保持切片的完整性。
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常规组织病理技术切片技术是病理检验技术的重要组成部分。
在实验室内的病理检查工作中，不仅要观察大体标本的病理变化，更重要的还要观察组织标本的病理变化，才能作出最后诊断。
大体标本的病理变化是用肉眼观察，而组织标本必须借助显微镜进行观察。
组织标本的质量将直接影响镜检观察，也就是影响到诊断和研究。
学习和从事切片技术工作，首先应当认识这一工作的重要性，提高责任感。
切片技术随着生物学和医学的发展而发展，随着光学仪器和切片机的日益精密而不断改进。
下面仅就目前兽医实验室最常用的石蜡切片的制作技术做一系统的介绍。
（一）石蜡切片制作方法和程序任何组织制成一张菲薄的切片标本需要经过一系列的处理过程，而每一过程的步骤和手续严密而复杂。
现将制作石蜡切片的主要程序介绍如下。
制作石蜡切片的主要程序：取材；固定；脱水；透明；浸蜡；包埋；切片；染色；封固。
1.取材病理组织大多数采自动物尸体剖检材料或活体检查组织，取材的种类、数量取决于诊断和研究的目的，病理组织要越新鲜越好，因此标本取材后要及时切成小块，进行固定。
取材时必须注意：⑴接受病理组织材料时，必须依据送检单详细检查送检物。
自己采的病料也要求及时填写送检单。
检查时注意标本名称、数量与送检单是否相符，并查明送检单位地址以及有无临床及化验等有关资料。
如果发现送检标本不符，标本固定不当以及标本发生腐败等而不能制作切片时，应立即退回；若检查无误，应将标本及时登记、编号。
⑵组织切块需用锐刀或剪，切忌对组织材料挤压，揉搓及扭折等损伤，以保持组织完整及生活时状态。
⑶切块要选择病变显著部位及可疑病灶。
切取组织块要包括病灶及其周围健康部分，重要病变可多取几块，以反映病变各阶段、各部分的形态变化。
采取组织应包括各该器官的各组成部分，如肾脏应包括被膜、肾皮质部、肾髓质部、肾乳头及肾盂。
⑷组织块不宜过大，通常长1厘米，宽为1.5厘米，厚度为0.3厘米，最宽可达1.5~3厘米，但厚度不超过0.5厘米为宜。
尸检采取标本时，可先取较大组织块，固定数小时后再切小，切薄。
为防止易变形的组织（如胃、肠等腔形器官）在固定时发生弯曲扭转，可在切取组织后将病变面向上平贴在硬纸上然后缓慢浸入固定液中。
⑸固定标本时要同时进行标记，以免彼此混淆。
若同时固定于一个标本瓶中，分别标记或是将组织块切成不同的形状，用铅笔或墨笔标明在小纸片上，后用线系在组织块上一起固定。
2.固定和固定液⑴固定，是将采取的组织浸于固定液中，使组织、细胞保持其固有的形态和结构。
新鲜组织从动物体取下后立即投入固定液中借助化学药品的作用使组织细胞的形态结构保持完好。
因为动物死后血液循环停止，细胞逐渐死亡，如不立即处理，则细胞内的酶（水解酶）会使蛋白质分解，以至细胞溶解破坏，组织变形，发生组织自溶现象。
更可由于微生物的繁殖而组织发生腐败，结构破坏失去了制片的意义。
固定的作用和目的：①可以防止组织溶解和腐败。
②使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分保存下来，保持结构与生活时相似。
③因沉淀及凝固的关系使细胞内成分产生不同的折射率，造成光学上的差异，使得在生活情况时原来看不清楚的结构变得清晰，并使细胞各部分容易着色。
④固定剂兼有硬化作用，使组织硬化，硬度增加，不易变形，有利于固定以后的处理。
⑵固定液：固定液的种类较多，一般都具有能固定组织原有的物质，有足够的渗透性，对组织收缩不大、硬化程度适当，不影响染色等特点。
常用的有以下几种：①福尔马林（Formalin）又称甲醛。
福尔马林是由甲醛气体（Formaldehyde，HCHO）饱和于水而制成。
一般市售甲醛溶液含甲醛37%~40%。
福尔马林是较好的固定剂，也可与其他药品配成混合固定液。
组织固定液常用10%福尔马林。
其配制方法：取37%~40%甲醛溶液10毫升与蒸馏水（或自来水、河水、井水）90毫升混合而成，实际甲醛含量为4%。
10%的福尔马林是一般最常用的固定液，它的渗透力强，能使组织硬化，且固定后的组织收缩极少，能保持脂肪和类脂质，固定均匀。
一般组织块在10%福尔马林液内固定24小时即可。
福尔马林固定的组织因含有微量甲醛，所以固定后的标本必须经流水冲洗。
对于短时间固定的标本，冲洗时间可缩短至10 分钟~2小时，对于较长时间固定的标本则需冲洗24小时，甚至增加到48小时，否则由于未除净组织中残留的甲醛而影响染色结果。
也可将它制成中性或微碱性溶液，其配方有：A.福尔马林钙液（Lillie氏液）：甲醛10毫升，醋酸钙2克，蒸馏水加至100毫升。
B.福尔马林钙液（Baker氏液）：甲醛10 毫升，氯化钙2克，蒸馏水加至100 毫升。
C.缓冲福尔马林液：甲醛10 毫升，酸性磷酸钠（磷酸二氢钠）0.4克，磷酸氢二钠0.65克，蒸馏水加至100 毫升。
用中性或微碱性福尔马林固定的效果，能显著增加对铁离子的检出速度，且可完全避免福尔马林色素的形成。
②乙醇（Ethylalcohol）。
乙醇即酒精，为无色液体，沸点约78℃，能与水在任何比例下相互混合。
市售的分为95%乙醇和无水乙醇（100%）两种。
高浓度时有较大的收缩力，因此组织必须用乙醇固定时，宜先用低浓度乙醇（70%~80%）固定数小时，然后再换为95%乙醇，这样可以避免组织过度收缩。
制作切片通常须用各种浓度乙醇。
可依以下计算方法进行计算和配制。
举例如下：（拟配体积）100 毫升×80%（拟配成浓度）÷95%（原有浓度）=100×80／95=84.2 毫升(即为须用95%乙醇体积)15.8 毫升为加水稀释的数量100 毫升是配成80%酒精的总体积。
③苦味酸（Picric acid）。
苦味酸为黄色结晶，干燥则易燃烧，可发生爆炸，通常贮藏时应加水制成饱和溶液。
固定组织可沉淀蛋白质成为苦味酸与蛋白质的化合物。
苦味酸的穿透速度慢，使组织收缩显著，一般不单独使用。
苦味酸固定时间不宜过久，否则会影响苏木素等碱性染料的染色。
组织经苦味酸固定后着黄色，但黄色在平常脱水时可脱去，即使遗留少许在组织中，对制片并无影响。
常用苦味酸配制Bouin氏液。
Bouin氏液渗透力强，对组织固定均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
特别适用于睾丸活检组织的固定。
小块组织只需固定数小时，较大脏器固定12~24小时为宜。
组织固定后用70%乙醇洗数次，约需12~24小时，然后再移入高浓度乙醇中脱水。
配制方法：苦味酸饱和水溶液（1.22%）75毫升，40%甲醛，25毫升，冰醋酸5毫升。
此液在临用时配制，按上方依次加入即可。
⑶注意事项。
①固定液的用量。
固定组织时应有足够的固定液，一般为组织块体积的10~15倍。
容器不可太小，材料不要太多，避免组织中水分在固定液时渗出而影响固定液的浓度。
不要使组织贴于瓶壁。
可在瓶底垫上棉花，以使固定液均匀的渗入。
②固定的时间，视材料的性质、种类、大小，固定液的种类、性质、渗透力强弱而定。
可从1~2小时到几十小时或更长一些，小的材料仅需几十分钟。
某些组织液对组织的硬化作用较强（乙醇），固定时间不宜过长。
但有些固定液（如Bouin氏液）固定时间较长时无大妨碍，一般固定24小时即可。
③固定时间的长短与温度有密切关系。
一般在室温中进行，增加温度虽可缩短固定时间，但对组织变化较大，尤其是组织化学染色更不相宜，除应用于快速诊断材料及冰冻切片外，一般多不采用。
④固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化，失去固定作用。
3.脱水脱水就是把组织内水分彻底除掉，也称无水法。
无论任何组织都含有不同程度的水分，组织经固定和冲洗后也含有多量水分。
而水是不能于石蜡混合的，必须经脱水后才不妨碍包埋材料的渗入，所以在浸蜡包埋前，必须脱净组织内所含的水分。
⑴脱水剂。
脱水剂必须选择与水在任何比例下都能混合的，以使组织内含的水分逐次脱去，这是组织脱水首先要注意的。
一般常用的脱水剂有：①乙醇（Ethylalcohol）。
乙醇与水可混合，又能硬化组织，穿透速度很快。
但对组织有强烈收缩和脆化的缺点，因而不能将组织从水中直接移入高浓度乙醇中脱水，应将组织经过由低到高，各级浓度不同的乙醇，逐渐脱掉组织中的水分。
②丙酮（Acerone）。
丙酮应用于组织脱水，其优点是脱水力强；缺点是对组织有剧烈收缩，不是一般制片所常用的，常在组织需要急速脱水时使用丙酮，脱水不易超过1小时。
③正丁醇（N—Butlyalcohol）。
正丁醇为易挥发的黄色液体，脱水能力强，但组织收缩少，能与水及乙醇混合，能溶解石蜡，可不经透明剂直接浸蜡，但由于正丁醇的价格较贵，故不常用。
⑵组织脱水一般过程和时间可参照表5进行。
表5 组织脱水时间表步骤溶剂温度时间1 70%乙醇室温或4℃2小时或过夜2 80%乙醇室温或4℃2小时3 90%乙醇室温或4℃2小时4 95%乙醇（A）室温或4℃0.75小时5 95%乙醇（B）室温或4℃0.75小时6 无水乙醇（A）室温或4℃1小时7 无水乙醇（B）室温或4℃1小时脱水时间应根据组织的种类和体积大小而定，脂肪组织或疏松结缔组织要加长脱水时间，特别是大块组织必须延长脱水时间。
4.透明透明的目的是帮助石蜡渗透组织内起到增加组织硬度的支持作用。
所以透明是石蜡包埋重要的一环，要求透明剂即可溶于乙醇，又能溶解于石蜡。
⑴一般常用的透明剂。
①二甲苯（Xylene）。
沸点144℃，是目前应用最广的一种透明剂，透明力强，作用较快，易溶于乙醇，又能溶解石蜡，还能与封固剂（树胶）混合，不溶于水。
最大的缺点是容易使组织收缩变硬变脆，所以透明时间不宜过长，同时组织必须完全脱水后才能应用。
②甲苯（Tolul）。
沸点110.8℃，性质同二甲苯，价格亦较便宜，可做二甲苯的代用品。
但透明速度较慢，组织在其内留置12~24小时亦不变脆，故优于二甲苯。
③苯（Benzene）。
沸点80℃，性质近似二甲苯，对组织收缩较少，久浸也不像二甲苯对组织产生的硬脆现象。
缺点是挥发较快。
④氯仿（Chlorofom）。
组织较长时间浸存时，不使组织剧烈收缩，亦不会变脆，又因为它很易挥发，在浸蜡时病料中的氯仿在高温中比二甲苯容易挥发。
缺点是渗透力稍弱，比二甲苯、苯还慢，固透明时间应延长2~3倍。
适宜透明大块组织。
⑤香柏油（Cedarwood oil）。
香柏油有高度透明作用，对组织的收缩及硬化比任何透明剂都小。
缺点是透明慢，小块组织一般需12小时以上。
不易被石蜡所代替，不能与树胶相混合，经香柏油透明后需再浸二甲苯。
⑵透明过程和时间可参照表6。
为避免组织从无水乙醇中取出直接浸入二甲苯，可先放入与二甲苯（1:1）的混合液中。
表6 组织透明时间表步骤溶剂温度时间1 无水乙醇—二甲苯（1:1）室温或4℃1小时2 二甲苯（A）室温或4℃20~40分钟3 二甲苯（B）室温或4℃视组织块大小而定透明时间长短也依组织的种类和大小的不同而有变动，以组织完全透明为准。