动物肝脏中DNA的提取检测实验报告
动物肝脏dna的提取实验报告
动物肝脏dna的提取实验报告动物肝脏DNA的提取实验报告摘要：DNA提取是生物学研究中的一项基本实验技术，本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，探究DNA提取的原理和方法。
实验结果表明，通过适当的操作步骤和试剂，可以成功地从动物肝脏中提取到高质量的DNA。
引言：DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它为我们了解生物的遗传信息提供了基础。
而动物肝脏作为一个重要的代谢器官，其中的DNA含量丰富，因此成为DNA提取的理想来源之一。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，探究DNA提取的原理和方法。
材料与方法：1. 实验材料：动物肝脏样本、细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、异丙醇、氯仿、等温酒精、TE缓冲液等。
2. 实验步骤：a. 取一定量的动物肝脏样本，用细胞裂解缓冲液将其均匀悬浮。
b. 加入适量的蛋白酶K，使其在适宜的温度和时间下进行消化。
c. 加入异丙醇和氯仿，进行DNA的沉淀和分离。
d. 用等温酒精洗涤DNA，去除杂质。
e. 用TE缓冲液溶解DNA，获得高质量的DNA溶液。
结果与讨论：通过实验操作，我们成功地从动物肝脏中提取到了DNA。
观察DNA溶液的外观，呈现出透明且黏稠的特点，符合DNA的理化性质。
进一步通过紫外光谱检测，发现DNA溶液在260nm处有明显的吸收峰，而在280nm处几乎没有吸收，表明DNA溶液中没有蛋白质的污染。
此外，通过琼脂糖凝胶电泳分析，我们可以看到明显的DNA条带，进一步证明了提取到的DNA的完整性和纯度。
DNA提取的关键步骤是细胞裂解和DNA分离。
细胞裂解缓冲液中的离子和蛋白酶K的作用可以破坏细胞膜和核膜，使DNA释放到溶液中。
异丙醇和氯仿的加入可以通过沉淀和分离的方式将DNA从溶液中提取出来。
等温酒精的洗涤可以去除DNA溶液中的杂质，如蛋白质和盐类。
最后，用TE缓冲液溶解DNA，可以得到高质量的DNA溶液。
结论：本实验通过提取动物肝脏中的DNA，探究了DNA提取的原理和方法。
动物肝脏中DNA的提取和检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸〔DNA,为英文Deoxyribonucleic acid的缩写,又称去氧核糖核酸,是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分,同时也是组成基因的材料。
有时也被称为"遗传微粒",原因是在繁殖过程中,父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中,从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线〔260nm有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应；当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染色体,整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言,正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物,如动物、植物及真菌而言,染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用,进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸〔dAMP 脱氧腺苷、胸腺嘧啶脱氧核苷酸〔dTMP 脱氧胸苷、胞嘧啶脱氧核苷酸〔dCMP 脱氧胞苷、鸟嘌呤脱氧核苷酸〔dGMP 脱氧鸟苷。
而脱氧核糖〔五碳糖与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连,这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列,可组成遗传密码,指导蛋白质的合成。
动物肝dna提取实验报告
动物肝dna提取实验报告动物肝DNA提取实验报告引言：DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内的遗传物质，对于研究生物进化、基因表达和遗传变异等方面具有重要意义。
DNA提取是分子生物学研究中的基础实验之一，它可以用于进一步的PCR扩增、测序以及其他分子生物学实验。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，了解DNA提取的基本原理和方法。
材料与方法：1. 实验材料：- 动物肝脏样本（例如小鼠、大鼠、猪等）- 细胞裂解缓冲液（含有蛋白酶K）- 乙酸酚/氯仿提取液- 乙醇- TE缓冲液（含有Tris-HCl和EDTA）2. 实验仪器：- 离心机- 恒温水浴- 紫外可见分光光度计- 电泳仪实验步骤：1. 取动物肝脏样本，将其置于细胞裂解缓冲液中，用块状器械将其均匀研磨。
2. 将研磨后的样本转移到离心管中，离心10分钟，以去除细胞碎片和蛋白质。
3. 将上清液转移到新的离心管中，加入等体积的乙酸酚/氯仿提取液，轻轻摇匀，离心10分钟。
4. 分离上清液和有机相，将上清液转移至新的离心管中，加入等体积的冷乙醇，缓慢倾倒，使DNA沉淀。
5. 用离心机离心10分钟，将上清液倒掉，加入70%乙醇洗涤沉淀3次，每次离心5分钟。
6. 倒掉乙醇，将离心管倒置在吸水纸上，待DNA沉淀干燥。
7. 加入适量的TE缓冲液溶解DNA，使其充分溶解。
8. 使用紫外可见分光光度计检测DNA的浓度和纯度。
9. 可以将提取得到的DNA用于后续的PCR扩增、测序等实验。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地从动物肝脏样本中提取到了DNA。
通过紫外可见分光光度计检测，我们可以得到DNA的浓度和纯度信息，以确保提取到的DNA质量良好。
此外，我们还可以使用电泳仪对提取得到的DNA进行质量检测，观察DNA的大小和完整性。
DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它为后续实验提供了可靠的DNA样本。
在实际应用中，我们可以利用提取得到的DNA进行PCR扩增，以研究特定基因的表达情况；也可以进行测序，以了解DNA序列的变异情况。
动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告
动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告动物肝脏DNA的提取和鉴定实验报告研究背景•DNA提取是基因研究和遗传分析的基础步骤之一，对于动物肝脏DNA的提取和鉴定具有重要意义。
•本实验旨在探究动物肝脏DNA的提取方法，并通过PCR技术对其进行鉴定和分析。
实验设计和方法1.实验所用材料和仪器：–动物肝脏样本–DNA提取试剂盒–离心管、显微管–PCR反应体系组分–PCR仪2.DNA提取步骤：–取动物肝脏样本，加入提取试剂，进行细胞破裂和蛋白质消化。
–通过离心将细胞碎片分离，再加入酒精将DNA沉淀。
–对DNA进行洗涤、干燥和溶解，得到纯净的DNA提取物。
3.DNA鉴定和PCR步骤：–制备PCR反应体系，包括DNA模板、引物、酶和缓冲液等。
–进行PCR反应，使用特定的温度和时间条件进行扩增。
–通过凝胶电泳分析PCR产物，检测特定的DNA序列是否存在。
实验结果和分析•经过DNA提取和PCR扩增，成功从动物肝脏中提取到DNA，并进行了鉴定和分析。
•凝胶电泳结果显示，PCR反应产物呈现出预期的大小和条带清晰，表明目标DNA序列存在于动物肝脏中。
结论•本实验成功地提取和鉴定了动物肝脏中的DNA。
•通过PCR技术，可以快速、准确地检测和分析动物肝脏的遗传信息。
•这一研究结果对于进一步深入了解动物遗传特征具有重要意义。
参考文献[1] Smith A, Jones B. A review of DNA extraction techniques for biofilm analysis in wastewater treatment systems. Water Research, 2018, 132: 87-96.[2] Brown C G, McKinstry J L, et al. Comparison of seven methods for extraction of bacterial DNA from fecal and cecal samples of mice. Journal of Microbiological Methods, 2019, 164: 105682.讨论与展望•本实验采用DNA提取试剂盒的方法，相比传统的有机溶剂法，具有操作简便、提取效率高、污染少等优点。
动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告修订版
动物肝脏中D N A的提取及检测实验报告集团标准化小组：[VVOPPT-JOPP28-JPPTL98-LOPPNN]动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic?acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA 的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA 的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA 的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
动物肝脏中DNA的提取与检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA 的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
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动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构：DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
读取密码的过程称为转录，是以DNA双链中的一条单链为模板转录出一段称为mRNA（信使RNA）的核酸分子。
DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3’，5’-磷酸二酯键相连构成的长链。
大多数DNA含有两条这样的长链，也有的DNA为单链，如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。
DNA 有环形DNA和链状DNA之分。
在某些类型的DNA中，5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶，其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。
在某些噬菌体中，5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。
40年代后期，查加夫（E.Chargaff）发现不同物种DNA的碱基组成不同，但其中的腺嘌呤数等于其胸腺嘧啶数（A=T），鸟嘌呤数等于胞嘧啶数（G=C），因而嘌呤数之和等于嘧啶数之和，一般用几个层次描绘DNA的结构。
浓盐法从动物组织中提取DNA核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白（DNP/RNP）的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在0.14 M的盐溶液中溶解度很低，而RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl 溶液将其从样品中分别抽提出来。
将抽提得到的DNP用SDS处理可将其分离DNA和蛋白质，用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去可得DNA上清，加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。
肝脏细胞肝脏是由肝细胞组成，肝细胞极小，肉眼看不到，必须通过显微镜才能看到。
人肝约有25亿个肝细胞，5000个肝细胞组成一个肝小叶，因此人肝的肝小叶总数约有50万个。
肝细胞为多角形，直径约为20-30/加(微米)，有6-8个面，不同的生理条件下大小有差异，如饥饿时肝细胞体积变大。
每个肝细胞表面可分为窦状隙面、肝细胞面和面三种。
肝细胞里面含有许许多多复杂的细微结构:如肝细胞核、肝细胞质、、内质网、、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。
二、实验目的1.掌握浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术三、实验原理核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白（DNP/RNP）的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在0.14 M的盐溶液中溶解度很低，而RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl 溶液将其从样品中分别抽提出来。
将抽提得到的DNP用SDS处理可将其分离DNA和蛋白质，用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去可得DNA上清，加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。
四、实验器材和材料试剂实验器材：①匀浆器②量筒③离心机④离心管⑤试管⑥吸管⑦恒温水浴锅实验材料：①猪肝实验试剂：①0.1mol/L NaCl-0.05mol/L 柠檬酸钠溶液（pH6.8）②95%乙醇（A.R.）③NaCl固体（A.R.）④5%SDS溶液（5g SDS 定容至100ml）⑤V(氯仿)：V（异戊醇）20：1的混合液五、实验操作1.称量①称取一定质量的猪肝，加入2倍肝重的0.1mol/L NaCl-0.05mol/L柠檬酸钠缓冲液并用匀浆器磨碎（已完成）。
2.提取DNA①量取肝糜4 ml 于10毫升离心管，在4000r/min下离心10min ，沉淀中再加入8 ml缓冲液于4000r/min离心5 min；②弃上清，取沉淀；③将沉淀用10 ml柠檬酸钠缓冲液完全洗入干净的小烧杯、加入5 ml 氯仿-异戊醇混合液、1 ml SDS，振荡30min（保鲜膜封口）；④缓慢加入固体NaCl（约0.9g），使其最终浓度为1mol/L；⑤将溶液分装到2个10毫升离心管中，在4000r/min离心5 min，取上清水相；⑥在上述水相溶液中分别加等体积冷95%乙醇，边加边用玻棒慢慢朝一个方向搅动，将缠绕在玻棒上的凝胶状物用滤纸吸去多余的乙醇，即得DNA粗品；⑦用8ml蒸馏水溶解DNA粗品于10ml离心管中。
3.标准曲线的绘制按下表加入各种试剂，混匀，于60℃恒温水浴锅45min，冷却后，在595nm波长下于分光光度计比色测定，以吸光度对DNA 浓度作图，制作标准曲线。
0 1 2 3 4 50.0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 标准DNA溶液/ml蒸馏水/ml 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 04.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 二苯胺试剂/mlA595nm4.样品的测定将DNA粗品定容至25ml容量瓶，再取DNA样液1.0ml，加入蒸馏水1.0ml，混匀。
然后准确加入二苯胺试剂4.0ml，混匀，于60℃恒温水浴锅45min，冷却后，595nm波长下于分光光度计比色测定，根据所测的吸光度对照标准曲线求得DNA的质量（ug）。
5.计算100g猪肝中DNA含量w=m1/m2×100%w：DNA的质量分数（%）m1：样液中测得的DNA的质量（ug）m2：样液中所含样品的质量（ug）六、实验数据处理1.标准曲线2.实验结果处理猪肝质量为2.04gDNA提取液体积为12.53ml序号 1 2 3A595nm 0.102 0.102 0.101平均A595nm 0.102样液中DNA含量/ug 171.4样液中样品质量/g 0.1628根据公式w=m1/m2×100%得：w=0.1053％则100g猪肝中DNA含量为：w×100=0.1053g七、思考题1.实验中的乙醇、SDS、氯仿-异戊醇、NaCl、柠檬酸钠分别有什么作用？答：①柠檬酸的钠盐在实验中既充当DNA酶的抑制剂，也是pH缓冲溶液；②SDS是表面活性剂，可以让蛋白质与DNA分开；③氯仿是有机溶剂，可以使蛋白质聚集沉淀，便于分离出去；④异戊醇是消泡剂，可以减少泡沫的发生；⑤氯仿-异戊醇的作用是使、膜溶解；⑥NaCl固体溶解使得试液成为高浓度的盐溶液，在这样的环境中DNA核蛋白能溶解，RNA核蛋白则溶解度很低，可以利用这一性质分离两种核酸。
八、实验注意事项1.DNA主要集中在细胞核中，因此，通常选用细胞核含量比例大的生活组织作为提取制备DNA的材料，小牛胸腺组织中细胞核比例较大，因而DNA含量丰富，同时其脱氧核苷酸酶活性较低，制备过程中DNA被降解的可能性相对较低，所以是制备DNA的良好材料，但其来源较困难，脾脏或肝脏易获得，也是实验室制备DNA常用的材料，本实验用新鲜肝脏作为实验材料。
2.为了防止大分子核酸在提取过程中被降解，须采取以下措施：整个过程必须在低温下进行，可加入某些物质抑制核酸酶的活性，如柠檬酸钠、EDTA、SDS等，EDTA是抑制核酸酶的活性最好的抑制剂。
3.从核蛋白中脱去蛋白质的方法很多，经常采用的有：氯仿-异丙醇法、苯酚法、去垢剂法等，他们均能使蛋白质变性和核蛋白解聚，并释放出核酸。
4.使用离心机时，对称放置的离心管必须用天平调平衡。
5.避免剧烈振荡，如研磨过程、搅拌过程等。
九、实验结果误差分析及讨论经过对本次实验结果进行分析，得出100g猪肝中DNA含量大约为0.1053g的结论，在上网查阅相关资料后发现：猪肝中DNA含量与本次试验实际操作测量得出的结果大致相互吻合。
由此可知，本次试验结果是相对比较成功的，较为粗略地测量出猪肝中DNA的含量，并且较为熟练地掌握了浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术，基本达到了本次实验的目的。
但是本次实验结果只是粗略测量，并未达到精确测量猪肝中DNA的含量，且实验数据较理论值偏低，这是由于某些误差导致，在实验过程中些许因素可能会导致实验结果数据有偏差，经分析得出以下几点：①在称取猪肝后加入柠檬酸钠缓冲液进行研磨的过程中，由于猪肝组织表面较滑不易磨碎，且研磨至最后依旧有小部分猪肝组织块残留，因此可能导致猪肝中DNA提取不充分，致使实验数据较理论值偏低；②研磨过程中，可能由于操作不当，导致部分液体溅出，因此可能使得提取液中部分DNA损失，导致实验数据偏低；③在粗提取DNA操作中，频繁地将DNA提取液转移至各个仪器内，可能有极小部分DNA提取液未倒净，残留在仪器壁上损耗掉，导致实验误差；④在使用移液枪的过程中，可能因为操作不当或移液枪经常错误使用，出现仪器误差，导致吸取的DNA样液不精确，出现实验误差；⑤在水相中加入乙醇析出DNA时，不是所有DNA均析出，有小部分依旧融在溶液，导致提取出的DNA含量偏低；⑥标准曲线制作过程中出现些许误差；总的来讲，本次试验结果是相对比较成功的，较为粗略地测量出猪肝中DNA的含量，并且较为熟练地掌握了浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术，基本达到了本次实验的目的。
在今后的实验中会着重注意实验操作的严谨性，严格按照实验前拟定完全的实验步骤进行，保证将实验操作过程中可能出现的误差概率降到最低，尽可能达到预期的实验效果，完成自我的学习及锻炼过程。