山东大学细胞生物学实验四——细胞凝集反应
细胞凝集反应实验报告 山东大学
科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应细胞凝集反应【实验目的】1.了解细胞膜的表面结构；2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理；3.学习研究细胞凝集反应的方法。
【实验原理】1.凝集素凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖转移结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。
常用的为植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。
在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。
凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。
凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。
人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。
ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。
另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。
如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。
2.细胞凝集细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。
细胞凝集反应实验报告
细胞生物学实验报告一．实验名称：细胞凝集反应二．实验原理：细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被.目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素(lectin)是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。
常用的为植物凝集素(Phytoagglutin， PNA）,通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA）、麦胚素（Wheat germ agglutinin， WGA)、花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin， SBA）等，凝集素是它们的总称。
凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。
血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。
三．实验用品：土豆块茎显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g，Na2HPO41。
48g，KH2PO40。
43g,加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.2.4。
2%的红细胞四．实验步骤：1.称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
2.以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂),加生理盐水3ml，在1000r/min，离心5min，重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。
3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。
4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右孔内，充分混匀，做对照实验。
细胞凝集反应原理
细胞凝集反应原理
细胞凝集反应是一种免疫学实验技术，通常用于检测抗体与抗原之间的相互作用。
该反应原理涉及到抗体与抗原结合导致凝集的现象。
以下是细胞凝集反应的基本原理：
1.抗原和抗体结合：在实验中，通常使用红细胞（如羊红细胞）
或其他细胞作为抗原。
这些细胞表面可能具有特定的抗原。
当
与具有相应抗体的血清或其他抗体溶液相互作用时，抗体与抗
原发生结合。
2.凝集现象：当抗体与抗原结合时，会形成一个抗原-抗体复合
物。
在一定条件下，这些复合物可能会导致细胞凝集，即细胞
聚集在一起形成团块。
这种凝集现象通常是可见的，尤其是在
显微镜下。
3.最优反应条件：细胞凝集反应的发生需要一定的条件，包括适
当的温度、pH值和离子浓度。
这些条件的调节可以影响抗原与
抗体的结合强度，进而影响细胞的凝集程度。
4.阳性和阴性反应：在细胞凝集反应中，阳性反应表现为明显的
细胞凝集，而阴性反应则表现为细胞均匀分散，没有凝集现象。
阳性和阴性的判断可能通过目视观察或者使用适当的测量仪器
来进行。
5.应用：细胞凝集反应在免疫学和临床诊断中广泛应用，例如血
型鉴定、病原微生物检测、自身免疫疾病诊断等。
不同的抗原
和抗体系统可用于检测不同的疾病或生物学过程。
总体而言，细胞凝集反应是一种简单而有效的实验技术，通过观察细胞的凝集状态可以获取有关抗体与抗原相互作用的信息。
细胞生物学实验报告——凝血
图1. 凝集素介导的细胞与分子或细胞间相互作用模型（引自Chapman and Hall 1989）。
A. 同种细胞间相互作用。
B. 不同种细胞间相互作用。
在本实验中，土豆块茎凝集素介导的红细胞凝集属于A 类中由上至下数第二种类型，即凝集素可溶，可以同时与两个红细胞表面的糖蛋白寡糖链结合，在两个红细胞之间形成连接。
山东大学细胞生物学实验报告植物凝集素介导的红细胞凝集反应姜政 2012/10/6实验目的：观察凝血的过程和凝血后红细胞的聚集状态，理解细胞间凝集反应与细胞膜表面结构的关系，了解植物凝集素使红细胞凝集的基本原理和凝集素的应用领域。
实验原理：凝集素（Lectins ）是一种能与细胞膜表面糖蛋白寡糖链特异性结合的蛋白质，多数含糖，广泛存在于植物提取物、动物组织、各种微生物包括病毒中，其中以植物凝集素（Phytohemagglutinin ，PHA ）分离到的种类最多。
植物凝集素在植物体内主要参与防卫机制[1]，识别入侵微生物和愈合伤口，在豆类植物中，凝集素还与植物与特定固氮菌形成共生有关[2]；在体外，凝集素最典型的效应是引起细胞凝集。
通常认为，凝集素介导细胞凝集的基本原理是：可溶性凝集素分子能与细胞膜表面的糖蛋白寡糖链特异性结合，使不同细胞的糖蛋白通过凝集素分子彼此连结，进而引起细胞间凝集（图1）。
红细胞膜表面有大量糖蛋白，其中一些糖蛋白具有特异性，比如人类A 型红细胞表面的α-N -乙酰-D-半乳糖胺和O 型红细胞表面的α-L-海藻糖就分别决定了人类的A 血型和O 血型[3]。
本实验就是利用植物凝集素与红细胞表面糖蛋白受体的特异性结合实现红细胞凝集。
土豆块茎凝集素（potato tuber lectin ）是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50, 000，包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素（wheat germ agglutinin ，WGA ）等几丁质结合蛋白具有同源性[1, 4]。
细胞反应凝集实验报告
一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。
2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。
3. 观察和分析细胞凝集现象。
二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下，由于细胞膜表面分子间的相互作用，导致细胞相互聚集的现象。
凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值，如血型鉴定、病原体检测等。
本实验采用凝集素作为凝集剂，通过观察红细胞凝集现象，了解细胞凝集反应的基本原理。
三、实验材料与用品1. 试剂：红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。
2. 仪器：离心机、移液器、试管、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备红细胞悬液：将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中，混匀后离心，弃去上清液，加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。
2. 设置实验组：取3支试管，分别加入等量的红细胞悬液。
3. 加入凝集素：在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液，第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液，第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。
4. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。
5. 加入蒸馏水：取3支新的试管，分别加入等量的红细胞悬液。
6. 加入凝集素与抑制剂：在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂，第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂，第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。
7. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。
五、实验结果与分析1. 实验组：随着凝集素浓度的增加，红细胞凝集现象逐渐明显。
低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少，中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多，高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。
2. 抑制剂组：在加入抑制剂后，红细胞凝集现象明显减弱。
当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时，红细胞凝集现象减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时，红细胞凝集现象进一步减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时，红细胞几乎不发生凝集。
细胞凝集反应实验报告
细胞凝集反应实验报告实验目的，通过细胞凝集反应实验，观察不同抗原和抗体的相互作用，了解细胞凝集反应的原理和应用。
实验材料与方法：1. 实验材料，新鲜的兔红细胞悬液、抗兔红细胞抗体、生理盐水、离心管、试管等。
2. 实验步骤：a. 取一定量的兔红细胞悬液和抗兔红细胞抗体，分别加入到不同的试管中。
b. 在生理盐水中制备不同浓度的抗原-抗体混合液。
c. 将不同浓度的抗原-抗体混合液与兔红细胞悬液混合，静置反应。
d. 观察不同试管中的混合液是否发生凝集反应，记录结果。
实验结果：在实验过程中，观察到不同浓度的抗原-抗体混合液与兔红细胞悬液发生了不同程度的凝集反应。
随着抗原-抗体浓度的增加，凝集反应的程度也增加，最终形成明显的凝集沉淀。
实验讨论：细胞凝集反应是一种重要的免疫学实验方法，通过观察抗原和抗体的相互作用，可以了解免疫反应的机制和特点。
在本次实验中，我们观察到了不同浓度的抗原-抗体混合液与兔红细胞悬液发生的凝集反应，这表明抗原和抗体之间存在特异性结合。
同时，实验结果也提示了抗原-抗体浓度对凝集反应的影响，浓度越高，凝集反应越明显。
细胞凝集反应在临床诊断和实验室研究中具有重要的应用价值。
通过细胞凝集反应可以检测血清中的抗体水平，诊断某些疾病，评估免疫功能等。
因此，掌握细胞凝集反应的原理和方法对于临床医学和科研工作具有重要意义。
结论：通过本次实验，我们深入了解了细胞凝集反应的原理和应用，实验结果表明抗原-抗体浓度对凝集反应有明显影响。
细胞凝集反应作为一种重要的免疫学实验方法，在临床诊断和实验室研究中具有广泛的应用前景。
我们将继续深入学习和探讨免疫学相关知识，为将来的临床工作和科研工作打下坚实的基础。
细胞凝集反应实验
细胞凝集反应王玉琼201005232142 齐鲁医学班一实验目的：1了解细胞膜的表面结构2了解血细胞凝集原理3学习研究细胞凝集反应的方法二实验原理：细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。
目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。
凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，如植物血球凝集素，伴刀豆凝集素和土豆凝集素等，它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
三实验用品：PBS缓冲液显微镜双凹载玻片滴管土豆凝集素土豆凝集素的提取：去皮土豆块茎2g，加10mLPBS缓冲液浸泡24h，所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素.1%兔血红细胞2.1%兔血红细胞制备：抽取兔静脉血1mL加抗凝剂，加入3mL生理盐水，1000r/min离心5min，重复洗涤三次。
按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。
四实验步骤：1．分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴，置于双凹片左孔混匀。
2．吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。
3．摇晃5-10min观察，并以低倍镜镜检。
五实验结果：反应前反应后（左为混合了PBS的兔血红细胞，右为混合了土豆凝集素的兔血红细胞）发生凝集的细胞未发生凝集的细胞图2 低倍镜（*10）下混合了了土豆凝集素（左）和PBS缓冲溶液（右）的兔血红细胞观察结果分析：混合土豆凝集素9分钟时细胞开始发生凝集，可以观察到细小沙粒状的细胞团，随时间流逝小细胞团变大。
如图1可看到，混合了土豆凝集素的兔血红细胞（右侧）聚集成块，周围液体较澄清；而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞（左侧）未发生凝集，液体浑浊。
低倍镜下镜检（图2）可看到，凝集了的细胞聚成一簇不规则的团，而未发生凝集的红细胞很均匀。
细胞凝集反应实验报告
一、实验目的1. 了解细胞膜表面的结构及其与糖分子的关系。
2. 掌握凝集素促使细胞凝集的原理和机制。
3. 熟悉细胞凝集实验的操作方法，并观察细胞凝集现象。
二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构，主要由双层脂质和蛋白质组成。
在细胞膜的外层，蛋白质与糖分子结合形成糖蛋白，即糖被。
凝集素是一类能与糖分子专一结合的蛋白质，它能够识别并结合细胞表面的糖分子，从而促使细胞凝集。
细胞凝集反应的原理如下：1. 细胞膜表面的糖被具有特异性，不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。
2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子，形成凝集素-糖分子复合物。
3. 凝集素-糖分子复合物在细胞间形成“桥”状结构，使细胞相互粘连，导致细胞凝集。
三、实验材料与用品1. 试剂：PBS缓冲溶液、0.9%的氯化钠溶液、不同浓度的凝集素、红细胞悬液、细胞计数板、显微镜等。
2. 仪器：天平、载玻片、滴管、加样器、恒温水浴箱等。
四、实验步骤1. 将红细胞悬液用PBS缓冲溶液稀释至一定浓度。
2. 取两块载玻片，分别标记为A、B。
3. 在A载玻片上滴加适量的红细胞悬液，用加样器吸取少量不同浓度的凝集素，滴加到红细胞悬液中，轻轻摇匀。
4. 将A载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。
5. 在B载玻片上滴加适量的红细胞悬液，用加样器吸取等量的PBS缓冲溶液，滴加到红细胞悬液中，轻轻摇匀。
6. 将B载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。
7. 比较A、B两块载玻片上的细胞凝集现象，分析凝集素对细胞凝集的影响。
五、实验结果与分析1. 在A载玻片上观察到明显的细胞凝集现象，细胞相互粘连，形成较大的细胞团块。
2. 在B载玻片上观察到红细胞分散，没有明显的凝集现象。
3. 分析实验结果可知，凝集素能够促使细胞凝集，而PBS缓冲溶液对细胞凝集没有影响。
六、实验结论1. 细胞膜表面的糖被具有特异性，不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。
2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子，促使细胞凝集。
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细胞生物学实验五——细胞膜的通透性实验
13生物基地 201300140059 刘洋 2015-04-29
同组者：吕赞
一、实验目的
1.了解溶血现象及其发生机制。
2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
二、实验原理
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。
将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。
由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同，因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。
本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。
溶血（Hemolysis）红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，简称溶血。
可由多种理化因素和毒素引起。
在体外，如低渗溶液、机械性强力振荡、突然低温冷冻（-20℃～—25℃）或突然化冻、过酸或过碱，以及酒精、乙醚、皂碱、胆碱盐等均可引起溶血。
哺乳动物血浆的等渗溶液为0.9%NaCl溶液，红细胞在低于0.45%NaCl溶液中，因水渗入，红细胞膨胀而破裂，血红蛋白逸出。
在体内，溶血可为溶血性细菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗体反应（如输入配血不合的血液）、各种机械性损伤、红细胞内在（膜、酶）缺陷、某些药物等引起。
溶血性细菌，如某些溶血性链球菌和产气荚膜杆菌可导致败血症。
疟原虫破坏红细胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血浆或红细胞的卵磷脂转变为溶血卵磷脂，使红细胞膜分解。
三、实验用品
1.材料
鸡血红细胞
2.试剂
0.85%NaCl溶液、0.085%NaCl溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、
6%葡萄糖溶液、2%TritonX-100
3.器材
试管、试管架、滴管、显微镜、离心机。
四、实验步骤
1.取鸡血6ml，加0.85%NaCl溶液4ml，在1000r/min条件下离心5分钟；（RBC压积量
不少于0.6mol）
2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%浓度；（总体积应不少于1.2ml）
3.每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml：
（1）0.85%NaCl溶液
（2）0.085%NaCl溶液
（3）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）甲醇溶液
（4）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）丙三醇溶液
（5）6%（5%等渗）葡萄糖溶液
（6）2%（1.5%等渗）TritonX-100
4.向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血
现象发生（观察时间1小时），记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液的细胞。
五、实验结果
七、结果讨论
1.把液体滴加到双凹片上时，注意用量，防止悬液过多而溢出，使两个细胞悬液接触，
导致实验结果不可靠。
2.滴加1%的红细胞悬液时，可适当的多加点儿，便于实验结果的观察。
3.用手晃动双凹片时，注意摇晃的姿势：一只手用手掌处贴紧双凹片，另一只手抵住双
凹片的另一侧上下晃动。
4.摇晃的时间可适当延长，提高红细胞凝集程度。
5.浸出土豆凝集素时选发芽的或发青色的土豆。
由此可知发芽土豆不宜食用，因其所含
土豆凝集素可让血细胞发生凝集。
6.区分血清与血浆，血清指血液自然沉降后所得上清液，而血浆是血液加抗凝剂后离心
所得上清液。
7.凝血是指多个细胞聚集成不规则细胞簇，溶血是红细胞在低渗溶液作用下，肿胀破裂
放出血红蛋白的过程。