高效液相色谱仪操作三要点
高效液相色谱仪的使用注意事项

高效液相色谱仪的使用注意事项
1.使用前须确定操作者是否具有色谱仪操作资格,如未具有资格,应在专业人士的指导下使用。
2.首次使用前,应检查仪器性能是否正常,适当调整参数,以达到最佳操作状态。
3.使用过程中,应注意仪器的安全,避免过热、过压及调节参数超出正常范围,避免仪器受损。
4.样品质控,应定期使用标准品或有关物质进行质控,确保测试精度。
5.操作时应熟练掌握仪器操作流程,以防误操作。
6.应及时更换仪器液体及耗材,以确保实验准确。
7.使用后,应将仪器关闭,安全放置,勿放在水源附近或潮湿环境中。
- 1 -。
高效液相色谱仪操作

高效液相色谱仪操作一、简介高效液相色谱仪(High-performance liquid chromatography,HPLC)是一种常用的分析仪器,主要用于分离、定量和检测样品中的化合物。
它具有分离效率高、分离时间短、操作方便等优点,广泛应用于制药、化妆品、食品、环境监测等领域。
本文将为您介绍高效液相色谱仪的操作步骤和注意事项。
二、操作步骤1.准备工作在使用高效液相色谱仪之前,需要确保仪器和所需材料的准备工作已完成。
包括以下几个方面: - 选用合适的色谱柱:根据样品的特性和分离要求,选择相应的色谱柱类型和规格。
- 准备好流动相:根据试验要求和分析方法,配置好正确的流动相,确保其符合实验要求。
- 检查仪器状态:检查仪器的电源是否正常,色谱柱是否安装正确,流速控制装置是否工作正常等。
2.样品准备•将待分析样品溶解或稀释到合适的浓度。
•过滤样品以去除杂质,确保样品的纯度和稳定性。
•如果需要,可以对样品进行衍生化处理,以提高分离效果。
3.仪器设置•打开操作软件,确保仪器和计算机正常连接。
•根据分析要求设置进样体积、流速、检测器参数等。
•在进样器中加入样品,设置为自动进样或手动进样。
4.开始分离•启动色谱泵,使流动相从色谱柱中流动,建立起足够的流速。
•启动检测器,选择适当的检测模式和波长。
根据样品特性选择合适的检测器类型,如紫外/可见光检测器、荧光检测器等。
•开始记录数据,在色谱软件上观察色谱图的变化,根据需要进行峰的识别和峰面积的积分计算。
5.数据分析•根据分析要求,对色谱图进行峰的分析和峰面积的计算。
•根据标准曲线或对照品,进行定量分析。
三、注意事项1.安全操作:使用高效液相色谱仪时,应注意仪器操作安全,避免发生意外事故。
如注意电源和高压电缆的连接是否牢固,避免漏电和触电危险。
2.样品准备:样品准备过程中,应避免受到外界污染和杂质的干扰,保证样品的纯度和稳定性。
3.色谱柱的选择:根据样品的性质和分离要求,选用合适的色谱柱。
hplc高效液相色谱仪工作原理操作、维护要点的梳理总结

HPLC高效液相色谱仪工作原理操作、维护
要点的梳理总结
HPLC(高效液相色谱)是一种常见的分析仪器,用于分离、鉴定和定量分析化合物。
下面是HPLC高效液相色谱仪的工作原理、操作和维护要点的梳理总结:
工作原理:
1. 样品通过高压注射器注入进入液相色谱柱,柱内填充有固定相(如硅胶或离子交换树脂),流动相(溶剂)通过柱子,样品中的化合物在不同的固定相上有不同的分配系数,从而被分离出来。
2. 分离后的化合物通过检测器进行检测,检测器将化学信号转换为电信号,然后通过数据系统进行数据处理,得到化合物的保留时间、峰面积等信息。
操作要点:
1. 准备工作:检查仪器是否正常工作,准备好样品,选择合适的溶剂进行样品制备和提取。
2. 启动仪器:启动仪器,调节流速、温度等参数,使其达到预设值。
3. 注入样品:通过注射器注入样品,注意控制注入速度和量。
4. 运行分析:启动色谱柱和检测器,开始进行分析。
5. 数据处理:通过数据系统对分析结果进行数据处理,得到化合物的保留时间、峰面积等信息。
维护要点:
1. 定期清洁和维护仪器:定期清洁仪器,更换滤芯和柱子,保证仪器的正常工作。
2. 定期校准仪器:定期对仪器进行校准,保证分析结果的准确性。
3. 注意安全操作:在操作过程中应遵守安全规范,避免意外事故发生。
4. 储存样品:储存样品时应注意保存条件,避免样品变质或污染。
总之,HPLC高效液相色谱仪的工作原理、操作和维护要点都需要认真掌握,才能保证分析结果的准确性和仪器的正常工作。
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。
其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。
3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。
注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。
高效液相色谱仪使用说明书

高效液相色谱仪使用说明书序言高效液相色谱仪(High-performance liquid chromatography, HPLC)是一种常用的分离技术,广泛应用于药物分析、食品安全监测、环境检测等领域。
本说明书旨在提供关于高效液相色谱仪的基本操作原理、使用方法和注意事项等信息,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
一、仪器概述高效液相色谱仪主要包括进样系统、色谱柱、泵液系统、检测器和数据处理系统等基本组成部分。
1. 进样系统进样系统用于将待测样品引入色谱柱中进行分离。
常见的进样方式包括自动进样器、手动进样器和微量注射器等。
2. 色谱柱色谱柱是分离相和固定相组成的圆柱体,是进行样品分离的关键组件。
用户应根据待测样品的特性选择适当的色谱柱型号和填充物。
3. 泵液系统泵液系统通过输送流动相将样品送入色谱柱中,并提供足够的压力以保持流速和流动相性质的稳定。
泵液系统可根据实际需求配置恒压、梯度或等压梯度等控制方式。
4. 检测器检测器用于监测和记录样品的化学信号,并将其转化为可读的信号输出。
常见的检测器包括紫外可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
5. 数据处理系统数据处理系统用于采集、处理和分析检测到的信号,通常配备有专业的软件。
用户可根据需要选择合适的数据处理系统,并进行适当的参数设置。
二、操作方法1. 仪器准备(1)保证仪器通电正常并处于稳定工作状态。
(2)检查流动相储液瓶中是否有足够的流动相,并确保其配制符合要求。
(3)检查色谱柱的连接情况,确保柱座和柱连接部位严密无泄漏。
(4)开启数据处理系统,确保与色谱仪的连接正常。
2. 样品准备根据实验要求选择合适的样品,并进行必要的前处理工作,如过滤、稀释等。
3. 进样操作(1)将样品溶液通过合适的进样方式加入进样器中。
(2)设置进样体积和进样方式等参数,并进行进样操作。
4. 流动相系统设置(1)根据实验要求选择合适的流动相,注入流动相储液瓶中。
(2)设置流速、梯度等参数,并进行流动相系统的初始化。
高效液相色谱仪安全操作规定

高效液相色谱仪安全操作规定一、前言高效液相色谱仪(HPLC)是一种灵敏、准确、高效的分离和定量分析技术。
但是,如果不正确地操作HPLC,会造成安全事故和设备损坏。
为了确保实验室人员和设备的安全,特制定以下操作规定。
二、操作前的准备工作1.在使用HPLC之前,应仔细阅读设备操作手册和相关化学品安全资料,确保自己了解HPLC的操作原理和已知的安全提示。
2.总是戴上安全眼镜和实验室外套、手套。
3.确保工作区域清洁,用于分析的试样和溶剂必须是纯净的。
4.使用合适的容器和标签标记所有样品和溶剂,确保容器盖子完全紧固并避免倾泻。
三、HPLC操作过程中的安全措施1.确定所有操作步骤和解决方案,确保混合物的比例和流量是准确的,避免因不正确的操作而产生安全隐患。
2.需要使用毒性或易燃的化合物时特别小心,确保其不与操作人员的皮肤和眼睛接触。
操作过程中要尽量避免吸入有毒气体或挥发性有机化合物。
3.在加热系统中使用加热棒时,必须正确地控制加热器温度,并确保加热棒与任何易燃或易爆物质保持安全距离。
4.在使用HPLC时,总是要注意设备、高压线路以及相关部件是否完好无损。
必要时,可以使用物料检查清单进行检查和维护。
5.当操作HPLC时必须避免任何不必要的移动和干扰,以确保设备免受损坏和人员安全。
6.完成实验后,必须仔细清理所有设备,特别是液体管路和溶解瓶。
处理过程中需要小心谨慎,避免溅出、散布和混合化学物品。
四、在实验室中进行HPLC操作的个人安全提示以下是在实验室中进行HPLC操作时需要注意的安全提示:1.避免高压泵和简单手动琼脂泳道中的任何泄漏。
2.避免发生应力。
3.不要将任何药物或物质注入琼脂泳道中。
4.使用牢固的安全带,在前面跑的样品数量超过一定数量时,必须进行维护和验证。
5.当进料水槽或样品浓度过高时,必须使用合适的洗手液和橙色印记保护皮肤,通过强光聚焦来检查洗手液和印记的情况。
五、总结在HPLC操作中,合理、规范的标准操作步骤是非常重要的,并且需要制定良好的设备日常维护策略。
高效液相色谱仪操作技巧及操作规程

高效液相色谱仪操作技巧及操作规程高效液相色谱仪操作技巧任何颗粒物进进高效液相色谱仪后都会在柱子进口端被筛板挡住,最后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力加添并使色谱峰变形。
因此,要实行各种防备措施,包括操纵步骤和商品仪器自身的各种过滤设计,努力防止或削减颗粒物进进高效液相色谱仪中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并进步数据的牢靠性。
在高效液相色谱仪中,颗粒物的紧要来源有三个途径:活动相、被测样品和仪器系统部件的磨损物。
1、被测样品使用针筒式过滤器不可能100%得到通过过滤器的被测样品,总会或多或少的丢失。
丢失来自这样几方面:过滤器滤膜的吸附、过滤器滤出的颗粒物上的吸附、针筒式滤膜过滤器与针筒连接处的渗漏等。
2、活动相无论是高效液相色谱仪HPLC级的水还是在试验室使用超纯水净化系统制备的水,最后一步也是通过0.2μm微孔滤膜。
任何一种缓冲液中加进了固体物,必定活动相过滤将。
少量杂质颗粒存在于活动相中必定成为残渣。
解决方法:2.1.活动相制备仅接受HPLC级液体时不需要过滤,反之全部活动相构成在使用前必需过滤。
2.2.在连接储液瓶和泵的输液管的末端进口接受下沉式过滤器(常见材质有熔融玻璃砂芯滤板和微孔金属的两种)也是很紧要的。
这个过滤器的规格为≥10μm的微孔物质,所以它不能取代活动相过滤步骤,但是它能除往系统中的尘土并保证储液瓶、输液管使用的牢靠性。
2.3.推举在HPLC系统中接受一个0.45或0.5μm的在线多孔过滤器,接在自动进样器和柱子之间,即使已使用了保护柱。
这个在线过滤器将成为挡板代替柱头的滤板,而且如接受一个玻璃砂芯滤板,既便宜,更换又便利(几分钟就可更换)。
若接受在线过滤,高效液相色谱仪检测每批样品开始前记录下压力值,当压力上升确定值,例如25%或加添500psi,应当更换玻璃砂芯滤板了,更换以后冲洗几分钟系统将恢复到原来的压力值。
3、仪器系统部件的磨损物最后,在高效液相色谱仪HPLC系统中颗粒物的另一个紧要来源是输液泵密封垫和进样阀旋转轴的磨损。
高效液相色谱仪操作说明书

高效液相色谱仪操作说明书一、引言高效液相色谱仪(HPLC)是一种广泛应用于化学、生物医药、环境监测等领域的分析仪器。
本操作说明书旨在帮助用户正确有效地操作HPLC仪器,以获得准确可靠的分析结果。
二、仪器概述1. 主要组成:HPLC仪器主要包括进样系统、色谱柱、流动相装置、检测器及数据分析系统等组成部分。
2. 基本原理:HPLC利用流动相在高压下通过色谱柱,样品分离后再由检测器进行检测和信号记录,通过数据分析系统生成分离效果图谱或定量结果。
三、操作步骤1. 准备工作a) 确保仪器电源已接通,并检查各部分连接是否牢固。
b) 打开相关软件并进行系统初始化。
c) 根据待分析样品的特性,选择适宜的色谱柱和流动相。
2. 进样系统操作a) 将待测样品通过合适的方法制备成溶液。
b) 打开进样系统的相关开关,将样品通过进样针注入进样口。
c) 调整进样量和进样速度,确保样品完全被进样器吸取。
3. 色谱柱操作a) 将色谱柱连接到系统中,并确保连接处密封良好。
b) 根据样品性质选择合适的流动相和梯度条件,设置柱温以提高分离效果。
c) 在柱前和柱后设置适当的减压阀,调节流量和压力,确保色谱柱正常运行。
4. 流动相装置操作a) 根据检测要求准备合适的流动相溶液。
b) 将流动相溶液通过流动相装置输送至色谱柱,确保流速和流量稳定。
5. 检测器操作a) 打开检测器并进行相关参数设置,如波长选择、灵敏度调节等。
b) 将流经色谱柱的样品原液通过检测器进行检测,并记录信号。
6. 数据分析与结果生成a) 使用相应的数据分析软件,导入检测到的信号数据。
b) 根据需求进行峰面积积分、峰高浓度定量等相关数据分析。
c) 生成分析图谱或报告,并保存结果。
四、故障排除在操作过程中,可能会遇到一些故障情况,以下列举一些常见故障及其排除方法:1. 柱堵塞:检查柱前和柱后的减压阀是否打开和调整流量。
2. 波峰异常:检查流动相和检测器参数设置是否正确。
3. 信号丢失:检查进样系统是否正常工作,检查柱连接是否存在泄漏。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
高效液相色谱仪操作三要点高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。
同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。
和其它分析仪器一样,你若想让HPLC 很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。
而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。
大家在学校或接受仪器公司培训的时候,老师或工程师会提出很多的操作注意事项。
但要是总结归纳一下,最重要的有三点:脱气、过滤和冲洗。
本文围绕这三点进行讨论,给新从事HPLC 分析的工作者一点操作建议,希望能对正确的操作仪器有一点帮助。
更欢迎有经验的专家介绍使用经验,提出好建议。
一、脱气流动相脱气对于避免HPLC 系统出问题,顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。
HPLC 系统内是不希望有气泡存在的。
HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。
如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压力低限,泵将停止工作。
有些泵设计可以很好地排除气泡,而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。
当一个气泡通过输液泵时,由于系统压力大,气泡通常会溶解在流动相溶液中,随流动相通过柱子。
但是到达检测器流通池时系统压力又恢复到了大气压,因而气泡可能在检测器流通池中又显现,在色谱图上会出现不规律的毛刺。
为解决这个问题,有些仪器公司设计一个反压控制器,这样可以在检测器出口提供足够的压力保持气泡始终溶解在流动相中直到它们流出检测器。
当然,这个压力不能超过流通池所能承受的压力极限,否则可能损坏检测器。
紫外/可见光(UV/VIS)检测器的液相色谱图中的噪音毛刺通常是气泡进入并通过流通池的征兆。
有些检测器对空气的存在也非常敏感,但表现出的征兆与UV/VIS 不同,例如有报导说,当使用荧光(FL)检测器时,流动相中溶解氧的存在可能会使一些化合物失去荧光性。
此外,对于利用待测物质在电极表面发生氧化还原反应引起电流变化而进行检测的电化学(EC)检测器,对流动相中的溶解氧的存在也非常灵敏。
此外,气泡的存在有时还会导致保留时间不重现。
所以,必须注意消除流动相中的空气,并且还应避免空气由管路(如PTFE 管)渗透进流动相中。
如果适当地关注在使用之前脱去流动相中溶解进的空气,上述这些问题均能避免,或把影响降至最低。
常用的脱气方法有如下几种:1. 吹氦脱气法。
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa 压力下,以约60 mL/min 流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。
采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。
这意味着1L 氦气通过1L 流动相就可完成排气这个工作。
这种脱气方法虽然好,但我们国内氦气价格较高,很少有实验室采用此方法。
2. 加热回流法。
此法的脱气效果较好。
在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。
3. 抽真空脱气法。
此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa 即可除去溶解的气体。
但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4. 超声波脱气法。
将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中,用超声波震荡10~20min。
此法的脱气效果最差。
5. 在线脱气法。
现在商品的HPLC 仪器,均可配在线脱气机。
在线脱气使用简单,低故障,有效。
建议购买仪器时一定要购买,有的公司是作为选购件,所以与仪器公司谈配置时应与公司确认。
二、过滤任何颗粒物进入HPLC 系统后都会在柱子入口端被筛板挡住,最后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。
因此,要采取各种预防措施,包括操作步骤和商品仪器自身的各种过滤设计,努力防止或减少颗粒物进入HPLC 系统中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并提高数据的可靠性。
在HPLC 系统中,颗粒物的主要来源有三个途径:流动相、被测样品和仪器系统部件的磨损物。
1、流动相如果流动相均由高效液相色谱级溶剂组成,流动相没有必要过滤。
这是因为高效液相色谱级的有机溶剂,例如乙腈、甲醇等,在制造的工艺过程中都已经过了0.2 μm 微孔滤膜过滤。
同样的,无论你是买的HPLC 级的水还是在实验室使用超纯水净化系统制备的水,最后一步也是通过0.2 μm 微孔滤膜。
然而,如果有任何一种缓冲液中加入了固体物,例如磷酸盐,流动相过滤将是必要的一个步骤。
虽然缓冲盐可能是可溶解的、高纯的,但它还是可能含有颗粒物质,例如在盖试剂瓶的塑料内盖时,塑料瓶盖子与瓶口边缘挤压就会产生塑料颗粒。
在这种情况下,添加的一种固体物可能完全溶解了,但是少量杂质颗粒存在于流动相中成为残渣。
流动相通过0.45 μm 微孔滤膜过滤对于从流动相中除去所有颗粒物是一个有效方法。
0.2μm 微孔滤膜也可以用,但是它们就这个应用而言并不比0.45μm 微孔滤膜更有效,而且它的过滤速度会更慢,特别是当实验室使用的试剂和水的质量不太好时。
建议实验室在编写制定他们流动相制备标准操作程序(SOPs)时规定,可以借鉴国际上同类实验室的规定,即:流动相制备仅采用HPLC 级液体时不需要过滤,反之所有流动相组成在使用前必须过滤。
在连接储液瓶和泵的输液管的末端入口采用下沉式过滤器(常见材质有熔融玻璃砂芯滤板和微孔金属的两种)也是很重要的。
这个过滤器的规格为≥10 μm 的微孔物质,所以它不能取代流动相过滤步骤,但是它能除去系统中的尘土并保证储液瓶、输液管使用的可靠性。
2、被测样品液相系统中的第二个颗粒物来源是被测样品。
一些实验室在将他们的样品放置在自动进样器盘(或手动进样)以前,所有样品都先通过一个0.45 μm 针筒式过滤器过滤。
这是一个有效除去被测样品中颗粒物的方法。
但是这个过程也有一点需要关注:你使用了针筒式过滤器就不可能100%得到通过过滤器的被测样品,总会有或多或少的丢失。
丢失来自这样几方面:过滤器滤膜的吸附、过滤器滤出的颗粒物上的吸附、针筒式滤膜过滤器与针筒连接处的渗漏等。
如果有丢失,过滤后液体中被测物的含量或浓度与原基本样液的含量或浓度还相同吗?这个问题一般需要通过实验确认。
确认这步是要增加工作量和费用的。
过滤器的使用是一种消耗,每个过滤器的价格从几元到十几元。
但在做食品中残留物分析时,由于基质大多比较复杂,所以过滤这步已成为不可或缺的一步。
在实际分析工作中,一般检测每一组样品会带一个外标、一个添加回收或是质控样品,所以,只要最终检测时得到的信噪比能满足检出限要求,可将这步视为系统误差而忽略。
3、仪器系统部件的磨损物最后,在HPLC 系统中颗粒物的另一个主要来源是输液泵密封垫和进样阀旋转轴的磨损。
关于输液泵密封垫的磨损更换有两种不同建议。
第一种建议认为,在一般实验室中输液泵密封垫通常使用寿命为六个月到一年,因此建议半年或一年更换这些密封垫,实验室应基于上述观点制定定期预防性维护计划。
该观点认为:与输液泵密封垫颗粒堵塞柱子而更换新柱子的费用相比,更换密封垫的费用低些。
一些输液泵有玻璃砂芯或筛网,可在流路中滤掉从泵密封垫磨损下来的颗粒物,防止这些颗粒物随流动相流至柱头。
若有这种装置应查阅输液泵操作手册,查看推荐的这种过滤器清洗或更换的间隔。
另一种建议则认为,原装密封垫的密封效果最好,更换以后容易引起流动相渗漏。
所以,只要不漏液就不要轻易更换密封垫。
两种说法都有其道理,具体如何操作,建议与仪器公司工程师沟通,各公司的仪器还是有些不同的。
自动进样器旋转轴的密封随着使用时间也会磨损,但是在我的经验中,即便是高负荷的运转旋转轴密封垫也可以使用几年。
如果你的自动进样器系统有计数进样阀转动次数的功能,你可以设定一个警铃当预设阀转动次数已达到时提醒你。
曾有一种说法,进样器最多转动20,000次,这仅仅是进样10000个;但这似乎不是实验室涉及的常规样品分析使用寿命,它们的实际使用寿命会更长。
旋转轴密封磨损后会渗液,比较明显的特征是同一样品多次进样后,峰面积值差别比较大(RSD>5%)。
当然,输液泵的密封垫和旋转轴的密封垫磨损将增加更多研磨物在流动相中,加速对这些部件的损伤。
此外,如果你日常运行的流动相有缓冲盐,如磷酸缓冲盐,密封垫的磨损会更快。
无论颗粒物源于何物,实验时都要将其除去。
推荐在HPLC 系统中采用一个0.45或0.5 μm的在线多孔过滤器,接在自动进样器和柱子之间,即使已使用了保护柱。
这个在线过滤器将成为挡板代替柱头的滤板,而且如采用一个玻璃砂芯滤板,既便宜,更换又方便(几分钟就可更换)。
若采用在线过滤,HPLC 系统检测每批样品开始前记录下压力值,当压力上升一定值,例如25%或增加500psi,应该更换玻璃砂芯滤板了,更换以后冲洗几分钟系统将恢复到原来的压力值。
三、冲洗使HPLC 系统良好运行的第三个要点是保持系统的清洁。
你需要关注流动相流经该系统的所有地方,对于这些地方经常性的冲洗,将使你的系统保持在“Ready”状态。
1、流动相储液瓶首先要经常清洗流动相储液瓶,或者每做一批新样品更换一次流动相。
一个脏的储液瓶将会污染注入的流动相。
建议储液瓶中缓冲液使用时间不要超过一周,而有机溶剂使用时间不要超过一个月。
也有人建议储液瓶中保持用溶剂充满,直到更换分析方法储液瓶需更换新溶剂(流动相组成发生变化)时,将旧溶剂倒掉更换新溶剂,这样胜于将溶剂用完。
但这对于分析样品量少的实验室而言似乎有些浪费。
仪器公司的工程师建议储水瓶的水要天天换,每周瓶子还应该用异丙醇清洗一次。
有的实验室则在水里加入0.1~1 mM 的甲酸抑制微生物的生长。
这些做法看起来有些繁琐,但却能起到“磨刀不误砍柴工”作用。
2、泵接下来要冲洗的是泵。
千万不要一分析完冲几分钟后就停泵,特别是当流动相中含有难挥发的缓冲液(如磷酸盐)时。
如果仪器不是连续使用,当流动相蒸发时,难挥发物就会粘在活塞密封垫的表面,难挥发物将形成固形物沉淀。
这是泵密封垫磨损和单向阀渗漏的主要原因之一。
所以,无论使用长短,在停泵以前一定要用非缓冲液流动相冲洗泵在半个小时以上,要是流动相中有难挥发缓冲盐则建议冲洗的时间应该更长些。
3、自动进样器自动进样器也要按规定清洗。
现在的仪器多配有自动进样器的冲洗液瓶,通常只要注意及时更换、补充冲洗液即可。
自动进样器用的洗涤液也要采用与流动相相同的方式处理,并根据溶剂的有效期和规定,清洗储液瓶或更换洗涤液。
现在的自动进样器设置、操作都很简单,如果时间允许(特别是利用夜间运行),每次分析完后设置进1、2针纯溶剂(如甲醇、乙腈),也是一个好做法。