代谢控制发酵试题库

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《代谢控制发酵》考试题

《代谢控制发酵》考试题

2004—2005年度生物工程专业《代谢控制发酵》考试试卷及答案(2005年6月)班级——————姓名————————得分——————一名词解释(每题6分,共60分)1 代谢互锁从生物合成途径来看,似乎是受一种完全无关的终产物的控制,它是在较高浓度下才发生,而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。

2 协同反馈抑制在分支代谢途径中,任何一终产物豆不能单独抑制该途径第一个酶,但当几个末端产物同时过量,它们可协同抑制第一个酶反应。

3 优先合成 a D→EA−→−c C−c B−→b F→G底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G,由于a酶的活性远远大于b 酶的活性,结果优先合成E。

E合成达到一定浓度时,就会抑制a酶,使代谢转向合成G。

G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。

4 累积反馈抑制在累积反馈抑制中,每个最终产物只能单独的部分的抑制代谢途径中的第一个酶,当几个末端产物同时存在时,它们的抑制作用是积累的。

5 转化指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内,并整合于受体细胞的基因组中,从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。

6 转导利用转导噬菌体为媒介,将供体菌DNA导入受体菌中,从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。

7代谢控制发酵利用遗传学和生物学方法认为的在DNA分子水平上改变或控制微生物的代谢,使目的产物大量合成、积累的发酵。

8 营养缺陷型突变株代谢途径某一步骤发生缺陷,造成菌株缺乏某一营养物质,终产物不能积累,解除了终产物的反馈调节,使中间产物积累或另一分支途径的末端产物得以积累。

9 渗漏突变株由于遗传性障碍不完全的缺陷菌株,由于遗传突变导致某一种酶的活性下降而不是完全丧失,能够少量合成某一种代谢最终产物。

10 限量补充培养通过在培养基中限量控制营养物的量,解除对酶的反馈调节,从而使目标产物得到积累的培养方法。

二论述题(每题20分,共40分)1 根据D-核糖的生物合成途径及代谢调节机制,阐述D-核糖高产菌的育种思路。

代谢调控发酵习题

代谢调控发酵习题

代谢调控发酵习题课件摘要控制细胞膜渗透的⽅法1、化学控制⽅法通过控制发酵培养基中的化学成分,达到控制磷脂、细胞膜的形成或阻碍细胞壁正常的⽣物合成,使⾕氨酸向外渗透。

(1)控制磷脂合成,形成磷脂合成不⾜的细胞膜。

1)⽣物素缺陷型作⽤机制:⽣物素作为关键酶⼄酰辅酶A羧化酶的辅酶,参与脂肪的合成,进⽽影响磷脂的合成。

控制的关键:⽣物素亚适量(5~10ug/l2)添加表⾯活性剂(吐温60)或饱和脂肪酸清除渗透障碍物,积累⾕氨酸。

3)油酸缺陷型由于油酸缺陷型突变株切断了油酸的后期合成,即丧失脂肪酸合成能⼒,直接影响磷脂的合成和细胞膜的渗透性控制关键:必须控制油酸亚适量4)⽢油缺陷型作⽤机制:丧失a-磷酸脱氢酶。

不能合成a-磷酸⽢油和磷脂。

必须由外界供给⽢油才能⽣长。

控制⽅法:⽢油限量供应(添加亚适量的⽢油或⽢油衍⽣物),间接控制磷脂合成。

(2)阻碍⾕氨酸菌细胞壁的合成,形成不完全细胞壁,进⽽导致形成不完全细胞膜。

像在对数⽣长期添加青霉素或头孢霉素C等抗⽣素抑制⾕氨酸⽣产菌细胞壁后期合成乳糖操纵⼦:⼤肠杆菌(E.coli)的⼀种操纵⼦,由启动⼦(promoter,P)、活化蛋⽩结合位点(CAP)、操纵基因(operator,O )、及与乳糖代谢相关的⼏种酶的结构基因(structural gene)组成调节酶包括3个种类:⑴变构酶;⑵同功酶:具有同⼀种酶的底物专⼀性,但分⼦结构不同;⑶多功能酶:能够催化两种以上不同反应的酶。

反馈阻遏(feedback repression)是由代谢终点产物抑制酶合成的负反馈作⽤。

3. 反馈抑制与反馈阻遏的⽐较反馈抑制的效果⽐较直接⽽快速,因为不涉及蛋⽩质的合成过程,当终产物浓度达到⼀定⽔平时,⽴即使酶的活⼒丧失,待最终产物的浓度降低后,酶的活⼒⼜重新恢复。

反馈抑制作⽤不通过调节基因调节。

反馈抑制的物质基础是变构酶,通过酶的变构作⽤改变酶的活性。

变构酶的结构为基因所决定。

反馈阻遏是调节基因作⽤的结果,这是⽣物不通过基因⽽适应于环境改变的⼀种“措施”,这种“措施”对于环境的改变反应⽐较迟缓。

发酵生产技术题库

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发酵生产技术题库一、名词解释:1.发酵工程应用微生物学的相关自然科学以及工程学原理,利用微生物等生物细胞进行酶促转化,将原料转化成产品或提供社会服务的一门学科。

2.碳源凡是构成微生物细胞和代谢产物中碳素来源的营养物质。

3.氮源凡是构成微生物细胞的原生质体或代谢产物中氮素来源的营养物质。

4.前体某些化合物加入到发酵培养基中,能被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去,其自身结构并无多大变化,但是产量却因前体的加入有较大提高5.天然培养基用各种植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质以及天然的含有丰富营养的有机物质制成的培养基。

6.培养基人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。

7.种子培养基包括摇瓶种子和种子罐种子培养基,是适合微生物菌体生长的培养基,目地是为下一步发酵提供数量较多、强壮而整齐的种子细胞。

8.生长因子凡是调节微生物代谢产物活动的微量有机物统称为生长因子,一般为B族维生素9.灭菌用物理或化学的方法杀死或除去物体表面或内部的所有微生物,包括营养细胞、细胞芽孢和孢子。

10.消毒指用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的部分病源微生物,使之不再发生危害。

11.干热灭菌是指相对湿度在20%以下的高热,有火焰灼烧灭菌和热空气灭菌。

12.湿热灭菌在实验室或工业生产中,对培养基、管道、设备的灭菌,通常采用蒸汽加热到一定温度,并保温一段时间的灭菌方法。

13.实罐灭菌(实消)将培养基置于反应器中用蒸汽加热,达到一定温度并维持一段时间,再冷却到发酵温度,然后接种发酵。

14.连续灭菌(连消)将培养基在罐外连续进行加热、维持和冷却然后进入到发酵罐。

15.空罐灭菌(空消)通入饱和蒸汽于未加培养基的发酵罐体内进行湿热灭菌的操作。

16.无菌空气指通过除菌处理使空气中的含菌量降低在一个极低的百分数,从而能控制发酵污染至极小的机会。

17.自然选育对微生物细胞群体不经过人工处理而直接进行筛选的育种方法,又称为单菌落分离。

山东轻工业学院代谢控制发酵

山东轻工业学院代谢控制发酵

1、代谢控制发酵指利用遗传学的方法或者其它生物化学的方法(1分),人为地在脱氧核糖核酸(DNA)分子水平上改变和控制微生物的代谢,使目标产物大量生成、积累的发酵(1分)。

2、关键酶是参与代谢调节的酶的总称(1分)。

作为一个反应链的限速因子,对整个反应起限速作用。

常称为调节酶,主要包括变构酶、同功酶和多功能酶(1分)。

3、操纵子是指原核生物基因组的一个表达调控序列(1分),长度约1000bp左右,由若干结构基因串联在一起,其表达受到同一调控系统的调控(1分)。

4、巴斯德效应在有氧的条件下(1分),由于进行呼吸作用而使酒精发酵和糖酵解作用受到抑制的现象(1分)。

5、营养缺陷型指原菌株由于发生基因突变(1分),致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养基中补加该营养物质才能生长的突变型菌株(1分)。

10分,每题2分)√,如果是错误的,在其下方加以改正。

即真核细胞中功能上彼此有关的基因往往分布在不同染色体√(2分)×(1分)(1分)反馈抑制是在DNA水平上进行控制。

×(1改正:反馈阻遏是在DNA水平上进行控制,反馈抑制控制的是酶蛋白的构象变化。

分)5、渗漏型缺陷是指遗传性障碍不完全的缺陷型,仍能够在基本培养基上进行大量生长。

×(1分)改正:渗漏型缺陷是指遗传性障碍不完全的缺陷型,能够在基本培养基上进行少量生长。

(1分)三、填空题(本题满分20分,每空1分)1、乳糖操纵子中结构基因编码的三个酶分别是β—半乳糖苷酶、β-半乳糖透性酶、β-半乳糖苷转乙酰基酶。

2、微生物细胞代谢的调节机制主要有酶的活性调节和酶的生物合成(酶量)调节。

3、调节酶的催化部位与酶反应底物相结合,催化酶的反应;变构部位能与特异代谢物(变构效应物)相结合,使酶的构象发生改变,从而影响催化部位的活性。

4、变构酶的脱敏作用指该酶经过特定处理后,可使变构酶解聚,或变构酶的编码基因发生突变,失去调节功能,但一般不丧失其催化活性。

发酵工艺学试题库完整

发酵工艺学试题库完整

发酵工艺学试题库完整发酵工艺学题库一、名词解释1、发酵(广义)利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程,它包括厌氧培养的生产过程,以及通气(有氧)培养的生产过程。

2、生物转化生物细胞或其产生的酶能将一种化合物转化成化学结构相似,但在经济上更有价值的化合物。

3、菌落指微生物细胞在一定条件下,在固体培养基表面形成的肉眼可见的微生物群体。

若来自一个细胞,则为纯培养或称克隆。

4、酶活性调节是指一定数量的酶,通过其分子构象或分子结构的改变来调节其催化反应的速率。

5、激活在激活剂的作用下,使原来无活性的酶变成有活性,或使原来活性低的酶提高了活性的现象。

6、前(体)馈激活指代谢途径中后面的酶促反应,可被该途径中较前面的一个中间产物所促进。

7、反馈抑制(feedback inhibition)反馈抑制是指代谢的末端产物对酶(往往是代谢途径中的第一个酶)活性的抑制。

8、次级代谢是指微生物在一定的生长时期(一般是稳定生长期),以初级代谢产物为前体,合成一些对微生物的生命活动没有明确功能的物质的过程。

9、淀粉的溶解或液化淀粉糊化后,如果提高温度至130℃,由于支链淀粉的全部(几乎)溶解,网状结构彻底破坏,淀粉溶液的粘度迅速下降,变为流动性较好的醪液,这种现象称为淀粉的溶解或液化。

10、糖化以无机酸或酶为催化剂,在一定温度下使淀粉水解,将淀粉全部或部分转化为葡萄糖等可发酵性糖的过程。

11、前体物质指某些化合物加入到发酵培养基中,能被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去,其自身结构并无多大变化,但产量却因前体的加入有较大提高。

12、抑制剂加入后会抑制某些代谢途径的进行,使另一途径活跃,从而获得人们所需要的某种代谢产物,或使正常代谢的某一代谢中间物积累。

13、灭菌用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。

14、微生物的热阻是指微生物在某一特定条件(主要是温度和加热方式)下的致死时间。

15、无菌空气是指通过除菌处理使空气中含菌量降低在一个极低的百分数,从而能控制发酵污染至极小机会,此种空气称为“无菌空气”。

代谢控制发酵试题库

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1脱敏作用:变构酶经特定处理后,不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。

2分解代谢物阻遏:当细胞具有一优先利用的底物时,很多其他分解反应途径受到阻遏3限量补充培养法:将经适当稀释的浓缩处理液涂布于含有微量蛋白胨或0.1%完全培养基成分的基本培养基平板上。

经培养后,野生型细胞迅速生长成较大菌落,而缺陷型细胞生长缓慢只能形成小菌落。

这些小菌落大多数为营养缺陷型,将其转接到完全培养基斜面保存待测。

5代谢互锁:从生物合成途径来看,酶受一种与此代谢途径完全无关的终产物的控制,它只是在较高浓度下才发生,而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。

6代谢工程:应用重组DNA技术和应用分析生物学相关的遗传学手段进行有精确目标的遗传操作,改变酶的功能或输送体系的功能,甚至产能系统的功能,以改进细胞某些方面的代谢活性的整套操作工作。

7积累反馈抑制:每个分支途径的末端产物都独立于其他末端产物,以一定百分比控制该途径第一个共同的酶所催化的反应。

当几个末端产物同时存在时,它们对酶反应的抑制是累积的。

各末端产物之间既无协同效应,也无拮抗作用。

8原生质融合:是一个人工实验系统,将遗传性状不同的两个细胞融合,通过基因重组,形成有新的、优良性状的新细胞的过程。

9转导:利用转导噬菌体为媒介而将供体菌的部分DNA导入受体菌中,从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。

10营养缺陷型:指原菌株由于发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养基中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。

11基因工程:指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。

上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。

12诱变:指利用物理或化学因素处理微生物细胞群体,促使其中少数细胞中的遗传物质(主要是DNA)的结构发生改变,从而引起微生物的遗传性状发生变化,然后通过目的选择标记设法从群体中筛选出少数性状优良的突变菌株的过程。

发酵工程题库及试题要点

发酵工程题库及试题要点

发酵工程部分题库及答案一、名称解释1、前体指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去,而其自身的结构并没有多大变化,但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高.2、发酵生长因子从广义上讲,凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质,如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子3、菌浓度的测定是衡量产生菌在整个培养过程中菌体量的变化,一般前期菌浓增长很快,中期菌浓基本恒定。

补料会引起菌浓的波动,这也是衡量补料量适合与否的一个参数。

4、搅拌热:在机械搅拌通气发酵罐中,由于机械搅拌带动发酵液作机械运动,造成液体之间,液体与搅拌器等设备之间的摩擦,产生可观的热量。

搅拌热与搅拌轴功率有关5、分批培养:简单的过程,培养基中接入菌种以后,没有物料的加入和取出,除了空气的通入和排气。

整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化。

6、接种量 : 移入种子的体积接种量=————-———-接种后培养液的体积7、比耗氧速度或呼吸强度单位时间内单位体积重量的细胞所消耗的氧气,mmol O2•g菌—1•h—18、次级代谢产物是指微生物在一定生长时期,以初级代谢产物为前体物质,合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质过程,这一过程的产物,即为次级代谢产物。

9、实罐灭菌实罐灭菌(即分批灭菌)将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后维持一定时间,在冷却到接种温度,这一工艺过程称为实罐灭菌,也叫间歇灭菌。

10、种子扩大培养:指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。

这些纯种培养物称为种子。

11、初级代谢产物是指微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢,生成维持生命活动所需要的物质和能量的过程。

这一过程的产物即为初级代谢产物。

12、倒种:一部分种子来源于种子罐,一部分来源于发酵罐。

生物发酵培训试题及答案

生物发酵培训试题及答案

生物发酵培训试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 生物发酵过程中,下列哪种微生物是常用的发酵剂?A. 乳酸菌B. 酵母菌C. 醋酸菌D. 以上都是答案:D2. 发酵过程中,酵母菌主要产生的代谢产物是什么?A. 乳酸B. 酒精C. 醋酸D. 二氧化碳答案:B3. 下列哪种物质不是发酵过程中常用的营养物质?A. 葡萄糖B. 蔗糖C. 淀粉D. 氯化钠答案:D4. 发酵过程中,pH值的控制对于发酵效果有何影响?A. 无影响B. 影响微生物生长C. 影响代谢产物的产量D. 以上都是答案:D5. 在发酵过程中,温度控制的重要性体现在哪些方面?A. 影响微生物的代谢速率B. 影响微生物的生长C. 影响代谢产物的稳定性D. 以上都是答案:D二、填空题(每题2分,共10分)1. 发酵过程中,微生物的代谢产物主要包括______、______和______。

答案:酒精、乳酸、二氧化碳2. 发酵过程中,酵母菌的适宜生长温度一般为______摄氏度。

答案:20-303. 发酵过程中,pH值的控制对于微生物的代谢活动至关重要,例如乳酸菌的适宜pH值为______。

答案:5.5-6.54. 发酵液中氧气的供应对于微生物的代谢活动有重要影响,例如酵母菌在______条件下进行酒精发酵。

答案:无氧5. 发酵过程中,营养物质的浓度会影响微生物的生长和代谢产物的产量,例如葡萄糖浓度过高会导致______。

答案:渗透压增大三、简答题(每题5分,共20分)1. 简述发酵过程中,温度控制的重要性。

答案:温度控制对于发酵过程至关重要,因为不同的微生物有不同的最适生长温度。

适宜的温度可以促进微生物的生长和代谢,提高发酵效率和代谢产物的产量。

过高或过低的温度都可能抑制微生物的生长,甚至导致微生物死亡。

2. 描述发酵过程中pH值控制的必要性。

答案:pH值控制对于发酵过程至关重要,因为不同的微生物有不同的最适pH值范围。

适宜的pH值可以促进微生物的生长和代谢,提高发酵效率和代谢产物的产量。

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代谢控制发酵试题库名词解释1.代谢工程指应用重组DNA技术和应用分析生物学相关的遗传学手段进行有精确目标的遗传操作,改变酶的功能或输送体系的功能,甚至产能系统的功能,以改进细胞某些方面的代谢活性的整套操作工作(包括代谢分析、代谢设计、遗传操作、目的代谢活性的实现)。

2.积累反馈抑制指每个分支途径的末端产物都独立于其他末端产物,以一定百分比控制该途径第一个共同的酶所催化的反应。

当几个末端产物同时存在时,它们对酶反应的抑制是累积的。

各末端产物之间既无协同效应,也无拮抗作用。

3.代谢互锁指从生物合成途径来看,酶受一种与此代谢途径完全无关的终产物的控制,它只是在较高浓度下才发生,而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。

4.原生质融合指是一个人工实验系统,是将遗传性状不同的两个细胞融合,通过基因重组,形成具有新的、优良性状的新细胞的过程。

5.转导指利用转导噬菌体为媒介而将供体菌的部分DNA导入受体菌中,从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。

6.代谢控制发酵:是指利用遗传学方法或其它生物化学方法,人为地在脱氧核苷酸(DNA)的分子水平上,改变和控制微生物的代谢,使有用目的产物大量生成、积累的发酵。

7.营养缺陷型:指原菌株由于发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养基中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。

8.基因工程:基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。

上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。

9.诱变:指利用物理或化学因素处理微生物细胞群体,促使其中少数细胞中的遗传物质(主要是DNA)的结构发生改变,从而引起微生物的遗传性状发生变化,然后通过目的选择标记设法从群体中筛选出少数性状优良的突变菌株的过程。

10.转化:指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内,并整合于受体细胞的基因组中,从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。

11.合作反馈抑制:指当任何一种终产物单独过剩时,只部分的反馈抑制第一个酶的活性,只有当终产物同时过剩存在时,才能引起强烈抑制,其抑制程度大于各自单独存在的和。

12.分子克隆:指对目的DNA分子进行切割,并连接到合适的载体上进行体外重组。

判断1.转化和转导都是将外源基因导入受体细胞的方法,只是受体存在差异。

×,转导需要载体,而转化不需要载体。

2.紫外线照射后的菌悬液,不能移至可见光下进行筛选和检出。

√,由于光复活作用,不能移至可见光下3.酶的诱导和酶的阻遏都是指终产物对酶合成过程的促进或阻碍。

×,酶诱导是底物对酶合成的促进,酶阻遏是产物对酶合成的抑制4.一个操纵子中的结构基因通过转录、转译控制蛋白质的合成,而操纵基因和启动基因通过转录、转译控制结构基因的表达。

×,操纵基因和启动基因只起调节作用,本身不表达。

5.诱变处理的菌液进行中间培养主要是为了克服表型延迟。

√,解释表型延迟。

6.转化和转导都是将外源基因导入受体细胞的方法,只是供体存在差异。

×,转化是外源基因直接导入,转导是以噬菌体为载体导入。

7.为了克服表型延迟,必须将诱变处理的菌液进行中间培养,即将一定量的菌液接入基本培养基中培养过夜。

×,诱变处理的菌液必须接入完全培养基培养过夜。

8.限制性内切酶有三类,在基因工程操作中常用Ⅰ型限制性核酸内切酶。

×,基因工程操作中常用Ⅱ型限制性内切酶。

9.反馈抑制作用的酶一定是变构酶,而反馈阻遏作用的酶不一定是变构酶。

√,分析反馈抑制和反馈阻遏的概念三、单项选择题1.酶合成调节速度比酶活力调节速度(B )A 快B 慢C 相等D 无法比较2.受反馈调节的酶一般是(C )A 同功酶B 组成酶C 变构酶D 激酶3.变构酶的动力学曲线为(B )A 双S形B S形C 直线形D 抛物线4.在支链代谢途径中,任何一个终产物都不能单独抑制途径第一个共同酶地反应,但当两者同时过剩时,它们协同抑制第一个酶反应,这种调节类型称为(A )A 多价反馈抑制B 合作反馈抑制C 积累反馈抑制D 顺序反馈抑制5.在支链代谢途径中,当任何一个终产物单独过剩时,只部分地反馈抑制第一个酶活性,只有终产物同时过剩时,才能引起强烈抑制,其抑制程度大于各自单独存在的和,这种调节类型称为(B )A 多价反馈抑制B 合作反馈抑制C 积累反馈抑制D 顺序反馈抑制6.下列氨基酸中,其合成途径属于非支路代谢途径的为(B )A 赖氨酸B 精氨酸C 苏氨酸D 亮氨酸7.利用酶特性进行代谢控制时,利用酶的(D )特性A 专一性强B 变性C 变构D 专一性差8.在诱变处理后,能使DNA链中胸腺嘧啶形成二聚体的诱变剂为(A )A 紫外线B 亚硝酸C 烷化剂D 激光9.在诱变处理后,能使碱基氧化脱氨的诱变剂为(B )A 紫外线B 亚硝酸C 烷化剂D 激光10.诱变处理时所用的出发菌细胞应处于(B )A 延迟期B 对数生长期C 稳定期D 衰亡期四、填空题1.在代谢工程中,改变代谢流的措施有构建代谢旁路改变分叉代谢途径的流向改变能量代谢途径加速速度限制反应。

2.切断支路代谢的措施为营养缺陷型突变,渗漏缺陷型突变。

3.去除终产物主要是通过改变细胞的细胞膜透性来实现。

4.诱变剂可分为杀菌,诱变。

5.营养缺陷型检出的方法有逐个检出法,夹层培养法,限量补充培养法,影印接种法。

6.原生质融合育种的步骤为标记菌株的筛选,原生质体的制备,原生质体的再生,原生质体的融合,融合子的选择,实用性菌株的筛选。

7.转化过程包括供体DNA的制备,受体细胞对DNA的吸收,转化子的选择。

8.基因工程技术诞生技术上的三大发明DNA的体外切割与连接技术;基因工程载体的使用;DNA的核酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和Southern转移杂交等技术。

9.脱敏作用是指变构酶经特定处理后,不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。

10.设计育种及发酵工艺控制的“五字策略”为进、通、节、堵、出。

11.酶合成的调节包括酶的诱导,酶的阻遏。

12.影响原生质体制备的因素主要有菌体的前处理,菌体的培养时间,酶浓度,酶解温度,酶解时间,渗透压稳定剂。

13.基因工程五大单元操作为切,接,转,增,检。

14.转导必须有供体、转导噬菌体和受体3个组成部分。

15.表型延迟包括生理性延迟,分离性延迟两种。

16.酶合成的阻遏包括末端代谢产物阻遏,分解代谢产物阻遏。

17.解除菌体自身反馈抑制的措施有抗类似物突变,酶特性的利用,营养缺陷型回复突变。

18.诱变剂都具有杀菌,诱变双重效应。

19.营养缺陷型浓缩常用的方法有青霉素法,D-环丝氨酸,五氯酚法,亚硫酸法,制霉菌素法,脱氧葡萄糖法,过滤法,差别杀菌法。

20.基因工程技术诞生理论上的三大发现确定DNA是遗传物质,DNA双螺旋结构模型和半保留复制机理,提出了“中心法则”和操纵子学说,并成功破译了遗传密码。

五、简答题1.简述营养缺陷型菌株的浓缩方法。

营养缺陷型菌株的浓缩方法有青霉素法,D-环丝氨酸,五氯酚法,亚硫酸法,制霉菌素法,脱氧葡萄糖法,过滤法,差别杀菌法。

2.简述夹层培养法进行营养缺陷型菌株检出的原理和步骤。

融化分装在试管中的l0ml基本培养基,冷却至45~50℃,加入适当稀释的经浓缩处理的菌液(每皿50~100个菌落),混匀,立即倾于预先准备好的基本培养基甲板上,待凝固后培养1~2天。

长出菌落后,从培养皿的背面用记号笔将长出菌落的地方作好标记。

然后在其上加入融化并冷却至45~50℃的10mi完全培养基,凝固后,培养2—3天,将会在前次没有菌落的地方,生出菌落。

这些新生出的菌落(第2次生长菌落)可能是营养缺陷型。

将其转入完全培养基斜面中保存待测。

3.简述转化的概念及步骤。

设计育种及发酵工艺控制的“五字策略”为进、通、节、堵、出。

4.简述基因工程诞生理论上的三大发现。

.基因工程理论上的三大发现:确定DNA是遗传物质,DNA双螺旋结构模型和半保留复制机理,提出了“中心法则”和操纵子学说,并成功破译了遗传密码。

5.简述营养缺陷型菌株的浓缩方法及其机理。

.营养缺陷型浓缩的方法有:青霉素法,D-环丝氨酸,五氯酚法,亚硫酸法,制霉菌素法,脱氧葡萄糖法,过滤法,差别杀菌法。

前6种化学药物能选择性地除去经中间培养后群体细胞中的野生型(原养型)细胞,从而提高缺陷型细胞的分离和检出效率,因为野生生长速度远远快于缺陷型。

过滤法的原理为在基本培养基中,野生型孢子能萌发形成菌丝,而营养缺陷型孢子不能萌发。

将经诱变处理后的孢子,在液体培养基中培养一定时间后,滤去菌丝,即可淘汰野生型,达到浓缩缺陷型的目的。

差别杀菌法的原理细菌的芽孢较营养细胞耐热。

将经诱变处理的细菌芽孢接种在液体培养基中培养一定时间,野生型芽孢发育成营养体,此时加热至80℃,保温15min,即可被杀死;缺陷型孢子因为仍然保持为芽孢状态而保留下来得以浓缩。

6.简述反馈抑制和反馈阻遏的区别。

.反馈抑制和反馈阻遏的比较项目反馈阻遏反馈抑制控制对象酶的生物合成酶的活性控制量终产物浓度终产物浓度控制水平DNA→mRNA→蛋白质酶蛋白的构象变化控制装置终产物与阻遏蛋白亲和力终产物与变构部位亲和力控制装置动作阻遏蛋白与操纵基因结合,不能合成mRNA 通过变构效应,酶的结构变化形成的控制开、关控制控制酶活性大小反应迟缓、粗的控制迅速、精确的控制代谢途径无定向代谢途径和合成代谢途径分支点等无定向代谢途径和合成代谢途径分支点等细胞经济高分子化合物(酶蛋白)低分子化合物(酶反应生成物)7.简述基因工程诞生理论上的三大发现和技术上的三大发明。

基因工程理论上的三大发现:确定DNA是遗传物质,DNA双螺旋结构模型和半保留复制机理,提出了“中心法则”和操纵子学说,并成功破译了遗传密码;基因工程技术上的三大发明:DNA的体外切割与连接技术;基因工程载体的使用;DNA的核酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和Southern转移杂交等技术。

8.简述微生物诱变育种的一般程序。

出发菌→纯化→细胞或孢子悬浮液的制备→诱变剂处理→中间培养→目的突变菌株分离→初筛→复筛→生产性实验。

9.简述转导的概念及步骤。

转导就是利用转导噬菌体为媒介而将供体菌的部分DNA导入受体菌中,从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。

步骤:供体目的DNA的提取、分离和纯化;噬菌体的分离及与目的基因的连接;转导。

10.简述基因工程诞生技术上的三大发明。

基因工程技术上的三大发明:DNA的体外切割与连接技术;基因工程载体的使用;DNA的核酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和Southern转移杂交等技术。

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