液相色谱操作步骤

桌面密码：jf

流动相都要经过0.22um的滤膜过滤并超声脱气处理。B瓶装有机相，D瓶装水相装上流动相，从上到下顺序依次打开开关，最底下的检测器不能打开。

打开电脑主机，点击软件online。

打开排气阀，点击PUMP图标，点击Set PUMP选项，流速从1，2到3，单击OK。

单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。

单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵，关闭Purge valve。

单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。

12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。

第一步：设置参,

Set up pump,流速：0.8ml/min，流动相的比例。在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键, ,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。保留时间为30-45min。点击屏幕上的on，点击瓶子图标-solvent bottle-filling-A和C是空瓶子，参数都是0.3和1；B和D第一列按瓶子中实际量填写，后一列总容量都是1.→点击OK。

波长：Instrument→set up→DAD signals→选项C:210 8 360 100

第二步：排气泡

松开液相色谱仪上的黑色阀门，先排水相的气泡，D设置为100%，B设置为0%，流速从1,2,3ml/min依次增加（切换速率要快），注意流动相管子中的气泡，驱逐气泡。待气泡排出之后，将D切换到B，流速不变，排除气泡。流速设置为降到0，然后关闭黑色阀门，B改为95，D改为5，流速从0，0.2,0.4,0.6增加0.8，压强上下浮动2bar时，改变流速。

第三步：，走空白再进样

RUN SCAN→SAMPLE INFO→填好后（日期，数据所在文件夹，样品名。）—RUN METHPD抬起阀门，进样，关闭阀门。

第四步：冲柱子

优先选择90%乙腈和10%的超纯水冲柱子，没有水的话可选择100%乙腈冲柱子，最好不要用纯乙腈冲柱子。

纯乙腈：B改为100，D改为0,V不变，不用动其它，冲15-20min。至基线变平为止。流速缓慢从0.8，0.6,0.4,0.2,到0，然后点击off，关闭软件，再关电脑，关检测器，流程与开机顺序相反。