AL蛋白酶抑制剂混合液(1mgml)
Thermo Scientific蛋白酶抑制剂

100mg
1515
78432
抑肽酶(Aprotinin)
25mg
1678
78433
抑氨肽酶(Bestatin)N-[(2S,3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰]-L-亮氨酸
(N-[(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutyryl]-L-leucine)
可逆
1mg/ml(水)
胃酶抑素A(PepstatinA)
685.9
天冬氨酸蛋白酶
可逆
1mg/ml(甲醇)
PMSF (苯甲磺酰基氟化物)
174.2
丝氨酸蛋白酶
可逆
18mg/ml(甲醇)
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单独包装的蛋白酶抑制剂
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78431
AEBSF [4-(2-氨乙基)氟化苯磺酰•HCl]
10mg
2801
78435
亮抑蛋白酶肽(Leupeptin)
[(乙酰基-亮氨酰-亮氨酰-argininal) •半硫酸盐]
50mg
4317
78436
胃酶抑素A(PepstatinA)
25mg
2118
36978
PMSF (氟化苯基甲磺酰氟)
5mg
911
焦磷酸钠(Sodium
Pyrophosphate)
221.9
丝氨酸/苏氨酸磷酸酶
不可逆
65mg/ml(水)
E-64
357.4
半胱氨酸蛋白酶
不可逆
20mg/ml(1:1乙醇/水)
蛋白酶抑制剂选择指南

蛋白酶抑制剂选择指南1 蛋白酶抑制剂选择指南抑制剂 工作浓度 分子量 抑制蛋白酶种类 稳定性AEBSF终浓度1mM MW:239.5不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制胰蛋白酶,糜蛋白酶,纤溶酶,凝血酶及激肽释放酶. 可溶于水,其pH7的水溶液在4o C可保持稳定1-2个月,在pH>8的情况下会发生缓慢水解Aprotinins 抑肽酶终浓度2ug/ ml MW:6512 可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制纤溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶,但不抑制凝血酶和Factor Xa。
非常稳定,当pH>12.8时失去活性,可溶于水(10mg/ml),-20o C下可长期保存Bestatin终浓度10uM MW:308.4 可逆的丙氨酰-氨基肽酶抑制剂, 工作液可保存一天,1mM的甲醇贮存液在-20o C可保存至少一个月E-64 Protease Inhibitor终浓度10uM MW:357.4 不可逆的半胱氨酸酸蛋白酶抑制剂,抑制半胱氨酸酸蛋白酶而不会影响其他酶的半胱氨酸残基,与小分子量的巯基醇如beta-巯基乙醇不会产生反应,具有高度特异性。
工作液在正常pH值下可保持稳定数天,1mM的水溶液在-20o C可保存几个月EDTA, 4Na终浓度10mM MW:380.2 金属蛋白酶的可逆性螯合物,可能同时影响其他金属依赖性生物过程。
其水溶液很稳定,其贮存液(pH8.5的0.5M 水溶液)在4o C可保存数月Leupeptin, 半硫酸盐 亮抑酶肽(亮肽素) 终浓度100uM MW:493.6 可逆的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶制剂,可抑制胰蛋白酶样蛋白酶及一些半胱氨酸蛋白酶如:Lys-C内切蛋白酶,激肽释放酶,木瓜蛋白酶,凝血酶,Cathepsin B及胰蛋白酶。
工作液的稳定期为数小时,贮存液(10mM水溶液)在4o C时稳定期为一周,-20o C时稳定期为一个月Pepstatin A 终浓度1uM MW:685.9 可逆的天冬氨酸蛋白酶,可抑制胃蛋白酶,Cathepain B&L,血管紧张肽原酶(renin)及以1mg/ml溶于甲醇,搅拌过夜可以1mg/ml溶于乙醇,333mg/ml溶于6N的蛋白酶抑制剂选择指南2抑肽素A 很多细菌来源的天冬氨酸蛋白酶,与蛋白酶有微弱的结合。
蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。
在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。
以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。
由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。
在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。
常用抑制剂PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名为苯甲基磺酰氟。
分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19,纯度>99%。
常用生化试剂,用于抑制蛋白酶.【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成 1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。
如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。
【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。
凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
PMSF在水溶液中不稳定。
应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。
pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。
蛋白水解酶抑制剂啊实验室常用的啊主要用于组织匀浆时用!!1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤

免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。
如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads 上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。
这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为:(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
缺点为:(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。
二、准备工作:预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS;2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶)3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到1.5EP管中,4℃,缓慢晃动15min(EP管插冰上,置水平摇床上)4. 4℃,14000g离心15min,立即将上清转移到一个新的离心管中5. 准备Protein A agarose,用PBS 洗两遍珠子,然后用PBS配制成50%浓度,建议减掉枪尖部分,避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠6. 每1ml总蛋白中加入100μl Protein A琼脂糖珠(50%),4℃摇晃10min(EP管插冰上,置水平摇床上),以去除非特异性杂蛋白,降低背景7. 4℃,14000g离心15min,将上清转移到一个新的离心管中,去除Protein A珠子8. (Bradford 法)做蛋白标准曲线,测定蛋白浓度,测前将总蛋白至少稀释1:10倍以上,以减少细胞裂解液中去垢剂的影响(定量,分装后,可以在-20℃保存一个月)9. 用PBS将总蛋白稀释到约1 μg/μl,以降低裂解液中去垢剂的浓度,如果兴趣蛋白在细胞中含量较低,则总蛋白浓度应该稍高(如10 μg/μl)10. 加入一定体积的兔抗到500μl总蛋白中,抗体的稀释比例因兴趣蛋白在不同细胞系中的多少而异11. 4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温2h,激酶或磷酸酯酶活性分析建议用2 h室温孵育12. 加入100μl Protein A琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物,4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温1h,如果所用抗体为鼠抗或鸡抗,建议加2 μl"过渡抗体"(兔抗鼠IgG,兔抗鸡IgG)13. 14000rpm瞬时离心5s,收集琼脂糖珠-抗原抗体复合物,去上清,用预冷的RIPA buffer洗3遍,800μl/遍,RIPA buffer有时候会破坏琼脂糖珠-抗原抗体复合物内部的结合,可以使用PBS14. 用60μl 2×上样缓冲液将琼脂糖珠-抗原抗体复合物悬起,轻轻混匀,缓冲液的量依据上样多少的需要而定(60 μl足够上三道)15. 将上样样品煮5min,以游离抗原,抗体,珠子,离心,将上清电泳,收集剩余琼脂糖珠,上清也可以暂时冻-20℃,留待以后电泳,电泳前应再次煮5min变性。
蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)

产品组成:
名称
编号
蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)
使用说明书
PI0015 1ml
PI0015
Storage
5×1mlቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1份
-20℃ 避光
操作步骤(仅供参考):
1、 开盖前,请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。 2、 使用时, 根据裂解液的用量加入 1%的蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC),使其终浓度达
北京雷根生物技术有限公司
蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)
产品简介:
蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋 白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。蛋白酶抑制剂有很多种,包括 EDTA、 E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、Pepstatin A、Aprotinin 等,可以有效抑制蛋白的 降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
到 1×。
注意事项:
1、 蛋白酶抑制剂混合液有轻微刺激性,小心操作,同时应避免反复冻融。 2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12 个月有效。
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产品编号 PI0011 PS0013 PT0001
产品名称 苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L) RIPA 裂解液(强) BCA 法蛋白定量试剂盒
Leagene 蛋 白 酶 抑 制 剂 混 合 液 (100 × PIC) 主 要 由 Leupetin 、 Pepstatin A 、 Aprotinin、E-64 等组成,不含 EDTA。该混合物可以抑制绝大多数蛋白酶活性,包括丝氨 酸蛋白酶、半胱胺酸蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。该蛋白酶抑制剂混合 液是 100×的浓缩的 DMSO 溶液,适用于从哺乳动物组织、细胞中提取蛋白质,能够更有 效的获得目的蛋白质。提取出来的蛋白可以用于 Western Blot、免疫共沉淀等试验。
蛋白酶抑制剂Cocktail使用说明书奥默生物

奥默生物电话:021-5096 7598 邮箱:techsupport@ 网站:产品简介:本产品是由6种独立的蛋白酶抑制剂(不含EDTA)按照优化的配比配置而成的蛋白酶抑制剂混合物。
其作用的靶点分别为丝氨酸蛋白酶,丝氨酸半胱氨酸蛋白酶,氨肽酶,半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶等,广泛作用于各种蛋白酶,可称之为广谱蛋白酶抑制剂。
本产品应于-20℃环境下密封保存,产品有效期为2年。
使用时可短时间放置于常温或4℃中,用毕应立即放回-20℃中保存。
储存条件:蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA,100X DMSO储液)蛋白酶抑制剂Cocktail 使用说明书蛋白酶抑制剂通过抑制蛋白酶的活性,减少蛋白酶对蛋白的分解,从而有效地提高蛋白质得出率,而且不使细胞及组织本身的性质发生改变。
作用原理:产品组成:成分MTT法CCK法 AEBSFAprotininBestatinE-64LeupeptinPepstatin A Cysteine proteases Serine proteases Aminopeptidases Serine proteases Serine and cysteine proteases Aspartic proteases Irreversible Reversible Reversible ReversibleReversible Irreversible 靶点靶点类型运输条件: 蓝冰运输。
奥默生物使用说明:1. 本产品适用于哺乳动物细胞及组织的蛋白质提取及纯化,蛋白免疫印迹(WesternBlot),免疫共沉淀(Co-IP),免疫荧光(IF),免疫组织化学(IHC),激酶测定(kinaseassay)和抗体,酶诊断试剂盒(Dignose Kit)等。
2. 实验时,按照1:100的容积比,将Cocktail预先加入在已准备好的实验体系中,轻轻混合均匀。
注意事项:1. 本产品不含EDTA,为100×DMSO储存液形式。
蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性:溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇,25℃时稳定至少9个月。
分子量:174.2使用:贮存浓度200mM,工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。
4℃一周稳定,分成小份,冷冻在-20℃至少6个月。
分子量:C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如0.1M tris,pH8.0)。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量:6,512使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保存1个月。
分子量:685.9使用:贮存浓度1mg/ml,使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。
EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂溶解性:溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月分子量:372.24使用:工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8~9时再加入。
蛋白酶抑制剂成分

蛋白酶抑制剂成分蛋白酶抑制剂是一种可以抑制蛋白酶活性的化合物。
蛋白酶是一种酶类,它在细胞内起着非常重要的作用,可以分解蛋白质分子,使其成为更小的分子。
但是,在某些情况下,过多的蛋白酶活性会导致细胞内的蛋白质被分解得过快,从而对细胞造成伤害。
因此,蛋白酶抑制剂成分可以在一定程度上保护细胞免受蛋白酶的伤害。
目前,已经发现了很多种蛋白酶抑制剂成分,其中一些已经被广泛应用于医学和生物学领域。
以下是一些常见的蛋白酶抑制剂成分:1. 蛋白酶抑制剂-1(Protease Inhibitor-1)蛋白酶抑制剂-1是一种天然存在于人体中的蛋白质,它可以抑制多种蛋白酶的活性。
研究表明,蛋白酶抑制剂-1可以对多种疾病有治疗作用,如心血管疾病、肿瘤、炎症等。
2. 甲基硫代咪唑(Methylthioadenosine)甲基硫代咪唑是一种天然存在于人体中的化合物,它可以抑制多种蛋白酶的活性。
研究表明,甲基硫代咪唑可以对多种疾病有治疗作用,如肿瘤、炎症等。
3. 金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂(Staphylococcus aureus Protease Inhibitor)金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂是一种可以抑制金黄色葡萄球菌产生的多种蛋白酶的化合物。
这种化合物可以用于治疗金黄色葡萄球菌感染等疾病。
4. 蛋白酶抑制剂A(Protease Inhibitor A)蛋白酶抑制剂A是一种可以抑制多种蛋白酶活性的化合物。
研究表明,蛋白酶抑制剂A可以对多种疾病有治疗作用,如肿瘤、心血管疾病等。
5. 磷酸二酯酶抑制剂(Phosphodiesterase Inhibitor)磷酸二酯酶抑制剂是一种可以抑制多种磷酸二酯酶活性的化合物。
研究表明,磷酸二酯酶抑制剂可以对多种疾病有治疗作用,如心血管疾病、哮喘等。
总之,蛋白酶抑制剂成分具有广泛的应用前景,在医学和生物学领域都有着重要的作用。
未来,随着科学技术的不断发展,相信会有更多的蛋白酶抑制剂成分被发现,并用于治疗更多的疾病。
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北京雷根生物技术有限公司
AL 蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml)
简介:
蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降甚至消失但不使蛋白变性的物质。
蛋白酶抑制剂有很多种,包括EDTA、E-64、NaVO 3、Bestatin、Leupetin、Pepstatin A、Aprotinin 等均可有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
Leagene AL 蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml)主要由抑蛋白酶肽Aprotinin、亮抑酶肽Leupetin 等组成,不含EDTA。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。
2、使用时,根据裂解液的用量加入AL 蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml),使其终浓度达到1×。
注意事项:
1、蛋白酶抑制剂混合液有轻微刺激性,小心操作,同时应避免反复冻融。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:编号
名称PI0001
Storage AL 蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml)
1ml -20℃避光使用说明书1份编号
名称DC0032
Masson 三色染色液PW0082
丽春红S 染色液(1×Ponceau S)TC0699葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。