LC—MS／MS法测定吸烟者和被动吸烟者尿液中的烟碱及其代谢物
液相色谱-串联质谱法测定尿液中的可替宁
２１ ． ｍｍ，． ｍ） 离 ， ０ １ 甲酸 水 溶 液 一． 乙酸 甲醇 溶 液 为 流 动 相 ， 用 梯 度 洗 脱 方 式 ， 电喷 雾 离 ３５ 分 以 ． ０１ 采 以
含 量 的升 高 而升 高 。
关键词 ： 替宁 ； 可 高效 液相 色谱 一 串联 质 谱 ； 液 ； 国烤 烟 型 卷 烟 尿 中
中 图 分 类 号 ： ５ ． ３ Ｏ ６ ７ ６ 文 献标 识 码 ： ・ 文章 编 号 ：０ ４ ２ ９ （ ０ ２ ０ —２ ２ ０ Ａ １ ０—９ ７ ２ １ ）４０ ５—５
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ａ ｇ ｐ ｒｏｒ ｎｃ ｉ ｉ ｃ ｏ ａ ｏｇ ａ ｈｙ ｅ ｅ ｔ ｏ ｐｒ ｙ ｏｎ ｚ ｔｏ ａ ｄｅ ｍ ａ ｓ ｈｉ ｈ ｅ ｆ ｍａ ｅ ｌｑｕ ｄ ｈｒ ｍ ｔ ｒ ｐ — ｌ ｃ ｒ ｓ ａ ｉ ｉａ ｉ ｎ ｔ ｎ ｍ ｓ
ｓ ｅ ｔｏ ｅｒ （ — ＩＭ Ｓ Ｍ Ｓ） ｅｈ ｄ ｗａ ｅ ｅｏ ｅ ｏ ｈ ｅｅ ｍｉ ａｉｎ ｏ ｏ ｉ ｉｅ ｉ ｐ ｃｒ ｍ ｔｙ ＬＣ ＥＳ — ／ ｍ ｔ ｏ ｓ ｄ ｖ ｌｐ ｄ ｆ ｒｔ ｅ ｄ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆｃ ｔ ｎ ｎ ｎ
子 源 正 离 子 多 反 应 监 测 模 式 进 行 分 析 。方 法 检 出 限 为 ０ ０ ｇ Ｌ， 性 范 围 为 １ ５ ０／ ／ 空 白样 品 中加 ． ８ｐ ／ 线 ～ ０ ￣ ， ｇ
标 回收 率 范 围在 ９ ． ～ ９ ． ， 密 度 （ 相对 标 准 偏 差 计 ） ０ ～ ３ ２ 。利 用 此 方 法 检 测 了 ５ ４３ ９９ 精 以 为 ． ８个 非 吸 烟 者 和 ２ ６个 吸 烟 者 尿 液 中 可 替 宁 的 含 量 水 平 ， 果 表 明 ： 烟 者 ２ ４ 结 吸 ４ｈ尿 液 中 的 可 替 宁含 量 是 非 吸 烟 者 的 １０多 倍 ， 是 由 于个 体 之 间 以及 吸 烟 行 为 之 间 的差 异 ， 液 中 的 可 替 宁 含量 并不 随卷 烟 主 流 烟 气 中 烟 碱 ８ 但 尿
液相色谱-串联质谱法测定尿液中的可替宁
液相色谱-串联质谱法测定尿液中的可替宁刘彤;侯宏卫;张小涛;陈欢;唐纲岭;胡清源【摘要】为了准确测定吸烟者与非吸烟者尿液中可替宁含量水平,建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法.尿液经稀释、离心和过滤,引入LC-MS/MS,经Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5 μm)分离,以0.1％甲酸水溶液-0.1％乙酸甲醇溶液为流动相,采用梯度洗脱方式,以电喷雾离子源正离子多反应监测模式进行分析.方法检出限为0.08 μg/L,线性范围为1～500 μg/L,空白样品中加标回收率范围在94.3％～99.9％,精密度(以相对标准偏差计)为0％～3.2％.利用此方法检测了58个非吸烟者和246个吸烟者尿液中可替宁的含量水平,结果表明:吸烟者24 h尿液中的可替宁含量是非吸烟者的180多倍,但是由于个体之间以及吸烟行为之间的差异,尿液中的可替宁含量并不随卷烟主流烟气中烟碱含量的升高而升高.%A high performance liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS) method was developed for the determination of cotinine in urine. After dilution, centrifugation and filtration, the urine was injected to the LC-MS/ MS. The analysis was performed on a Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 column (150 mm× 2. 1 mm, 3. 5μm) using a gradient elution with the mobile phases of 0. 1% formic acid buffer and 0.1% acetate in methanol (V/V), and determined by tandem mass spectrometry in positive ESI mode under multiple reaction monitoring mode. The limits of determination (S/N=3) was 0. 08 μg/L, with a linear calibration range spanning 1-500 μg/L. The recoveris ranged from 94. 3% to 99. 9% at three spiked levels, the relative standard deviations (RSDs) ranged from 0 to 3. 2%. The method wasapplied to detect the concertrationrnof urine cotinine from 58 non-smokers and 246 smokers. Twenty-four hours urine cotinine . levels in smokers was much more than 180 times that in non-smokers. However, due to the differences between individuals and smoking behavior, the concertration of urine cotinine did not increase with cigarettes nicotine in the mainstream smoke.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2012(033)004【总页数】5页(P252-256)【关键词】可替宁;高效液相色谱-串联质谱;尿液;中国烤烟型卷烟【作者】刘彤;侯宏卫;张小涛;陈欢;唐纲岭;胡清源【作者单位】国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001;国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001;国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001;国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001;国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001;国家烟草质量监督检验中心,河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】O657.63烟碱，俗称尼古丁，是一种存在于茄科植物（茄属）中的生物碱，也是烟草的重要成分，占烟草中总生物碱的98%［1］。
3烟草中农残检测技术LC-MSMS
V——提取步骤提取剂乙腈的使用体积，单位为毫升（mL）； m——样品质量，单位为克（g）； w——样品的水分含量，%（质量分数）。
不同稀释倍数基质标准曲线响应强度变化
2.00E+07 1.80E+07 1.60E+07 1.40E+07 1.20E+07 1.00E+07 8.00E+06 6.00E+06 4.00E+06 2.00E+06 0.00E+00
D、除草剂
异噁草松、双苯酰草胺、吡氟禾草灵、喹禾灵、克草敌、 敌草胺、甲草胺、异丙甲草胺
E、其它杀虫剂
啶虫脒、除虫脲、吡虫啉、吡蚜酮、噻虫嗪
常见检出的农药
杀菌剂：腈菌唑、霜霉威、甲霜灵、苯霜灵、多菌灵、甲 基硫菌灵、稻瘟灵、烯酰吗啉、恶霜灵、三唑醇、三唑酮、 异菌脲
除草剂：甲草胺、二甲戊灵、异噁草松
相对等浓度标准溶液的响应强度（~1ppb）
需要注意的问题
✓ 样品含水率对于萃取乃至回收率影响很大
✓ 调整样品含水率，2g样品添加10mL水
✓ 基质效应基本上引起响应信号的下降 ✓ 不同基质的影响趋势一致，但幅度有差别 ✓ 相同基质对不同目标物的影响差别很大
✓ 基质标准曲线的应用，结合内标
✓ 稀释有助于减小基质效应，但效果有限
仪器设备因素
重复性差检查步骤 − 气帘气(Curtain Gas)太低，会有周期性降低现象。 − 采样时间(Dwell Time)太长，每个色谱峰采样点太少，至少十几点，采样时 间 太短则噪声太高，信噪比不好。 − 新色谱柱没有充分平衡，旧色谱柱老化，重新清洗活化，或更换。 − 源温度太高，样品分解。 − 加样前与标准液分别平行做处理，观察有无区别, 若标准品溶液无问题，而样 品重复性差，则问题可能出在基质的干扰或前处理方法不当。 − 稀释配制样品的移液枪，移液管，容量瓶等有无污染问题。 − 梯度洗脱后平衡时间不够，或脏东西没洗干净，累积使得重复性差 重复性差 重复性差 重复性差，应彻底冲洗柱子。 − 当液氮剩不多时，及使用钢瓶时，尤其注意压力变化。 − 流动相虽有在线脱气，但装入瓶后超声还是必要的。
国务院关于公共场所严禁吸烟的规定
国务院关于公共场所严禁吸烟的规定第一条为了保障人民身体健康，保护公共环境，减少吸烟造成的危害，根据有关法律、法规，结合本市实际，制定本规定。
第二条下列公共场所禁止吸烟：（一）影剧院、歌舞厅、音乐厅、录像放映厅、游艺厅（室）；（二）会议厅（室）、礼堂；（三）图书馆、档案馆、科技管、博物馆、展览馆、文化馆等室内活动场所；（四）托儿所、幼儿园；（五）中小学的教室、寝室、活动室，其他各类学校的室内教学、活动场所；（六）商店、书店、邮电业、金融业的营业（交易）厅；（七）医疗机构的挂号区、候诊区、诊疗区和病房区；（八）电梯间和公共交通工具内，汽车站、海港客运站的候车（船）厅、售票厅；（九）市人民政府确定其他公共场所。
禁止吸烟的公共场所的管理单位，有条件的可以设立吸烟室（区）。
第三条市卫生行政管理部门是本行政区域内公共场所禁止吸烟的主管部门，负责本规定的组织实施和监督检查。
宣传、教育、文化、新闻等部门应当开展吸烟有害健康和公共场所禁止吸烟的宣传教育。
第四条机关、团体、企事业单位可以在本单位内部确定出本规定以外的禁止吸烟的场所。
鼓励创建无吸烟先进单位。
第五条禁止吸烟的公共场所管理单位应当履行下列职责：（一）制定本单位禁止吸烟的制度和措施；（二）在禁止吸烟的公共场所设置统一的禁止吸烟标志；（三）在禁止吸烟的公共场所不得设置吸烟器具和附有烟草广告的标志。
禁止吸烟的公共场所的管理单位应当配备检查人员。
第六条在禁止吸烟的公共场所，公民有权要求吸烟者停止吸烟；有权要求禁止吸烟的公共场所的管理单位履行本规定的职责；有权向卫生行政管理部门举报违反规定的行为。
第七条检查人员对在本单位范围内禁止吸烟的公共场所吸烟者，应当予以制止，并可处以十元罚款。
检查人员对吸烟者做出行政处罚决定时，应当向当事人出示由市人民政府统一印制的执法身份证件，填写预定格式、编有号码的行政处罚决定书，当场交付当事人。
第八条禁止吸烟的公共场所的管理单位违反本规定第六条规定的，由卫生行政管理部门予以警告，责令限期改正，对逾期不改正的，处以五百元以上三千元以下罚款。
吸烟危害知识册
吸烟危害知识册-机械工程学院机132班“无烟校园”团日活动制-机132班团支部制目录一．吸烟-燃烧生命二．二手烟-隐形的杀手三．戒烟-永远不晚四．铭记-吸烟知识问答吸烟是在燃烧生命！！！一．吸烟-燃烧生命吸烟的害处很多，它不但吞噬吸咽者的健康和生命，还会污染空气，危害他人。
一、肺部疾病：香烟燃烧时释放38种有毒化学物质，其中有害成份主要有焦油、一氧化碳、尼古丁、二恶英和刺激性烟雾等。
焦油对口腔、喉部、气管、肺部均有损害。
烟草烟雾中的焦油沉积在肺部绒毛上，破坏了绒毛的功能，使痰增加，使支气管发生慢性病变，气管炎、肺气肿、肺心病肺癌便会产生。
据统计吸咽的人60岁以后患肺部疾病的比例为74%，而不吸烟的人60岁以后患肺部疾病的比例仅为4%，这是一个触目惊心的数字。
二、心血管疾病：香烟中的一氧化碳使血液中的氧气含量减少，造成相关的高血压等疾病。
吸烟使冠状动脉血管收缩，使供备量减少或阻塞，造成心肌梗塞。
吸烟可肾上腺素增加，引起心跳加快，心脏负荷加重，影响血液循环而导致心脑血管疾病、糖尿病、猝死综合症，呼吸功能下降、中风等共20多种疾病。
三、吸烟致癌：研究发现，吸烟是产生自由基最快最多的方式，每吸一口烟至少会产生10万个自由基，从而导致癌症和许多慢性病。
最近，英国牛津提德克里夫医院对3.5万名吸烟者进行长达50年的研究得出了结论，结果显示，肺癌、胃癌、胰腺癌、膀胱癌、肝癌、口腔癌、鼻窦癌等到11种癌症与吸烟“显著相关”。
为什么吸烟的人容易感冒，是因为人体的淋巴细胞活性降低，导致癌症。
鉴于吸烟致烟致癌的三大因素，戒烟要越早越好。
四、吸烟还会导致骨质疏松，更年期提早来临。
吸烟可使男性丧失性功能和生育功能。
孕妇吸烟可导致胎儿早产及体重不足，流产机率增高。
吸烟使牙齿变黄容易口臭。
吸烟害人害已，被动吸烟的人受到危害是吸烟人的五倍。
为了你和家人的健康，不让自已成为烟的奴隶，应尽早戒烟。
五、吸烟对智力的危害。
吸烟可使人的注意力受到影响。
吸烟对孕妇及胎儿的健康影响
题目：吸烟对孕妇及幼儿健康影响的综述学院：医学检验学院姓名：马正根班级：1班学号：11203010030孕妇吸烟或被动吸烟都会严重影响胎儿生长发育。
本综述旨在重点收集有关吸烟对胎儿造成的影响。
帮助读者了解吸烟对胎儿的危害及其有关研究的进展。
根据香烟烟雾的形成过程，可将香烟烟雾分为主流烟雾和测流烟雾两类。
孕妇吸烟对胎儿的发育和健康是非常不利的。
烟草中含有大量的有毒物质，除大家所熟知的尼古丁外，还有氢氰酸、氨、一氧化碳、二氧化碳、吡啶、芳香族化合物和焦油等。
这些有毒物质可以随着烟雾被吸收到母体血液中，使母体内的血氧含量降低，胎盘中的血氧含量也随之减少。
胎儿由于缺氧，可造成生长发育迟缓，故吸烟孕妇所生的低体重儿（体重低于2500克）是不吸烟妇女的两倍。
这些婴儿不仅体质弱，且出生一年内患严重疾病的危险性大，死亡率高。
近年来的不少研究还表明，吸烟孕妇比不吸烟孕妇较易发生流产、早产和死胎。
（一）吸烟对胎儿生长的影响及其机制吸烟可使胎儿生长迟缓，并易发生早产而致出生体重降低。
研究证实，吸烟可增加胎儿宫内发育迟缓（IUGR）的发病率。
孕期被动吸烟的早产发生率明显高于无被动吸烟组（14.00%，4.66%，P<0.01），过期产、死胎死产、胎膜早破也明显高于无被动吸烟组（P<0.05~P<0.01）。
孕期被动吸烟的新生儿出生低体重发生率也明显高于无被动吸烟组（14.98%，7.25%，P<0.01）。
其有关机制如下：1、孕期被动吸入香烟燃烧中形成的有害物质，其中尼古丁有缩血管作用。
其作用于交感神经节，使交感肾上腺系统兴奋性增加，释放到血中的乙酰胆碱和儿茶酚胺增加，减少子宫-胎盘血流，导致胎儿的营养供应不足。
2、香烟产生的一氧化碳通过肺泡吸收后，与血红蛋白结合形成稳定的碳氧血红蛋白，其亲和力比氧大200~300倍，解离率比氧小3 600倍，从而降低了氧与血红蛋白及肌红蛋白的结合能力，减少母血和胎血的含氧量，同时抑制碳酸酐酶的活性，影响母体及胎儿组织中二氧化碳转运。
《烟草科技》第9期目次
脱氧 果糖嗪规模化合成 工艺研 究 李 鹏 ，宗永立 ，胡 卷烟主流烟 气中挥发性醛酮 的 Ｌ — ／ Ｃ ＭＳＭＳ分析
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
பைடு நூலகம்
军 ，等
许 自成 ，李 丹 丹 ，毕 庆 文 ，等
白肋 烟 品 种 资 源 的聚 类 分析
… … … … … … … … … … …
ＧＤ包装机条外透 明纸检测装置 的设计应用
毅 ，等
… … … … … … … … … … … …
林 国平 ，蔡 长 春 ，王
潘 安 岳 ，覃 成 林 ， 曾令 金
绿肥、 鸡粪和钙肥使 用对新垦红壤土壤肥力和烟草 生长的影
现 代 烟 草 农 业 科 技 进 步 的 成 效 、 问题 与 对 策 思考
… … … … … … … … … … … …
黄 元 炯 ，刘 建 波 ， 石
威
超声超 临界流 体萃取烟叶 中的烟碱
… … … … … … … … … … … …
伟 ， 李 桂 锋
大 户 种 植 对 烟 叶 生产 町持 续 发 展 的 影 响 … … … … 柴 建 国
魏玉玲 ，李雪梅 ，常
宇 ，等
不 同混 丝模 式对烟丝掺配效果 的影响
… … … … … … … … … … …
２ ７ ｍｍ 滤 嘴长卷烟材料 多因素对 主流烟气递送量及过滤效 率的影响… … … … … … … 魏玉玲 ，冯洪涛 ，代家红 ，等
超 临 界流 体 技 术 在 废 次 烟 叶 中提 取 纯 化 茄尼 醇 的 应 用
UPLCMSMS法同时检测人尿液中布格呋喃代谢物M1和M2_杨芬
枢单胺神经递质的作用有关［4］。
有较高的排泄量。而粪便中 M1 和 M2 的回收率仅
在临床前研究中，通过给大鼠口服氚标记的药 为 0.11%，那么有可能在尿液中有较高的回收率。另
物已经得到了布格呋喃的排泄途径和物料平衡的相 外，由于质谱检测的丰度跟化合物的离子化程度高度
关信息。放射性药物的平均回收率为 80%，其中尿 相关，并不能直接反映其浓度。因此，本文拟建立尿
* “重大新药创制”科技重大专项基金（编号：2008ZX09312-016） ** 通信作者 Tel： （010）69158366；E-mail：pk.frosh@
第一作者 Tel： （010）88196850；E-mail：yf7854@
Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis
6，7-hexahydro-2，2，5a-trimethyl-α-propyl（M1）和 天平。
药物分析杂志
Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis
药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
·1 5 9 1·
对 照 品 M1、M2 和 内 标 7H-3，9a-Methano-1- 液、工作液、标准曲线样品、质控样本均保存在 -30 ℃
药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
代谢分析
·1 5 8 9·
UPLC-MS/MS 法同时检测人尿液中布格呋喃代谢物 M1 和 M2*
杨芬 1，2，王洪允 1，陈霞 1，胡蓓 1，江骥 1**
（1. 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院，北京 100730；2. 北京肿瘤医院，北京 100142）