“敏筛”说明书
超敏C反应蛋白测定试纸(胶体金免疫层析法)产品技术要求泰杰伟业

超敏C反应蛋白测定试纸(胶体金免疫层析法)适用范围:用于体外定量测定人全血/血清/血浆样本中C反应蛋白(CRP)含量。
1.1包装规格卡型1人份、10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。
1.2主要组成成分每盒含10、20或50人份测定试纸和1张校准信息卡。
每人份测定试纸包括1人份hs-CRP测定试纸条、1包干燥剂和1支滴管。
hs-CRP测定试纸由玻璃纤维素膜(样品垫)、NC膜(T线包被鼠抗人CRP单克隆抗体;C线包被羊抗鼠IgG 多克隆抗体)、聚酯纤维素膜(包被胶体金标记的鼠抗人CRP单克隆抗体)、滤血膜、吸水纸、PVC胶板组成。
2.1物理性状2.1.1 外观测定试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固;标签字迹清晰,无破损。
2.1.2 膜条宽度测定试纸的膜条宽度不小于2.5mm。
2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。
2.2 空白限空白限应不高于0.5μg/mL。
2.3 精密度2.3.1重复性CV 应不高于10.0%。
2.3.2 批间差CV 应不高于15.0%。
2.4剂量-反应曲线的线性2.4.1线性相关系数在[0.5,64] μg/mL的范围内,用线性拟合公式拟合,剂量-反应曲线相关系数r应不低于0.99。
2.4.2线性相对偏差在(3,64]μg/mL的范围内,线性相对偏差应在±15%范围内。
2.4.3线性绝对偏差在[0.5,3] μg/mL的范围内,线性绝对偏差应不大于±0.45μg/mL。
2.5 准确度检测CRP抗原,样本回收率应在85%~115%范围内。
2.6特异性用浓度为100mg/L血清蛋白P溶液检测超敏C反应蛋白测定试纸,检测结果应小于0.5μg/mL。
2.7稳定性将测定试纸在4℃~30℃的环境中放置18个月后,取样分别检测2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6项,结果应符合各项目的要求。
过敏原特异性抗体igeelisa检测试剂盒说明书

过敏原特异性抗体IgE ELISA 检测试剂盒说明书【用途】定性和定量检测过敏原特异性人IgE。
过敏反应是一种特殊的病理性免疫反应,是人体对一种或多种原本无害的物质产生不正常的反应。
其主要原因是患者吸入或食入含有过敏性物体刺激机体,触发细胞大量分泌药理活性物质,引起一系列过敏症状,例如过敏性哮喘,过敏性鼻炎,湿疹、发痒、流泪、皮炎以及肠胃道过敏症等。
同时产生相当量的E型免疫球蛋白(Immunoglobulin E 即Ig E),引起人类过敏反应的过敏原种类繁多,如能从中查到引起机体过敏的物质,就能很好地预防和治疗过敏反应。
本检测盒是一种用酶联免疫法(ELISA)快速、精确测定体内引起过敏反应的特异E型免疫球蛋白的体外诊断工具。
它可定性和定量地测定人体抗特种过敏原的E型免疫球蛋白在血清中的水平,从而帮助医生正确地诊断引起病人过敏反应的过敏原。
本过敏原检测盒适合于广泛的过敏原检测,特别适用于少儿患者,同时也非常适用于湿疹以及其他皮肤病患者和对皮试过敏的患者。
【检测原理】本试剂盒采用酶免ELISA法。
当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后,血清中特异性IgE(一抗)就会特异地结合到抗原上,此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识别,加入显色剂后,二抗所联的酶使显色剂呈蓝色,加终止液后呈黄色。
显色的深度与血清中特异性IgE成正比;能定性/半定量地检测血清中特异性IgE的浓度。
【检测盒组成】过敏原包被微孔酶标板(Coated Wells) 96wells HRP酶联二抗12 ml浓缩洗涤液(15X)(Washing Conc.) 40ml×1 TMB单组分显色液12 ml硫酸终止液(Stop Solution) 12ml 样本稀释液(Sample Diluent) 12 ml【检测动态范围】0.35 ~100 IU/ml (0.84ng ~ 240 ng/ml)。
【重现性】CV 10%~15%【重现性】0.30IU/ml (0.72ng/ml)【注意事项】1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。
皮肤科“敏筛”定量过敏原检测介绍

皮肤科“敏筛”定量过敏原检测介绍日前,我院皮肤科新引进德国Medlwlss“敏筛”定量过敏原检测系统专门进行过敏原检测,采用免疫印迹方法,定量检测人血清中过敏原特异性IgE抗体(sIgE) 、3ml,不受药物及食物影响,可以进行极微量的抗原操作简单、方便,只需抽血2~检测,灵敏快速,结果精确可靠,为医生的诊断提供更为准确的依据,为患者与医生提供了一种新的治疗方法。
(1月1日开始)。
1.检测范围:该项检测可以检测30种过敏原,其中吸入性17种如:户尘螨、粉尘螨、矮豚草、蒿、猫毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、点青霉、分枝孢霉、烟曲霉、交链孢霉、柏、榆、梧桐、柳、三角叶杨、葎草;食入性13种如:鸡蛋白、鸡蛋黄、牛奶、鱼、虾、蟹、牛肉、羊肉、腰果、花生、黄豆、芒果、小麦、总IgE。
2.适应症:主要是为寻找Ⅰ型变态反应过敏性疾病的过敏原及进行针对性的脱敏治疗,常见疾病有:1) 婴儿湿疹,过敏性哮喘、花粉症、真菌变态性反应疾病。
2) 各种过敏性皮肤病:湿疹、荨麻疹、异位性皮炎、过敏性紫癜,季节性再发性面部皮炎等。
3) 由于食物或吸入物过敏引起的过敏性鼻炎,结膜炎,花粉症,支气管哮喘。
4) 过敏性结肠炎,过敏性胃肠病等。
这些疾病一般都是人体对外界物质过敏所引起,如果通过过敏原检测找到过敏物质,就等于找到了“病根”,可以根据找到的过敏原制定治疗方案根除疾病3.过敏原检测结果的意义“敏筛”定量过敏原检测系统可以检测出30种生活中的常见过敏原,可以对大多数过敏性疾病做出解释。
但大自然中过敏原远远多于这些,有时也可能检测不出结果,证明患者的过敏原因是生活中较少见的物质,这也有利于医生和患者去寻找过敏原。
另外当患者体内出现IgE抗体衰竭时也会出现阴性结果。
4. 过敏原检测的费用我科过敏原检测每次收费400元,同样的检测远低于大医院每次600~750元的价格,无论是从费用还是从方便性上了都为过敏性皮肤病患者带来了福音。
5检验单的开据和标本送检临床医生可在检验单检验项目栏题写“特殊变应原检测×8项”,抽取患者3ml血液随时送皮肤科检测即可。
常用试敏操作规程表

常用试敏操作规程表试敏操作规程表1. 概述试敏操作是针对化学物质、药物或食物过敏的检测方法,用于确定个体对特定物质的过敏反应。
以下是一份常用的试敏操作规程表,旨在提供准确可靠的操作指导。
2. 实验前准备2.1. 实验室应具备充足的试敏试剂,包括常用的常规测试物质和特殊测试物质。
2.2. 实验室应配备必要的设备和工具,例如称量器、试剂瓶、试管、移液枪等。
2.3. 操作人员应具备相关的专业知识和技能,并理解试敏操作的原理和流程。
3. 试敏操作流程以下是一般的试敏操作流程,具体操作步骤可根据试验要求进行调整。
3.1. 检测前准备:3.1.1. 根据试验要求准备标准曲线所需浓度的常规测试物质溶液。
3.1.2. 将特殊测试物质按要求制备成所需浓度的溶液。
3.1.3. 检查检测设备的工作状态,确保其正常运行。
3.1.4. 清洁工作台和试验器材,准备好所需的实验用品。
3.2. 标准曲线制备:3.2.1. 进行稀释系列浓度的常规测试物质溶液,按照稀释倍数稀释。
3.2.2. 取适量的每个稀释溶液,加入相应的试剂反应。
3.2.3. 按照实验要求对每个稀释溶液进行检测,记录各个浓度下的检测结果。
3.3. 试样测定:3.3.1. 取特殊测试物质样品,根据试验需求合理调整其浓度。
3.3.2. 将试样加入试剂,进行反应。
3.3.3. 根据实验要求,通过观察变色、沉淀形成等方式判断试样是否产生过敏反应。
3.3.4. 记录实验结果,包括颜色变化、反应时间等。
3.4. 数据处理:3.4.1. 将标准曲线的浓度和相应的检测结果绘制成图表。
3.4.2. 根据试样的反应情况,在标准曲线上找出相应的浓度。
3.4.3. 根据实验原理,判断试样的过敏程度。
4. 安全注意事项4.1. 操作人员应佩戴适当的个人防护用品,包括实验手套、口罩和实验服。
4.2. 避免直接接触试剂和试样,尽量使用工具和设备进行操作。
4.3. 工作台面和实验器材应定期清洁,防止交叉污染。
“敏筛”说明书

Instruction manual (说明书):AllergyScreen过敏原检测试剂盒1.用途AllergyScreen过敏原定量检测系统采用免疫印迹方法,定量检测人血清中过敏原特异性IgE抗体。
2.概述IgE免疫球蛋白发现始于1964年,它在I型变态反应发生机制中起重要作用。
免疫应答时B淋巴细胞分化成熟为浆细胞,并合成和分泌不同类型的抗体。
该过程由Th和Ts细胞调节,如果调节失控,通常不会造成损害的抗原也能激发免疫应答,刺激抗原特异性B细胞分化成熟为浆细胞,并产生IgE抗体, IgE抗体通过Fc段同嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面Fc受体结合。
当同一变应原再次进入机体,直接作用于IgE,并通过它的决定簇与IgE分子Fab段间的结合,形成IgE 受体聚集成片,这些变化最终导致嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒释放组胺等生物活性物质,从而产生如麻疹`荨麻疹、皮炎、关节炎,枯草热(过敏性鼻炎)`哮喘及过敏性休克等典型的I型变态反应症状。
3.检测原理特异性过敏原被吸附于硝酸纤维素膜表面,置于反应槽中。
用移液器加入病人血清,室温下孵育,标本中过敏原特异性的IgE抗体与过敏原发生反应,并连接在硝酸纤维素膜上。
将多余的抗体冲洗脱掉,再加入标记了生物素的抗人IgE 抗体,室温下孵育,冲脱未结合上的抗抗体。
然后加入结合有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素,室温下孵育,链霉亲和素和生物素结合。
将未结合上的酶标链霉亲和素冲洗干净。
当再加入BCIP/NBT酶作用底物并孵育后,碱性磷酸酶发生特定的酶显色反应,试剂条上出现沉淀。
颜色深浅与血清中sIgE抗体含量成正比。
待试剂条干燥后,CCD相机照相,读取检测结果。
4.检测系统组成每套检测系统包括:1×12 检测条:标记有20种过敏原的硝酸纤维素膜,置于塑料反应槽中(混合过敏原组,吸入组,食物组)1×洗脱液:(TRIS/NaCl,包含0.1%NaN3)可稀释成1x500ml 的清洗液,pH=7.5 (20ml)1×标记有生物素的抗人IgE抗体(白盖,多抗),含 0.1%NaN3 1×酶标链霉亲和素(红盖),连接有碱性磷酸酶的链霉亲和素1×底物(蓝盖),BCIP/NBT12×加样吸管(300微升)1×使用说明书5.未提供的实验所需的其他工具5.1稀释液蒸馏水或去离子水5.2 其他搅拌器;量筒(500毫升),500毫升洗瓶,具10个不同板型的洗板机(也可无),避光的孵育箱(具体要求见MEDIWISS说明书);水平混匀器;电吹风(也可无);专用阅读仪(RAPID READER)和电脑(Windows98,Windows2000 ME或Windows2000 PROF 带USB接口)及打印机。
梅毒螺旋体抗体(酶联免疫法)

梅毒螺旋体抗体(酶联免疫法)1、原理:本试剂盒采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理。
在微孔条上预包被梅毒螺旋体抗体基因重组抗原,配以酶标记抗原及TMB显色剂等其他试剂,检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。
2、标本采集与处理?2.1 受检者准备:对于体检对象抽血前保持平时的饮食习惯,采血前应禁食4-6小时。
2.2静脉采血:除非是卧床病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,因此影响测定水平。
故在采血前至少应静坐5分钟。
一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3采血管:一般采用血清做检验,可以用一般洁净的塑料管或玻璃试管作为容器。
2.4标本处理:血液标本应尽快地送实验室。
本试剂使用样品为人血清或血浆,含EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。
2.5标本接收:接收标本时应检查标本是否符合要求(要求密封、无溶血、无杂物)、所用试管是否正确、试管是否填写完整、并问讯采血日期,对不合格标本应退回重采,并填写记录。
2.6标本储存:样品中应无微生物,可在2-8o c储存1周,长期储存应低温冻存,避免反复冻融。
3、试剂与仪器:?3.1测定试剂:3.1.1生产厂商:北京万泰生物药业股份有限公司3.1.23.1.3包装:96T×13.1.3试剂配置:浓缩洗涤液 50ml×1瓶TP酶标板 8×12孔或12×8孔TP酶标试剂 12 ml×1瓶TP阳性对照 0.2ml×1支TP阴性对照 0.2ml×1支显色剂A、B液各6ml×1瓶终止液 6ml×1瓶自封袋 1个封版膜 2张说明书 1份3.2测定仪器:3.2.1酶标仪:上海安泰model MT-8583.2.2洗板机: ANALYTECH 8284、操作步骤:4.1配液:浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
4.2编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照3孔,阳性对照2孔和空白对照1孔(用双波长检测,可不设空白对照孔)4.3 加样:分别在相应孔中加入待测样品,阴,阳对照100微升,轻轻振荡混匀。
敏筛过敏原检测仪的标准操作程序sop

敏筛过敏原检测仪的标准操作程序(Allergyscreen)实验室名称项目编号制定日期****** 敏筛过敏原检测仪的使用、维护和保养****** **年**月**日【目的】敏筛过敏原检测仪的使用、维护和保养。
【SOP文件的更改】严格按仪器使用说明书制定。
【仪器运行条件】为保证仪器的正常运行,仪器必须满足下列条件:1.灰尘少、通风良好的环境,避免阳光直接照射。
2.地面水平良好(斜度<1/200)。
3.室内温度保持在0~50℃,温度变化不超过±3℃/小时。
4.避免强酸,强碱性化学物品接触机器内部。
5.电源供应:5V±10%, 0Hz,最大功率2.5VA。
6.对附件电脑软硬件的要求:●操作系统Windows XP pro(home)●不支持Win 98(se)/Win ME/Win 2000/Win NT●最少256 MB 内存(显存容量另计)●CPU P233以上●最少300兆空闲的硬盘空间●4倍速以上光驱●VGA显示器(最小支持800*600分辨率,24位真彩色)●USB2.0接口【开机程序】1 开机前检查1.供电系统(包括UPS)是否正常。
2.检查仪器与电脑连接是否正常。
3.仪器及操作台面表面干净、无污物。
2 开机1.接通计算机电源,启动电脑。
2.待电脑自检及程序装载结束,仪器至备用状态,如有错误,根据电脑显示情况检查原因,及时处理。
3.启动过敏原自带软件程序,软件操作界面左下角若无错误提示,仪器进入待测状态,若有错误提示,根据提示情况检查原因,及时处理。
开机程序设置:1。
双击桌面上的软件(rapid)图标,输入密码(admin),点击继续(continue)按钮。
2。
测读模式的选择:点击菜单栏上的其他-----更改-----先进-----测读模式-----选操作或实验模式。
【校准程序】1.校准物的准备将校准物从干燥避光处取出,校准物的选择一定要选择在有效期内的配套仪器厂家校准品。
0.9mm标准筛使用说明

0.9mm标准筛使用说明摘要:一、产品简介二、使用方法1.准备工作2.筛分操作3.清洗与保养三、注意事项四、故障处理五、总结正文:一、产品简介0.9mm标准筛是一款专为粉末、颗粒等物料进行筛分、分级的高精度筛分设备。
该设备采用不锈钢材质制造,具有耐腐蚀、耐磨损、使用寿命长等特点。
广泛应用于化工、食品、医药、冶金、建材等行业。
二、使用方法1.准备工作在使用0.9mm标准筛之前,请确保以下准备工作已完成:(1)检查电源线及插头,确保无损坏;(2)检查筛框、筛网是否有破损或松动;(3)清理筛分容器内的杂物;(4)接通电源,打开开关。
2.筛分操作准备工作完成后,进行筛分操作:(1)将待筛分的物料倒入筛分容器;(2)缓慢晃动筛分容器,使物料均匀分布在筛网上;(3)观察筛分容器下方的收集容器,观察筛分效果;(4)如需调整筛分效果,可适当调整筛框的摇动频率或更换筛网。
3.清洗与保养(1)筛分结束后,关闭电源,清理筛网上的残留物料;(2)用清水冲洗筛网和筛框,确保清洁;(3)定期检查筛网磨损情况,如发现磨损严重,及时更换;(4)定期给传动部件润滑,以延长使用寿命。
三、注意事项(1)使用前,请详细阅读使用说明书;(2)严禁使用有损坏的电源线和插头;(3)严禁在筛分过程中用手触摸运行中的筛框;(4)严禁将液体物料倒入筛分容器进行筛分;(5)设备运行时,请勿将头或身体伸入筛分设备附近。
四、故障处理如遇故障,请先切断电源,检查设备是否存在以下问题:(1)电源线及插头是否损坏;(2)筛网是否破损或松动;(3)传动部件是否卡滞或磨损严重;(4)如有其他问题,请联系售后服务人员。
五、总结0.9mm标准筛是一款高精度筛分设备,通过本文的介绍,相信大家已经掌握了正确的使用方法。
在使用过程中,请注意遵守注意事项,定期进行清洗和保养,以确保设备正常运行。
如有任何疑问或故障,及时联系售后服务人员。
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Instruction manual (说明书):AllergyScreen过敏原检测试剂盒1.用途AllergyScreen过敏原定量检测系统采用免疫印迹方法,定量检测人血清中过敏原特异性IgE抗体。
2.概述IgE免疫球蛋白发现始于1964年,它在I型变态反应发生机制中起重要作用。
免疫应答时B淋巴细胞分化成熟为浆细胞,并合成和分泌不同类型的抗体。
该过程由Th和Ts细胞调节,如果调节失控,通常不会造成损害的抗原也能激发免疫应答,刺激抗原特异性B细胞分化成熟为浆细胞,并产生IgE抗体, IgE抗体通过Fc段同嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面Fc受体结合。
当同一变应原再次进入机体,直接作用于IgE,并通过它的决定簇与IgE分子Fab段间的结合,形成IgE 受体聚集成片,这些变化最终导致嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒释放组胺等生物活性物质,从而产生如麻疹`荨麻疹、皮炎、关节炎,枯草热(过敏性鼻炎)`哮喘及过敏性休克等典型的I型变态反应症状。
3.检测原理特异性过敏原被吸附于硝酸纤维素膜表面,置于反应槽中。
用移液器加入病人血清,室温下孵育,标本中过敏原特异性的IgE抗体与过敏原发生反应,并连接在硝酸纤维素膜上。
将多余的抗体冲洗脱掉,再加入标记了生物素的抗人IgE 抗体,室温下孵育,冲脱未结合上的抗抗体。
然后加入结合有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素,室温下孵育,链霉亲和素和生物素结合。
将未结合上的酶标链霉亲和素冲洗干净。
当再加入BCIP/NBT酶作用底物并孵育后,碱性磷酸酶发生特定的酶显色反应,试剂条上出现沉淀。
颜色深浅与血清中sIgE抗体含量成正比。
待试剂条干燥后,CCD相机照相,读取检测结果。
4.检测系统组成每套检测系统包括:1×12 检测条:标记有20种过敏原的硝酸纤维素膜,置于塑料反应槽中(混合过敏原组,吸入组,食物组)1×洗脱液:(TRIS/NaCl,包含0.1%NaN3)可稀释成1x500ml 的清洗液,pH=7.5 (20ml)1×标记有生物素的抗人IgE抗体(白盖,多抗),含 0.1%NaN3 1×酶标链霉亲和素(红盖),连接有碱性磷酸酶的链霉亲和素1×底物(蓝盖),BCIP/NBT12×加样吸管(300微升)1×使用说明书5.未提供的实验所需的其他工具5.1稀释液蒸馏水或去离子水5.2 其他搅拌器;量筒(500毫升),500毫升洗瓶,具10个不同板型的洗板机(也可无),避光的孵育箱(具体要求见MEDIWISS说明书);水平混匀器;电吹风(也可无);专用阅读仪(RAPID READER)和电脑(Windows98,Windows2000 ME或Windows2000 PROF 带USB接口)及打印机。
6.注意事项本系统用于检测人血清中sIgE,所有患者血清都可能有传染性,操作时应采取相关防范措施。
由于抗抗体和洗脱液利用叠氮钠防腐,故应避免接触皮肤和粘膜。
还应避免与铜或铅的容器接触,以免发生爆炸。
每次实验完毕,检测者应妥善处置各种废物。
所有接触过具潜在传染性的标本的器具,必须经消毒处理或在120℃高温下处理一小时以上。
不同批号的试剂组分不可互换使用。
包装损坏或出现漏液的试剂,不应再使用。
7.储藏条件及有效期检测条应置于阴凉,干燥,黑暗的塑料袋中。
于2-8℃下保存,在有效期内使用。
注意避免各种污染。
稀释过的洗脱液在2-8℃下至多保存八周。
应避免底物受到链霉亲和素酶标物之污染而导致底物染色,结果错误。
此外,底物必须避免阳光照射,以防分解或自动氧化造成染色。
如果底物变色则不应再使用。
8.试剂稳定性使用前若底物混浊变或呈紫色,说明试剂已变质,不能再使用。
9.标本采集和储存本系统采用人血清为标本。
静脉采血待血清自然析出或离心(4000G/转)10分钟。
应避免使用反复冻融及被污染的标本。
使用经加热灭活,脂血,溶血,黄疸及脂浊的血标本会导致结果的不正确。
标本在2-8℃下保存一周。
若需保存更长时间,应置于-20℃以下储藏。
10.检测过程10.1 概述●使用前所有试剂及反应槽都应先恢复到室温(20-22℃)。
试剂在使用前必须充分混匀。
结果的可重复性主要取决于准确的加样,严格地遵守孵育时间`温度和规范性地冲洗检测条。
通常底物显色反应时,温度每升高1℃,反应时间应相应减少30秒钟。
●实验中应尽量避光,建议遮盖反应槽以避免蒸发损耗。
拿反应槽时应避免接触其表面,而握其手柄。
病人资料(如编号)可以贴在手柄上。
●严格按说明书操作,否则孵育时间和温度的偏差会导致标本的结果错误。
●底物孵育必须在暗箱中操作,以免底物自动显色。
严格按照检验室规程工作。
10.2 清洗液的制备将洗脱液置于500ml的量筒内,加满蒸馏水,充分搅拌混匀,并转移到洗瓶中。
如果需要,可37℃水浴溶解洗脱液中的结晶。
10.3 初次孵育将实验所需的检测条从包装内取出,用稀释过的洗脱液冲洗几秒钟,用加样器取250µl患者血清,注意每加一份血清就更换一个加样器头。
置于混匀器(120次振动/分钟)上室温(20-22℃)孵育45分钟。
10.4 冲洗反应槽用洗脱液冲洗5秒钟,上下转动,使清洗液充分流过检测条。
轻轻晃动可以增强清洗效果。
如使用自动化洗板机此过程可简化。
10.5 二次孵育在每个反应槽中加入250µl的抗抗体,仍放在混匀器上室温孵育45分钟。
10.6 冲洗过程同10.4。
10.7 第三次孵育加入250µl链霉亲和素酶标物,混匀器上室温孵育20分钟。
10.8 冲洗过程同10.4。
10.9 第四次孵育加入250µl底物在反应槽内,混匀器上室温孵育20分钟后,流水冲洗试剂条,即发生酶变色反应。
空气干燥或用电吹风加快干燥,当蓝紫色的背景消失时说明试剂条已完全干燥,才能进行读数。
操作步骤总结:A. 系统恢复到室温(20-22℃)。
B .用蒸馏水以1:25稀释洗脱液。
C. 用清洗液湿润硝酸纤维素膜,在检测板上加入250µl的血清标本,在混匀器(120振/分)上室温孵育45分钟。
D. 冲洗,手持反应槽上下翻转让清洗液充分流过,轻晃会增加效果。
E. 加入250ul抗抗体,在混匀器上室温孵育45分钟。
F. 冲洗(同D)G. 加250ul链霉亲和素标记物,在混匀器上室温孵育20分钟。
H. 冲洗(同D)I. 加入250ul底物,在混匀器上室温孵育20分钟J. 流水冲洗终止底物酶反应。
K. 完全干燥后,专用阅读仪读数。
11. 分析11.1。
检测板组合AllergyCreen Panel 1混合组过敏原检测条(Art.No.A001)包含以下20种过敏原:阳性对照,房尘螨1(屋尘螨),房尘螨2(粉尘螨),桤木,桦木,榛木,杂草,黑麦,艾草,车前草,猫,马,狗毛发皮屑,交链孢霉菌,蛋白,牛奶,花生,榛果,胡萝卜,面粉,大豆AllergyCreen Panel 2吸入组过敏原试剂条(Art.No.A002)包含以下20种过敏原:阳性对照,房尘螨1(屋尘螨),房尘螨2(粉尘螨),桤木,桦木,榛木,橡木,杂草,黑麦,艾草,车前草,猫,马,狗毛发皮屑,豚鼠,仓鼠,野兔,点青霉菌,芽枝霉菌,烟曲霉菌,交链孢霉菌AllergyCreen Panel 3食物组过敏原试剂条(Art.No.A003)包含以下20种过敏原:阳性对照,榛果,胡桃,杏仁,牛奶,蛋白,蛋黄,酪蛋白,土豆,鲟鱼,蟹肉,柑桔,苹果,面粉,黑麦面,蓖麻子,大豆阴性对照,未结合任何过敏原,位置在检测条最下方。
阳性对照,标记生物素的牛血清白蛋白,在每个检测条最上方。
11.2检测结果本软件是由免疫印迹数字成像分析系统发展而来,通过CCD照相,软件评估条带颜色的深浅。
方法是通过计算显色条带的面积积分并与内标准曲线对比(以草花粉为标准),对之进行分级,分级与IgE的IU/ml浓度相对应,分析中曲线均经“平滑处理”,排除干扰。
在测量后得到的结果报告单包括:检测条的相片和密度曲线,每种过敏原的分级和浓度数值(IU/ml)。
患者的数据都被保存在系统内,以备后查。
对于每种过敏原,试剂条上颜色的深浅同患者血清中的特异性IgE抗体含量成正比。
将带检测条的反应槽插入专用阅读仪测量,连接计算机即可进行量化分析。
打印出定量结果,并分成0-6级,分级与浓度及含量间的换算关系可以查表Table1。
11.3质控每个检测板都设有阳性对照,用以质控。
如果阳性对照分类值<2.5,实验无效。
在这种情况下,请检查:试剂是否过期根据说明使用仪器严格遵守实验步骤正确在专用阅读仪内插入反应槽观察试剂盒是否有污染,变质和泄漏底物是否已发黑而不能继续使用如果重复检测后,仍不能达到要求,请联系当地经销商。
11.4。
文件处理在试剂条干燥和读取结果后,用镊子将它从反应槽移开并保存于文件夹内.实验数据(图像和量化分析结果)将被储存在计算机硬盘事先设定目录下.每个测试结果都能通过连接在计算机的打印机被打印出来.12.统计数据:重复性、敏感度、特异性和准确性.重复性:批内差:平均值6.2%批间差:平均值3.1%.为了确定灵敏度和特异性,临床对142例血清进行了与皮试的737样本的比较,结果为:敏感度:95.1%特异性:80.2%准确性:88.3%881样本与ELISA单项过敏原检测研究,结果为:灵敏度:84.3%特异性:95.0%精准度:90.6%13.特异性IgE在临床诊断中的意义过敏性疾病的诊断不能仅仅根据实验室检测结果,而应和即往病史及当前临床表现(体内和体外多种试验的结果)一起综合考虑。
分级的测试结果可以用于判断患者对某一过敏原的过敏程度.测定血清特异性抗体与体内检测(如皮试)同样重要和可行.需要强调的是,体外检测是唯一可频繁使用的确定I型变态反应敏感度的方法.本系统以特定的过敏原条带显色,指示患者血清中有相关的IgE抗体,但这并不说明所有这些患者都会伴有相关的临床症状,因为他们可能只处于致敏状态,而尚未有相关临床表现。
制造商:德国MEDIWISS公司。