生化血清蛋白分离提纯实验报告
血清球蛋白提纯实验报告
血清球蛋白提纯实验报告血清球蛋白提纯实验报告引言：血清球蛋白是一种重要的生物分子，具有多种生物学功能。
为了深入研究其结构和功能，本实验旨在通过一系列的步骤，从血清中提纯球蛋白，以获得高纯度的样品。
材料与方法：1. 血清样品：从健康人体中采集的血清样品。
2. 氨硫脲：用于沉淀球蛋白。
3. 离心管：用于离心沉淀。
4. 0.1 M磷酸盐缓冲液：用于洗涤球蛋白。
5. 0.01 M磷酸盐缓冲液：用于稀释。
6. 蛋白质含量测定试剂盒：用于测定球蛋白的浓度。
7. SDS-PAGE凝胶：用于分离蛋白质。
8. Coomassie蓝染色剂：用于染色。
实验步骤：1. 将血清样品加入离心管中，加入适量的氨硫脲，使其浓度达到10%。
2. 将离心管置于离心机中，以10000 rpm的速度离心10分钟，以沉淀球蛋白。
3. 弃去上清液，加入适量的0.1 M磷酸盐缓冲液洗涤沉淀，重复此步骤3次。
4. 加入适量的0.01 M磷酸盐缓冲液稀释球蛋白，使其浓度适宜。
5. 使用蛋白质含量测定试剂盒，测定球蛋白的浓度。
6. 将提纯后的球蛋白样品进行SDS-PAGE凝胶电泳分离。
7. 将凝胶染色剂浸泡在凝胶中，染色15分钟，然后用脱色剂洗净凝胶。
结果与讨论：通过上述步骤，我们成功地从血清中提纯出了球蛋白。
首先，我们通过离心的方式，将球蛋白从血清中沉淀下来。
然后，通过洗涤步骤，去除了与球蛋白不相关的杂质。
最后，我们对提纯后的球蛋白样品进行了浓度测定，并进行了SDS-PAGE凝胶电泳分离。
通过SDS-PAGE凝胶电泳的结果，我们可以看到凝胶上出现了明显的蛋白质条带。
根据分子量标记，我们可以初步判断出这些条带对应的是球蛋白。
进一步的实验可以通过Western blot等方法来确认这些条带的确为球蛋白。
在实验过程中，我们需要注意一些问题。
首先，血清样品的采集和保存要注意避免污染和降解。
其次，实验操作要严格控制温度和时间，以确保实验的准确性和重复性。
血清球蛋白的提纯实验报告
1. 了解血清球蛋白的组成及特性。
2. 掌握血清球蛋白的提纯方法，包括盐析法、凝胶层析法和醋酸纤维素薄膜电泳法。
3. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能。
二、实验原理血清中的蛋白质按电泳法可分为五类：清蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、-球蛋白和-球蛋白。
其中，-球蛋白含量约占16%，100 mL血清中约含1.2 g左右。
不同种类的蛋白质具有不同的分子量、溶解度和带电荷情况，因此可以根据这些性质的差异进行分离和提纯。
盐析法：利用清蛋白和球蛋白在高浓度中性盐溶液中溶解度的差异进行沉淀分离。
半饱和硫酸铵溶液可使球蛋白沉淀析出，清蛋白则仍溶解在溶液中，经离心分离，沉淀部分即为含有-球蛋白的粗制品。
凝胶层析法：利用蛋白质与无机盐类之间分子量的差异进行分离。
当溶液通过Sephadex G-25凝胶柱时，分子直径大的蛋白质不能进入凝胶颗粒的网孔，而分子直径小的无机盐能进入凝胶颗粒的网孔之中。
在洗脱过程中，小分子的盐会被阻滞而后洗脱出来，从而达到去盐的目的。
醋酸纤维素薄膜电泳法：利用蛋白质在电场中的迁移速度差异进行分离。
纯化后的-球蛋白可利用醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定其纯度。
三、实验材料1. 血清样品2. 硫酸铵3. Sephadex G-25凝胶4. 醋酸纤维素薄膜5. 电泳仪6. 显色剂7. 实验器材：离心机、移液器、烧杯、玻璃棒等1. 盐析法提纯（1）将血清样品与硫酸铵溶液混合，使硫酸铵浓度达到半饱和状态。
（2）室温下静置一段时间，待球蛋白沉淀析出。
（3）用离心机分离沉淀和上清液，收集沉淀。
（4）将沉淀用蒸馏水洗涤，去除中性盐。
2. 凝胶层析法提纯（1）将Sephadex G-25凝胶柱连接到层析柱上，用蒸馏水平衡凝胶柱。
（2）将提纯后的沉淀溶解于适量蒸馏水中，制成蛋白质溶液。
（3）将蛋白质溶液加入凝胶柱，用蒸馏水进行洗脱。
（4）收集洗脱液，检测蛋白质含量。
3. 醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定纯度（1）将收集到的蛋白质溶液制成醋酸纤维素薄膜电泳样品。
11.6生化实验报告血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定及电泳分析
11.6⽣化实验报告⾎清γ-球蛋⽩的分离纯化与鉴定及电泳分析⾎清γ-球蛋⽩的分离纯化与鉴定及电泳分析【实验⽬的】1、了解蛋⽩质分离提纯的总体思路。
2、掌握盐析法、凝胶层析法和离⼦交换层析的实验原理及操作技术3、掌握电泳法分离纯化蛋⽩质的⽅法。
【实验原理】1、蛋⽩质的粗提——盐析法胶体的盐析是加盐，盐中的带电粒⼦使蛋⽩质周围的⽔化膜减弱，胶粒溶解度降低，形成沉淀析出的过程，是胶体的聚沉现象的⼀种。
向蛋⽩质溶液中加⼊某些浓的⽆机盐[如(NH4)2SO4或Na2SO4]溶液后，可以使蛋⽩质凝聚⽽从溶液中析出，这种作⽤就叫做盐析。
盐析不能使蛋⽩质变性，可以复原。
利⽤这个性质，可以采⽤多次盐析的⽅法来分离、提纯蛋⽩质。
蛋⽩质在⽔溶液中的溶解度取决于蛋⽩质分⼦表⾯离⼦周围的⽔分⼦数⽬，亦即主要是由蛋⽩质分⼦外周亲⽔基团与⽔形成⽔化膜的程度以及蛋⽩质分⼦带有电荷的情况决定的。
蛋⽩质溶液中加⼊中性盐后，由于中性盐与⽔分⼦的亲和⼒⼤于蛋⽩质，致使蛋⽩质分⼦周围的⽔化层减弱乃⾄消失。
同时，离⼦强度发⽣改变，蛋⽩质表⾯的电荷⼤量被中和，蛋⽩质溶解度更加降低，之蛋⽩质分⼦之间聚集⽽沉淀。
由于各种蛋⽩质在不同盐浓度中的溶解度不同，不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋⽩质不同，从⽽使之从其他蛋⽩中分离出来。
简单的说就是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加⼊蛋⽩质溶液，使蛋⽩质表⾯电荷被中和以及⽔化膜被破坏，导致蛋⽩质在⽔溶液中的稳定性因素去除⽽沉淀。
由于清蛋⽩的亲⽔性⽐球蛋⽩⼤，且清蛋⽩的分⼦⽐球蛋⽩⼩，所以清蛋⽩需要⾼浓度的盐溶液才能够发⽣盐析，低浓度的时候球蛋⽩发⽣盐析。
盐析法分离蛋⽩质：各种蛋⽩质的颗粒⼤⼩、亲⽔程度、pI不同，盐析所需的盐浓度也不⼀样。
调节盐浓度可使不同的蛋⽩质沉淀，从⽽达到分离的⽬的。
常⽤中性盐：硫酸铵、硫酸钠等。
硫酸铵：温度系数⼩，溶解度⼤，蛋⽩谱⼴，盐析效果好，不易引起变性。
可⽤硫酸/氨⽔按需要调节pH值。
本实验中清蛋⽩分⼦⼩，亲⽔性强，在饱和硫酸铵溶液中可沉淀析出，⽽球蛋⽩分⼦⼤，亲⽔性弱，在半饱和硫酸铵溶液中即可沉淀析出。
分离提纯鉴定血清清蛋白
血清清蛋白的分离、纯化与鉴定2010级检本5班宋立群陈然焦志会张翼鹏王旭东【目的要求】1．了解蛋白质分离提纯的总体思路。
2．了解紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理。
3. 掌握电泳的基本原理；4.掌握盐析法、分子筛层析、离子交换层析等实验原理及操作技术。
5．熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的方法和应用。
6．熟悉紫外分光光度计的使用。
【实验原理】血清中含有清蛋白和各种球蛋白（α-β-γ-球蛋白等），由于它们所带电荷不同、相对分子质量不同，在高浓度盐溶液中的溶解度不同，因此可利用它们在中性盐溶液中溶解度的差异而进行沉淀分离，此法称为盐析法。
本实验应用不同浓度硫酸铵分段盐析法可将血清中清蛋白、球蛋白初步分离。
在半饱和硫酸铵溶液中，血清清蛋白不沉淀，球蛋白沉淀，离心后清蛋白主要在上清液中，沉淀的球蛋白加少量水可使其重新溶解。
用盐析法分离而得的蛋白质含有大量的硫酸铵，会妨碍蛋白质的进一步纯化，因此必须去除，常用的有透析法、凝胶过滤法等。
本实验采用凝胶过滤法，该法是利用蛋白质与无机盐类之间相对分子质量的差异除去粗制品中盐类。
脱盐后的蛋白质溶液再经DEAE（二乙氨乙基）纤维素层析柱进一步纯化。
DEAE纤维素为阴离子交换剂，在pH 6.5的条件下带有正电荷，能吸附带负电荷的清蛋白、α-球蛋白和β-球蛋白（pl分别为4.9、5.06和5.12），而γ-球蛋白（pl7.3）在此条件下带正电荷，不被吸附故直接从层析柱流出。
提高醋酸铵溶液的浓度到0.06 mol/L，DEAE纤维素层析柱上的ß-球蛋白及部分a-球蛋白可被洗脱下来。
将醋酸铵溶液的浓度提高至0.3mol/L，则清蛋白被洗脱下来，此时收集的流出液即为较纯的清蛋白。
经DEAE纤维素阴离于交换柱纯化的清蛋白液往往体积较大，样品质量分数较低。
为便于鉴定，常需浓缩。
浓缩的方法很多，本实验选用聚乙二醇透析浓缩的方法。
蛋白质是两性电解质，在同一pH环境下，混合蛋白质中各种成分带电量不同、分子大小不同，在同一电场中泳动的速度不同，导致相同的时间迁移的距离不同而把它们分开。
血清蛋白质分离实验报告
实验名称：血清蛋白质分离实验实验日期：XXXX年XX月XX日实验地点：实验室实验目的：1. 掌握电泳技术分离血清蛋白质的基本原理和操作方法；2. 了解不同血清蛋白质的等电点、分子量和形状；3. 分析血清蛋白质分离实验结果，并探讨实验误差。
实验原理：血清蛋白质分离实验主要采用醋酸纤维素薄膜电泳法。
该法以醋酸纤维素薄膜为支持物，利用蛋白质在电场中的迁移速度差异进行分离。
由于血清中各种蛋白质的等电点、分子量和形状不同，它们在电场中的迁移速度也不同，从而实现分离。
实验器材与药品：1. 实验器材：醋酸纤维素薄膜、电极、电源、染色液、显色液、显色剂、移液器、离心机、显微镜等；2. 实验药品：血清样品、缓冲液、染色液、显色液、显色剂等。
实验步骤：1. 准备实验器材和药品，检查是否齐全；2. 将血清样品进行适当稀释，以适应实验要求；3. 将醋酸纤维素薄膜剪成适当大小，并在薄膜上点样；4. 将点样的薄膜放入缓冲液中，使蛋白质溶解；5. 将薄膜固定在电极上，连接电源；6. 开启电源，进行电泳分离；7. 电泳完成后，取出薄膜，用染色液染色；8. 将染色后的薄膜放入显色液中，显色；9. 将显色后的薄膜放入显色剂中，显色；10. 使用显微镜观察并记录实验结果。
实验结果与分析：1. 实验结果显示，血清蛋白质在醋酸纤维素薄膜电泳中分离出5条区带，分别为清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和脂蛋白；2. 清蛋白在电泳中迁移速度最快，α-球蛋白次之，β-球蛋白、γ-球蛋白和脂蛋白迁移速度依次减慢；3. 通过比较实验结果与文献报道，发现实验结果与文献报道相符，说明实验方法可行。
实验误差分析：1. 实验过程中，血清样品的稀释倍数和点样量对实验结果有一定影响。
若稀释倍数过大或点样量过少，可能导致区带不明显或无法分离；2. 电泳过程中，缓冲液的pH值和电流强度对蛋白质迁移速度有较大影响。
若pH值过高或过低，电流强度过大或过小，可能导致区带分离不完全或分离速度不均；3. 实验过程中，薄膜的制备和染色操作也可能导致实验误差。
血清的分离实验报告
1. 熟悉血清分离的基本原理和方法。
2. 掌握血清分离实验的操作技能。
3. 了解血清分离在临床医学中的应用。
二、实验原理血清是血液中的液体部分，主要由水、电解质、蛋白质、激素、营养物质等组成。
血清分离实验是将血液中的液体部分与有形成分分离的过程，通常采用离心法进行。
离心法是利用离心机产生的离心力，使血液中的有形成分沉淀，从而分离出血清。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：抗凝剂（如EDTA）、生理盐水、试管、移液器、离心机等。
2. 仪器：离心机、显微镜、培养皿、烧杯等。
四、实验步骤1. 取血液样本：将血液样本加入抗凝剂，充分混匀。
2. 离心：将混匀后的血液样本置于离心管中，以3000r/min的转速离心10分钟。
3. 观察分层：离心完成后，可见血液样本分为三层，上层为血清，中层为有形成分，下层为红细胞。
4. 分离血清：用移液器将上层血清小心移至新的试管中，注意避免将中层有形成分和下层红细胞带入血清。
5. 检查血清：将分离出的血清置于显微镜下观察，确认无红细胞等有形成分。
6. 记录结果：记录分离出的血清量，并计算血清中蛋白质、电解质等指标。
五、实验结果与分析1. 血清分离效果：实验过程中，成功分离出上层血清，无红细胞等有形成分，分离效果良好。
2. 血清量：分离出的血清量为2.5ml，符合实验预期。
3. 血清成分：经检测，分离出的血清中蛋白质含量为60g/L，电解质含量正常。
1. 血清分离实验是临床医学中常用的实验方法，对于疾病的诊断、治疗和预后评估具有重要意义。
2. 实验过程中，应严格按照操作步骤进行，避免因操作不当导致分离效果不佳。
3. 离心速度和离心时间对血清分离效果有较大影响，应根据实验需求选择合适的离心条件。
七、实验结论本次实验成功分离出血液中的血清，验证了血清分离实验的基本原理和方法。
实验过程中，操作规范，分离效果良好，为临床医学提供了可靠的实验数据。
蛋白提纯的实验报告
一、实验目的1. 掌握蛋白质提纯的基本原理和实验操作技术。
2. 学习使用盐析法、凝胶层析法等方法对蛋白质进行提纯。
3. 熟悉蛋白质纯度鉴定方法，如醋酸纤维素薄膜电泳法。
二、实验原理蛋白质提纯是指从混合物中分离出目标蛋白质的过程。
根据蛋白质的性质差异，如分子量、溶解度、电荷等，采用不同的分离方法进行提纯。
1. 盐析法：利用蛋白质在高浓度中性盐溶液中的溶解度差异进行分离。
在高浓度盐溶液中，蛋白质的溶解度降低，可形成沉淀。
通过离心分离，得到含有目标蛋白质的粗制品。
2. 凝胶层析法：根据蛋白质分子量的大小，利用凝胶柱分离不同分子量的蛋白质。
分子量较大的蛋白质无法进入凝胶颗粒的网孔，而分子量较小的蛋白质能进入凝胶颗粒的网孔，从而实现分离。
3. 醋酸纤维素薄膜电泳法：利用蛋白质在电场中的迁移速度差异进行分离。
根据蛋白质的等电点，调节溶液pH值，使蛋白质在电场中迁移至相应位置，从而实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：血清、硫酸铵、Sephadex G-25凝胶、醋酸纤维素薄膜、考马斯亮蓝R-250染料、硝酸、氢氧化钠、丙酮等。
2. 仪器设备：离心机、凝胶层析柱、电泳仪、紫外灯、分析天平、移液器、烧杯、试管等。
四、实验步骤1. 盐析法提纯蛋白质（1）取一定量的血清，加入硫酸铵至饱和，搅拌均匀，静置过夜。
（2）将混合物离心，取沉淀部分，用少量去离子水溶解。
（3）用透析法去除硫酸铵。
2. 凝胶层析法提纯蛋白质（1）将Sephadex G-25凝胶柱装好，用去离子水平衡。
（2）将溶解的蛋白质溶液加入凝胶柱，控制流速。
（3）收集洗脱液，检测蛋白质纯度。
3. 醋酸纤维素薄膜电泳鉴定蛋白质纯度（1）将蛋白质样品点样于醋酸纤维素薄膜上。
（2）将薄膜放入电泳槽中，加入电泳缓冲液。
（3）通电，观察蛋白质迁移情况。
（4）将薄膜取出，用考马斯亮蓝R-250染料染色，观察蛋白质条带。
五、实验结果与分析1. 盐析法提纯蛋白质通过盐析法，成功从血清中提取出目标蛋白质，沉淀量较大，纯度较高。
蛋白分离纯化实验报告
一、实验目的1. 掌握蛋白质分离纯化的基本原理和操作方法。
2. 学习不同分离纯化技术的应用。
3. 提高实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理蛋白质是生物体内重要的生物大分子，具有复杂的结构和功能。
蛋白质分离纯化是研究蛋白质结构和功能的重要手段。
本实验采用多种分离纯化技术，包括：材料预处理、细胞破碎、离心分离、沉淀分离、膜过滤分离和色谱分离等，实现对蛋白质的分离纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：大肠杆菌细胞、质粒DNA、限制性内切酶、DNA连接酶、PCR产物、琼脂糖、电泳缓冲液、考马斯亮蓝R-250等。
2. 实验仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机、移液器、玻璃棒、培养箱、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 蛋白质提取（1）将大肠杆菌细胞培养至对数生长期。
（2）收集细胞，用玻璃棒搅拌，加入预冷的提取缓冲液，低温条件下进行细胞破碎。
（3）离心分离，取上清液即为蛋白质粗提液。
2. 蛋白质沉淀（1）向蛋白质粗提液中加入一定量的硫酸铵，搅拌溶解。
（2）离心分离，收集沉淀，即为蛋白质沉淀。
3. 蛋白质溶解（1）将蛋白质沉淀溶解于适量的缓冲液中。
（2）调整pH值，使蛋白质处于适宜的溶解状态。
4. 蛋白质分离纯化（1）离子交换色谱：将蛋白质溶液上样至离子交换柱，用不同浓度的盐溶液进行梯度洗脱，收集目标蛋白峰。
（2）凝胶过滤色谱：将蛋白质溶液上样至凝胶过滤柱，用缓冲液进行洗脱，收集目标蛋白峰。
5. 蛋白质鉴定（1）聚丙烯酰胺凝胶电泳：将分离纯化的蛋白质样品进行SDS-PAGE电泳，分析蛋白质分子量。
（2）考马斯亮蓝R-250染色：观察蛋白质条带，判断蛋白质纯度。
五、实验结果与分析1. 蛋白质提取：通过细胞破碎和离心分离，成功提取出大肠杆菌细胞中的蛋白质。
2. 蛋白质沉淀：硫酸铵沉淀法成功地将蛋白质从粗提液中分离出来。
3. 蛋白质溶解：调整pH值后，蛋白质成功溶解于缓冲液中。
4. 蛋白质分离纯化：离子交换色谱和凝胶过滤色谱成功地将目标蛋白从粗提液中分离出来。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
生物化学实验报告
姓名：
学号：
专业年级：
组别：
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称血清清蛋白、γ蛋白分离提纯与纯度鉴定
实验日期2018-12-27实验地点
合作者指导老师
评分教师签名批改日期
格式要求：正文请统一用：小四号，宋体，1.5倍行距；数字、英文用Times New Roman；标题用：四号，黑体，加粗。
需强调的地方请用蓝颜色标出。
不得出现多行、多页空白现象。
一、实验目的
1.掌握盐析法分离蛋白质的原理和基本方法
2.掌握凝胶层析法分离蛋白质的原理和基本方法
3.掌握离子交换层析法分离蛋白质的原理和基本方法
4.掌握醋酸纤维素薄膜电泳法的原理和基本方法
5.了解柱层析技术
二、实验原理
蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。
不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。
利用这些性质的差别，可分离纯化各种蛋白质。
三、材料与方法：以流程图示意
材料：人混合血清、葡聚糖凝胶G-25(Sephadex G-25)层析柱、二乙基氨基乙基(DEAE)、纤维素离子交换层析柱、饱和硫酸铵溶液、各不同浓度的醋酸铵缓冲溶液、20%磺基水杨酸溶液、1%BaCl2溶液
器材：层析柱、电泳仪、电泳槽等
操作方法：
取浓度最高的一管做纯度鉴定。
2管均作纯度鉴定
最后DEAE-纤维柱先用6ml 1.5mol/L NaCl-0.3mol/LNH4AC溶液流洗，再用10ml 0.02mol/L NH4AC 缓冲液流洗再生平衡。
醋酸纤维素薄膜电泳：
点样（粗面）→电泳→染色和漂洗
注意：
①点样线尽量点得细窄而均匀
②电泳时薄膜粗面朝下、点样端置阴极端、两端紧贴在滤纸盐桥上，膜应轻轻拉平，切勿使点样处与电泳槽接触
③电泳完毕后，关闭电源，将膜取出，直接浸于染色液中5min。
取出膜，尽量沥净染色液，移入漂洗液中浸洗脱色（一般更换2次），至背景颜色脱净为止。
取出膜，用滤纸吸干即可。
四、结果与讨论：①结果：实验数据、现象、图谱；②讨论：以结果为基础的逻辑推论，并得出结论。
从上到下分别为血清、清蛋白一、清蛋白二、球蛋白。
从上图可以看出，此次实验结果不太理想，血清电泳结果只有两条带，推测原因有
①血清点样时量不足
②点样时手法不恰当
③血清不新鲜
同样清蛋白提取液只出现了一条不明显的条带，球蛋白提取液未出现条带，推测可能的原因是
①提取时错使蛋白质峰液流失
②上一组同学使用层析柱时将液体流干使柱内进入空气
③血清不新鲜，有细菌滋生
思考题：
（1）硫酸铵盐析一步,为什么是0.8ml血清加0.8ml饱和硫酸铵?
因为清蛋白和球蛋白的盐析浓度不一样，使用半饱和硫酸铵溶液可以使球蛋白沉淀而清蛋白不沉淀，0.8ml血清和0.8ml饱和硫酸铵混合可以形成半饱和硫酸铵溶液从而达到分离的目的。
（2）为什么实验中DEAE纤维素柱分离γ-球蛋白后不用再生,可直接用于纯化清蛋白? 因为DEAE纤维素带正电荷，是一种阴离子交换剂，而γ-球蛋白带正电荷，不与DEAE纤维素结合，会从层析柱中首先洗脱出来。
所以DEAE纤维素柱分离γ-球蛋白后可直接用于纯化清蛋白。
（3）应用醋酸纤维素薄膜电泳鉴定分离纯化后的血清清蛋白和γ-球蛋白的纯度,根据什么来确定它是清蛋白还是γ-球蛋白?判定它们纯度的依据是什么?
血清中含有清蛋白，α-球蛋白，β-球蛋白，γ-球蛋白等蛋白质，每种蛋白质均具有其不同的等电点、氨基酸立体构象和相对分子质量，因此在同一电场中也具有不同的泳动速度。
据此分离后将薄膜置于染色液中使蛋白质固定并染色，可见清晰的条带。
根据上图数据分析，用此方法分离的蛋白条带从阳极至阴极的顺序应为：清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。
因此可以根据各蛋白质条带的位置与样品健康人血清各蛋白质条带的位置对比来确定γ-球蛋白和清蛋白。
判断纯度的依据是：若分离提纯得到的清蛋白和γ-球蛋白各仅有一条蛋白质条带，其他位置没有条带，则为杂质较少，纯度较高。