细胞凝集反应
细胞凝集反应
姓名学号班级组别同组者科目细胞生物学实验题目动物细胞融合【实验目的】1.了解细胞膜的表面结构。
2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理。
3.学习研究细胞凝集反映的方法。
【实验原理】凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。
常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等，凝集素是它们的总称。
在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。
凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。
凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。
人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。
ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。
另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。
如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。
细胞凝集反应原理
细胞凝集反应原理
细胞凝集反应是一种免疫学实验技术，通常用于检测抗体与抗原之间的相互作用。
该反应原理涉及到抗体与抗原结合导致凝集的现象。
以下是细胞凝集反应的基本原理：
1.抗原和抗体结合：在实验中，通常使用红细胞（如羊红细胞）
或其他细胞作为抗原。
这些细胞表面可能具有特定的抗原。
当
与具有相应抗体的血清或其他抗体溶液相互作用时，抗体与抗
原发生结合。
2.凝集现象：当抗体与抗原结合时，会形成一个抗原-抗体复合
物。
在一定条件下，这些复合物可能会导致细胞凝集，即细胞
聚集在一起形成团块。
这种凝集现象通常是可见的，尤其是在
显微镜下。
3.最优反应条件：细胞凝集反应的发生需要一定的条件，包括适
当的温度、pH值和离子浓度。
这些条件的调节可以影响抗原与
抗体的结合强度，进而影响细胞的凝集程度。
4.阳性和阴性反应：在细胞凝集反应中，阳性反应表现为明显的
细胞凝集，而阴性反应则表现为细胞均匀分散，没有凝集现象。
阳性和阴性的判断可能通过目视观察或者使用适当的测量仪器
来进行。
5.应用：细胞凝集反应在免疫学和临床诊断中广泛应用，例如血
型鉴定、病原微生物检测、自身免疫疾病诊断等。
不同的抗原
和抗体系统可用于检测不同的疾病或生物学过程。
总体而言，细胞凝集反应是一种简单而有效的实验技术，通过观察细胞的凝集状态可以获取有关抗体与抗原相互作用的信息。
细胞凝集反应实验(共10张PPT)
1 ． ２％鸭血红细胞0悬.液1制7备mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸铵、
0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L
丙酮等6种溶液进行同样实验，步骤同上。
在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血异糖基的蛋白质，能与细胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集。
17mol/L氯化钠、0. 新鲜鸭血加抗凝剂，生理盐水洗５次，每次２０００r/min，离心５min，按红细胞压积用生理盐水配成２％鸭血红细胞悬液。
– 结果溶血，溶液变透明 在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间
茎、0.17mol/L氯化钠和其他等渗液。
四、实验步骤
• (一) 细胞凝集反应 • 1 ． ２％鸭血红细胞悬液制备 • 新鲜鸭血加抗凝剂，生理盐水洗５次，每次２０００r/min，离心５
min，按红细胞压积用生理盐水配成２％鸭血红细胞悬液。
• 2 ．土豆凝集素制备
• 土豆２克，加１０ml PBS，浸泡２h • 3 ．细胞凝集反应
细胞凝集反应实验
一、实验目的
• 1 ．了解细胞膜的表面结构； • 2 ．了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细
胞膜的速度。
二、实验的原理
• 1、细胞凝集反应
• 凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，能与细 胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集。
• 2、细胞膜的渗透性
• 在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。在等渗液
不同。
蒸馏水
10ml
• 2 ．等渗溶液 1 ．了解细胞膜的表面结构；
1 ．了解细胞膜的表面结构；
土豆凝集素１滴、２％鸭血红细胞液１滴
细胞反应凝集实验报告
一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。
2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。
3. 观察和分析细胞凝集现象。
二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下，由于细胞膜表面分子间的相互作用，导致细胞相互聚集的现象。
凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值，如血型鉴定、病原体检测等。
本实验采用凝集素作为凝集剂，通过观察红细胞凝集现象，了解细胞凝集反应的基本原理。
三、实验材料与用品1. 试剂：红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。
2. 仪器：离心机、移液器、试管、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备红细胞悬液：将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中，混匀后离心，弃去上清液，加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。
2. 设置实验组：取3支试管，分别加入等量的红细胞悬液。
3. 加入凝集素：在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液，第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液，第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。
4. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。
5. 加入蒸馏水：取3支新的试管，分别加入等量的红细胞悬液。
6. 加入凝集素与抑制剂：在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂，第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂，第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。
7. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。
五、实验结果与分析1. 实验组：随着凝集素浓度的增加，红细胞凝集现象逐渐明显。
低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少，中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多，高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。
2. 抑制剂组：在加入抑制剂后，红细胞凝集现象明显减弱。
当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时，红细胞凝集现象减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时，红细胞凝集现象进一步减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时，红细胞几乎不发生凝集。
细胞凝集反应是什么
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生活常识分享细胞凝集反应是什么
导语：细胞凝集反应是我们在生活当中很少遇见的一个医学用语。
那么细胞凝集反应是什么呢！我们可以来具体了解一下，以便可以帮忙在生活当中遇到的
细胞凝集反应是我们在生活当中很少遇见的一个医学用语。
那么细胞凝集反应是什么呢！我们可以来具体了解一下，以便可以帮忙在生活当中遇到的一些问题。
这是一种对身体健康特别有利的一种组织，很多食物当中会还有这样的物质，所以我们在生活当中应当注意自己的饮食情况。
细胞凝集反应是什么呢
细胞膜是双层脂嵌蛋白质结构，脂和蛋白质以能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。
目前认为：细胞间的联系，细胞的生长各肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。
凝集素可以通过使它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入能与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
凝集素
凝集素(LECTIN)是一类含糖的并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞各刺激细胞分裂的作用。
凝集素是动物细胞和植物细胞都能够合成和分泌的、能与糖结合的蛋白质，在细胞识别和粘着反应中起重要作用，主要是促进细胞间的粘着。
凝集素具有一个以上同糖结合的位点，因此能够参与细胞的识别和粘着，将不同的细胞联系起来。
应用
凝集素是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。
常用的为植物凝集素(Phytoagglutin，PNA)，通常以其被提取的植物命名，。
凝集反应名词解释
凝集反应名词解释凝集反应是一种集聚反应，是一种微生物学上重要的反应，主要是描述一种由特定蛋白质结合在一起形成类聚体的物理现象，或者用于控制多个分子之间的相互作用。
该反应可以激活或增强特定的生物反应，如催化、促肥、保护等，广泛存在于生命系统中，为多种生物活动提供稳定的支持。
当有适当的分子存在于液体中，这种分子将通过结合和细胞膜受体的作用形成簇，且会表现特定的物理和化学行为，这种结合称为凝集反应。
凝集反应可以用于控制多个分子之间的相互作用，以构建分子簇，例如一些活性核酸分子在液体中称为聚合物，它们的聚合可以增强其生物活性和受体结合性。
此外，凝集反应还可以控制具有有害作用的分子的聚集，从而作用于抑制特定的病原体的生长。
此外，凝集反应还可以通过调节液体的通量来维持细胞的酸碱平衡，并促进细胞内外的活性物质的交换，从而使细胞能够适应某种环境条件，从而保证细胞的生存机制。
另外，凝集反应还能够增强生物反应物的发挥功效，例如促肥、催化、保护等，广泛用于细胞水解、脱氢反应、抗病毒感染反应等。
凝集反应在生物学上具有十分重要的意义，凝集反应能够维持细胞内环境的稳定性，有效地促进受体的配体结合及识别，并可以调控特定的生物反应，如催化、促肥、保护等，使生物活动有效而稳定。
凝集反应的发生也能够控制病原体的聚集，从而阻止细菌病发生，以保护细胞。
因此，凝集反应是一种十分重要的生命现象，为生物系统的正常运作提供了稳定的支持。
从化学的角度来看，凝集反应是一种基于氢键的原子、分子或集聚都能发生的结合反应，可以用来制备均质的类聚体，代替反应溶液中的分子组装。
凝集反应伴随着质子的转移或共价键的构建，它们构建或破坏分子之间的双氧水网络，从而控制分子簇的大小、组成和活性，进而能够影响分子间的相互作用。
总之，凝集反应是一种重要的反应，它在生物学和化学上都有着广泛的应用，其中一个重要的用途是控制细胞内外环境的稳定，通过氢键的发生维持质子的转移，能够发挥催化、保护、促肥等特性，在细胞水解，脱氢，病原体的抗感染反应等过程中都起着至关重要的作用，为细胞活动提供了有效和稳定的支持。
实验十一细胞凝集反应
三、实验用品
1. 材料
土豆块茎、家兔。
2. 器具:
显微镜、离心机、托盘天平、研钵、剪刀、离心管、细滴管、
载片、盖片。
3. 试剂:
PBS缓冲液：NaCl 7.2 g、Na2HPO4 1.48 g、KH2PO4 0.43 g，加蒸馏水，定容至1 L，调pH至7.2。 1%肝素液：0.1 g肝素溶解于10 mL 0.9%氯化钠溶液中。
1. 绘图简图表示血细胞凝集过程，并说明原因。
2. 哪些因素影响细胞凝集反应?
3. 结合凝集素的特性，简述凝集素在生物学中有何应用？
研究凝集素有何意义？
等均与细胞外被有关。
二、实验原理
凝集素（lectin）是一类可逆结合特异糖基的蛋白
质，具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已 发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊 椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某 些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素 （phytohemagglutinin, PNA），通常一起被提取 的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花
浸泡2 h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
3. 细胞凝集反应 土豆凝集素1滴、2%兔血红细胞液1滴，在载玻片上混匀，静置20
min；以PBS缓冲液加2%血细胞悬液作为对照，低倍镜下观察。
五、结果观察
低倍镜下可以看到对照组红细胞分布均一，无凝集；实验
组中红细胞凝集在一起。
对照
阳性
六、实验报告及思考题
生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。
二、实验原理
细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则 的细胞团。
பைடு நூலகம் 凝集素使细胞凝集的原理是：它可以与细胞表面的糖
细胞凝集反应实验报告
一、实验目的1. 了解细胞膜表面的结构及其与糖分子的关系。
2. 掌握凝集素促使细胞凝集的原理和机制。
3. 熟悉细胞凝集实验的操作方法，并观察细胞凝集现象。
二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构，主要由双层脂质和蛋白质组成。
在细胞膜的外层，蛋白质与糖分子结合形成糖蛋白，即糖被。
凝集素是一类能与糖分子专一结合的蛋白质，它能够识别并结合细胞表面的糖分子，从而促使细胞凝集。
细胞凝集反应的原理如下：1. 细胞膜表面的糖被具有特异性，不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。
2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子，形成凝集素-糖分子复合物。
3. 凝集素-糖分子复合物在细胞间形成“桥”状结构，使细胞相互粘连，导致细胞凝集。
三、实验材料与用品1. 试剂：PBS缓冲溶液、0.9%的氯化钠溶液、不同浓度的凝集素、红细胞悬液、细胞计数板、显微镜等。
2. 仪器：天平、载玻片、滴管、加样器、恒温水浴箱等。
四、实验步骤1. 将红细胞悬液用PBS缓冲溶液稀释至一定浓度。
2. 取两块载玻片，分别标记为A、B。
3. 在A载玻片上滴加适量的红细胞悬液，用加样器吸取少量不同浓度的凝集素，滴加到红细胞悬液中，轻轻摇匀。
4. 将A载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。
5. 在B载玻片上滴加适量的红细胞悬液，用加样器吸取等量的PBS缓冲溶液，滴加到红细胞悬液中，轻轻摇匀。
6. 将B载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。
7. 比较A、B两块载玻片上的细胞凝集现象，分析凝集素对细胞凝集的影响。
五、实验结果与分析1. 在A载玻片上观察到明显的细胞凝集现象，细胞相互粘连，形成较大的细胞团块。
2. 在B载玻片上观察到红细胞分散，没有明显的凝集现象。
3. 分析实验结果可知，凝集素能够促使细胞凝集，而PBS缓冲溶液对细胞凝集没有影响。
六、实验结论1. 细胞膜表面的糖被具有特异性，不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。
2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子，促使细胞凝集。
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科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2013.03.14 姓名*** 系年级2011级生物基地学号***
实验二细胞凝集反应
一．实验目的
1.了解细胞膜的表面结构；
2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理；
3.学习研究细胞凝集反应的方法；
4.用土豆凝集素诱导血细胞凝集，观察血细胞凝集现象；
5.学习设计实验的平行、对照原则。
二．实验原理
1.凝集素
凝集素（lectin）是一类含糖（少数例外）并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。
常用的有植物凝集素（phytohemagglutinin, PNA），通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。
土豆块茎凝集素（potato tuber lectin ）是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50, 000，包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素（wheat germ agglutinin ，WGA）等几丁质结合蛋白具有同源性。
土豆凝集素含有50% （质量分数）的糖组分，其中90% 是阿拉伯糖，另有少量半乳糖；最丰富的氨基酸是羟脯氨酸，其次是半胱氨酸。
土豆凝集素在水溶液中主要以单体形式存在，能与细胞膜寡糖链上的N- 乙酰葡萄糖胺特异性结合，这是其具有凝集活性的主要原因。
2.细胞凝集
细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。
目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。
在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。
凝集素引起的血细胞凝集（hemagglutination），其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异性集合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder（1983）提出应称“凝集素组织化学”而不能称“凝集素免疫组织化学”。
凝集素使细胞凝集的原理是：它可以与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。
人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。
三．实验原理
1.器材
离心机、离心管、滴管、注射器、双凹片、普通光学显微镜，等。
2.试剂
土豆、PBS缓冲液、兔子静脉血、生理盐水，等。
四．实验步骤
1.取土豆去皮块茎2克，加10mlPBS缓冲液，浸泡24小时，浸出的粗体液中即含有可溶性土豆凝集素。
2.抽取兔子静脉血（加抗凝剂）1ml，加生理盐水3ml，在1000r/min条件下，离心5分钟。
重复三次离心，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%的红细胞悬液。
3．分别用滴管吸取土豆凝集素和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片的左孔内，充分混匀。
4．同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右孔内，充分混匀，作对照实验。
5.摇晃5-10分钟后，观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。
6.先以白纸为衬托，直接观察双凹片凹槽内混合样品发生凝集的现象，注意左右凹槽内不同现象的对比，对于发生凝集的一边注意观察凝集与不发生凝集的区别。
直接观察后在光学显微镜下观察两凹槽内现象的区别，并用照相机拍摄实验结果。
五．实验结果
1.实验现象记录及结果分析
实验组对照组
试剂土豆凝集素PBS缓冲液
现象在振荡过程中，溶液中的红细胞渐
渐凝集成颗粒状，逐渐聚拢，最后
在液滴中形成红色血细胞团。
在振荡过程中，红细胞不断向中间
靠拢，最终形成中间颜色较深，边
缘颜色较浅的红细胞浑浊溶液。
结论土豆凝集素可使血液发生凝集，PBS缓冲液不能使血液发生凝集。
3.实验过程中宏观效果对比：
用肉眼观察，整个过程中，对照组中红细胞沉积在双凹片凹槽底部成大红点；
用凝集素处理的实验组，颜色越来越浅，透明度逐渐变高，最终，背景颜色变为透明，红细胞呈颗粒状聚集。
0min
实验组对照组
说明：开始时，由于二者还没有充分混合，加入PBS缓冲液和加入土豆凝集素的两滴细胞悬液差异不大，此时还未发生细胞凝集作用。
5min
实验组对照组说明：5min后，两者对比已经比较明显，其中加入土豆凝集素的细胞悬液发生了细胞凝集现象，红细胞凝集在一起，呈颗粒状，周围的悬液较澄清，而只加入PBS缓冲液的未发生凝集作用，从整体上来看形成的仍为均匀的胶状液体。
10min
实验组对照组说明：10min后，加入土豆凝集素的细胞悬液细胞凝集程度更高，而只加入PBS缓冲液的几乎无变化，从整体上来看形成的仍为均匀的胶状液体。
4.实验过程中微观效果对比：
实验组 （10×10） 对照组（10×10）
低倍镜下可以看到对照组中红细胞分布较均一，无凝集（右）；实验组中，红细胞凝集在一起（左）。
六． 思考讨论
1. 哪些因素影响细胞凝集反应？
答： 影响细胞凝集反应的因素有很多，次实验中主要有以下两点：（1）温度。
温度影响酶的活性。
（2） 时间。
随着时间的延长细胞聚集程度增大。
2.结合凝集素的特性，简述凝集素在生物学中有何应用？研究凝集素有何意义？ 答：凝集素( lect in) 是一类具有糖结合专一性, 是可促使细胞凝集的蛋白质。
凝集素对糖的特异结合性决定了它在动植物体内具有一些重要而特殊的生物学功能。
利用这些功能, 凝集素在生物养殖、生物工程、生理活动调控、疾病防治等方面展示出广阔的应用前景。
凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面也展示出了十分广阔的应用前景。
如：植物凝集素可抑制受精；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。
掌握凝集素的生物学功能, 对了解动植物的生物学进程、生理功能都有重要意义。
七． 注意事项
1. 浸出土豆凝集素时选发芽的或发青色的土豆,因其所含土豆凝集素可让血细胞发生凝集。
2. 把液体滴加到双凹片上时，注意用量，防止悬液过多而溢出，使两个细胞悬液接触，导致实验结果不可靠。
3. 滴加1%的红细胞悬液时，可适当的多加点儿，便于实验结果的观察。
4. 用手晃动双凹片时，注意摇晃的姿势：一只手用手掌处贴紧双凹片，另一只手抵住双凹片的另一侧上下晃动。
5. 摇晃的时间可适当延长，提高红细胞凝集程度。