实验3 死活细胞的鉴定
细胞死活鉴定 实验报告
细胞生物学实验报告细胞死活鉴定1.实验目的：观察上次实验培养的小鼠脾细胞，掌握细胞死活鉴定的方法。
2.实验用品：（1）仪器及器材：显微镜、血细胞鉴定板、盖玻片、胶头滴管、试管（2）实验药品：蒸馏水、台盼蓝染液、生理盐水、伊红染液（3）实验材料：小鼠脾细胞3.实验原理：（1）活细胞特征：细胞边缘清晰，细胞透明度高，整体立体感强，核区域明显，细胞质内颗粒物质较少，无空泡。
培养数天后，可观察到正在分裂的细胞。
（2）肉眼观察鉴定细胞死活：正常生长的细胞培养液微微发黄，透明度高；如发现培养液微混，则说明细胞量太大需进行传代培养，或者培养液被污染；如果培养液仍呈现清亮的粉红色，则说明细胞未生长。
（3）细胞凋亡特征过程：首先，细胞膜绒毛消失；然后，细胞收缩，细胞核高度浓缩，边缘化；最后，细胞核片段化，形成凋亡小体。
细胞核片段化时，如果对此类细胞进行DNA电泳，则会发现电泳条带呈梯状分布。
（4）细胞死活鉴定方法①染色排除法：细胞死亡后，细胞膜的通透性变大，染料可以通过细胞膜进入细胞。
因此，死细胞可以被染料染色，而活细胞由于细胞膜的选择透过性而呈无色。
②荧光染色法：活细胞需要进行代谢。
将荧光染料与有机分子结合（如二丙酸酯荧光素），使之易穿膜。
在活细胞中这些物质可被分解为荧光染料和有机分子（二丙酸酯和荧光素），在显微镜下观察，细胞被染色。
此种方法中，活细胞被染色，死细胞则呈无色。
（5）血细胞计数板的用法：如果是对比较密的细胞进行计数（如红细胞），则使用中间的中格进行计数，再将所得数值乘以2500，即是每毫升中的细胞数量；如果是对比较稀疏的细胞进行计数（如白细胞），则使用四个角上的大格进行计数，再将所得数值乘以10000，即是每毫升中的细胞数量。
4.实验步骤：（1）台盼蓝染色法：①用生理盐水制成0.4%的台盼蓝溶液备用②取0.5ml细胞悬液放入干净试管中，加一滴染液，混合。
2 mins 后迅速制成临时装片，镜检。
（2）伊红丫染色法①用生理盐水制成0.15%的伊红染液混合② 2 mins 后制片镜检5.实验结果：视野中活细胞呈无色；死细胞呈蓝色，有些可观察到细胞核；还有少量细胞只有边缘部分呈蓝色。
细胞死活鉴定实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞死活鉴定的原理和方法。
2. 学会使用显微镜观察细胞形态和结构，判断细胞的死活。
3. 了解细胞膜通透性在细胞死活鉴定中的作用。
二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位，细胞的死活状态对其生物学功能具有重要意义。
细胞膜是细胞的重要结构，具有选择性通透性，能够控制物质进出细胞。
活细胞的细胞膜对物质的选择性通透性较强，而死细胞的细胞膜通透性增加，物质更容易进出细胞。
本实验通过观察细胞对染料的摄取情况，判断细胞的死活。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：活细胞悬液、死细胞悬液、台盼蓝染液、生理盐水、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。
2. 实验仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、生理盐水、台盼蓝染液等。
四、实验步骤1. 准备载玻片和盖玻片，将载玻片用生理盐水清洗干净，晾干。
2. 分别取活细胞悬液和死细胞悬液各1滴，滴在载玻片上。
3. 分别将活细胞悬液和死细胞悬液各1滴，滴在盖玻片上，使细胞均匀分布。
4. 将载玻片放在显微镜下观察，调整显微镜的焦距，使细胞清晰可见。
5. 将台盼蓝染液滴在盖玻片边缘，用滴管轻轻吸取染液，使染液均匀覆盖在细胞上。
6. 观察细胞对染料的摄取情况，记录活细胞和死细胞的数量。
7. 重复实验，取不同浓度的台盼蓝染液进行实验，观察细胞对染料的摄取情况。
五、实验结果与分析1. 实验结果显示，活细胞对台盼蓝染液的摄取较少，死细胞对染液的摄取较多。
2. 随着台盼蓝染液浓度的增加，细胞对染液的摄取逐渐增多。
3. 分析原因：活细胞的细胞膜具有选择性通透性，对台盼蓝染液的摄取较少；而死细胞的细胞膜通透性增加，对染液的摄取较多。
六、实验结论通过本实验，我们掌握了细胞死活鉴定的原理和方法，了解了细胞膜通透性在细胞死活鉴定中的作用。
实验结果表明，活细胞对台盼蓝染液的摄取较少，而死细胞对染液的摄取较多，这与细胞膜通透性的差异有关。
七、实验讨论1. 实验过程中，需要注意载玻片和盖玻片的清洁，避免杂质对实验结果的影响。
高中判断细胞死活的方法
高中判断细胞死活的方法1、细胞活染色法是判断细胞死活的最常用的方法。
细胞活染色是利用细胞内的染料色素向细胞的细胞膜渗透，从而判断细胞的活性，根据细胞的染色状态可以分析出细胞存活与否的情况。
活细胞可以将染料色素向细胞膜渗透内，释放着色素，从而使整个细胞呈现深色；死亡细胞不能将染料色素渗入细胞膜内，整个细胞只有简单的荧光。
2、细胞凝固染色法也是判断细胞死活的一种方法。
凝固染色法分为偏光显微镜和免疫染色两种方法。
偏光显微镜利用偏光显微镜来分析死亡细胞，活细胞细胞膜会很完整，上面有凝固，而死亡细胞细胞膜会出现破坏，凝固状态比较差；免疫染色法是通过特殊抗体将活细胞与死亡细胞区分开来，根据活细胞与死亡细胞的染色状态可以判断细胞死活情况。
二、细胞死活相关试剂1、细胞活染色的试剂：培养基、染料色素、抗体，这些试剂都可以用来判断细胞死活情况。
2、凝固染色的试剂：偏光显微镜试剂包含：偏光显微镜、抗体和染料；免疫染色的试剂包含：抗体和染料。
三、实验操作1、细胞活染色实验操作：（1）将细胞样本用培养基取出，然后放入低温室，调节温度到4℃；（2）根据细胞类型，将染料色素和抗体按比例混合；（3）将混合物和细胞样本放入封闭状态的容器中，搅拌均匀；（4）将容器放置于25℃恒温环境，等待细胞染色；（5）观察染色状态，分析细胞的活性，根据染色状态判断细胞存活与否的情况。
2、凝固染色实验操作：（1）准备偏光显微镜和免疫染色所需的试剂；（2）取出细胞样本，利用偏光显微镜对细胞进行检测，观察细胞膜的凝固状态；（3）将免疫染色试剂混合，混合物和细胞样本放入封闭状态的容器中，搅拌均匀；（4）将容器放置于25℃恒温环境，等待细胞染色；（5）观察染色状态，分析细胞的活性，根据染色状态判断细胞存活与否的情况。
四、细胞死活判断的重要性为了判断细胞死活，需要使用活染色和凝固染色方法，以准确地判断细胞的活性、数量以及存活情况。
细胞死活的判断很重要，因为它可以帮助我们研究细胞的生命周期，认识生物的机理，从而探索生物的发展规律，发现新的生物科学，为生命科学及其应用提供有价值的研究和发现。
死活细胞的鉴定方法
死活细胞的鉴定方法The document was prepared on January 2, 2021活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义.细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况,需要经常测定细胞的存活率；在肿瘤细胞的研究中,为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力,也需要测定肿瘤细胞的存活率.在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用,例如为了检测某一男子的生育能力,测定精子细胞的存活力是比较常用的办法.死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法和仪器分析法.染色法是常用的细胞死活鉴定方法,简便,易于操作.但是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活,实验结果很容易受操作者的主观因素的影响,存在一定的误差,所以,在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测.不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理,但无论采用何种办法,都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异.常用的方法包括染色法和仪器分析法.1 染色法染色法分化学染色法和荧光染色法,根据染色机理的不同,染料或使死细胞着色,或使活细胞着色.死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加.常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质.台盼蓝,又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜.所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色.甲基蓝有类似的染色机理.植物细胞的质壁分离也可鉴定死活.死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据.美蓝是一种无毒染料,氧化型为蓝色,还原型为无色.由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型,因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱,使美蓝处于氧化态,从而被染成蓝色或淡蓝色.荧光素双醋酸酯FDA是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料,其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：FDA本身不产生荧光,也无极性,能自由渗透出入完整的细胞膜.当FDA进入活细胞后,被细胞内的脂酶分解,生成有极性的、能产生荧光的物质——荧光素,该物质不能自由透过活的细胞膜,积累在细胞膜内,因而使有活力的细胞产生绿色荧光；而无活力的细胞因不能使FDA分解,而无法产生荧光.除此之外,还有一些细胞器的专有染料.如液泡系的专有染料中性红.中性红是一种低毒性染料,可以使活细胞液泡着红色,而细胞质和细胞核不被着色；死细胞的液泡不被着色或浅染,染料弥散于整个细胞中,细胞核和细胞质被染成红色.有时侯为了增加染色效果可以将两种染料结合使用,如甲基蓝-中性红混合染色法.2 仪器分析法可采用微电极技术利用死活细胞膜两侧电位的差异、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪等,可对细胞的死活进行精确的批量检测.德国INNOVATIS出产的全自动Cedex细胞存活率/细胞计数仪/细胞分析仪是世界上第一台高分辨率、高清晰度扫描专利细胞分析仪,具有全自动台盼蓝染色、显成象、CEDEX工作站软件,可用于制药、医学、发酵、免疫、病理、毒性测试、生物技术等学科的研究开发和工业生产过程中的细胞计数和分析.自动分析结果,检测分析数据输出11项：总细胞数目,总细胞浓度 cells/mL ；活细胞数目,活细胞浓度 cells/mL；死细胞数目,死细胞浓度 cells/mL ；细胞存活率 % ；细胞的平均圆度compactness ；细胞的平均直径 um ；细胞团比例 Aggregate Rate；细胞直径分布图Diameter Histogram；细胞团分布图 Aggregate Histogram；细胞圆度分布图Compactness Histogram ；细胞生长时间曲线Cultivation Time Chart.流式细胞仪法用来判断细胞死活的常用荧光探针有二大类：一类是能透过活的细胞膜进入细胞内而发出荧光的物质,例如FDA可被活细胞持留而发出黄绿色荧光,若细胞有损伤则会从细胞中流失,观察不到荧光.另一类是不能透过活细胞膜,但能对固定的细胞及膜有破损的细胞的核进行染色,例如碘化丙啶 PI,Propidium iodide 和溴化乙锭 EB,Ethidium bromide 就是常用的第二类荧光探针.碘化丙啶PI不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色.而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶PI可以染色坏死细胞.目前常用的一种细胞凋亡与坏死检测试剂盒则含有Hoechst 33342和碘化丙啶Propidium Iodide,PI两种荧光染料.细胞发生凋亡时,染色质会固缩,Hoechst 33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强.上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光.此外,还可以用植物细胞的质壁分离试验来对植物细胞的死活进行见证,还可以通过观察细胞质的流动性进行细胞的死活鉴定.。
实验三、霉菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
二、基本原理 基本原理
1、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常 见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以芽殖 少数以裂殖 见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以芽殖、少数以裂殖进 芽殖、 裂殖进 行无性繁殖；有性繁殖则通过结合产生子囊孢子。 子囊孢子。 行无性繁殖；有性繁殖则通过结合产生子囊孢子 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型 氧化型呈蓝色， 无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时， 无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代 谢作用，细胞内具有较强的还原能力， 谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化 型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞 型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无 活细胞是 色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色和淡 死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色和 或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色 蓝色。 蓝色。
四、操作步骤
在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液 子挑取少许菌丝， 子挑取少许菌丝，浸于染液中 散开 盖上盖玻片 用镊 用解剖针将菌丝分 用高倍
低倍镜观察
镜观察菌丝局部
操作要点： 操作要点： • 挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。 挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。 • 尽可能将菌丝分开，加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。 尽可能将菌丝分开，加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。 • 挑取菌丝前镊子和解剖针要在酒精灯上灼烧灭菌。 挑取菌丝前镊子和解剖针要在酒精灯上灼烧灭菌。
实验三 酵母菌的形态观察及死、 酵母菌的形态观察及死、活细胞 的鉴别和霉菌的形态观察 的鉴别和霉菌的形态观察
死活细胞的鉴定方法
活细胞的鉴定在生物学与医学上具有很重要的意义。
细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况,需要经常测定细胞的存活率;在肿瘤细胞的研究中,为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力,也需要测定肿瘤细胞的存活率。
在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用,例如为了检测某一男子的生育能力,测定精子细胞的存活力就是比较常用的办法。
死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法与仪器分析法。
染色法就是常用的细胞死活鉴定方法,简便,易于操作。
但就是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活,实验结果很容易受操作者的主观因素的影响,存在一定的误差,所以,在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测。
不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理,但无论采用何种办法,都就是利用了死活细胞在生理机能与性质上的差异。
常用的方法包括染色法与仪器分析法。
1 染色法染色法分化学染色法与荧光染色法,根据染色机理的不同,染料或使死细胞着色,或使活细胞着色。
死活细胞在生理机能与性质上的差异主要包括:死活细胞细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜就是一种选择性膜,对细胞起保护与屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。
常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就就是利用了这一性质。
台盼蓝,又称锥蓝,就是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。
所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色。
甲基蓝有类似的染色机理。
植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。
死活细胞在代谢上的差异:就是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。
美蓝就是一种无毒染料,氧化型为蓝色,还原型为无色。
由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型,因此美蓝染色后活的酵母细胞无色;而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱,使美蓝处于氧化态,从而被染成蓝色或淡蓝色。
荧光素双醋酸酯(FDA)就是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料,其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异:FDA本身不产生荧光,也无极性,能自由渗透出入完整的细胞膜。
死活细胞鉴定
生物探究活动——鉴定植物细胞的死活【实验目的】学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活【实验原理】活细胞的原生质层具有选择透过性；而死细胞则为全透性。
选择透过性是质壁分离的先决条件。
因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的，不能发生质壁分离的细胞则说明是死的。
死活细胞间不仅通透性不同，而pH值等情况也不同，它们对某些染料的反应明显不同。
某些染料能在活细胞的细胞液中积累，但不能染活的原生质；另一方面，这些染料可使死细胞的结构染色，但不积累于液泡。
所以可根据某些染料活体染色的情况来鉴定细胞死活。
【实验材料和用具】洋葱及其它植物材料、酒精灯、显微镜、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、1M蔗糖溶液、0.01%中性红溶液等。
【实验步骤】1、用质壁分离的方法鉴定细胞的死活。
撕洋葱表皮细胞滴加1M蔗糖溶液，在显微镜下观察。
细胞很快发生质壁分离，这就是细胞活着的证据。
另把制取的同样制片，用冷冻、加热、干燥、酒精浸泡等方法将它们的细胞杀死，然后取代上述活材料，做质壁分离实验，结果看到已死的细胞不能发生质壁分离现象。
用尿素、硝酸钾、氯化钙溶液等来代替蔗糖溶液，能快速鉴定细胞的死活。
2、用活体染色的方法的鉴定细胞的死活。
取洋葱或其它材料，用镊子撕下表皮（如表皮不易撕下，也可在水中用锋利的刀片轻轻刮去多余部分），或用刀片做成切片若干，将表皮或切片浸入中性红溶液中，放置5-10分钟最后用清水浸洗后置于载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察。
活细胞的液泡内染成红色至紫色，原生质不染色，死细胞常呈橙红色，原生质和细胞核被染色。
撕破的细胞，只剩细胞壁时，呈淡红色或淡紫色。
为进一步鉴别细胞的死活，可把玻片上的水溶液吸去，滴一滴1M蔗糖溶液，便可观察到活细胞能发生质壁分离，死细胞及只剩细胞壁的空细胞都有没有这种现象。
可用加热、冷冻或其它方法杀死植物组织，然后用上面所述方法进行处理，比较与活组织有何不同。
注：1台盼蓝，又称锥蓝，是一种阴离子型染料，不能透过完整的细胞膜。
死活细胞的鉴定方法
活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义。
细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况，需要经常测定细胞的存活率；在肿瘤细胞的研究中，为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力，也需要测定肿瘤细胞的存活率。
在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用，例如为了检测某一男子的生育能力，测定精子细胞的存活力是比较常用的办法。
死活细胞的鉴定方法有很多种，常用的有染色法和仪器分析法。
染色法是常用的细胞死活鉴定方法，简便，易于操作。
但是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活，实验结果很容易受操作者的主观因素的影响，存在一定的误差，所以, 在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测。
不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理，但无论采用何种办法，都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。
常用的方法包括染色法和仪器分析法。
1染色法染色法分化学染色法和荧光染色法，根据染色机理的不同，染料或使死细胞着色，或使活细胞着色。
死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。
常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。
台盼蓝, 又称锥蓝，是一种阴离子型染料，不能透过完整的细胞膜。
所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色，而活细胞不被着色。
甲基蓝有类似的染色机理。
植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。
死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。
美蓝是一种无毒染料，氧化型为蓝色，还原型为无色。
由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型，因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱，使美蓝处于氧化态，从而被染成蓝色或淡蓝色。
荧光素双醋酸酯（FDA是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体FDA本的生活力鉴定染料，其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：身不产生荧光，也无极性，能自由渗透出入完整的细胞膜。
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• 【作业】 作业】 • 绘制口腔粘膜上皮细胞及洋葱内表皮细胞 分别3—5个细胞）。 个细胞）。 图（分别 个细胞 思考:鉴定细胞死活可采用哪些方法 鉴定细胞死活可采用哪些方法? 思考 鉴定细胞死活可采用哪些方法
实验3 实验 死活细胞鉴定
• • • • • 【实验目的】 实验目的】 掌握鉴定死活细胞的方法。 掌握鉴定死活细胞的方法 【实验原理】 实验原理】 台盼蓝是一种低毒的活体染色剂，它只能透过质膜受损的细胞或死亡的细胞， 台盼蓝是一种低毒的活体染色剂，它只能透过质膜受损的细胞或死亡的细胞，而正常 的活细胞能加以排除， 死细胞着色而活细胞不着色。故可用于死、活细胞的鉴定。 的活细胞能加以排除，即：死细胞着色而活细胞不着色。故可用于死、活细胞的鉴定。 【实验用品】 实验用品】 – 器材与材料：口腔粘膜上皮细胞、洋葱内表皮细胞 器材与材料：口腔粘膜上皮细胞、 – 试剂：0.2％台盼蓝溶液 试剂： ％ 实验方法】 的台盼蓝染液1滴 滴加在载玻片的中央。 【实验方法】用0.2%的台盼蓝染液 滴，滴加在载玻片的中央。 的台盼蓝染液 取洁净的牙签稍用力刮取口腔粘膜上皮细胞，均匀涂抹于台盼蓝染液中。 取洁净的牙签稍用力刮取口腔粘膜上皮细胞，均匀涂抹于台盼蓝染液中。 染色5—10钟后进行观察。 钟后进行观察。 染色 钟后进行观察 切取面积约0.5× 的洋葱内表皮,小心地平铺在载玻片的中央 切取面积约 ×0.5 cm2的洋葱内表皮 小心地平铺在载玻片的中央。 的洋葱内表皮 小心地平铺在载玻片的中央。 向载玻片中央的洋葱内表皮上滴加1 滴台盼蓝染液。 向载玻片中央的洋葱内表皮上滴加 滴台盼蓝染液。 染色5—10分钟后进行观察。 分钟后进行观察。 染色 分钟后进行观察 作业】 【作业】 绘制口腔粘膜上皮细胞及洋葱内表皮细胞图（分别3—5个细胞）。 个细胞）。 绘制口腔粘膜上皮细胞及洋葱内表皮细胞图（分别 个细胞 思考:鉴定细胞死活可采用哪些方法 鉴定细胞死活可采用哪些方法? 思考 鉴定细胞死活可采用哪些方法
【实验用品】 实验用品】
– 器材与材料：口腔粘膜上皮细胞、洋葱 器材与材料：口腔粘膜上皮细胞、 内表皮细胞 – 试剂：0.2％台盼蓝溶液 试剂： ％
【实验方法】 实验方法】
• • • • • • 的台盼蓝染液1滴 用0.2%的台盼蓝染液 滴，滴加在载玻片的中 的台盼蓝染液 央。 取洁净的牙签稍用力刮取口腔粘膜上皮细胞， 取洁净的牙签稍用力刮取口腔粘膜上皮细胞， 均匀涂抹于台盼蓝染液中。 均匀涂抹于台盼蓝染液中。 染色5—10钟后进行观察。 钟后进行观察。 染色 钟后进行观察 切取面积约0.5× 的洋葱内表皮,小心地 切取面积约 ×0.5 cm2的洋葱内表皮 小心地 的洋葱内表皮 平铺在载玻片的中央。 平铺在载玻片的中央。 向载玻片中央的洋葱内表皮上滴加1 向载玻片中央的洋葱内表皮上滴加 滴台盼蓝 染液。 染液。 染色5—10分钟后进行观察。 分钟后进行观察。 染色 分钟后进行观察
实验3 死活细胞鉴定
• • • • 【实验目的】 实验目的】 掌握鉴定死活细胞的方法。 掌握鉴定死活细胞的方法 【实验原理】 实验原理】 台盼蓝是一种低毒的活体染色剂， 台盼蓝是一种低毒的活体染色剂，它只能透过 质膜受损的细胞或死亡的细胞， 质膜受损的细胞或死亡的细胞，而正常的活细 胞能加以排除， 胞能加以排除，即：死细胞着色而活细胞不着 故可用于死、活细胞的鉴定。 色。故可用于死、活细胞