agilent高效液相色谱仪标准操作程序

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Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明:1.开机前准备:1.1仪器设备:Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。

● G1311A (四元泵)。

● G1329A(标准型自动进样器)。

● G1316A(柱温箱)。

● G1315A(DAD检测器)。

● 色谱柱 1.2溶剂准备:● 有机相必须是色谱级纯。

● 水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。

● 流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。

有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。

产品类别代表产品品系产品特点纤维素酯类混合纤维素水相成孔性能好,亲水性好,材料成本低。

膜(CN-CA)可耐稀酸。

不适合于酮类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。

尼龙6 通用具有亲水性,较耐碱不耐酸。

在酮、酚、聚酰胺类(PA-6)醚及高分子醇类不被腐蚀。

聚砜(PS)通用良好的化学和热稳定性,耐辐射,机械聚砜类强度高。

有机PDEF耐化学腐蚀,耐氧化,耐高温,疏聚偏氟乙烯/PDEF/PTFE 水性(酒精处理后变清水性),PTFE耐酸聚四氟乙烯膜碱性强。

具有良好的化学稳定性,耐酸碱和各种聚烯烃类聚丙烯膜有机有机溶剂。

价格便宜,但孔径分布宽。

(PP)耐高温,耐有机溶剂、耐生物降解等。

无机材料陶瓷、玻璃通用 BP、金属膜2.基本操作步骤: (一)、开机:1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序(部分安装程序不需要运行Bootp)。

2、打开 1200 LC 各模块电源。

3、待各模块自检完成后,双击“仪器1 联机”图标,化学工作站自动与1200LC通讯,进入的工作站画面如下所示。

4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”,“在线光谱”,“化学工作站状态”,“系统视图”,“样品视图”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

Agilent1260高效液相色谱仪操作规程

Agilent1260高效液相色谱仪操作规程

Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1开机前准备1.1根据实验要求配制流动相,须经0.45μm滤膜过滤,之后再进行脱气处理,使用前必须用超声波振荡l0-15min,按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A(装有洗盐装置,最好固定盛放无机盐水相)、B 中;对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。

1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2~3滴的速度虹吸10% 的异丙醇水冲洗seal-wash,以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

2 开机2.1打开电源,打开计算机,进入Windows 系统,从上到下依次打开各模块电源。

2.2待各模块自检完成后,双击桌面上的“仪器1联机”图标,将自动进入化学工作站画面。

2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项,进入方法和运行控制窗口。

2.4打开Purge阀(逆时针),右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。

2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ,A通道设到100%,单击“确定”。

2.6单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge,直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止;切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。

(查看柱前压力,若大于10Bar,则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。

)2.7将泵的流量设到0.5ml/min,若使用双泵则应设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;关闭排气阀(顺时针);再将流量设到0.8ml/min ,2分钟后设定至方法所需流速,冲洗色谱柱20-30min。

2.8单击泵下面的瓶图标,输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积(为保护泵和色谱柱,请按实际体积输入)和停泵的体积单击“确定”,如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积,泵将自动停止。

2.9把缓冲液(用于柱子过渡的,与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液)换成流动相,排气后,逐步增加至所需流速,待柱压基本稳定后,打开检测器等,监视基线。

安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项

安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项

安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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Agilent_1100高效液相色谱仪操作规程[1]

Agilent_1100高效液相色谱仪操作规程[1]

高效液相色谱仪(Agile 1100型)标准化操作规程一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须至少过0.4 μm滤膜,最好过0.2 μm滤膜;(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜纯净水,不能使用超过3天的纯净水,以防止长菌或长藻类);水相混匀后超声10~15分钟脱气(有在线脱气机不需超声脱气);把流动相放入溶剂瓶中(棕色瓶可以防止藻类生长)。

一般A瓶:为有机相;B瓶:为水相。

有机溶剂通道和盐溶液通道要固定,不要互换。

避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂:·碱金属卤化物及其酸溶液(如:碘化锂、氯化钾等)。

·高浓度无机酸,如硝酸、硫酸.·可能含有过氧化物的色谱醇醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。

这些在使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。

·含强络合剂的溶液(如EDTA,乙二胺四乙酸)。

·四氯化碳与2 -异丙醇或四氢呋喃的混合液。

2、打开电脑,进入Win 2000或NT界面。

(Agilent 在Win 2000和NT操作系统下稳定)3、双击CAG Boodp server图标,放大CAG Boodp server小图标,出现窗口,5min内自下至上打开各模块电源,并待各模块自检完成后(指示灯变成黄色),等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAG Boodp serve窗口。

4、双击online图标,仪器自检,进入工作站。

该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

5、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。

Agilent液相色谱仪器操作规程

Agilent液相色谱仪器操作规程

1、打开计算机;
2、打开主机各模块电源(不分先后),再双击仪器 1 联机图标,进入工作站;
3、旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%;
4、在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;
5、依次切换到B、C、D溶剂分别排气;
6、将工作站中的泵流量设到1ml/min,再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;
7、关闭排气阀,检查柱前压力;
8、待柱前压力基本稳定后,设置VWD波长,打开检测器灯,观察基线情况;
9、由运行控制进入样品信息进行一系列设置,进样分析
10、仪器使用后,应用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时,流量0.5∽1ml/min,再用100%甲醇冲0.5小时;
11、开机时,打开排气阀,100%水,泵流量5ml/min,若此时显示压力 >10bar,则应更换排气阀内玻璃料
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简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。

其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。

2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。

3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。

4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。

5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。

6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。

7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。

8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。

注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。

- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。

- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。

- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。

- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。

- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。

Agilent1200高效液相色谱仪操作程序

Agilent1200高效液相色谱仪操作程序

1 目的:建立Agilent1200高效液相色谱仪标准操作程序,规范Agilent1200高效液相色谱仪的使用和操作。

2 范围:Agilent1200高效液相色谱仪。

3 责任者:QC仪器分析人员。

4 程序:4.1 仪器组成本套仪器由脱气机、低压四元梯度泵、柱温箱、可变波长紫外检测器和Agilent 1200色谱工作站组成。

4.2 基本操作4.2.1 准备工作4.2.1.1 按照SOP操作标准配置相应的流动相,用0.45µm的膜过滤并冷却至室温待用,流动相名称和容器序号必须对应,以及在流动过程中检查是否有气泡。

4.2.1.2 色谱柱准备:选择与被测物质匹配的色谱柱,并安装好。

4.2.1.3 预热分析天平5~10分钟,调节水平,确保称量准确。

调节操作环境的温湿度使其达到规定的要求。

4.2.1.4 测试液、对照液的准备:使用品种项下规定的测试液、对照液并按操作规程临用前配置。

4.2.2 接通电源并打开Agilent1200仪器和与之配套的计算机。

4.2.3 双击电脑桌面上的Agilent1200在线工作站(Instrument 1 online)4.2.4 参数设置测试条件和显示条件一致,则无需重新设置。

否则按检测条件设置操作参数。

(如:进样量、柱温箱温度、流量、波长、流动相比例、分析时间等),启动仪器测绘基线并观其状态。

4.2.5 分析操作当以上所有设置参数达到相应的设定值并且基线处于稳定状态时,窗口状态显绿,此时系统显示Ready,放采样瓶于相应位置,按Start键开始采样分析,工作站自动进行数据采集,采样完毕,自动进行数据处理并存盘。

分析前填写被测样品以及工作人员的详细资料,以便查阅。

4.2.6 报告的预览与打印等采样结束直接预览并打印或者双击桌面上的离线工作站(Instrument 1 offline)。

选择“打开”项,按进样信息打开需要的谱图,单击“预览”按钮,显示预览报告,有必要时可以对谱图进行修改,确认无误后,单击“打印”按钮,即可进行报告打印并保存图谱。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。

为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器,以下是一些规范操作的步骤和注意事项。

1.仪器准备-开启仪器电源,并等待仪器自检完成。

-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。

-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净,并按需更换柱筒。

2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品,并确保其纯度和浓度符合实验要求。

-制备规范的稀释液或内标溶液,以便进行质量控制和校准。

3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。

-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。

-根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。

4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱,并将柱安装在柱底座上。

-将导线连接到柱温控制系统,并设置柱温。

-选择适当的流动相溶剂,用它们预平衡柱,以确保柱达到稳定状态。

5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。

-定期进行质控分析,以检验仪器的准确性和精确性。

-根据需要,进行合适的质量控制和校正操作。

6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式(如自动进样器、手动进样器等)。

-通过进样器吸取样品,并确保进样量准确无误。

-进行一定的进样准备,如过滤、稀释等。

7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置,样品进样准备完毕,并进行柱的平衡。

-点击“开始”按钮,启动分析程序。

-监测分离曲线或结果,确保分析结果的准确性与可靠性。

8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。

-对结果进行后处理和数据分析,如绘制色谱图、峰面积计算等。

-存储数据,以备后续分析和查阅。

9.仪器维护与清洁-使用完毕后,关闭仪器并断开电源。

-清洗注射器和柱等关键部位,以防止残留的样品引起交叉污染。

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Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序1.目的
使操作人员的操作步骤规范化.
适用范围2.
适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进行的操作.
3.责任者
质控科仪器分析员对此规程负责.
4.规程
4.1清洗液、流动相、封柱液预处理
4.1.1所有清洗液、流动相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀.
4.1.2甲醇-水(10:90)、乙腈-水(10:90)、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中.
4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜,其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜.
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4.1.4存放清洗液、流动相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次.
4.2接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕,处于准备进行状态.双击桌面图标“仪器1联机”,打开Agilent 1200化学工作站,在左上角下拉框中选择“方法与运行控制”界面.显示如下图
标:
注意:一定要先双击“仪器1联机”图标,进入联机状态,方可双击“仪器1脱机”图标,同时进入脱机界面.否则,将无法联机.
4.2泵
4.2.1 准备清洗液并装入溶剂瓶中,将吸滤器放入瓶内.安装所需用柱子.
2 / 8
单击泵图标阀)打开,,4.2.3 将吹扫阀(即“Purge”选择“设置泵”,将“流速”设置为3.00ml/min.选择清洗液所在通道(建议为A通道),单击“确定”,在“系统视图”中单击“启动”运行泵,泵运行10分
钟后,观察压力,应小于10bar,若大于此压力,应更换purge阀滤芯,调节流速1.00ml/min.
4.2.4关闭purge阀,观察柱压是否正常.
4.2.5选择“控制”,在“用于泵密封垫清洗的泵”(Seal Wash)中选择“定期清洗”,“周期”设置为5min,“持续”设置为0.1min,同时观察试剂架中10%异丙醇是否充足,相应的废液瓶是否有充足空间.
4.2.6 根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子约30分钟后,在“控制”组中的“泵”选项中选择“待机”,待系统压力降到10bar
以下后,更换流动相,在“控制”组中的“泵”选项中选择“启动”改用流动相平衡柱子,约30分钟后柱子处于平衡状态.设定所需流速,在“停止时间”中设定所需运行时间,在“后运行时间”设定所需后运行时间;选择“溶剂”项,设定各通道比例,单击“确定”.
4.2.6 如进行梯度分析,在“设置泵”组中选择“时间表”,单击“追加”,根据具体方法进行时间和相应的参数设置.
4.3 柱温箱
单击柱温箱图标,4.3.1在系统视图中,并从菜单中选择“设置柱温箱”,设置“温度”选项,单击“确定”.
4.3.2在实验开始时,用清洗液清洗柱子时,应同时开启柱温箱;在3 / 8
实验结束时,用清洗液清洗柱子时,应关闭柱温箱,让柱子随着清洗过程慢慢冷却.要避免到封柱过程结束后才关闭柱温箱,这会导致柱的寿命减短.
4.4自动进样器
在系统视图中,单击自动进样器图标,从菜单“设置4.4.1进样器”,在“进样”组中,选择“洗针进样”,清洗瓶通常设为“91”;在最优化中设为“无”.
4.4.2 清洗瓶中的清洗剂通常为滤过的超净水,只需盖瓶盖,无需放置垫片.
4.5可变波长检测器(VWD)
单击检测器图标,在系统视图中,并从菜单中选择“设4.5.1置VWD 信号”,在“信号”组中设置波长,在“峰宽(响应时间)”组中,单击下拉列表并选择“>0.1min(2s)”,单击“确定”.
4.5.2在“控制”组中,选择关闭或打开氘灯.一般情况下,待到系统走流动相时即打开氘灯预热;分析结束时,用清洗液清洗柱子时,即时关闭氘灯.
4.7“自动进样器”、“柱温箱”、“检测器”中的时间表设置均与“泵”一致.
4.8 上述“自动进样器”、“泵”、“柱温箱”、“检测器”的相关参数设置完毕后可在主界面选择“方法”,选择“方法另存为”保存方法,4 / 8
以后使用时可选择“调用方法”.
4.9 序列
在“方法和运行控制”视图中,单击主工具栏上的,切换至4.9.1. “序列”面板,点击“仪器控制”单击选择“序列参数”出现如下
对话框:4.9.2
“操作者姓名”一般填写姓名的首字母集合;“数据文件”选择“自动”;子目录填写“xxyyzz-aaa”,其中xxyyzz为6位数的年月日组合,aaa为品名的首字母集合;“运行部分方法”选择“依据运行时选项表”;“等待时间”设置为0min;“未就绪超时”设置为0min;如该序列要5 / 8
走过夜,在“关闭”选择“序列运行后命令/宏”,如果所用的仪器为单元泵,选择“LAMPALL OFF”,如果所用的仪器为四元泵,选择
“macro SHUTDOWN MAC,go”
4.9.3单击“确定”.
4.9.4单击“序列“面板,出现如下对话框,设定序列表.
在“样品瓶“中输入样品瓶位置“1~99”;在样品样品名称中输入相应样品名称,具体参见附件一;在方法名称中输入相应的方法名称,具体参见附件二;在“进样次数/瓶”输入所需进样的次数;使用“插入”、“追加一行”和“剪切”按钮编辑序列行数,单击“确定”.
4.9.5单击主界面上的“序列”,选择“保存序列”,保存所设置的序列.
4.10 数据分析
4.10.1在“视图”中选择“数据分析”将主界面切换到数据分析.
6 / 8
单击,切换至积分工作区.
4.10.24.10.3选择“调用信号”调用所需的信号.
报告”工具栏中,单击切换到积分事件表.在“积分/其4.10.4中,基线校正可以设置为“经典”或“高级”,在进行有关物质分析时设置为“高级”;斜率灵敏度在有关物质分析时设置为“0.5”,其他分析时设置为“1”;峰宽设置为“0.04”;“最小峰面积”和“最小峰高”在有关物质分析时均设置为“0”,其他分析时可设置适合的数值;“肩峰”选择“关闭”;“信号指定事件”选择“VWD缺省”.单击保存已修改的积分事件表并关闭积分工作区.
单击. 4.10.5打开“保存方法”对话框保存方法单击.
4.10.6放大光标查看积分基线,单击缩小至初始大小4.11样品分析待基线走平稳后,在序列“仪器控制”主界面点击“开始”进样. 4.12仪器及柱子清洗
根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子及流路,注意一般甲醇-水(10:90)、乙腈-水(10:90)不超过60分钟.再用10倍柱体积封柱液清洗柱子及流路.退出工作软件并保存数据,关机.
5.维护
5.1泵
5.1.1主动入口阀滤芯,每6个月清洗一次.
5.1.2溶剂过滤器,每3个月清洗一次.
7 / 8
5.1.3 泵密封垫、柱塞杆每2年清洗一次.
5.2自动进样器
5.2.1针头,每6个月清洗一次.
5.2.2针座,每6个月清洗一次.
5.2.3转子密封垫,每6个月清洗一次.
5.2.4 计量泵,通常不进行维护,除非发现进样量精密度降低或计量设备泄漏.
5.3柱温箱,进行必要的清洁.
5.4 检测器
5.4.1 氘灯,当不能点亮或者漂移超过范围是更换.
5.4.2 流通池,噪声、渗漏、光强度降低时进行清洗.
8 / 8。

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