林下山参的人参皂苷含量分析和指纹图谱研究
实验六 人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)一、实验介绍人参是一种传统的中药材，具有滋补强壮、改善免疫功能、抗氧化、抗疲劳等保健作用。
人参中的主要活性成分为人参皂苷，是一类四环倍半萜类化合物，已经被证明具有多种药理活性，包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。
本实验将通过浸提、分离纯化和质谱鉴定等方法，提取并鉴定人参中的人参皂苷。
二、实验原理1、浸提法浸提法是将药材浸入某种合适的溶剂中，使药材中的有效成分与溶剂发生物理或化学变化，达到提取目的的一种分离方法。
2、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是将样品溶液通过硅胶柱，利用在硅胶表面的物理吸附或化学吸附作用，将混杂在一起的化合物分离开的方法。
3、质谱鉴定质谱鉴定是一种能够确定样品化学结构和分子质量的分析技术。
常用的质谱仪有基质辅助激光解吸/电离质谱仪（MALDI-TOF MS）、毛细管电泳-电喷雾离子化质谱仪（CE-ESI-MS）、气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）等。
三、实验步骤1、人参皂苷的浸提提取取50克粉碎后的人参，加入500 mL纯水，加热至60℃灌装入烧杯中，自然冷却至室温，用纱布过滤液体，重复浸提两次，将过滤液集合并浓缩至100 mL，抽取所有成分并将溶剂蒸干，得到人参的浸提液。
将人参浸提液溶于甲醇，用硅胶柱层析法进行分离。
在硅胶柱中注满硅胶，静置，再用甲醇将硅胶冲洗至洗液pH值小于7，并流至平衡，用稀甲酸使硅胶柱的pH值保持在4.5左右，注入30 ml的样品溶液后，按照乙醇-水（5:95）逐步更换溶剂进行洗提。
收集各部分2 mL溶液，检测其皂苷浓度。
将含有人参皂苷的溶液分别离子化并进入质谱仪，分别进行质谱分析，并比对和参考相关文献，确定人参皂苷的种类及分子质量。
四、实验结果浸提液得率为12.5%，色深浅不一，澄清程度良好。
利用硅胶柱进行层析分离，得到了包含人参皂苷的溶液。
收集了各部分的溶液，并测定了其皂苷浓度，得到各部分的含人参皂苷浓度、总皂苷脂含量和分离效果。
林下参化学成分的研究
化合 物 2： 白 色 粉 末，难 溶 于 水，易 溶 于 甲 醇。 mp 197 ～ 199 ℃ （ MeOH ） 。 Liebermann-Burchard 反 应阳性、Molish 反 应 阳 性。10% 硫 酸 水 解 检 出 葡 萄 糖、阿拉伯糖及原 人 参 二 醇 组 苷 元，50% AcOH 部 分 水解检出葡萄糖、阿拉伯糖及次级苷人参皂苷 Rg3 。
林下参研究进展
不同的提取方法对皂苷含量影响显著， 回流法 热 与超声波法和微波法相比对人参皂苷的提取率最高 ， 而且在加热过程中丙二酰基人参皂苷分别转化成相 应的中性皂苷 。郑毅男 利用高效液相色谱进行人 参皂苷的含量测定 ， 结果发现不同地区栽培的人参主 根中皂苷含量存在显著差别 ， 且人参皂苷 Ｒ Ｒ ｇ和 ｅ
目前关于园参化学成分 的研究有很多报道 ， 而林 下参的研究 报道 还 比较少。李海军 等 从林 下参 】
籽货、 籽上 山、 海货 ， 是人为地把栽培参的种子撒播到
自然的环境里 ， 任其 自然生长 ， 不移栽、 不搭棚、 不施 发展提供了依据。 肥、 不打药 、 不锄草、 不动土，０多年后才上山收取的 １ 为了研究林下参挥发性的成分化学组成及含量 ， 半野生山参， 生长若干年的林下参的质量可以和野山 李海军等 将林下参 乙醇回流提取物进行硅胶柱色 参相媲美¨ 。 ０ ５ Ｊ ２０ 年版《 中国药典》 增补本 中， 已正 式将林下参定为林下 山参 。人参是东北 大宗道地 Ｊ 药材 ， 药中上品。特别是 山参 ， 不仅具有超凡的药用
选择具有重要的指导作用。 １２ 林下参人参皂苷的测定 。
８ ．３ ６９ ％。现代研究表 明， 不饱和脂肪 酸具有明显降 低血清胆 固醇的作用 ， 进而降低高血压、 心脏病及 中 风等疾病的发病率ｕ 引。并且林下参种子中不饱和脂
肪酸中油酸含量最高 ， 油酸是细胞膜的必要成分 ， 并 且有降低人体内血清胆固醇和甘油三酯的功能 ， 也能 软化血管并 防止血栓 的形成［ 。因此 试验结果表 】 ¨ 明， 林下参种子在医药 、 保健品等领域有广阔的开发
林下参 （ ａａ ｉ ｅｇｃ Ａ Ｍ ｙｒ Ｖ Ｓｖｔ ａ ＰｎｘＧｎ ｎ ． ． ｅｅ ｃ．ｉａｃ ） ｓ ｌ ｉ 为五加科人参属多年生草本植物 ， 习称育山参 、 籽海 、
不同产地人参指纹图谱研究对比
参在医疗或养生方面都有可观的价值，而不同产地的人参由于环境、气侯、水土等因素影响，其成分也有所不同，故市场上流通的人参存在不少非原产地以次充好，以假乱真的现象。
目前中药指纹图谱中应用最多的方法是高效液相色谱法，因为其对样品挥发度和热稳定性限制小，兼具高柱效、高选择性、灵敏度高的优点，比较适合中药材复杂体系的分析。
所以，在参考前人的研究基础上，利用高效液相色谱法对人参药材进行多维谱图条件研究，寻找不同产地人参之间的识别因子以及通过人参药材与制剂指纹图谱的相关性分析，能科学评价及有效控制人参质量。
仪器与试剂仪器。
美国Agilent 1200 高效液相色谱仪；德国sar-torius CP224S电子分析天平；天津奥特赛恩斯AS20600B-DT超声波清洗仪；上海菲恰尔TDL-5A离心机。
试剂。
乙腈（色谱纯，美国TEDIA公司）；磷酸（优级纯，国药集团化学试剂有限公司）；甲醇（分析纯，广州化学试剂厂）；乙醇（分析纯，广州化学试剂厂）；人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rf、Rg1（中国药品生物制品检定所）；Rc、Rd、Rh1（北京恒元启天化工技术研究院）样品。
本实验共收集人参药材26批，其中吉林12批，辽宁10批，北京、山东、加拿大、东北各1批。
药用部位均为人参主根。
实验方法色谱条件。
色谱柱：phenomenex Kinetex C18 100Å（100×4.6mm，2.6μm）；检测波长：203nm；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，洗脱程序：0～17.5min，乙腈19%，17.5～22.5min，乙腈变化到29%，22.5～35min，乙腈保持在29%，35～50min，乙腈变化至40%；分析时间：50min；进样量：5μL。
对照品溶液的制备。
精确称取人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rh1、Rf、Rg1对照品适量，加甲醇溶解分别制成0.2mg/mL的对照品溶液。
试验人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型-A 型，②人参三醇型-B型，③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20（S）-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20（S）-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水，甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
林下山参与园参理化性质的比较研究
林下山参与园参理化性质的比较研究杨文志;娄子恒;王明芝;杜跃中;潘晓鹏;张引;张立臣;高宇【摘要】目的通过比较研究林下山参与园参理化性质的特点,进一步认识林下山参与园参的内在区别.方法通过比较林下山参与园参的皂苷含量,皂苷HPLC图谱,皂苷TLC图谱,乙醚浸出物的含量及参粉的密度,得出林下山参与园参相区别的重要特征.结果二者在总皂苷的含量,皂苷Rb1的含量,以及总皂苷的HPLC检测图谱及参粉密度的区别特征突出,可作为林下山参与园参之间的鉴别依据.结论林下山参与园参在理化性质方面存在一定的区别.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2018(030)001【总页数】5页(P17-21)【关键词】高效液相色谱;薄层色谱;总皂苷;皂苷Rb1;乙醚浸出物;密度【作者】杨文志;娄子恒;王明芝;杜跃中;潘晓鹏;张引;张立臣;高宇【作者单位】吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001;吉林人参研究院·吉林通化·134001【正文语种】中文林下山参一词来源于中国药典。
2005年中国药典在人参项下规定了“播种在山林野生状态下自然生长的”人参称为“林下参”，习称“籽海”，而将栽培的人参称为“园参”，至此野生种植方式下所生产的人参有了自己的名字。
2010年版中国药典延用林下参的定义，但将“林下参”改为“林下山参”；2015年版中国药典延用了“林下山参”的名称。
林下山参与园参相比较有三个基本特点，一是生长环境是自然的野生环境，散播并与其它植物伴生生长；二是生长期间不进行人工管理，不除草，不打药，不追肥，任其自然生长；三是生长时间长，一般要15年采收。
人参HPLC指纹图谱研究
第２９卷 第３期２００９年 ５月河北大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．２９Ｎｏ．３Ｍａｙ２００９人参ＨＰＬＣ指纹图谱的研究阎 正１，苑若瑶１，王春云１，蔡立鹏１，王继坤２（１．河北大学化学与环境科学学院，河北保定 ０７１００２；２．北京中防昊通防伪技术中心，北京 １０００２５） 摘 要：建立了人参的高效液相指纹图谱．研究了不同的预处理方法、流动相组成、最佳检测波长、色谱柱温度等操作因素对人参指纹谱图的影响，并对不同产地和种类的人参药材的指纹图谱进行了比较．色谱条件为：色谱柱为不锈钢填充柱（ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ‐３，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；检测波长为２０３ｎｍ；流动相为乙腈‐（质量分数为０．０５％）磷酸水溶液梯度洗脱；流速１ｍＬ／ｍｉｎ；分析时间９０ｍｉｎ；柱温为３０℃．关键词：人参；ＨＰＬＣ；指纹图谱中图分类号：Ｏ６５７．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－１５６５（２００９）０３－０２７８－０６ＳｔｕｄｙｏｆＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＧｉｎｓｅｎｇｂｙＨＰＬＣＹＡＮＺｈｅｎｇ１，ＹＵＡＮＲｕｏ‐ｙａｏ１，ＷＡＮＧＣｈｕｎ‐ｙｕｎ１，ＣＡＩＬｉ‐ｐｅｎｇ１，ＷＡＮＧＪｉ‐ｋｕｎ２（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００２，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｅｎｔｅｒｏｆＺｈｏｎｇｆａｎｇＨａｏｔｏｎｇＡｎｔｉｃｏｕｎｔｅｒｆｅｉｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＢｅｉｊｉｎｇ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｓｐａｐｅｒｄｅｓｃｒｉｂｅｄａｎａｎａｌｙｔｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｏｆｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＧｉｎｓｅｎｇｂｙＨＰＬＣ．Ｗｅｓｔｕｄｉｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓａｍｐｌｅｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ，ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｔｈｅｆｉｎｇｅｒ‐ｐｒｉｎｔｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓｏｆＧｉｎｓｅｎｇｆｒｏｍｓｉｘｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓａｎｄｋｉｎｄｓ．ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ‐３ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｗａｓｕｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍｉｘｔｕｒｅｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ‐０．０５％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ；ｔｈｅｄｅ‐ｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ２０３ｎｍ；ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１ｍＬ／ｍｉｎａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０℃．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｉｎｓｅｎｇ；ＨＰＬＣ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ人参为五加科植物的根，具有补气、益肺、祛暑、生津、滋补、强壮、抗疲劳等多方面的作用，临床上主要用于治疗津伤口渴，四肢倦怠等症状．因此，人参在医学以及养生方面具有可观的价值．而不同产地的人参，由于环境气候水土等条件的影响，它所含有的成分不尽相同，因而也就导致了临床疗效的差异．很多不法商贩用一些非原产地的人参以次充好，以假乱真，极大地危害到了消费者的身心健康．目前，高效液相色谱法测量人参常规组分具有流动相简单、精密度高、分离效果好、准确性高等特点．高阳、袁永越等曾利用高效液相色谱法标示出人参药材指纹图谱中的１８个共有峰并且测定其相似度［１］，但是并未对不同产地与种类人参的区别进行考察．所以本课题组参考已有文献，利用高效液相色谱法对人参样品进行了多维谱图条件研究，试图寻找不同产地产品之间的特征识别因子，并且取得了一定的进展，可为区别原产地与非原产地高端保健品人参提供参考． 收稿日期：２００８－０９－０２ 基金项目：“十一五”国家科技支撑计划项目（２００６ＢＡＫ０２Ａ１７） 第一作者：阎 正（１９５８－），男，河北保定人，河北大学副教授，主要从事色谱分析技术研究．第３期阎 正等：人参ＨＰＬＣ指纹图谱的研究１ 实验部分１．１ 仪器及试剂１．１．１ 仪器Ｗａｔｅｒｓ６００Ｅ高效液相色谱仪（ＰＡＤ，美国Ｗａｔｅｒｓ公司）；自动控温溶剂回流液固提取器（自制）；电子天平（ＡＧ２４５，ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ）；旋转蒸发器ＲＥ‐５２Ａ（上海亚荣生化仪器厂）；鼓风式干燥箱（上海分析仪器厂）；ＳＫ５２００Ｈ超声振荡器（上海科导超声仪有限公司）．１．１．２ 试剂及样品样品：生晒园参、生晒移植山参、生晒白参（原产地长白山，国家质监总局提供）、生晒园参（辽宁）、生晒园参（吉林）、养殖人参（购于保定药店）．试剂：人参皂苷Ｒｅ，Ｒｂ１，Ｒｂ２，Ｒｂ３，Ｒｆ标准品（中国药品生物制品检定所提供）；乙腈（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心）；磷酸（分析纯，天津市鼎盛化工试剂厂）；甲醇（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；二次蒸馏水（０．４５μｍ纤维素膜过滤）．１．２ 实验方法１．２．１ 色谱条件色谱柱：ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ‐３（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；检测波长：２０３ｎｍ；流动相：乙腈‐（质量分数为０．０５％）磷酸水溶液梯度洗脱；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；洗脱程序：０～７ｍｉｎ，乙腈（体积分数）０，７～１０ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）１０％，１０～３０ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）３０％，３０～４０ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）３５％，４０～４５ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）５０％，４５～６０ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）７０％，６０～９０ｍｉｎ，乙腈变至（体积分数）９０％；进样量：２０μＬ；柱温：３０℃．１．２．２ 对照品溶液的制备精确称取人参皂苷Ｒｅ对照品适量，加甲醇溶解制成１．００ｇ／Ｌ的对照品溶液．１．２．３ 供试品溶液的制备将人参样品置于６０℃干燥箱中加热４ｈ至恒重，粉碎过筛，收集８０目（孔径０．０１８ｍｍ）以下的粉样．准确称量２．０ｇ人参粉样置于自动控温溶剂回流液固提取器内，加入１００ｍＬ甲醇提取５ｈ．提取液旋转蒸发回收溶剂，浓缩液倒入１０ｍＬ容量瓶中．用甲醇清洗旋转蒸发器内壁，每次２ｍＬ，共清洗３次，清洗液也倒入容量瓶中，并稀释至刻度．０．４５μｍ滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液．２ 结果与讨论２．１ 方法学考察２．１．１ 指纹图谱建立与分析精密吸取各供试品溶液和对照品溶液适量，注入液相色谱仪，记录９０ｍｉｎ的色谱图．根据多批样品的指纹图谱给出的相关参数，所有组分在９０ｍｉｎ全部出峰．选取分离度以及峰形均较好的１５～９０ｍｉｎ比较供试品谱图，其中１１个峰为共有峰（单峰面积大于１０％），如图１所示．其中，根据保留时间和峰高加高法确定３号峰为人参皂苷Ｒｅ，是人参的指标成分之一，将其作为内参比峰．２．１．２ 方法精密度的测定取同一长白山园参供试品溶液，按１．２．１色谱条件，连续进样５次，计算各共有峰相对于内参比峰的相对保留时间和相对峰面积值（人参产地：长白山）．结果见表１．・９７２・河北大学学报（自然科学版）２００９年图１ 最佳检测条件下的长白山园参指纹图谱（１５～９０ｍｉｎ）Ｆｉｇ．１ ＴｈｅＨＰＬＣＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＧｉｎｓｅｎｇ（Ｃｈａｎｇｂａｉｓｈａｎ）（１５～９０ｍｉｎ）表１ 方法精密度的测试Ｔａｂ．１ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｉｎｊｅｃｔｉｏｎｐｒｅｃｉｓｉｏｎ共有峰序号相对保留时间１２３４５ＲＳＤ／％相对峰面积１２３４５ＲＳＤ／％１０．４９５０．４９６０．４９５０．４９５０．４９３０．２２０．６０９０．６０３０．５８７０．６１１０．６０７１．６２０．５９１０．５９００．５８９０．５９３０．５９２０．２７０．４８５０．４９８０．４９９０．４９００．５００１．３３１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００４１．３１２１．３１３１．３１２１．３１１１．３１００．０９０．６４４０．６４３０．６４７０．６５００．６４９０．４７５１．３４５１．３４３１．３４３１．３４２１．３４１０．１１０．５８２０．５８００．５８４０．５７８０．５８３０．４１６１．３６３１．３６２１．３６３１．３６４１．３６５０．０８０．７２６０．７３４０．７３５０．７３００．７３８０．６４７１．３７２１．３７１１．３７０１．３７２１．３７４０．１１０．３４６０．３４５０．３４００．３３７０．３４５１．１８１．３９９１．３９９１．３９８１．３９６１．４０００．１１０．５４８０．５５３０．５５２０．５４７０．５４００．９４９１．９６９１．９６８１．９７０１．９６６１．９６７０．０８０．１９３０．１９００．１９１０．１９４０．１９１０．８６１０２．２６８２．２７０２．２６８２．２６９２．２６７０．０５０．５３９０．５３５０．５３８０．５３２０．５３５０．５２１１２．４８７２．４８９２．４８８２．４８９２．４８５０．０７０．７４６０．７４５０．７４３０．７３７０．７４６０．２０结果显示，相对峰面积的ＲＳＤ为０．２０％～１．６％，相对保留时间的ＲＳＤ为０．０５％～０．２７％，表明方法精密度良好．２．１．３ 方法重现性的测定取同一产地长白山园参样品５份，按１．２．３方法制备供试品溶液，按１．２．１色谱条件，分别进样，计算各共有峰相对于内参比峰的相对保留时间和相对峰面积值（人参产地：长白山）．结果见表２．・０８２・第３期阎 正等：人参ＨＰＬＣ指纹图谱的研究表２ 方法重现性的测试结果Ｔａｂ．２ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ共有峰序号相对保留时间１２３４５ＲＳＤ／％相对峰面积１２３４５ＲＳＤ／％１０．４９５０．４９５０．４９５０．４９５０．４９５０．０００．６０９０．６０１０．６１８０．５９１０．５９３１．９２０．５９１０．５９００．５９００．５９００．５９１０．０９０．４８５０．５０３０．４９７０．４９００．４９７１．４３１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００４１．３１２１．３１４１．３１５１．３１３１．３１４０．０９０．６４４０．６７２０．６６２０．６６００．６５７１．５５１．３４５１．３４６１．３４７１．３４６１．３４２０．１４０．５８２０．６０９０．５９９０．５９４０．５９８１．６６１．３６３１．３６４１．３６４１．３６７１．３４１０．１６０．７２６０．７６２０．７４５０．７３６０．７５６２．０７１．３７２１．３７３１．３７３１．３７３１．３７１０．０７０．３４６０．３５８０．３４５０．３３８０．３５０２．１８１．３９９１．３９９１．４００１．３９７１．４０００．０９０．５３８０．５５４０．５３６０．５３２０．５４７１．６９１．９６９１．９６９１．９７０１．９６６１．９６９０．０８０．１９３０．１９００．１９００．１９２０．１９１０．６８１０２．２６８２．２６９２．２６９２．２６８２．２７００．０４０．５３９０．５３８０．５３００．５３３０．５３６０．６９１１２．４８７２．４８８２．４８８２．４８９２．４８８０．０３０．７４６０．７４７０．７４６０．７４５０．７４３０．２０结果显示，相对峰面积的ＲＳＤ为０．２０％～２．１％，相对保留时间的ＲＳＤ为０．０３％～０．１６％，说明方法重现性良好．２．１．４ 样品稳定性的测定取同一长白山园参供试品溶液，按１．２．１色谱条件，在０，４，１２，２４，４８ｈ进样，计算各共有峰相对于内参比峰的相对保留时间和相对峰面积值（人参产地：长白山）．结果见表３．表３ 样品稳定性的测试Ｔａｂ．３ Ｓａｍｐｌｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｐｒｅｃｉｓｉｏｎ共有峰序号相对保留时间０４ｈ１２ｈ２４ｈ４８ｈＲＳＤ／％相对峰面积０４ｈ１２ｈ２４ｈ４８ｈＲＳＤ／％１０．４９５０．４９５０．４９６０．４９５０．４９５０．０９０．６０９０．５７６０．６０３０．６１７０．５８７２．８２０．５９１０．５９００．５９２０．５９３０．５９００．２２０．４８５０．４７９０．４９８０．５０００．４７６２．２３１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００４１．３１２１．３１２１．３１３１．３１０１．３１４０．１１０．６４４０．６４７０．６４３０．６４８０．６４００．５０５１．３４５１．３４５１．３４６１．３４３１．３４２０．１２０．５８２０．５８１０．５８００．５８５０．５８４０．３６６１．３６３１．３６３１．３６２１．３６４１．３６１０．０８０．７２６０．７３２０．７３４０．７３３０．７３９０．６４７１．３７２１．３７２１．３７３１．３７５１．３７１０．１１０．３４６０．３４４０．３４５０．３５８０．３５１１．７８１．３９９１．３９９１．４００１．３９７１．３９８０．０８０．５３８０．５３５０．５５３０．５３７０．５４０１．３９１．９６９１．９６７１．９７０１．９６６１．９６７０．０８０．１９３０．１９１０．１９００．１９００．１９２０．６８１０２．２６８２．２６４２．２６７２．２６５２．２６８０．０８０．５３９０．５２７０．５３１０．５３００．５３３０．８４１１２．４８７２．４８３２．４８９２．４８４２．４８５０．１００．７４６０．７４６０．７４００．７３７０．７４４０．５４结果显示，相对峰面积的ＲＳＤ为０．３６％～２．８％，相对保留时间的ＲＳＤ为０．０８％～０．２２％，说明样品至少在４８ｈ内稳定．２．２ 实验条件的选择与确定２．２．１ 检测波长的选择为了在指纹图谱中获得最丰富的人参化学成分信息，参照文献对人参指纹图谱的检测波长进行了选择，・１８２・河北大学学报（自然科学版）２００９年范围为１９０～３００ｎｍ，对此范围内全部波长进行扫描，结果显示在２０３ｎｍ下指纹图谱的色谱峰数目最多，代表的化学成分信息量最大，峰的分离也较好，所以确定２０３ｎｍ为检测波长．２．２．２ 样品预处理方法的选择取同一样品４份，分别以乙醇回流、甲醇单次和多次超声萃取、甲醇自动控温溶剂回流液固提取４种方式处理样品．结果显示，相比于文献中多次用到的乙醇溶液普通热回流以及超声萃取等提取方式，利用实验室自行改进的自动控温溶剂回流液固提取器对样品进行处理，提取溶剂为甲醇，方法更为简单高效，样品溶液更为清澈，样品能够得到更有效的提取，提取得到的色谱图反应的化学信息量最大，所以确定用此方法对人参进行提取．之后又对提取时间（３ｈ，４ｈ，５ｈ）和提取温度（１４０℃，１５０℃，１６０℃）进行优化．结果显示，１５０℃×５ｈ效果最佳．故本实验采用自动控温溶剂回流液固提取器在１５０℃条件下甲醇提取５ｈ作为人参的预处理方法．２．２．３ 流动相的选择分别以乙腈‐水以及甲醇‐水体系为流动相进行等度洗脱色谱分析，结果显示用以上溶剂系统进行等度洗脱时，峰形堆积，分离度不好，并且色谱峰数目较少．采用以上溶剂系统进行梯度洗脱时，以乙腈‐水溶剂系统所得谱图比上述等度洗脱体系有较大改善，但是分离度依然不够理想．尝试在水相中添加磷酸溶液改善分离，分别尝试了乙腈‐（质量分数为０．０５％）磷酸溶液以及乙腈‐（质量分数为０．１％）磷酸溶液体系．结果显示，以乙腈‐（质量分数为０．０５％）磷酸溶液作为流动相峰形较好，分离度好，色谱峰信息较多．所以选用乙腈‐（质量分数为０．０５％）磷酸溶液系统作为本实验的流动相．２．３ 结果２．３．１ 谱图中主要组分峰的确定分别精确称取人参皂苷Ｒｅ、人参皂苷Ｒｂ１、人参皂苷Ｒｂ２、人参皂苷Ｒｂ３以及人参皂苷Ｒｆ标准品适量，加甲醇溶解制成１．００ｇ／Ｌ的溶液，在１．２．１色谱条件下，分别进样，根据保留时间确定以上各种人参皂苷在谱图中的位置．结合实验所研究各地人参的指纹图谱，可确定在人参的１１个共有峰中，３号峰为人参皂苷Ｒｅ，４号峰为人参皂苷Ｒｆ，５号峰为人参皂苷Ｒｂ１，６号峰为人参皂苷Ｒｂ２，７号峰为人参皂苷Ｒｂ３．２．３．２ 不同产地以及种类保健品人参指纹图谱的比较及结论对原产地长白山园参、山参以及白参，非原产地吉林、辽宁园参以及购于保定药店的人参进行了ＨＰＬＣ指纹图谱比对．结果显示因样品的个体差异，共有峰的含量有极为明显差异，如表４，图２所示．表４ 不同产地及种类人参指纹图谱检测Ｔａｂ．４ ＲｅｓｕｌｔｅｓｏｆＧｉｎｓｅｎｇｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓａｎｄｋｉｎｄｓ共有峰序号相对保留时间园参白参山参辽宁吉林保定ＲＳＤ／％相对峰面积园参白参山参辽宁吉林保定ＲＳＤ／％１０．４９５０．４９５０．４９６０．４９５０．４９４０．４９４０．１５０．６０９１．２９４０．８２８０．７４５０．５１９０．４７４４０２０．５９１０．５９００．５８９０．５８９０．５８７０．５９２０．３００．４８５１．９８１０．３９６０．６１８０．２６３０．３２６９６３１．０００１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００１．０００１．０００１．０００１．０００１．０００１．００００．００４１．３１２１．３１５１．３１３１．３１３１．３１７１．３１２０．１５０．６４４０．６１７０．４２５０．５５８１．３７３０．４３２５３５１．３４５１．３４７１．３４６１．３４５１．３４７１．３４４０．０９０．５８２０．４６６０．４２６０．２８６０．５８４０．２６３３２６１．３６３１．３６４１．３６３１．３６３１．３６４１．３６２０．０６０．７２６０．７６３０．３２５０．３７３０．８２７０．４１５３９７１．３７２１．３７４１．３７４１．３７４１．３７４１．３７２０．０８０．３４６０．３６５０．３１３０．４７００．７６００．２８１４２８１．３９９１．３９９１．３９９１．３９９１．３９９１．３９８０．０３０．５３８０．４２３０．１４００．０８００．３８１０．１８９６２９１．９６９１．９６７１．９６５１．９６４１．９６５１．９６９０．１１０．１９３０．６３７０．１２４０．２９３１．５２００．３１６１０２１０２．２６８２．２６５２．２６１２．２５９２．２６１２．２６８０．１７０．５３９１．３５００．６６５１．００３１．５０７１．３１２３７１１２．４８７２．４８２２．４８０２．４７８２．４８０２．４８５０．１４０．７４６０．７４５０．５９７０．５２３０．７０３０．３４６２６・２８２・第３期阎 正等：人参ＨＰＬＣ指纹图谱的研究图２ 不同产地与种类的人参指纹图谱Ｆｉｇ．２ ＴｈｅＨＰＬＣＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＧｉｎｓｅｎｇｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓａｎｄｋｉｎｄｓ 由图表可知，几种产地及种类的人参药材的ＨＰＬＣ指纹图谱共有峰的相对保留时间重现性很好（ＲＳＤ为０．０３％～０．３０％），但是相对峰面积值存在极为显著差异（ＲＳＤ为２６％～１０２％），这说明以上６个产地及种类的人参药材由于生长的地理环境和气候的不同而导致主要化学成分含量差别很大．该实验方法所建立的人参的ＨＰＬＣ的指纹图谱预处理方法简单，峰数多且分离度较好，可为区别原产地与非原产地高端保健品人参提供参考依据，并为其他中药材指纹图谱的建立提供借鉴．参 考 文 献：［１］高 阳，袁永越，于治国，等．人参药材色谱指纹图谱分析方法研究［Ｊ］．中成药，２００６，２８（４）：４７３－４７７．［２］孙永慧，李文春．不同工艺人参提取物的指纹图谱初探［Ｊ］．现代中药研究与实践，２００６，２０（１）：３９－４１．［３］谢培山．中药制剂色谱指纹图谱（图象）鉴别［Ｊ］．中成药，２０００，２２（６）：３９１－３９５．［４］聂 晶，田颂九，王国荣．中药指纹图谱的研究现状［Ｊ］．中草药，２０００，３１（１２）：８８１－８８４．［５］于世林．高效液相色谱方法及应用［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００１：１１－４１．［６］靳朝东．人参化学成分分析方法的研究进展［Ｊ］．中草药，１９９６，２７（１０）：６３１－６３３．［７］任 杰，窦德强，赵春杰，等．高效液相色谱法测定人参提取物及其胶囊中人参皂苷Ｒｂ１［Ｊ］．人参研究，２００３（３）：５－９．［８］于 超，刁长发，夏文娟，等．反相高效液相色谱法测定人参及其制剂中人参皂苷Ｒｇ１含量［Ｊ］．中成药，２０００，２０（４）：２６３－２６５．［９］曹 东，黄喜茹，王 伟，等．反向高效液相色谱法测定不同产地和种属丹参饮片中３种脂溶性成分［Ｊ］．化学试剂，２００６，２８（５）：２９８－３００．（责任编辑：梁俊红）・３８２・。
人参药材HPLC-ELSD指纹图谱研究
人参药材HPLC-ELSD指纹图谱研究蔡艳;贾继明;刘兴国;郑亚杰;王贵金;郭文胜;宋剑【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)3【摘要】目的 HPLC-ELSD法建立人参药材指纹图谱。
方法采用Waters Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温25℃,气体压力25psi、增益500、加热器级别66%、漂移管温度75℃。
结果以人参皂苷Rb1为参照物,通过对10批吉林通化产的不同批次的人参药材进行指纹图谱研究,标定了9个共有峰,并利用《中国药典》中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版,计算出其相似度均在0.99以上。
结论该方法可为更好地控制人参药材的内在质量提供科学依据。
【总页数】3页(P742-744)【关键词】人参;指纹图谱;高效液相色谱法【作者】蔡艳;贾继明;刘兴国;郑亚杰;王贵金;郭文胜;宋剑【作者单位】河北以岭医药集团研究院【正文语种】中文【中图分类】R283;R284.1【相关文献】1.不同产地浙贝母药材HPLC-ELSD指纹图谱的研究 [J], 朱广磊;睢宁;张春椿;俞冰;李石清;张水利;熊耀康2.黄芪及相关药材HPLC-ELSD色谱指纹图谱研究 [J], 王敏;李翔;王逢春3.河北道地药材远志HPLC-ELSD指纹图谱研究 [J], 孟岩;范丽芳;朱梦楚;生宁;何玉芳;张兰桐4.锁阳药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的研究 [J], 李倩; 卫阳飞; 黄瑞萍; 安琼5.基于HPLC-ELSD指纹图谱和含量测定的薏苡仁药材质量评价研究 [J], 王燕雄;李振雨;童培珍;陈向东;孙冬梅;魏梅;罗文汇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
林下山参化学成分及质量评价研究进展
山参 总皂 苷 含 量 （ ４ ． ６ ％） 低 于野 山参 （ ７ ． ２ ％） ， 但 高
于园参（ ３ ． ８ ％） 【 ， 林下 山参 中单体人参皂苷 Ｒ ｅ 含
量相 对较 高 ， 与 野 山参 和 园 参 有 显 著 性 差 异 （ 尸＜
ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｓ ｉ ｔ ｉ ｎ ｇ ｐ ｒ ｏ ｂ ｌ ｅ ｍｓ ａ ｎ ｄ ｆ ｕ ｔ ｕ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｇｉ ｎ ｓ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｂ ａ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｈｅ ｔ ｓ ｍｎ ｍａ ｒ ｙ ．
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ： ｇ ｉ ｎ ｓ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ； ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ｌ ａ ｃ ｏ ｍｐ ｏｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ； ｕａ ｑ ｌ ｉ ｔ ｙ ａ ｓ ｓ ｅ ｓ ｓ ｍｅ ｎ ｔ
人参 （ ｐ ａ ｎ ａ ｘ ｇ ｉ ｎ ｓ ｅ ｎ ｇ Ｃ． Ａ． Ｍ ｅ ｙ ． ） 为 五 加 科 多 年 生宿根草 本 植 物 ， 是 我 国 名 贵 中药 材 ， 主 要 以根 人 药 。林 下 山参是 指 园参种 子播 种在 山林下 任其 自然
的研究 ， 已从林 下 山参 中分 离 鉴 定 的皂 苷 类 化 合物 共计 ２ ０多种 ， 多为 ２ ０ （ ｓ ）一原 人参 二 醇 、 ２ ０ （ Ｒ ） 一原
人 参二 醇 、 ２ ０ （ Ｓ ）一Ｒ ｈ ２ 、 ２ ０ （ Ｒ） 一Ｒ ｈ ２ 、 ２ ０ （ Ｓ ） 一Ｒ ｇ ３ 、 ２ ０ （ Ｒ ） 一Ｒ ｇ ３ 、 Ｒ ｂ １ 、 Ｒ ｂ ２ 、 Ｒ ｂ ３ 、 Ｒ ｃ 、 Ｒ ｄ ， ２ ０ （ Ｓ ） 一原 人 参 三 醇、 ２ ０ （ Ｒ ） 一原 人参 三醇 、 ２ ０ （ Ｓ ） 一Ｒ ｈ １ 、 ２ ０ （ Ｒ） 一Ｒ ｈ １ 、
林下参的化学成分研究--中草药 200906
林下参的化学成分研究钟方丽1,刘金平2,卢丹2,李平亚2*(11吉林化工学院,吉林吉林132022;21吉林大学再生医学科学研究所,吉林长春130021)摘要:目的对林下参P anax ginseng的化学成分进行研究。
方法采用硅胶柱色谱法及制备H PL C法进行分离纯化,根据理化性质和光谱方法鉴定化合物的结构。
结果从林下参乙醇提取物中分离得到10个单体化合物,并鉴定为20(S)-人参皂苷Rg3(Ñ)、20(S)-人参皂苷Rh1(Ò)、20(R)-人参皂苷R h1(Ó)、20(S)-人参皂苷Rg2 (Ô)、20(S)-人参皂苷R h2(Õ)、人参皂苷Rb3(Ö)、豆甾醇-3-O-B-D-吡喃葡萄糖苷(×)、5,6-二氢豆甾醇-3-O-B-D-吡喃葡萄糖苷(Ø)、B-胡萝卜苷(Ù)、B-谷甾醇(Ú)。
结论10个化合物均为首次从林下参中分离得到。
关键词:林下参;人参皂苷;皂苷中图分类号:R28411文献标识码:A文章编号:02532670(2009)06086903林下参系五加科人参属林下参P anax g inseng C1A1Meyer cv1Silvatica的根,是人为地把园参的种子撒播到自然的环境里,任其自然生长,不移栽、不搭棚、不施肥、不打药、不锄草、不动土,10年后才上山收取的半野生山参。
林下育参缓解了高经济效益人参种植业与高生态效益的林业之间的矛盾[1]。
近年来,林下参种植业发展迅速,仅长白山区蕴藏量商业价值约50亿元人民币。
林下参的种植与应用日渐广泛,而有关其基础研究却相对滞后。
笔者在分离出已知人参皂苷和其他化合物基础上[2],进一步分离得到10个化合物,均为首次从林下参中分离得到。
1实验部分111仪器与试剂:上海精密科学仪器有限公司显微熔点仪;柱色谱用硅胶(200~300目,300~400目)和薄层色谱用硅胶均为青岛海洋化工公司产品。
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Ｃ ．Ｍ ｙ的根 。 乙腈 为色谱 纯 （ 国 Ｆｓｅ 试 剂公 ．Ａ ｅ 美 ｉ ｒ ｈ 司） ，重蒸 馏水 ，其他 试剂 均为 分析纯 。
２ 人参 皂苷 含量测 定 的试 验方 法
２ １药材 来源 ．
样 品来源 及编号 见表 １ 。
参皂苷 的对 照 品 。本 文通 过对 林下 山参 、园参及 红参 的 ３ 主要人参 皂苷 Ｒ ｅ ｂ 的含 量测定 ， 种 ｇ 、Ｒ 、Ｒ
少 。寻找不破坏生态资 源的人参 栽种 方法是 近年来 人
参 栽培研究 的主要课题 。１８ ９２年林 下 山参 在辽 宁本 溪 试 种成功 ，使得这一 问题 得 到解 决 。林 下 山参 的生 态 环境 与野 山参相似 ，完全 自然 生长 ，而且能 保护生 态
平衡 ，其 品质及药用价值 接 近野 山参 的水 平 ，修 改的 《 野山参分等 质量》 标 准将 林下 播种 的 山参纳 入野 山 参范畴 ， ０５年版 《 国药 典》 补 充 说 明 中 ，将 原 ２０ 中
以及建立林 下山参 药材ห้องสมุดไป่ตู้指 纹 图谱 ，比较全 面地 研究 了林下 山参 的内在 质量 ，为 其正规 化 、产业 化发 展提 供 了科学基 础 。
１ 仪 器与试 药
２ ２色谱 条件 ．
Ｅ本 岛津 Ｌ 一０ Ｔｐ高效 液相 色谱仪 ；色谱 柱 ： ｔ Ｃ１Ａ ｖ
Ｄ ａ ｎｉ Ｃ８４ ６ × ５ ｍ ｉ ｍｏ ｓ １ ． ｍｍ ２ ０ ｍ，５ｘ ；流 动相 ：乙 ｌ （ ｔ ｍ） 腈 、水 （ 度 洗 脱 ） 梯 ；分析 时 间 ：１０ ｎ ０ ｍｉ ，０～３ ｍｎ ５ｉ 乙腈 ｌ ，３ ５ ｍ ｎ乙腈 ｌ ２ ９ ５～ ５ ｉ ９～ ９，５ ７ ｎ乙腈 ５～ ０ ｍｉ
野生人参 资源稀少 ，园参栽种 确实 成功 解决 了人 参 药用资源不足 的问题 ，然 而 园参 的毁林 种植 方式 严 重破 坏 了生态资源 ，国家 近年规定 禁止 新增 加种植 园 参林 地 ，但人参 用 量 的 日益 扩 大 使 人 参 药 材 来 源 减
Ｓ Ｄ １ Ａ ｐ紫外检 测器 （日本 岛津 公 司 ） Ｐ 一０ ｖ ，美 国 Ａ ｉ ｇ —
维普资讯
２０ 年 ４月 第 １ ０８ ０卷
第 ４期
中国现代中药 Ｍ ｄｍ ｈ ｅｅＭ ｄｃ ｅ ｏｅ Ｃ ｉ ｓ ｅｉ ｎ ｎ ｉ
Ａ ｒ２０ Ｖ １１ Ｎ ． ｐ． ０ ８ ｏ ０ ｏ４ ．
林 下 山参 的 人参 皂 苷 含 量分 析 和 指 纹 图谱研 究
姜 海平 ，窦德 强 ，荆淑琴。 ，刘凤 云。
（． １ 辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连
１ ６０ ２ 本溪市药品检验所，辽宁 本溪 １ ００ １ ２； ． ６ １ ０） ７
［ 摘要］目的：采用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ测定林下山参 、园参及红参 中 ３种主要人参皂苷一 ｇ 、 ｅ ｆ）的含量 ；采用 Ｈ Ｌ Ｒ， Ｒ 、一 ， ｕ Ｐ Ｃ建 立林下 山参 药材 的指纹 图谱 。方 法 ：人参 皂 苷含 量测 定 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ条 件 ：色谱 柱 为 Ｄａ ｏｓ ， （５ ｍ × ．ｍ ｉ ｎｉ Ｃ ２０ ｍ ４６ ｍ， ｍ ｌ 柱 ５ ｍ） ｔ ，流动相为乙腈 、水 （ ｘ 梯度洗脱 ） ，检测波 长２ ３ｍ，柱温 ３ ￣ ０ｎ ０Ｃ，流速 １０ Ｌ・ ｉ～，分析时间 １０ ｉ；指纹 图谱 ．ｍ ｍｎ ０ｒｎ ａ ＨＬ Ｐ Ｃ条件 ：色谱柱为 Ｚ ｒａ ＢＣ ｏｂｘＳ ＋ 柱 （５ ｍ × ． ｍ １０ ｍ ４６ ｍ，５ｘ ，流 动相 ：乙腈－．５ ｔ ｍ） ０ ０ ％磷 酸水溶液 （ 梯度 洗脱 ） ，检测 波长 ２ ３ｍ，柱温 ３ ￣ ０ｎ ０Ｃ，流速 １０ Ｌ ｍｎ ． ｍ ・ ｉ～，分析时间 ９ ｍｎ ０ ｉ。结果 ：园参 、红参 和林下 山参 的人参 皂苷 Ｒ ， ｕ ｇ、ｆ）含 量测定值没有显著性差异，一 ｅ Ｒ 的含量测定值有差异 ，林下山参 ＞园参 ＞ 参 ；共标示 出林下山参药材指纹 图谱 中 １ 红 ９
个共有峰 。利用指纹图谱相似 度测试软 件 ，以夹角余 弦为测 度 ，测得 １ 林下 山参 药材指纹 图谱相 似度结果 均在 ０批
０９ ．０—１Ｏ 。结论 ：人参皂苷含量测定方法稳定准确，重现性好 ，可作 为测定林下 山参 的 ３种皂苷 的较好方法 ；本实 ．０ 验所建立 的林下山参药材指纹图谱分析方法 准确 、重复性好 ，为有效控制林下 山参药材 的质量提供 了可靠依据。 ［ 关键词 ］人参 ；林下山参 ；人参皂 苷 ；Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ；指纹 图谱
Ｌ 一０ Ｔｐ高 效 液 相 色 谱 仪 （Ｅ本 岛 津公 司 ） Ｃ １Ａ ｖ ｔ ，
ｌｎ １０ 高 效 液 相 色 谱 仪 （ 括 Ｖ ｅｔ ２０ 包 ＷＤ 检 测 器 ） ，
Ａ５５ ｓ１０型超声 波 清洗仪 。人参 皂苷 Ｒ 。 ｅ ｂ 对 ｇ 、Ｒ 、Ｒ 。 照 品购于 中 国药 品生 物制 品检 定 所 ，人参 皂 苷 Ｒ ｂ、 Ｒ ｄ对照 品 由本 实验 室分 离 ，林 下 山参 药 材 由辽 宁省 本溪 市参茸 农 牧 场 和翔 云药 业 参 场 提 供 ，另一 部分 自购 于本溪 市 参 茸特 产 店 ，经 本 溪 市 药 品检 验 所 刘 风 云副教授 鉴定 均为 五加科 植物 人 参 Ｐ ｎ ｘｇｎｓｎ ａ ａ ｉ ｅｇ ｇ