ClC-3氯通道蛋白磷酸化及其功能的研究进展
ClC-3氯通道蛋白磷酸化及其功能的研究进展柏志全;李华荣;张海峰;朱林燕;王立伟;陈丽新【摘要】ClC - 3 channel is one of voltage - gated chloride channels for chloride ion transmembrane, and participates in a variety of physiological and pathological processes, such as cell volume regulation, proliferation, migration, apoptosis, organic release and acidification of synaptic vesicle. The ClC -3 channel is controlled by many factors, including phosphorylation and dephosphorylation, to regulate the opening and closing. PKA( protein kinase A ), PKB, PKC and calcium calmodulin kinase Ⅱ are the key kinases in cell signal transduction pathway, which take part in the processes of ClC - 3 channel phosphorylation and regulate their functions. The study of ClC - 3 phosphorylation and functions are helpful to understand the importance of ClC - 3 in physiological and pathological processes and are premise to exploit the channel drugs for clinical therapy.%@@ 细胞容积调节广泛参与细胞的各种生理病理过程,如上皮细胞物质转运、物质代谢、细胞兴奋性、激素释放、细胞迁移、细胞增殖及细胞坏死凋亡等[1, 2].在低渗环境刺激下,容积激活性氯通道参与细胞容积调节,对维持细胞容积起着重要调节作用.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)008【总页数】5页(P1647-1651)【关键词】ClC-3氯通道;磷酸化;信号转导通路【作者】柏志全;李华荣;张海峰;朱林燕;王立伟;陈丽新【作者单位】暨南大学医学院生理学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院生理学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院生理学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院药理学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院生理学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院药理学系,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】Q7细胞容积调节广泛参与细胞的各种生理病理过程，如上皮细胞物质转运、物质代谢、细胞兴奋性、激素释放、细胞迁移、细胞增殖及细胞坏死凋亡等［1，2］。
在低渗环境刺激下，容积激活性氯通道参与细胞容积调节，对维持细胞容积起着重要调节作用。
目前，普遍认为容积激活性氯通道的候选蛋白是电压门控氯通道家族蛋白成员3［voltage－gated chloride channel(ClC)family protein 3，ClC－3］。
ClC－3氯通道分布广泛，各种组织器官和细胞中都有表达，并且具有较高基础活性，通道开放，Cl－外流形成氯电流，参与细胞容积调节、介导物质跨膜转运、胞内有机物释放及突触囊泡酸化等过程。
不同生理病理过程中，各种刺激信号通过各自的信号通路转导或者直接刺激氯通道，导致通道开放或者关闭，说明ClC－3氯通道门控特性是由多种机制参与调节。
那么，研究ClC－3门控调节机制对理解其在多种生理病理过程的作用成为关键点。
磷酸化和去磷酸化是蛋白质功能调节的重要机制之一，通过磷酸化或去磷酸化使该蛋白激活或者失活从而影响其功能。
研究发现，多种蛋白激酶参与了ClC－3氯通道的开放或关闭过程。
因此，探讨不同蛋白激酶对ClC－3氯通道的调节，从而推断其在不同生理病理过程中的作用具有重要意义。
本文将讨论ClC－3氯通道相关蛋白激酶及其对ClC－3氯通道功能调节作用。
1 ClC－3氯通道及蛋白磷酸化1.1 ClC－3氯通道 ClC－3氯通道蛋白是电压门控氯离子通道ClC家族成员之一，该蛋白与ClC－4及ClC－5两种氯离子转运体氨基酸序列相近。
位于常染色体4q33区的CLCN3基因，编码ClC－3蛋白，ClC－3氯通道有2种亚型:其一，Transcript variant e(NM_173872.2)翻译的ClC－3e蛋白全长866个氨基酸;其二，Transcript variant b(NM_001829.2)翻译的ClC－3b蛋白全长818个氨基酸，ClC－3b在羧基末端较ClC－3e少48个氨基酸。
ClC－3由Sasaki等［3］在大鼠肾脏克隆并鉴定，随后研究发现该蛋白分布广泛，在不同种属的不同组织器官和细胞都有表达。
ClC－3蛋白不仅分布在细胞膜上，同时在胞浆和细胞核内都有分布［4，5］。
对其通道特性、生理功能研究时发现ClC－3氯通道可以调节细胞多种功能，参与到各种生理病理过程中，其开放或关闭受多种因素调节，如氯离子浓度、渗透压、pH、膜电位、ATP、钙离子及蛋白激酶等。
其中，已发现可以影响通道开放关闭的蛋白激酶如PKA (protein kinase A)、PKB、PKC等是各种信号通路中的关键蛋白激酶，可磷酸化下游蛋白使其行使功能。
不同刺激信号作用细胞后通过第二信使或第三信使激活这些蛋白激酶，它们通过对ClC－3氯通道的磷酸化影响其功能，如cAMP→PKA→ClC－3。
因此，ClC－3氯通道在不同生理病理过程中的功能受多种信号通路调节控制。
1.2 蛋白质磷酸化可逆性磷酸化是蛋白质功能调节的重要机制，蛋白激酶和磷酸酶通过磷酸化或去磷酸化调节蛋白质功能，参与调控细胞信号转导、基因转录翻译、细胞周期等过程。
细胞生命关键活动都有蛋白激酶介导磷酸化修饰参与，其中蛋白质可逆性磷酸化是细胞信号转导的重要方式。
真核生物蛋白质的磷酸化位点主要是丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸残基，而原核生物蛋白质磷酸化多发生在组氨酸、精氨酸和赖氨酸残基。
一种蛋白质可能存在多个磷酸化位点并受多种蛋白激酶和磷酸酶调控，因此对蛋白质磷酸化研究就比较复杂。
蛋白质磷酸化研究包括磷酸化类型、磷酸化位点预测及鉴定、磷酸化定量分析、磷酸化功能研究、磷酸化调控信号通路研究等。
2 ClC－3氯通道磷酸化及其功能ClC－3氯通道在低渗环境下被激活，通道开放，参与细胞多种生理调节过程，在细胞容积调节中具有重要作用。
多年研究发现，不仅低渗可以激活ClC－3氯通道，其它多种胞内或胞外刺激信号都可以使通道开放或者关闭。
这些信号如何激活或关闭ClC－3氯通道是多年来的研究热点。
以下将主要讨论磷酸化对通道开关的影响及其意义。
2.1 PKA信号通路 ClC－3、ClC－4和ClC－5属于ClC家族同一分支，ClC－5首次从大鼠脑克隆并鉴定，其80%氨基酸序列与ClC－3相同，并证实有PKA的磷酸化位点，然而人为提高细胞内cAMP浓度对其电流特性没有影响［6］。
PKA 激动剂forskolin可以明显激活小鼠睾丸细管中未成熟足细胞TM4的氯电流，其抑制剂H－89则能消除1，25(OH)2－D3激活的氯电流［7］。
Nagasaki等［8］较为详细研究了胞内cAMP对ClC－3的作用，结果显示8－BrcAMP可以抑制豚鼠心肌细胞低渗激活ClC－3电流;异丙肾上腺素在无钙条件下可以减低ClC－3电流;高表达ClC－3氯通道的NIH/3T3细胞，8－BrcAMP可抑制ClC－3电流，其效应可被PKA拮抗剂KT5720和ClC－3突变(S51A)阻断，提示cAMP通过PKA 磷酸化S51(PKC磷酸化位点)位丝氨酸抑制ClC－3电流。
但PKA是否确实通过磷酸化S51而影响ClC－3通道还有待于进一步证实，其主要原因有两点:第一，cAMP对ClC－5没有影响;其二，研究发现某些ClC－3突变体可以降低对氯离子通透性，其特性同ClC－5对氯离子的转运相似［9］，由此可推断该突变点附近可能存在PKA磷酸化位点。
G蛋白偶联受体→cAMP→PKA信号转导通路是经典激素信号转导通路，ClC－3通道可能是PKA效应蛋白之一。
正如上文所述异丙肾上腺素作用于肾上腺受体后，激活腺苷酸环化酶导致cAMP浓度升高，活化的PKA磷酸化ClC－3通道影响细胞功能。
cAMP→PKA信号转导通路不仅影响ClC－3通道，同时也影响其它阳离子通道如钾离子通道［10，11］，共同调节细胞容积维持内环境稳态。
2.2 Akt(PKB)信号通路磷脂酰肌醇3－激酶(phosphatidylinositol 3－kinase，PI3K)家族参与多种信号通路，该酶可使磷脂酰肌醇的3位磷酸化而生成PI－(3，4)P2和PI－(3，4，5)P3。
其中，IA型PI3K磷酸化磷脂酰肌醇形成的磷脂酰肌醇三磷酸酯(phosphatidylinositol 3，4，5－trisphosphate，PIP3)可调节下游Akt/PKB活性，该信号通路与肿瘤发生发展密切相关而备受关注［12，13］。
活化的Akt/PKB通过磷酸化下游许多靶蛋白如GSK－3β、Bad、caspase－9、NF－κB、CREB、p21Cip1和p27Kip1等，调节细胞多种活动如迁移、增殖和分化等。
ClC－3氯通道参与细胞多种功能，研究发现其在细胞迁移过程中具有重要作用。
Wnt通路是介导细胞迁移的主要信号通路，其中GSK－3β是该信号转导通路中关键蛋白激酶，GSK－3β同样也是Akt/ PKB信号通路的下游蛋白［14］，那么ClC－3氯通道是否作为这些信号通路的最终效应蛋白从而影响细胞迁移。
目前没有直接证据说明PKB和GSK－3β影响ClC－3氯通道的报道。
Tang等［15，16］在研究内皮素对大鼠基底血管平滑肌增殖时发现，利用siRNA干扰阻断ClC－3表达后，PKB和GSK－3β的磷酸化程度明显减弱。
该结果可推测ClC－3氯通道可能是PKB或GSK－3β信号通路中的参与者。
因此，细胞外刺激信号是否通过PKB或GSK－3β信号通路影响ClC－3氯通道从而调节细胞功能还有待于进一步证实。
氯离子通道蛋白在卵巢癌发生及发展中作用的研究进展
• 314•中华实用诊断与治疗杂志2021年3月第35卷第3期J Chin Pract Diagn Ther.Mar. 2021, Vol. 35, No. 3•综述•氯离子通道蛋白在卵巢癌发生及发展中作用的研究进展陈国通1，张颖21.广东医科大学2018级，广东湛江524000:2.广东医科大学附属医院妇产科.广东湛江524000摘要：卵巢癌早期症状不典型，多数患者明确诊断时已处于中晚期，病死率较高。
氯离子通道相关蛋白如钙离子激活氯离子通道蛋白1、细胞内氯离子通道蛋内1等在维持细胞功能、细胞膜两侧电位和细胞状态中发挥重要作用。
氯离子通 道蛋白过表达可促进卵巢癌的发生、发展.其可作为卵巢癌诊断的新型肿瘤标志物、治疗靶点。
本文就氯离子通道蛋白在卵巢癌发生、发展中作用的研究进展作一综述。
关键词：卵巢癌；氣离子通道；肿瘤标志物Role of chloride ion channel in the occurrence and development of ovarian cancerCHEN Guo-tong1 . Z H ANG Ying'i.Oracle 2018^ Guangdong M edical University-, Zhunjiang-, Guan^Jong 524000 %Chi?ta; 2. De p artm ent o f Obstetricsand Gynecology ^the A f J iliatecl H ospital o f Guangdong M edical University^ Zhanj ian^ •GucuigcIo?tg 524000 *China Corresponding BUthor：Z H ANG Ying, E-mail：*********************Abstract ：The early symptoms of ovarian cancer are not typical, and mosl patients are in the middle and advanced stages at diagnosis, therefore the mortality rate is high. The expressions of chloride channel-related proteins as calcium-activated chloride channel protein 1. chloride intracellular channel protein 1and other proteins play important roles in maintaining cell function, potential on both sides of the cell membrane, and cell state. It is believed that the overexpression of chloride ion channel can promote the occurrence and development of ovarian cancer, and it can be used as a new tumor marker and therapeutic target for the diagnosis of ovarian cancer. This paper reviews the research progre.ss of the role of chloride ion channel in the occurrence and development of ovarian cancer.Keywords：ovarian cancer；chloride ion channel；tumor markers卵巢癌早期症状不典型，多数患者明确诊断时已 处于晚期，病死率较高L。
ClC-3沉默介导溶酶体酸化阻滞及自噬抑制增敏化疗和光热治疗
ClC-3沉默介导溶酶体酸化阻滞及自噬抑制增敏化疗和光热治疗ClC-3沉默介导溶酶体酸化阻滞及自噬抑制增敏化疗和光热治疗溶酶体是细胞内重要的液泡，在面对外源性或内源性的应激反应时扮演着关键的角色。
溶酶体通过酸化的环境和多种酶类的参与，参与了细胞的废物降解、组织修复和免疫应答等重要生物学过程。
然而，过度活化的溶酶体可能导致细胞发生凋亡或坏死，进而引发多种疾病。
因此，溶酶体的功能调控对于维持细胞正常生理功能具有重要意义。
ClC-3 (Chloride Channel 3)是一种高度保守的氯离子通道，广泛分布于多种细胞类型的溶酶体膜。
已有的研究表明，ClC-3参与了细胞内外物质的运输、溶酶体的pH调节、细胞凋亡和自噬过程。
近期的研究发现，ClC-3沉默能够引起溶酶体的酸化阻滞和自噬抑制，进而增强化疗和光热治疗的疗效。
首先，ClC-3沉默引起的溶酶体酸化阻滞能够增强化疗的效果。
溶酶体pH的调节对于维持细胞的稳态至关重要。
正常情况下，溶酶体通过H+-ATPase负责将负荷进入的质子排出，在溶酶体内部维持酸性环境。
然而，ClC-3沉默能够抑制H+-ATPase的功能，导致溶酶体内部pH的增加。
这种酸化阻滞会干扰溶酶体相关的酶活性，抑制细胞内外废物的降解，进而增加药物在溶酶体内的积聚。
因此，在ClC-3沉默的细胞中，化疗药物的有效浓度会增加，从而增强了化疗的疗效。
其次，ClC-3沉默抑制了自噬过程，并增加了光热治疗的敏感性。
自噬是一种细胞自我降解和组织修复的重要途径。
然而，过度活化的自噬也可能导致细胞死亡。
研究发现，ClC-3沉默能够降低自噬的活性，从而促使细胞更容易发生凋亡。
另外，光热治疗常常利用纳米材料在光照下转化为热能，破坏肿瘤细胞结构以达到治疗的效果。
通过ClC-3沉默抑制自噬，可进一步增加肿瘤细胞对光热的敏感性，从而提高光热治疗的疗效。
综上所述，ClC-3沉默通过引发溶酶体的酸化阻滞和自噬抑制，不仅增加了化疗药物在溶酶体的积聚，增强了化疗的疗效，还提高了肿瘤细胞对光热治疗的敏感性。
抑制ClC3表达促进顺铂诱导人省略OV3DDP细胞凋亡的作用机制于春艳
·实验与基础研究·抑制ClC －3表达促进顺铂诱导人卵巢癌SKOV3/DDP 细胞凋亡的作用机制①于春艳刘希②苏静③钟加滕③孙连坤③刘玉和④北华大学基础医学院病理学教研室（吉林吉林）132013中国图书分类号R737.31文献标识码A文章编号1001-4411（2013）06-1004-03；doi ：10.7620/zgfybj.j.issn.1001－4411.2013.28.41①吉林省教育厅资助课题〔吉教科合字2009第156号，吉教科合字2011第117号，吉教科合字2012第394号〕；吉林省科技厅自然科学基金资助课题〔201215103〕②北华大学化学与生物学院③吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室④通讯作者E －mail ：bhlyh1959@【摘要】目的：探讨抑制ClC －3基因表达对顺铂（DDP ）复制的人卵巢癌SKOV3/DDP 细胞损伤促进作用过程中的具体作用机制，为应用DDP 治疗卵巢癌提供实验依据。
方法：转染pSH1－siRNA －ClC －3重组质粒到人卵巢癌SKOV3/DDP 细胞，Western blotting 方法观察热休克蛋白（HSP70）、溶酶体组织蛋白酶D （cathepsin D ）蛋白表达。
结果：与SKOV3细胞比较，SK-OV3/DDP 细胞中HSP70蛋白表达增加（P ＜0.05）。
转染pSH1－siRNA －ClC －3重组质粒联合DDP 作用后，SKOV3/DDP 细胞中HSP70蛋白表达降低（P ＜0.05），cathepsin D 蛋白表达增加（P ＜0.05）。
结论：抑制ClC －3基因表达促进顺铂诱导SKOV3/DDP 细胞凋亡的可能作用机制与溶酶体膜通透性（LMP ）增加有关。
【关键词】卵巢肿瘤氯通道－3顺铂热休克蛋白溶酶体膜通透性Mechanism of promoting effect of inhibition of ClC －3expression on apoptosis ofhuman ovarian cancer SKOV 3/DDP cells induced by cisplatinYU Chun －Yan ，LIU Xi ，SU Jing et al .Department of Pathology ，Basic Medical College ，Beihua University ，Jilin 132013，Jilin ，China〔Abstract 〕Objective ：To explore the specific mechanism of promoting effect of inhibition of chloride channel －3（ClC －3）ex-pression on human ovarian cancer SKOV3/DDP cell injury induced by cisplatin ，and provide an experimental basis for treating ovarian cancer with DDP.Methods ：pSH1－siRNA －ClC －3recombinant plasmid was transfected into human ovarian cancer SKOV3/DDP cells ，Western blotting was used to observe the expressions of heat shock protein 70（HSP70）and lysosomal cathepsin D （cathepsin D ）.Results ：Com-pared with SKOV3cells ，HSP70expression increased in SKOV3/DDP cells （P ＜0.05）.HSP70expression decreased （P ＜0.05）and ca-thepsin D expression increased in human ovarian cancer SKOV3/DDP cells after treated with transfection of pSH1－siRNA －ClC －3recom-binant plasmid combined with DDP.Conclusion ：The mechanism of promting effect of inhibition of ClC －3expression on apoptosis of hu-man ovarian cancer SKOV3/DDP cells induced by cisplatin may be related to increase of permeability of lysosomal membrane.〔Key words 〕Ovarian tumor ；Chloride channel －3；Cisplatin ；Heat shock protein 70；Permeability of lysosomal membrane尽管顺铂（cisplatin ，DDP ）是临床上常用的抗肿瘤药物，诱导肿瘤细胞发生凋亡〔1〕，然而，采用DDP 治疗时常常发生肿瘤细胞获得耐药性〔2〕。
心脏ClC-3容积感受性氯离子通道研究进展
心脏ClC-3容积感受性氯离子通道研究进展作者：薄冰来源：《科技资讯》 2014年第15期薄冰(河南大学体育学院运动人体科学教研室河南开封 475000)摘要:本文对于ClC-3容积感受性氯离子通道在心血管疾病中的作用进行综述,该通道在心肌细胞容积稳定、心肌缺血再灌注、心肌肥厚及心力衰竭等状态下的电生理活动中发挥重要作用,并为多种心律失常的机制探讨及治疗提供理论依据。
关键词:ClC-3氯离子通道心脏细胞容积电生理中图分类号:R541 文献标积码:A 文章编号:1672-3791(2014)05(c)-0223-02ClC-3是ClC电压门控氯离子(Cl-)通道基因家族成员之一[1],1994年,Kawasaki等[2]首次应用聚合酶链反应技术在大鼠肾脏中克隆出ClC-3 cDNA,该基因可表达生成一种生物学及药理学特性与心肌容积感受性氯离子通道(volume-regulated Cl- channels,VRCCs)一致的外向整流Cl-通道,随后的相关实验也证实ClC-3基因是构成心肌细胞容积感受性氯离子电流(ICl,vol)的主要分子结构基础[3～5]。
应用ClC-3基因敲除小鼠(Clcn3-/-)的研究发现,Clcn3-/-小鼠心脏中VRCCs的特性发生明显变化,除ClC-3外的一些膜蛋白也发生了明显的变化。
Xiong等[6]对心脏ClC-3基因敲除小鼠研究发现,组成内源性VRCCs的ClC-3基因表达出现时间依赖性失活现象,并累及心脏功能。
因此,本文将就ClC-3型Cl-通道在心脏功能活动中作用的近期研究进行综述,为进一步探讨该通道在心肌缺血/再灌注、心肌肥大及心力衰竭等病理状态下的作用提供理论依据。
1 ClC-3氯离子通道与细胞容积稳定细胞容积的急性增加可引起容积下降调节(regulatory volume decrease, RVD)机制的产生并引导细胞回归至正常体积,以防止细胞结构及功能的完整性遭受破坏。
ClC型氯离子通道的研究_陈丽娥
ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ ＯＦ ＬＩＦＥ ２０１０，３０（４）文章编号： １０００－１３３６（２０１０）04－0549-05ＣｌＣ型氯离子通道的研究陈丽娥 谢 浩武汉理工大学理学院，武汉 ４３００７０摘要：ＣｌＣ型氯离子通道是一类分布广泛的阴离子通道，参与多种生理过程，如ｐＨ及静息膜电位和兴奋性的调节、细胞内囊泡的酸化和细胞体积调节等，其基因突变或功能异常都可导致多种疾病的发生。
对于ＣｌＣ型氯离子通道结构与功能关系的研究，有助于理解相关疾病的分子机制。
本文简要介绍了ＣｌＣ型氯离子通道的分类与性质、分子结构与作用机制、以及结构和表达异常所导致的主要生理变化和疾病。
关键词：ＣｌＣ型氯离子通道；蛋白质结构；突变中图分类号：Ｑ５１收稿日期：２０１０－０２－２５国家自然科学基金（Ｎｏ． ３０６００００４）；教育部留学回国人员科研启动基金（教外司留［２００７］１１０８号）资助作者简介：陈丽娥（１９８６－），女，硕士生，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｌｉｅ５９９＠１２６．ｃｏｍ；谢浩（１９７１－），男，博士，教授，通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｒｘｉｅｈａｏ＠１２６．ｃｏｍ氯离子是各种生物体细胞丰富和常见的阴离子，能够被多种二次激活氯离子通道和转运蛋白选择性地运输。
氯离子通道是分布于细胞膜或细胞器质膜上的一类能够转运氯离子及其他阴离子的通道蛋白，大致可分为电压门控氯离子通道（ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌ， ＣｌＣ）、囊性纤维化跨膜传导调节因子（ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅｒｅｇｕｌａｔｏｒ， ＣＦＴＲ）、钙离子激活的氯离子通道（ｃａｌｃｉｕｍａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌ， ＣａＣＣ）、容积调控性氯离子通道（ｖｏｌｕｍｅ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌｓ， ＶＲＡＣ）、配体激活的氯离子通道（ｌｉｇａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌｓ）等［１］。
T淋巴细胞膜上离子通道与免疫性疾病的关系
T淋巴细胞膜上离子通道与免疫性疾病的关系凌志扬;李有伟;付青姐【摘要】T淋巴细胞上存在多种类型的离子通道,主要有电压门控性K+通道(KV1.3),Ca2+激活K+通道(Kca3.1)、Ca2+释放激活的Ca2++通道(CRAC)、瞬时受体电位通道(TRPM7)及细胞容积调节的C1-通道(Clswell)5种类型.这些离子通道共同参与T淋巴细胞的激活、分化等免疫调节过程,参与T淋巴细胞凋亡及体积调节等过程,与很多自身免疫性疾病息息相关.就T淋巴细胞上离子通道的分类、离子通道与淋巴细胞功能的关系、离子通道与免疫性疾病及在临床上的应用等方面进行综述.【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2017(034)002【总页数】5页(P180-183,189)【关键词】T淋巴细胞;离子通道;免疫功能【作者】凌志扬;李有伟;付青姐【作者单位】266071山东青岛,解放军401医院药剂科;266071山东青岛,解放军401医院药剂科;266071山东青岛,解放军401医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R331.4离子通道分布于各种细胞，如心肌细胞、平滑肌细胞和神经元，是许多药物的作用靶点。
对免疫系统离子通道的研究已有30余年，其中T淋巴细胞可表达多种类型的离子通道。
目前研究较多的有5种类型的离子通道，包括电压门控性K+通道（KV1.3），Ca2+激活K+通道（Kca3.1）、Ca2+释放激活的Ca2+通道（CRAC）、瞬时受体电位通道（TRPM7）及细胞容积调节的Cl-通道（Clswell），此外，在T淋巴细胞上还存在电压门控性的Na+通道及不同于KV1.3和Kca3.1的K+通道等。
这些离子通道在T淋巴细胞膜上形成离子通道网络，共同参与T淋巴细胞的激活、分化、体积调节及细胞凋亡过程。
首先在分子水平，STIM1和Orail蛋白共同激活CRAC通道，引起内质网Ca2+贮存消耗。
在亚细胞水平，钾通道与钙通道集中分布于免疫突触，共同构成信号复合体，参与免疫突触的信号转导过程。
氯离子通道CLC-3在乳腺癌中的表达及临床意义
定浓度 范围及 作用 时间 内， 对人角膜基质 细胞增殖 和存活率 没有 明显影 响 ， 可以在这一浓度及 时间作用
下对培养 的人 角膜基质 细胞 进行研究 ， 能够更 准确 的 显 示细胞 正常生存状态下变化和所受 的影响 。
参 考文 献 ：
［ ］ ｌ ，ｕｕａ ，ｅｉ ， ａ￣ ｍ Ｙ ｌｌ日 Ｎ Ｎ ｉ ． Ｉｂ ０ １ｈ Ｆｋｄ Ｓ Ｎ ｋ ｍ １１ Ｙ Ｋ ｋＫ （Ｉ ＩＩ ， ｉ ｄ Ｔ Ｉ Ｉ ｜ ￣ ａ ｒｉ Ｉ ｌ
因子促进 白细胞 浸润进而促进角膜溃疡的形成【 。 ２ Ｊ Ｔｌ ｏ 样受体 ４ ｌ 作为脂多糖 的主要受体识别革兰阴性 菌的 内毒 素脂多糖【 参 与 ＬＳ ３， ３ Ｊ Ｐ 信号 的跨膜转导 ， ＩＳ ． 首先与血清中的 Ｃ １ 结合 ， Ｐ Ｄ４ 然后被 Ｔ Ｒ 识别 ， Ｌ４ 信号经过 Ｔ Ｒ 跨膜转导进入细胞 内，Ｌ ４ Ｌ４ Ｔ Ｒ 转导通 路中 的信号蛋 白及 下游 转 录 因子 在 数量 、 构 和 功 结 能上发 生改变 ， 可引起炎 性 因子释放 、 抗炎 因子产 生 减少 ， 并导致特定信号通路的激活。合理应用这一 药物是 实验成败 的关键 。
（ 收稿 日期：０７ ２ ４ ２０ —１ —２ ）
文章编号 ： ０ ４８ （０９０ —０ ５ —０ １ ７— ２７ ２０ ）３ ３０ ３ ０
氯 离子 通道 Ｃ Ｃ３在 乳 腺癌 中的表 达及 临床意义 Ｌ一
赵 维 王 ， 岩 Ｈ ， 振 国‘孙连坤 张录 民 韩 ， ，
（． １吉林大学中 日联谊 医院 胸外科 ， 吉林 长春 １０３ ； ． ３０３ ２ 吉林大学基础医学院病理 生理教研室 ； ． 省人 民医院 胸外科 ） ３ 吉林 摘要 ： 目的 研究氯离子通道 Ｃ Ｃ３ Ｌ ． 在乳腺癌组织 中的表达， 探讨其在乳腺癌诊断方面的临床意义及为乳腺癌发 生发展方面进一步研究提 供基础 。方法 在 ２ 例行乳腺癌改 良根治术的乳腺癌患者中， ７ 分别将乳腺癌癌灶和周围正
氯离子通道ClC_3研究进展_陈临溪
氯离子( Cl- ) 是 生物体内最多的阴离子, 通过 跨膜转运和阴离子通道参与各种生物功能, Cl- 的 跨膜转运形成 Cl- 电流, 很久以前就用电生理方法 记录到了, 一直当作/ 漏电流0而被忽视, 近来由于膜 片钳技术的应用, 特别是分子生物学技术的发展, 大 大推 进了 Cl- 通道( chloride channel ) 的研究, 1990 年 Jent sch 和同事首先在电鳐电器官上克隆了电压 门控 Cl- 通道( voltage- gat ed chloride channel) , 取得 了突破性进展[ 1] 。之后发现了大量的 Cl- 通道, 形 成了一个 Cl- 通道家族( ClC) , ClC 基因存在于几乎 所有生物体。在哺乳动物已发现 9 种 ClC 同源体, ClC 1~ 17, ClCKa, ClCKb, 分属于 ABC3 个亚族, 各 Cl- 通道有 30% ~ 80% 的同源序列。
肺, 支气管, 血管, 鼻
Tab 1 Expressi on of ClC- 3 i n aninal, organ and cell
细胞 脑血管内皮细胞, 肾集合管联接管闰细胞, 肾皮质, 肾内髓 集合管细 胞系 mIM CD-K 2, 胰腺 腺泡细 胞, 视上核神经元, 神经元突触囊泡, 海马, 嗅觉皮层, 嗅球, 耳蜗外毛细胞 神经元突触囊泡 心房心室肌细胞, 肾动脉平滑肌细胞, 肺动脉平滑肌细胞, 结肠平滑肌细胞 心室肌细胞 心房心室肌细胞
r 讲座与综述 r
中国药理学通报 Chinese Phar macological Bulletin 2002 O ct; 18( 5)
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氯离子通道 ClC- 3 研究进展*
Src激酶的功能研究新进展
第１４卷第１期２００２年２月生命科学ＣｈｉｎｅｓｅＢｕＩＩｅｔｉｎｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓＶｂｌ．１４．Ｎｏ．１Ｆ色ｂ．，２００２文章编号：１００４一０３７４（２００２）０１—００５０—０３Ｓｒｃ激酶的功能研究新进展白晓春，罗深秋，白洁（第一军医大学细胞生物与医学遗传学教研室，广州５１０５１５）摘要：Ｓｒｃ激酶家族是具有酪氨酸蛋白激酶活性的蛋白质。
作为连接许多细胞外和细胞内重要信号途径的膜结合开关分子，Ｓｒｃ激酶在受体介导的信号传递及细胞间通讯中具中心调节作用。
最近发现它在淋巴因子介导的细胞存活及血管内皮生长因子介导的血管发生中也具有重要作用。
关键词：Ｓｒｃ激酶；功能；信号传递中图分类号：Ｑ７１；Ｑ５１文献标识码：ＡＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｓｔｕｄｙｏｆＳｒｃｋｉｎａｓｅｓｆ．ｕｎｃｔｉｏｎＢＡＩＸｉａｏ—Ｃｈｕｎ，ＬＵＯＳｈｅｎ～Ｑｉｕ，ＢＡＩＪｉｅ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｅｌｌＢｉ０１０９ｙａｎｄＭｅｄｉｃａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａＬｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉＶｅｒｓｉｔｙ）Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＳｒｃｋｉｎａｓｅｆａｍｉｌｙｈａｖｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅａｎｄｐｌａｙａｐｉＶｏｔａｌｒｏＩｅａＳａｍｅｍｂｒａｎｅ～ａｔｔａｃｈｅｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｗｉｔｃｈｅｓｔｈａｔｌｉｎｋａＶａｒｉｅｔｙｏｆｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃｕｅｓｔｏｃｒｕｃｉａｌｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ．ＲｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａＶｅｄｅｍｏｎｓｔｒａ土ｅｄｔｈａｔｉｎａｄｄｉｔｉｏｎｔｏｔｈｅｉｒｃｅｎｔｒａｌｒｏｌｅｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｃｅｌｌｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，Ｓｒｃｋｉｎａｓｅｆａｍｉｌｙｐｌａｙａｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄｃｅｌｌｓｕｒＶｉｖａｌａｎｄＶＥＧＦ—ｉｎｄｕｃｅｄａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｒｃｋｉｎａｓｅ；ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎＳｒｃ作为一个癌基因蛋白起初发现于Ｒｏｕｓ肉瘤逆转录病毒（ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓＲｏｕｓｓａｒｃｏｍａｖｉｒｕｓ），随后发现在细胞中普遍存在高度保守并与其同源的Ｖ—Ｓｒｃ。
卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异
中国病理生理杂志 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ２０１９，３５（５）：７８４７９０ 杂志网址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｊｐｐ．ｎｅｔ
卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞 ＣｌＣ３蛋白 表达及通道功能的差异
封洁珠１， 李恩泽１， 彭子瀚１， 裴一飞１， 朱林燕１△ ， 高绿芬２△
ＦＥＮＧＪｉｅｚｈｕ１，ＬＩＥｎｚｅ１，ＰＥＮＧＺｉｈａｎ１，ＰＥＩＹｉｆｅｉ１，ＺＨＵＬｉｎｙａｎ１△ ，ＧＡＯＬüｆｅｎ２
（１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓ＆Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉ ｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２，Ｃｈｉｎａ．Ｅｍａｉｌ：ｔｚｈｕｌｙ＠ｊｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；ＦＲＥＳＨＬＵＣＹ０７＠１２６．ｃｏｍ） ［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］ ＡＩＭ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆＣｌＣ３ｃｈｌｏｒｉｄｅｃｈａｎｎｅｌｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｃｈａｎｎｅｌｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎｃｉｓｐｌａｔｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｅ（ａ２７８０）ａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｔ（ａ２７８０ｃｐ）ｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆａ２７８０ ａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃｉｓｐｌａｔｉｎｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＴＴａｓｓａｙ．ＴｈｅｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｌＣ ｃｈｌｏｒｉｄｅｃｈａｎｎｅｌｆａｍｉｌｉｅｓｉｎａ２７８０ｃｅｌｌｓａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． ＴｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＣｌＣ３ｐｒｏｔｅｉｎｉｎａ２７８０ｃｅｌｌｓａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ ｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐａｔｃｈｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓｕｓｅｄｔｏｒｅｃｏｒｄｔｈｅｃｈｌｏｒｉｄｅｃｕｒｒｅｎｔｉｎｔｈｅｃｅｌｌｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ：Ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆ ａ２７８０ｃｅｌｌｓａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｔｏｃｉｓｐｌａｔｉｎｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．ＴｈｅＩＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆａ２７８０ｃｅｌｌｓａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｔｏｃｉｓｐｌａｔｉｎｗｅｒｅ ５μｍｏｌ／Ｌａｎｄ２０μｍｏｌ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ（Ｐ＜００１）．Ｔｈｅａ２７８０ｃｅｌｌｓａｎｄａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｍａｉｎｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄＣｌＣ３ｉｎＣｌＣ ｆａｍｉｌｉｅｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｌＣ３ｗａｓｍｕｃｈｌｏｗｅｒｉｎａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｔｈａｎｔｈａｔｉｎａ２７８０ｃｅｌｌｓ（Ｐ＜００１）． Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈａ２７８０ｃｅｌｌｓ，ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｌＣ３ｉｎａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓｗａｓａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００１）． ＣｌＣ３ｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｍａｉｎｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｏｎｔｈｅｍｅｍｂｒａｎｅｉｎａ２７８０ｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｌｅｗａｓｉｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｉｎａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓ．Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄｔｈｅｃｈｌｏｒｉｄｅｃｈａｎｎｅｌａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｃｈｌｏｒｉｄｅｃｕｒｒｅｎｔｉｎｔｈｅａ２７８０ｃｅｌｌｓ，ｂｕｔｎｏｔｉｎｔｈｅａ２７８０ｃｐｃｅｌｌｓ．Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｄｉｄｎｏｔｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｃｈｌｏｒｉｄｅｃｕｒｒｅｎｔｉｎａ２７８０ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＣｌＣ３ｓｉＲＮＡ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｐｒｏｔｅｉｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＣｌＣ３ｃｈｌｏｒｉｄｅｃｈａｎｎｅｌｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｃｉｓｐｌａｔｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｔｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｃｈｍａｙｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｃｉｓｐｌａｔｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ． ［ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ］ Ｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒ；ＣｌＣ３；Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ；Ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ