高效液相色谱仪的基本操作和使用

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简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。

其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。

2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。

3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。

4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。

5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。

6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。

7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。

8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。

注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。

- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。

- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。

- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。

- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。

- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。

高效液相色谱仪的操作步骤

高效液相色谱仪的操作步骤

高效液相色谱仪的操作步骤高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种常用的分离和分析技术。

它利用液体流动相和固定相之间的相互作用,将样品中的混合物分离出来,并通过检测器进行定量分析。

本文将介绍高效液相色谱仪的具体操作步骤。

1. 准备工作在进行高效液相色谱仪的操作之前,首先需要进行一些准备工作。

检查色谱柱是否安装正确,确保色谱柱是干净的,并检查流动相的配制是否准确。

2. 样品制备根据需要分析的物质,准备好待测样品。

样品制备可以包括溶解样品、过滤样品等步骤,以确保样品的纯净度和稳定性。

3. 仪器开机将高效液相色谱仪接通电源,打开仪器的电源开关。

等待仪器初始化,并确保仪器各个部分正常工作。

4. 设置参数在仪器上设置分析所需的参数。

包括选择适当的检测器类型和检测波长、设置流量、温度等。

5. 启动系统启动高效液相色谱仪系统,等待系统稳定。

通常需要一段时间使得流动相在管路中充分平衡,并确保流量稳定。

6. 校正进行色谱柱的校正。

校正过程包括流量校正、波长校正等。

通过校正可以保证仪器输出结果的准确性和可靠性。

7. 注射样品将样品通过注射器引入色谱柱中,控制样品的注射量,通常在微升至毫升的量级。

确保样品的注射量稳定和准确。

8. 分离分析开始运行高效液相色谱仪系统,进行样品的分离与分析。

在此期间,流动相通过色谱柱,将样品中的化合物根据它们与固定相之间的相互作用进行分离。

9. 监测结果通过检测器对分离后的化合物进行监测。

根据检测器的信号,可以得到每个化合物的峰面积、保留时间等数据。

10. 数据处理将监测到的信号输入到数据处理软件中,进行结果的计算和分析。

通常可以得到各个化合物的峰高、峰面积等数据,从而实现对样品的定量分析。

11. 关机分析结束后,关闭高效液相色谱仪的电源开关,并进行必要的清洗和维护工作。

确保仪器的正常运行,并延长其使用寿命。

总结:高效液相色谱仪的操作步骤涵盖了仪器准备、样品制备、仪器设置、校正、样品注射、分离分析、结果监测和数据处理等多个方面。

高效液相色谱仪使用说明书

高效液相色谱仪使用说明书

高效液相色谱仪使用说明书序言高效液相色谱仪(High-performance liquid chromatography, HPLC)是一种常用的分离技术,广泛应用于药物分析、食品安全监测、环境检测等领域。

本说明书旨在提供关于高效液相色谱仪的基本操作原理、使用方法和注意事项等信息,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。

一、仪器概述高效液相色谱仪主要包括进样系统、色谱柱、泵液系统、检测器和数据处理系统等基本组成部分。

1. 进样系统进样系统用于将待测样品引入色谱柱中进行分离。

常见的进样方式包括自动进样器、手动进样器和微量注射器等。

2. 色谱柱色谱柱是分离相和固定相组成的圆柱体,是进行样品分离的关键组件。

用户应根据待测样品的特性选择适当的色谱柱型号和填充物。

3. 泵液系统泵液系统通过输送流动相将样品送入色谱柱中,并提供足够的压力以保持流速和流动相性质的稳定。

泵液系统可根据实际需求配置恒压、梯度或等压梯度等控制方式。

4. 检测器检测器用于监测和记录样品的化学信号,并将其转化为可读的信号输出。

常见的检测器包括紫外可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等。

5. 数据处理系统数据处理系统用于采集、处理和分析检测到的信号,通常配备有专业的软件。

用户可根据需要选择合适的数据处理系统,并进行适当的参数设置。

二、操作方法1. 仪器准备(1)保证仪器通电正常并处于稳定工作状态。

(2)检查流动相储液瓶中是否有足够的流动相,并确保其配制符合要求。

(3)检查色谱柱的连接情况,确保柱座和柱连接部位严密无泄漏。

(4)开启数据处理系统,确保与色谱仪的连接正常。

2. 样品准备根据实验要求选择合适的样品,并进行必要的前处理工作,如过滤、稀释等。

3. 进样操作(1)将样品溶液通过合适的进样方式加入进样器中。

(2)设置进样体积和进样方式等参数,并进行进样操作。

4. 流动相系统设置(1)根据实验要求选择合适的流动相,注入流动相储液瓶中。

(2)设置流速、梯度等参数,并进行流动相系统的初始化。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。

为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器,以下是一些规范操作的步骤和注意事项。

1.仪器准备-开启仪器电源,并等待仪器自检完成。

-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。

-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净,并按需更换柱筒。

2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品,并确保其纯度和浓度符合实验要求。

-制备规范的稀释液或内标溶液,以便进行质量控制和校准。

3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。

-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。

-根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。

4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱,并将柱安装在柱底座上。

-将导线连接到柱温控制系统,并设置柱温。

-选择适当的流动相溶剂,用它们预平衡柱,以确保柱达到稳定状态。

5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。

-定期进行质控分析,以检验仪器的准确性和精确性。

-根据需要,进行合适的质量控制和校正操作。

6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式(如自动进样器、手动进样器等)。

-通过进样器吸取样品,并确保进样量准确无误。

-进行一定的进样准备,如过滤、稀释等。

7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置,样品进样准备完毕,并进行柱的平衡。

-点击“开始”按钮,启动分析程序。

-监测分离曲线或结果,确保分析结果的准确性与可靠性。

8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。

-对结果进行后处理和数据分析,如绘制色谱图、峰面积计算等。

-存储数据,以备后续分析和查阅。

9.仪器维护与清洁-使用完毕后,关闭仪器并断开电源。

-清洗注射器和柱等关键部位,以防止残留的样品引起交叉污染。

高效液相色谱仪的操作与维护指南

高效液相色谱仪的操作与维护指南

高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。

为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果,正确的操作和科学的维护是非常重要的。

本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法,以帮助用户正确使用该仪器。

一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前,需要先进行一些准备工作。

首先,检查仪器是否处于稳定的工作环境中,以确保仪器不受外界干扰。

其次,检查所有的连接与密封件是否完好,确保流体不会泄漏。

最后,检查溶剂和样品的储存条件,保证其符合要求。

2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。

开机前,需要检查电源和其他外部连接。

按照仪器的说明书,按顺序打开电源和其他必要的开关。

关闭仪器时,应按照相反的顺序关闭开关,并断开电源。

3. 样品准备与进样在进行进样操作前,需要准备好样品和溶剂。

样品准备时,应遵循相应的样品制备方法,确保样品的准确性和稳定性。

进样时,应根据实验需求设置适当的进样方式,并注意定量准确。

4. 仪器参数设置在进行分析之前,需要设置仪器的参数,以调整流速、温度、检测波长等参数。

仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整,确保获得准确的分析结果。

5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后,可以开始进行分析运行。

根据实验要求和样品特性,选择合适的分析方法和梯度程序。

在分析过程中,应定期检查仪器运行状态,注意观察流速、峰面积、保留时间等数据,并记录相关结果。

6. 仪器清洗与维护分析结束后,必须对仪器进行清洗和维护。

首先,关闭流体通道,清除流体残留物和样品残留物。

然后,根据仪器说明书的要求,进行仪器的常规清洗和维护工作。

定期检查和更换液相柱、检测器等易损件,以保证仪器的正常运行。

二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件,需要定期维护和保养。

hplc高效液相色谱仪使用方法

hplc高效液相色谱仪使用方法

hplc高效液相色谱仪使用方法HPLC高效液相色谱仪是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于药物、环境、食品、化妆品等领域。

下面将详细介绍HPLC高效液相色谱仪的使用方法。

一、仪器准备:1.检查仪器的状态,确认各个部件是否正常运行,如高压泵、进样器、检测器等。

2.开机预热:打开主机电源,按照仪器操作手册上的指示,进行仪器的预热操作。

一般要求预热时间为30分钟到1小时。

二、工作站设置:1.打开工作站软件,点击新建分析方法。

根据分析需求选择不同的方法类型,如梯度洗脱、等温洗脱等。

2.设置流动相组成:根据分析物的性质和目标,选择合适的流动相,并设置其浓度和比例。

可以通过试错法或者文献参考来确定最佳流动相组成。

3.设置进样器参数:选择合适的进样方式,如全自动进样、微量进样等。

设置进样量和进样速度,根据分析物的浓度、检测器灵敏度等因素进行调整。

4.设置检测器参数:选择合适的检测器类型和波长。

一般情况下,紫外检测器是最常用的检测器,波长选择通常在200-400nm之间。

5.设置柱温:根据分析物的性质和目标,选择合适的柱温。

柱温对分离性能和分析速度有着明显的影响。

三、样品处理:1.样品制备:根据分析目标和方法要求,对样品进行处理,包括固相萃取、溶解、过滤等。

2.进样器设置:将样品注入进样器,确保进样量与方法要求相符。

3.进样:点击工作站软件上的进样按钮,开始进行进样。

进样过程中要确保无气泡进入柱。

四、开展分析:1.开始分析:点击工作站软件上的开始按钮,运行分析方法。

监控色谱图,观察峰的形状和分离度。

根据需要可以对分析方法进行优化,如调整流速、洗脱程序等。

2.数据处理:完成分析后,保存并导出色谱图和数据。

进行数据处理和结果分析。

五、仪器维护:1.使用完毕后,关闭泵和检测器,将柱中流动相完全排空,以免柱内残留物引起污染。

2.保养柱:每次使用后,要清洗柱和重新平衡柱。

柱的清洗和保养要根据具体的柱类型和使用情况进行。

3.保持仪器干燥和清洁:定期清洁仪器,尤其是注射器、透射比色噪声汇丰牌等易受污染的部件,以保证仪器的正常运行。

高效液相色谱仪操作使用过程中的注意事项

高效液相色谱仪操作使用过程中的注意事项

高效液相色谱仪操作使用过程中的注意事项一,高效液相色谱仪操作过程:1、开机操作:(1)、打开电源,用Harb相连接时,注意Harb电源,打开计算机,打开Bootp Server(一般启动时已打开);(2)、自上而下打开个组件电源,Bootp Server里显示有信号时(有六行字符),打开工作站(先打开On line);(3)、打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量为准;(4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定,若设定的容积低于最低限会自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液;(5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。

2、先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;3、建立色谱操作方法,注意保存为自己命名的Method,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;4、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;6、实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。

冲洗过程中关闭D灯、W灯;7、关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;8、使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。

(续)1、操作过程若发现压力很小,则可能管件连接有漏,注意检查。

当出现错误警告(各组件指示灯均为红色),一般为漏液,其中一个感应器中已有溶剂,漏液故障排除后,擦干,点击On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。

高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

高效液相色谱仪的操作流程和注意事项引言:高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种重要的分析仪器,广泛应用于化学、生物、医药等领域。

掌握正确的操作流程和注意事项,对保证分析的准确性和结果的可靠性至关重要。

下面将详细介绍高效液相色谱仪的操作流程和注意事项。

一、仪器准备在开始操作高效液相色谱仪之前,需要进行一些准备工作。

首先,检查仪器是否正常工作,例如电源是否正常接通,各个模块是否连接牢固等。

其次,确保色谱柱处于良好的工作状态,即没有泄漏和堵塞等问题。

最后,根据需要,选择合适的检测器,并校准相应的参数。

二、样品准备和进样样品的准备是操作高效液相色谱仪的关键一步。

首先,根据样品的性质选择合适的溶剂体系,并将样品完全溶解。

其次,为了提高分析的准确性,通常需要对样品进行预处理,例如磷酸酯酶的样品需要经过脱磷酸处理。

最后,将样品装入进样瓶中,根据仪器的要求设定进样量。

三、流动相的选择和准备流动相是高效液相色谱仪中的关键因素之一。

在选择流动相时,需要考虑样品的性质以及分析的目的。

常见的流动相包括有机溶剂、水以及它们的混合溶液。

在选择后,需要准备流动相,并进行除气处理以去除气泡。

此外,还要注意流动相的质量,例如pH值、浓度等。

四、色谱条件的设置色谱条件是操作高效液相色谱仪的关键之一。

根据分析的目的和样品的性质,需要设置合适的参数,例如流速、温度、梯度等。

在设置前,需要根据样品性质选择合适的色谱柱,并设定相应的温度以优化分离效果。

此外,还需要根据检测器的要求设定相应的参数。

五、数据采集和结果分析在操作高效液相色谱仪时,需要进行数据采集和结果分析。

首先,确保数据采集系统正常工作,并根据仪器的要求进行设定。

其次,启动数据采集并进行监控,及时记录实验过程中的各项指标。

最后,对采集的数据进行处理和分析,例如峰面积的计算、峰形的分析等。

注意事项:1. 严格按照操作流程进行操作,避免任意更改设置。

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美国赛默飞世尔(Thermo)公司
Finnigan Surveyor Plus 高效液相色谱系统
1、进口仪器
美国戴安公司 SUMMIT高效液相色谱仪
2、国产仪器
大连依利特分析仪器有限公司 P200Ⅱ型液相色谱仪
2、国产仪器
北京市东西电子技术研究所 LC—5500液相色谱仪
2、国产仪器
浙江福立分析仪器有限公司FL2200型高效液相色谱仪
一、基本结构
4、检测器
a.可变波长紫外检测器(VWD)
b.二极管阵列检测器(DAD或PDA) c.荧光检测器(FLD) d.示差折光检测器(RID) e.电化学检测器(ECD)
一、基本结构
4、检测器
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通微(上海)分析技术有限公司
BiSep-1100 高效液相色谱仪
2、国产仪器
通微(上海)分析技术有限公司
EasySep-1010 高效液相色谱仪
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色谱工作站软件
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二、简介
1、进口仪器
2、国产仪器 3、新型快速分析仪器 4、色谱工作站软件
1、进口仪器
美国安捷伦科技有限公司 Agilent 1100系列 高效液相色谱系统
1、进口仪器
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1、进口仪器
日本岛津公司 2010型高效率HPLC
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日本岛津公司LC-10AVP Plus高效液相色谱仪
1、进口仪器
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Analytical Pump AutoSampler
PE公司200系列HPLC
Detector
1、进口仪器
3、新型快速分析LC
美国戴安公司 UltiMate3000型智能液相色谱系统
4、色谱工作站软件
美国Agilent公司 ChemStation色谱工作站
4、色谱工作站软件
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4、色谱工作站软件
日本岛津公司
LCsolution高效液相色谱工作站
4、色谱工作站软件
澳大利亚易达(eDAQ)科技术有限公司
PowerChrom®色谱工作站软件
4、色谱工作站软件
PowerChrom®色谱工作站软件
4、色谱工作站软件
浙江大学N-2000色谱数据工作站
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英谱HS2000色谱系列工作站V5.0
4、色谱工作站软件
大连依利特分析仪器有限公司 EC2000/EC2003色谱数据处理工作站
新一代通用型色谱工作站
可联接任何厂家生产的气相色谱仪、液相色谱仪、离子色谱仪和 毛细管电泳仪等。
ห้องสมุดไป่ตู้
4、色谱工作站软件
4、色谱工作站软件
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天津奥特赛恩斯仪器有限公司
ANASTAR色谱数据处理工作站
3、新型快速分析LC
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3、新型快速分析LC
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3、新型快速分析LC
美国赛默飞世尔(Thermo)公司 Accela 超高速液相色谱(UPLC)
2、国产仪器
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LC2000液相色谱仪
2、国产仪器
上海精密科学仪器有限公司 LC200型高效液相色谱仪
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3、新型快速分析LC
UPLC的定义:
用细粒径填料(sub-2μm)、细内径柱子获得柱效 高达(100,000-300,000)的液相色谱技术,简称超 高效液相色谱。 UPLC的特点: 1、分析速度大大提高; 2、分辨率提高; 3、分析灵敏度提高; 4、单次分析的信息量大。
高效液相色谱仪的 基本操作和使用
主要内容
一、高效液相色谱仪的基本结构 二、商品化仪器及色谱软件简介 三、Agilent 1100 HPLC的基本操作
四、Waters HPLC的基本操作
一、基本结构
1、输液系统
最常用:双泵头往复式柱塞泵
Waters Alliance系统,采用2690分离单元 2、进样系统 3、色谱柱 最常用:ODS柱
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