动物肝脏中提取DNA
动物肝脏dna的提取实验报告

动物肝脏dna的提取实验报告动物肝脏DNA的提取实验报告摘要:DNA提取是生物学研究中的一项基本实验技术,本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA,探究DNA提取的原理和方法。
实验结果表明,通过适当的操作步骤和试剂,可以成功地从动物肝脏中提取到高质量的DNA。
引言:DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤,它为我们了解生物的遗传信息提供了基础。
而动物肝脏作为一个重要的代谢器官,其中的DNA含量丰富,因此成为DNA提取的理想来源之一。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA,探究DNA提取的原理和方法。
材料与方法:1. 实验材料:动物肝脏样本、细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、异丙醇、氯仿、等温酒精、TE缓冲液等。
2. 实验步骤:a. 取一定量的动物肝脏样本,用细胞裂解缓冲液将其均匀悬浮。
b. 加入适量的蛋白酶K,使其在适宜的温度和时间下进行消化。
c. 加入异丙醇和氯仿,进行DNA的沉淀和分离。
d. 用等温酒精洗涤DNA,去除杂质。
e. 用TE缓冲液溶解DNA,获得高质量的DNA溶液。
结果与讨论:通过实验操作,我们成功地从动物肝脏中提取到了DNA。
观察DNA溶液的外观,呈现出透明且黏稠的特点,符合DNA的理化性质。
进一步通过紫外光谱检测,发现DNA溶液在260nm处有明显的吸收峰,而在280nm处几乎没有吸收,表明DNA溶液中没有蛋白质的污染。
此外,通过琼脂糖凝胶电泳分析,我们可以看到明显的DNA条带,进一步证明了提取到的DNA的完整性和纯度。
DNA提取的关键步骤是细胞裂解和DNA分离。
细胞裂解缓冲液中的离子和蛋白酶K的作用可以破坏细胞膜和核膜,使DNA释放到溶液中。
异丙醇和氯仿的加入可以通过沉淀和分离的方式将DNA从溶液中提取出来。
等温酒精的洗涤可以去除DNA溶液中的杂质,如蛋白质和盐类。
最后,用TE缓冲液溶解DNA,可以得到高质量的DNA溶液。
结论:本实验通过提取动物肝脏中的DNA,探究了DNA提取的原理和方法。
动物肝dna提取实验报告

动物肝dna提取实验报告动物肝DNA提取实验报告引言:DNA(脱氧核糖核酸)是生物体内的遗传物质,对于研究生物进化、基因表达和遗传变异等方面具有重要意义。
DNA提取是分子生物学研究中的基础实验之一,它可以用于进一步的PCR扩增、测序以及其他分子生物学实验。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA,了解DNA提取的基本原理和方法。
材料与方法:1. 实验材料:- 动物肝脏样本(例如小鼠、大鼠、猪等)- 细胞裂解缓冲液(含有蛋白酶K)- 乙酸酚/氯仿提取液- 乙醇- TE缓冲液(含有Tris-HCl和EDTA)2. 实验仪器:- 离心机- 恒温水浴- 紫外可见分光光度计- 电泳仪实验步骤:1. 取动物肝脏样本,将其置于细胞裂解缓冲液中,用块状器械将其均匀研磨。
2. 将研磨后的样本转移到离心管中,离心10分钟,以去除细胞碎片和蛋白质。
3. 将上清液转移到新的离心管中,加入等体积的乙酸酚/氯仿提取液,轻轻摇匀,离心10分钟。
4. 分离上清液和有机相,将上清液转移至新的离心管中,加入等体积的冷乙醇,缓慢倾倒,使DNA沉淀。
5. 用离心机离心10分钟,将上清液倒掉,加入70%乙醇洗涤沉淀3次,每次离心5分钟。
6. 倒掉乙醇,将离心管倒置在吸水纸上,待DNA沉淀干燥。
7. 加入适量的TE缓冲液溶解DNA,使其充分溶解。
8. 使用紫外可见分光光度计检测DNA的浓度和纯度。
9. 可以将提取得到的DNA用于后续的PCR扩增、测序等实验。
结果与讨论:通过上述实验步骤,我们成功地从动物肝脏样本中提取到了DNA。
通过紫外可见分光光度计检测,我们可以得到DNA的浓度和纯度信息,以确保提取到的DNA质量良好。
此外,我们还可以使用电泳仪对提取得到的DNA进行质量检测,观察DNA的大小和完整性。
DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤,它为后续实验提供了可靠的DNA样本。
在实际应用中,我们可以利用提取得到的DNA进行PCR扩增,以研究特定基因的表达情况;也可以进行测序,以了解DNA序列的变异情况。
动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告

动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告动物肝脏DNA的提取和鉴定实验报告研究背景•DNA提取是基因研究和遗传分析的基础步骤之一,对于动物肝脏DNA的提取和鉴定具有重要意义。
•本实验旨在探究动物肝脏DNA的提取方法,并通过PCR技术对其进行鉴定和分析。
实验设计和方法1.实验所用材料和仪器:–动物肝脏样本–DNA提取试剂盒–离心管、显微管–PCR反应体系组分–PCR仪2.DNA提取步骤:–取动物肝脏样本,加入提取试剂,进行细胞破裂和蛋白质消化。
–通过离心将细胞碎片分离,再加入酒精将DNA沉淀。
–对DNA进行洗涤、干燥和溶解,得到纯净的DNA提取物。
3.DNA鉴定和PCR步骤:–制备PCR反应体系,包括DNA模板、引物、酶和缓冲液等。
–进行PCR反应,使用特定的温度和时间条件进行扩增。
–通过凝胶电泳分析PCR产物,检测特定的DNA序列是否存在。
实验结果和分析•经过DNA提取和PCR扩增,成功从动物肝脏中提取到DNA,并进行了鉴定和分析。
•凝胶电泳结果显示,PCR反应产物呈现出预期的大小和条带清晰,表明目标DNA序列存在于动物肝脏中。
结论•本实验成功地提取和鉴定了动物肝脏中的DNA。
•通过PCR技术,可以快速、准确地检测和分析动物肝脏的遗传信息。
•这一研究结果对于进一步深入了解动物遗传特征具有重要意义。
参考文献[1] Smith A, Jones B. A review of DNA extraction techniques for biofilm analysis in wastewater treatment systems. Water Research, 2018, 132: 87-96.[2] Brown C G, McKinstry J L, et al. Comparison of seven methods for extraction of bacterial DNA from fecal and cecal samples of mice. Journal of Microbiological Methods, 2019, 164: 105682.讨论与展望•本实验采用DNA提取试剂盒的方法,相比传统的有机溶剂法,具有操作简便、提取效率高、污染少等优点。
动物肝脏DNA的提取

动物肝脏DNA的提取点击次数:414 发表于:2008-07-08 17:32转载请注明来自丁香园来源:互联网一、目的:了解分离提取DNA的一般原理,掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。
二、原理:在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。
在稀氯化钠(0.14mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。
因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。
将抽提得到的核蛋白用SDS(十二烷基磺酸钠)处理,DNA(或RNA)即与蛋白质分开,可用氯仿一异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。
向溶液中加入适量乙醇,DNA即析出。
为了防止DNA(或RNA)酶解,提取时加EDTA(ethy-lenediamine tetracetic acid,乙二胺四乙酸)。
三、器材及试剂:1.器材:①新鲜猪肝(一次用不完一定要冷冻保存)②匀浆器③离心机5000r·min-1④量筒50ml(×1)、10ml(×1)⑤水浴锅⑥纱布⑦真空干燥器2.试剂:①5mol·L-1NaCl溶液:将292.3gNaCl溶于水,稀释至1000ml。
②0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA-Na溶液:溶8.18gNaCl及37.2gEDTA-Na于蒸馏水,稀释至1000ml。
四、操作步骤:1.取猪肝20~30g,用适量0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液洗去血液,剪碎,加入约30~50ml0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液,置匀浆器或研钵中研磨,研磨一定要充分,待研成糊状后,用单层纱布滤去残渣,将滤液离心10分钟(4000r·min-1)弃去上清液,沉淀用0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液洗二、三次。
动物肝脏中DNA得提取及检测实验报告

动物肝脏中DNA得提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸(DNA,为英文Deoxyribonucleic acid得缩写),又称去氧核糖核酸,就是脱氧核糖核酸染色体得主要化学成分,同时也就是组成基因得材料。
有时也被称为“遗传微粒”,原因就是在繁殖过程中,父代会把它们自己DNA得一部分复制传递到子代中,从而完成性状得传播。
DNA就是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高得粘度,可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来得水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间得氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA 得解螺旋。
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染色体,整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言,正常得体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期又可划分为:G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物,如动物、植物及真菌而言,染色体主要存在于细胞核内;而对于原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中得拟核内。
染色体上得染色质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与其她蛋白质进行交互作用,进而调节基因得转录。
脱氧核糖核酸得结构DNA得结构: DNA得结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构与四级结构四个水平。
DNA就是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP 脱氧腺苷)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP 脱氧胸苷)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP 脱氧胞苷)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP 脱氧鸟苷)。
而脱氧核糖(五碳糖)与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。
动物肝脏中DNA的提取检测实验报告

动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸(DNA,为英文Deoxyribonucleic acid的缩写),又称去氧核糖核酸,是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分,同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”,原因是在繁殖过程中,父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中,从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染色体,整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言,正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期又可划分为:G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物,如动物、植物及真菌而言,染色体主要存在于细胞核内;而对于原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用,进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构:DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP 脱氧腺苷)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP 脱氧胸苷)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP 脱氧胞苷)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP 脱氧鸟苷)。
而脱氧核糖(五碳糖)与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连,这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列,可组成遗传密码,指导蛋白质的合成。
动物肝脏DNA的提取

动物肝脏DNA的提取
试剂、器材和实验材料
一、试剂:0.15mol/LNaCl-0.015mol/L柠檬酸钠、0.15mol/LNaCl-0.15mol/LNa2EDTA 溶液、10%SDS、5mol/LNaCl溶液、氯仿—异丙醇混合液、95%乙醇
二、器材:离心管、电子台秤、恒温水浴、量筒、烧杯、刻度吸管、离心机。
三、实验材料:新鲜兔子肝脏
实验操作
1.取处理好的肝脏组织于离心管中,加入40mlSSC溶液,将肝脏中的冰块捣碎,平衡后3000rpm离心10min.
2.弃去上清液,收集沉淀,重复第一步操作,再弃去上清液,得到DNP粗制品。
3.沉淀物悬于25mlPH8.0的Na2EDTA溶液中。
4.缓慢滴加10%SDS溶液3ml,边加边搅拌,同向轻搅。
5.60℃恒温水浴10min,不断搅动。
6.取出,冷却,加入5mol/LNaCl溶液8ml,转移到500ml的烧杯中。
7.加入40ml氯仿—异丙醇混合液,在室温下摇动20min。
8.将混合物转移至离心管中,平衡后,3000rpm离心5min,离心后混合物分为三层。
9.用吸管小心吸取上清液,放到30ml95%乙醇中,用玻璃棒轻轻缠出DNA丝状物。
讨论
1.用玻璃棒进行搅拌时,要注意同向轻搅,因为提取的DNA比较容易断裂。
2.在室温下摇动时,要注意只能顺时针或逆时针摇动。
简述动物肝脏中dna提取的基本原理

简述动物肝脏中dna提取的基本原理动物肝脏中DNA提取的基本原理DNA提取是分子生物学中的一项基础技术,它是研究生物学、医学、农业等领域的重要手段。
在动物肝脏中提取DNA,可以用于研究动物的遗传信息、基因表达、疾病诊断等方面。
下面将介绍动物肝脏中DNA提取的基本原理。
1. 细胞破碎首先需要将肝脏组织中的细胞破碎,使DNA从细胞内释放出来。
常用的方法有机械破碎、化学破碎和超声波破碎等。
其中,机械破碎是最常用的方法,可以用搅拌器、研钵等设备将组织细胞破碎。
2. DNA分离破碎后的细胞混合物中含有DNA、RNA、蛋白质等多种分子,需要将DNA与其他分子分离。
一般采用酚/氯仿法或商用DNA提取试剂盒进行DNA分离。
酚/氯仿法是一种传统的DNA提取方法,它利用酚的亲油性和氯仿的亲水性,将DNA与其他分子分离。
商用DNA 提取试剂盒则是一种快速、简便的DNA提取方法,其中的试剂已经经过优化,可以快速地将DNA分离出来。
3. DNA纯化分离出的DNA还需要进行纯化,去除杂质和其他分子的干扰。
纯化方法包括乙醇沉淀法、离心柱纯化法等。
其中,乙醇沉淀法是最常用的方法,它利用乙醇的亲水性和DNA的亲疏水性,将DNA沉淀下来。
离心柱纯化法则是利用离心柱的特殊结构,将DNA与其他分子分离。
4. DNA定量最后需要对提取出的DNA进行定量,以确定DNA的浓度和纯度。
常用的方法有紫外分光光度法、凝胶电泳法等。
其中,紫外分光光度法是最常用的方法,它利用DNA分子的吸收特性,测定DNA的浓度和纯度。
动物肝脏中DNA提取的基本原理包括细胞破碎、DNA分离、DNA 纯化和DNA定量。
这些步骤需要严格控制条件,以保证提取出的DNA质量和纯度。
DNA提取技术的不断改进和优化,为动物遗传学、分子生物学等领域的研究提供了有力的支持。
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动物肝脏中提取DNA
【实验目的】
1.掌握肝脏DNA分离的原理及操作过程
2.掌握主要试剂的作用
3.熟悉DNA纯度及含量鉴定方法
【实验原理】
动物肝脏。
小牛胸腺和鱼类精子含有较多的DNA,是提取DNA的良好材料。
动植物的DNA室以核蛋白的形式存在于生物体中(主要在核内),DNA核蛋白(DNP)在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度很低,近视它在纯水中的1%。
,而在1mol/L NaCl溶液中,其溶解度至少是纯水中的二倍。
相反,核糖核蛋白(RNP)能在0.15mol/L NaCl溶液中溶解。
利用这一性质,可使脱氧核糖核蛋白与核糖核蛋白分开。
制备过程中,当细胞破碎时,脱氧核糖核酸酶的活性增加,DNA将遭受降解,为此在提取液中加入柠檬酸盐、EDTA做抑制剂,并要求整个提取操作在4℃以下进行,以减少酶对DNA的破坏。
分离得到的DNP,进一步用十二烷基硫酸钠(SDS)使蛋白质变性,用含有异丙醇的氯仿除去变性蛋白,最后用95%的冷乙醇从溶液中把DNA沉淀出来。
DNA纯度可以通过A260/A280进行鉴定,而浓度可以用紫外吸收法、定磷法、二苯胺显色法测定。
【实验操作】
1.取新鲜猪肝脏,除去血水和结缔组织,在冰浴上切成小块,称取10g,加入2倍体积(20ml)0.15mol/L NaCl-0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液,于组织捣碎机中迅速捣成匀浆,再以玻璃匀浆器2~3次使细胞破碎,最后加缓冲液至50ml。
2.组织匀浆移入离心管内,浸入冰盐溶液中冷却,而后在4℃下6000r/min离心5~10min。
弃上清(可用于制备RNA)。
将沉淀用2倍体积的冷的上述缓冲液洗涤2次,洗涤时用匀浆器研磨洗涤,离心条件同上。
3.将离心后所得沉淀物悬于5倍体积的0.15mol/L NaCl-0.1mol/L EDTA-Na2(pH8.0)溶液中,而后边搅拌边慢慢滴加5%SDS溶液,直至SDS的最终浓度达到1%为止。
然后加入固体NaCl,使其最终浓度达1mol/L。
继续不断搅拌30~45min,以确保NaCl
全部溶解,此时可见溶液由黏稠变稀薄。
4。
将上述混合溶液倒入一个300ml磨口三角瓶里,加入等体积的氯仿-异戊醇(20:1),振荡20min,室温3000r/min离心10min。
由此可见,离心管中分为三层,上层水溶液,中层变性蛋白,下层氯仿-异成醇。
振荡,离心取上清。
如此重复直至中间蛋白层消失。
5.最后一次离心后小心吸取上层水相,记录体积,放入小烧杯中,加入2倍体积预冷的95%乙醇。
加入时,用滴管吸取乙醇,边加边用玻璃棒慢慢顺一个方向在烧杯内转动。
此时可见白色DNA显微逐渐缠于玻璃棒上,直至无纤维出现为止。
6.纯度鉴定:将所得DNA纤维用75%乙醇洗涤2次,置于干净试管中,加入0.15mol/L NaCl-
0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液5ml,使其溶解。
测A260/A280,0.15mol/L NaCl-0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液做空白。
如果比值大于1.8说明含有RNA,如果比值小于1.8说明含有大奶:如果等于1.8说明DNA纯度较高。
7.含量测定:所得DNA制品可用紫外吸收法、定磷法、二苯胺显色法测定DNA含量。
【试剂和材料】
1.材料:猪肝
2. 0.15mol/L NaCl-0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液(pH7.0):称取8.77g NaCl和4.41g枸橼酸钠(Na3C6H5O7·2H2O),用蒸馏水溶解,以0.1mol/L NaOH调节pH至7.0,最后定容至1000ml。
3.0.15mol/L NaCl-0.15mol/L EDTA-Na2溶液(pH8.0):称取8.77g NaCl和37.2g EDTA-Na2溶于800ml蒸馏水中,以2mol/L NaOH调至pH8.0,最后定容至1000ml。
4.5%SDS溶液(W/V):称取5g SDS,溶至100ml45%的乙醇中。
5.氯仿一异戊醇溶液:按氯仿:异戊醇=20:1(V/V)配制。
6.95%乙醇溶液。
7.75%乙醇溶液。
【器材】
剪刀及天平;刻度吸管;试管;三角瓶及烧杯;量筒(10ml);组织捣碎机和玻璃匀浆器;离心机;紫光分光光度计。
【注意事项】
1.制备肝细胞匀浆时不要过度匀浆,以免DNA断裂。
2.加入氯仿一异戊醇后勿剧烈振荡,以免DNA纤维断裂。
3.有机溶剂对人体有害,操作时要注意。
4.为了尽量降低DNA酶的影响,提取过程应在冰浴上进行。