NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用 - 中国疾病预防控制中心 ...
泌尿生殖道病原体核酸RNA检测简介
RNA方法检测较传统培养，DNA佥测方法，在保证灵敏度高，不易漏检 的同时，可有效区分死菌或活菌（可进行疗效评估和辅助判愈）。（方
检测方法
培养法
SB菌壇养
分泌物
较曩杂，检 测过程长
准确率低「易 漏检及误检
用于NG/UU/CT/M G检测
形态学法
涂片镜检
分泌物
疾病之一；可引发男性淋菌性尿道炎、女性淋菌性尿道炎和宫颈炎
2非淋菌性尿道炎（NGU）则与支原体、衣原体相关。
三、筛查推荐
美国疾控中心（US CDC）、美国预防服务工作组（USPSTF）、英国国家 临床最优化研究所（NICE）指南均推荐所有育龄人群中进行CT或NG检
查；
中国2014版《梅毒、淋病、生殖器疱疹、生殖道沙眼衣原体感染诊
全手工操件
杂
准确率较高「 但有漏检
用于NG检测
免疫法
免疫法
胶体金/ 爾联阴性问题突出
用于CT检测
分子生
DNA捡测
PCR
分泌物
操作较复杂f■育一定 经验才能做 好检测
准确率相对较V，但存在污 染和死亡病原 体导致的假阳 性问题
用于CT/NG/UU检 测
物学法
RNA检测
泌尿生殖道病原体核酸 （RNA） 检测简介
一、项目简介：
为满足临床诊断需求，检验科于2016年4月5日起正式开展泌尿生殖道病
原体核酸（RNA检测项目。临床可根据需求选择单一病原体或者四种病 原体联合检测。
项目名称：沙眼衣原体（CT核酸（RNA检测
淋病奈瑟菌（NG核酸（RNA检测
解脲脲原体（UU核酸（RNA检测
（马硝惟）
生殖支原体（MG核酸（RNA检测
嗜麦芽窄食单胞菌36株临床分布及耐药性监测
物 ，但 Ｐ Ｎ Ｐ Ｇ和 Ｔ Ｎ Ｒ Ｇ流行率仍是其耐药流行病学监测的重 要指标之一 。本数据 表明 ， 淋球菌对环丙 沙星耐药率 １０ ０ ％。
与其他地 区环丙沙星耐药率相似【 喹诺酮类药物是一类广谱 ｌ 】 。 抗生素 ， 在性病 门诊该药物常用于对衣原体 、 支原体感染的治 疗， 其价格相对 低廉 ， 性病 患者存在 自行购买 药物 ， 不规 范用 药 ，可能是导致本地 区淋球菌对环丙 沙星的高 耐药率发生原
的流行病学研究． 中华皮肤 科杂 志，２ １ ， ４ ７ ： ７ －７ ． ０ １ ４ （ ） ４ ３４ ５
果： 环丙沙 星对 １ ８株淋球菌 的耐药 率为 １０ 头孢 曲松对 ０ ０ ％，
１８ ０ 株淋球菌的敏感率为 ４％，中敏率 为 ５％。大观霉 素对 ４ ６
Ｐ Ｎ Ｔ ＮＧ和环 丙沙星耐药 菌株全部敏感 。 Ｐ Ｇ、Ｒ
等高水平耐药 ， 耐药性率为 １０ 见第 ９４页表 １ ０ ％， １ 。
３ 讨 论
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表１ １ ７种抗 生素 对 ３ ６株嗜麦芽窄食
ｆ１ 王辉 ，陈民钧 ， ５ 倪语 星，等． ０ ３ ２ ０ ２０ － ０ ４年 中国十家教学 医院
主， 对抗生素呈多重耐药。 在不同国家和地 区由于用药习惯不 同， 耐药性存在差异 ， 故早期诊断 、 合理恰 当的使用抗生素 是 治疗 Ｓ ＭＡ感染的关键 。一旦确诊感染 ， 应及 时选 用敏感抗 生 素早期 、 足量 、 联合用药 ， 迅速控 制感染 ， 彻底 治愈 。同时医院 应加强综合管理 ， 对分离菌株早期监测 ， 做好细菌 的耐药性分
淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备_王春娥
基金项目:国家科技基础条件平台国家微生物资源平台奖补经费资助项目(NIM Ｒ2015-2作者简介:王春娥(1980－,女,助理研究员,主要从事医学微生物菌种资源的收集、保藏及相关科研。
通讯作者:叶强,主任技师,E-mail:qiangyee@nifdc．org．cn ·论著·淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备王春娥,卢旭,刘茹凤,石继春,李红,陈琼,唐静,陈翠萍,叶强中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京100050摘要:目的制备淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG核酸检测试剂盒国家参考品。
方法分别将10株NG和10株非NG参考菌株在各自适宜的培养基和温度下培养,收获新鲜无污染培养物,用比浊法和显微计数法将不同的培养物制备成10份NG菌悬液阳性参考品、5份精密性参考品和10份非NG菌悬液阴性参考品以及最低检出限参考品,然后利用5种不同来源的NG核酸检测试剂盒验证各种参考品,并考察参考品在不同处理条件下的稳定性。
结果每株菌在各自适宜的培养基和温度下培养后,均生长良好,无杂菌污染。
经5种试剂盒验证检测,10份阳性参考品的检测结果均为阳性,10份阴性参考品的检测结果均为阴性,精密性参考品检测结果为Ct值的CV均小于5．0%;5种试剂盒的最低检出限均能达到1000/mL,其中试剂盒B和E的最低检出限达100/mL。
参考品在28ħ放置7d、37ħ放置3d的热稳定性及反复冻融5次以内的稳定性良好。
结论制备的NG核酸检测试剂盒国家参考品的准确性、特异性及精密性均符合要求,可用于NG核酸检测试剂盒的质量评价。
关键词:淋病奈瑟菌;核酸;试剂盒;参考品中图分类号:Ｒ392-33文献标志码:A文章编号:1005-5673(201605-0021-05DOI:10．13309/j．cnki．pmi．2016．05．004Preparation of national reference for detection kit ofneisseria gonorrhoeae nucleic acidWANG Chun-e,LU Xu,LiuＲu-feng,SHI Ji-chun,LI Hong,CHEN Qiong,Tang Jing,CHEN Cui-ping,YE Qiang National Institutes for Food and Drug Control,Key Laboratory of Method and Standardization for Quality Control ofBiotechnical Products,Ministry of Public Health,Beijing100050,ChinaCorresponding author:YE Qiang,E-mail:qiangyee@nifdc．org．cnAbstract:Objective To prepare the national reference for the detection kit of neisseria gonorrhoeae nucleic acid．Metho-d s Allof10strains of neisseria gonorrhoeae and10strains of non-neisseria gonorrhoeae were cultured in a suitable mediaand temperature,then fresh and uncontaminated cultures were collected．The preparation of references was carried out in bacterial susponsion of both10positivereference of neisseria gonorrhoeae and10negtive reference of non-neisseria gonor-rhoeae,bacterial susponsion of5precision reference,and a bacterial susponsion of minimal detection limit reference by tur-bidimetry and microscopic counting．The references were verified by five PCＲdetection kits for neisseria gonorrhoeae from different companies,and evaluated by stability test under various conditions．Ｒesults Each from all strains grew well inits own suitable media and temperature,and the cultures were not contaminated．The detections showed correct results for10positive and10negative references,respectively,and the CV were all less than5．0%for tested results of precision by verification of the five PCＲdetection kits．A bacterial concentration of1000/mL was determined by the five kits,and a concentration of100/mL determined by the kit No．B and E．The stability tests showed good results on the references after stored at2－8ħfor7days,or37ħfor3days,or5cycles of freezing-thawing,respectively．Conclusion The accuracy, specificity,reproducibility can met the relevant requirements for the prepared national references,which could be used in evaluation of quality control of PCＲdetection kit for neisseria gonorrhoeae nucleic acid．Key words:Neisseria gonorrhoeae;Nucleic acid;Kit;Ｒeference淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG属革兰阴性球菌,为严格的人体寄生菌。
全国艾滋病检测技术规范(2019年修订版)
4.2.2.3 根据需要，连续在数个印圈上滴加样品。
4.2.2.4于室温下自然干燥至少4小时（潮湿气候下至少干燥24小时），不要加热或堆叠血斑，勿与其它界面接触。
4.3.4 尿液样品，使用专用采尿管，室温下可保存2周，一年之内存放宜在2～8℃。长期保存（一年以上）的样本冻存条件、是否添加防腐剂等以产品说明书为准。
4.3.5 用于CD4+T淋巴细胞检测的全血样品，室温保存，时间不超过24小时。如果用CD45设门，样品保存不超过72小时。
4.3.6筛查阳性样品应及时进行补充试验，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存1个月。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。补充试验阳性样品按照国家生物样品管理的有关规定执行。
4.1.1 样品的编码和记录
4.1.2 应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编号），保证其唯一性。
4.1.3 采血前，先对试管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，推荐使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。干血斑滤纸应使用具有资质的产品。
4.2.2.5 血斑充分干燥后，将其放入密封袋中，每张干血斑单独保存，避免血斑之间的相互污染，同时放入干燥剂及湿度指示卡，密封包装，保存备用。
4.2.3尿液和口腔黏膜渗出液
4.2.3.1尿液：推荐使用专用采尿管，保持尿液稳定。尿液样品可采集随机尿，女性经期应取中段尿。
4.2.3.2口腔黏膜渗出液：使用试剂盒提供的容器收集样品。存放时间和是否冻存以试剂盒说明书为准。口腔黏膜渗出液应采集口腔渗出液,不是唾液。
淋球菌耐药检测方法金标准_概述说明以及解释
淋球菌耐药检测方法金标准概述说明以及解释1. 引言1.1 概述淋球菌（Neisseria gonorrhoeae）是一种常见的性传播疾病病原体，全球范围内都存在广泛传播。
然而，近年来淋球菌感染的耐药问题日益严重，已成为公共卫生领域面临的严重挑战之一。
因此，有效、准确地检测淋球菌耐药性以及对其治疗方案进行个体化调整变得极为重要。
本文将就淋球菌耐药检测方法金标准进行概述，并详细说明及解释该金标准的应用和意义。
1.2 文章结构本文分为五个部分：引言、淋球菌耐药检测方法金标准概述、淋球菌耐药检测方法金标准说明、淋球菌耐药检测方法金标准解释以及结论。
以下将依次介绍每个部分内容。
1.3 目的本文旨在对淋球菌耐药检测方法的金标准进行概述、说明和解释，进一步加深对该领域的理解与认识。
同时，通过全面了解淋球菌耐药问题背景、现有检测方法以及金标准的应用，促进淋球菌耐药性的科学研究和临床实践，为未来的研究和应用提供借鉴和指导。
2. 淋球菌耐药检测方法金标准概述2.1 淋球菌耐药问题背景淋球菌是一种通过性接触传播且引起生殖系统感染的细菌，被认为是全球最常见的细菌性性病之一。
然而，在过去的几十年里，对于淋球菌抗药性的报告和研究逐渐增加，表明淋球菌感染出现抗药性严重的趋势，给治疗带来了巨大挑战。
2.2 现有淋球菌耐药检测方法目前常用的淋球菌耐药检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和基于PCR 技术的检测方法等。
然而，这些方法在可靠性、效率和灵敏度方面存在着局限，并且不能提供具体的耐药信息。
因此，寻找一个可靠、快速并且有效评估淋球菌耐药性的金标准成为了迫切需求。
2.3 金标准的重要性和定义金标准是指在特定领域或问题中被普遍接受并视为最可靠和准确的参考标准或方法。
在淋球菌耐药检测中，金标准应该能够准确、可靠地确定淋球菌是否对特定药物具有耐药性，并提供详细的耐药信息。
金标准的制定将有助于统一淋球菌耐药检测方法，促进不同实验室和研究机构之间的结果比较和交流。
14760238_畜禽支原体耐药性及耐药机制研究进展
造均具有重要的意义'作者就畜禽支原体的耐药现 尼考和环丙沙星呈 现 相 对 耐 药!对 替 米 考 星 相 对 敏
状以及 支 原 体 对 不 同 抗 菌 药 的 耐 药 机 制 进 行 了 综述'
感'贺晨飞等 对 *0%+ 临床分离 的 *) 株 牛 支 原 体 进 行 了耐 药 性 测 定!结 果 显 示!3)C 菌 株 对 达 氟 沙 星 敏
四环 素(大 环 内 酯 类 及 喹 诺 酮 类 药 物 是 目 前 临 床治疗畜禽支原体感染首选的*类抗菌药'药物的
药!仅 部 分 菌 株 对 喹 诺 酮 类 药 物 敏 感'4B97$86! A#9,YB6"#-等 对 *%(+ 临床 分 离 株 进 行 了 体 外 抑 菌 试 验!结果显 示!所 有 受 试 菌 株 对 大 环 内 酯 类 药 物 敏
中 国 农 业 科 学 院 兰 州 兽 医 研 究 所 家 畜 疫 病 病 原 生 物 学 国 家 重 点 实 验 室 农业部兽医公共卫生重点开放实验室草食动物细菌病创新团队兰州 /*&&)(
摘!要支原体感染给畜禽养殖造成的危害已受到国内外科 研 人 员 的 广 泛 重 视 目 前 控 制 畜 禽 支 原 体 感 染降 低 畜禽养殖经济损失的切实有效方法是大量使用抗生 素其 中 四 环 素大 环 内 酯 类 及 喹 诺 酮 类 药 物 是 现 阶 段 临 床 兽 医首选的*类抗菌药但短短几十年的临床实践表 明滥 用 抗 生 素 已 经 严 重 威 胁 畜 禽 健 康许 多 畜 禽 支 原 体 临 床 分离株不仅仅对单一抗生素产生耐药性而且同时对多种抗生素耐药作者从 药 物 靶 位 点 改 变外 排 泵 系 统 形 成 抗菌药物灭活酶产生等方面对上述抗畜禽支原体药 物 的 耐 药 机 制 进 行 阐 述以 期 为 建 立 支 原 体 耐 药 性 检 测 体 系 指 导 临 床 合 理 用 药 开 发 新 的 药 物 等 提 供 理 论 依 据 和 策 略 关 键 词 畜 禽 支 原 体 耐 药 性 耐 药 机 制 中图分类号=120n(0!!!!文献标识码D !!!!文章编号%(/%!/0*(0&%/&1!0)13!&/
CHINET中国细菌耐药性监测(2015)
材料
细菌 2015.1.1日~12.31日临床分离株 剔除同一患者分离的重复菌株（血液和脑脊液除外） 剔除非无菌体液分离的凝固酶阴性葡萄球菌和草绿色 链球菌 按统一方案进行抗菌药物敏感试验 培养基 药敏试验用MH琼脂，为oxoid公司商品。 抗菌药物纸片 抗菌药物纸片为BBL公司或Oxoid公司商品。
同济医院
广州一附院 北京医院 上海儿科医院 上海儿童医院 浙江邵逸夫医院 甘肃省人民医院 总计
963/1277
38/97 127/180 141/568 209/484 112/323 126/309
75.4
39.2 70.6 24.8 43.2 34.7 40.8
中国医大一附院
天津医大总院 四川大学华西医院 内蒙古医大一附院 宁波龙赛医院 浦东人民医院 湖北秭归人民医院
136/401
137/585 138/467 62/216 45/89 46/157 45/200 3477/8233
33.9
23.4 29.6 28.7 50.6 29.3 22.5 42.2
2015年CHINET监测网各医院凝固酶(-)葡萄球菌MR菌株检出率
凝固酶阴性葡萄球菌 医院 华山医院 瑞金医院 协和医院 凝固酶阴性葡萄球菌 医院 新疆医大一附院 安徽医大一附院 昆明医大一附院
浙江邵逸夫医院
甘肃省人民医院 合计
3343
1960
1248
582
浦东人民医院
湖北秭归县人民医院
1093
1194 62297 （70.2%）
389
299 26481 （29.8%）
CHINET中国细菌耐药性监测网历年来监测的菌株数 （革兰阴性菌和阳性菌）
结核病管理信息系统国家子系统操作手册
结核病管理信息系统国家子系统操作手册中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心修改记录目录1。
前言 (4)2。
用户计算机硬件和软件要求 (4)3。
用户计算机软件要求 (5)4.登陆方法 (5)5。
功能操作 (5)5。
1报卡管理 (5)5.1.1报告卡查询 (5)5.1。
2报告卡添加 (6)5。
1。
3报告卡订正或修改 (6)5.1.4报告卡删除 (7)5.1.5报告卡恢复 (7)5。
1.6报告卡审核 (8)5。
1.7报告卡追踪信息填写 (8)5.1.8报告卡收治 (8)5.1.9报告卡放弃收治 (9)5。
1。
10................................................................................................. 显示追踪登记本95.1.11报告卡查重 (9)5。
1.12排除卡浏览 (10)5.2病案管理 (10)5.2.1患者病案登记 (10)5。
2.2患者病案管理 (12)5.2.3患者病案修改 (13)5.2.4患者病案删除 (14)5。
2。
5患者重新登记 (14)5.2.6疑似耐多药患者管理 (14)5.2。
7患者转出 (15)5。
2.8患者转出管理 (15)5.2。
9患者转入管理 (15)5。
2。
10............................................................................................................. 结案审核165.2.11取消审核 (16)5.3项目管理 (16)5.3。
1项目维护 (16)5。
3。
2项目启动情况统计表 (17)5。
4季度录入报表 (17)5.4。
1药品用量季度录入表 (18)5。
4。
2痰涂片盲法复检结果 (18)5。
4。
3初诊患者检查情况 (19)5。
4。
4结核病实验室工作情况 (19)5。
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WT
2007 2416 0.25 XVII V
S
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2007 7085 0.25 new 6 T
S
WT
2007
2007 8772 0.25 new 6 T
Unemo M, Nicholas RA. Emergence of multidrug-resistant, extensively drug-resistant and untreatable gonorrhea. Future Microbiol 2012; 7: 1401-1422.
头孢低敏耐药菌株（MIC≥0.25µg/ml）的特征
MLST1901 NG-MAST ST1407
URGENT!!!
应对策略
中国的应对策略
1.深入了解耐药机制 2.加强淋球菌耐药监测： （1）加强已有淋球菌耐药监测网络 （2）分子流行病学方法应用于淋球菌耐药监测 （3）淋球菌临床治疗失败病例的筛查
耐药机制的初步研究
淋球菌耐药的可能机制
6. Allen VG et al. JAMA 2013; 309: 163-170.
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头孢曲松治疗淋菌性咽炎失败病例：Japan,8,9 Australia,10-12 Sweden,13 and Slovenia14
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表1. MIC≥0.25 µg/ml 菌株相关基因特征
Isolatio n year
NGMAST
ST
MIC of
penA alteration
ceftriaxon e
(mg/L)
penA allele
A501 alteratio
n
G542 alteratio
n
P551 alteration
2007 1612 0.25 new 6 T
淋病的治疗药物
Penicillins Tetracyclines Quinolones (Ciprofloxacin) Macrolides (Azithromycin) Spectinomycin Cephalosporins (Ceftriaxone,cefixime)
头孢菌素敏感性下降和临床治疗失败病例的出现
淋球菌耐药机制的初步研究以及多抗原测序 分型（NG-MAST）在耐药监测工作中的应用
------中国CDC性病控制中心 参比实验室 陈绍椿
概要
研究背景 耐药机制的初步研究 NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用
研究
淋病—全球性公共卫生问题
高发病率，且在不断增长 诊断、报病的不足导致发病率的低估 严重危害健康：不孕不育，异位妊娠，增加HIV感染几率
S
WT
2007 1691 0.25
V WT
S
WT
2007 1790 0.25 new 1 V
S
WT
2007 1790 0.25 new 6 T
S
WT
2007 1868 0.25 new 6 T
S
WT
2007 1943 0.25
V WT
S
WT
2007 2279 0.25 new 6 T
S
WT
2007 2288 0.50 XVII V
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治疗失败案例汇总
口服类Cefixime治疗失败病例： Japan,1 Norway,2 United Kingdom,3 Austria,4 France,5 Canada,6 and South Africa.7
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1860.
超级淋球菌的出现
第一株高度耐头孢曲松的“超级淋球菌”—H041： XDR, MLST7363, NG-MAST ST4220 咽部感染，1g头孢曲松治疗失败,MIC 1-2 mg/L 在法国和西班牙也发现了对头孢菌素高度耐药的淋球菌