细胞因子诱导的杀伤细胞cytokine-inducedkillerCIK
CIK细胞回输的护理常规
CIK 细胞回输的护理一、CIK细胞的定义“CIK” 全称：cytokine induced killer中文译名：细胞因子诱导的杀伤细胞，它是外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子共同诱导培养产生的一类细胞群，具有显著抗肿瘤活性的作用。
二、CIK细胞治疗的程序1、细胞采集细胞采集前检查患者肝功能、血常规、凝血功能等，结果符合条件者，经签署知情同意书后采血。
采血方法2种：（1）手工抽取患者外周血100ml左右；（2）用费森尤斯血细胞分离机采集患者外周血单个核细胞。
病人采血前注意事项a) 患者清晨抽血前可以进食，但勿食用油腻食物b) 抽血前12小时不能输液c) 进行放化疗的患者：放化疗前或化疗后淋巴细胞计数正常后取血。
已冻存细胞的情况除外。
d) 连续两个疗程治疗时，取血和回输细胞在时间上会有交叉。
取血必须在细胞回输之前2、细胞体外培养采集的细胞在GMP实验室进行培养，此过程需要约10天左右。
3、细胞回输于培养的第10天左右开始分8次回输CIK细胞，分别是第1、2、4、6、8、10、12、14天进行回输，一个疗程约14天。
三、不适合CIK细胞治疗的情况：1、正在使用免疫抑制药物，全身化疗不到2周或器官移植后长期使用免疫抑制剂的患者。
2、肝功能明显异常：胆红素（TBIL）>85umol/L（慢性肝炎患者TBIL>45 umol/L），转氨酶（ALT）>400U/L。
3、凝血功能明显异常：凝血酶原活动度(PTA) < 50%，血小板（PLT）< 40×109/L。
4、严重腹水，有上消化道出血史的患者。
5、有明确感染或者发热的患者。
6、有严重的心脑血管疾病、糖尿病及肾功能不全者。
7、T细胞淋巴瘤，骨髓瘤。
8、自身免疫性疾病的病人。
9、孕妇或者正在哺乳的妇女。
四、CIK细胞回输的护理1、回输前护理（1）接受本治疗前2周内终止放疗或化疗；（2）回输前15分钟肌注异丙嗪25mg、地塞米松5mg iv（3）细胞输注前先测量体温，如体温超过38.5℃，及时通知GMP 实验室暂不输注；（4）告知患者具体的回输时间，确保病人每次回输能顺利进行。
自体免疫免疫细胞治疗技术之CIK细胞治疗癌症_陈怡
329BIOTECHWORLD 生物技术世界CIK细胞具有增殖快速、杀癌力强、杀癌谱广、对正常细胞无杀伤作用、对耐药肿瘤敏感、可调整人体的免疫状态、刺激骨髓造血等重要作用。
是目前已知活性最高的非特异性杀伤免疫效应细胞。
树突状细胞(dendritic cell,DC细胞)是体内功能最强大的专职抗原递呈细胞，也是唯一能激活幼稚T细胞的抗原的递呈细胞。
DC细胞在免疫应答过程中具有关键的作用。
将CIK细胞和同源DC细胞以及一系列细胞因子如IL-1、IL-2、IFN-y、CD3mAb共同培养，即可获得DC-CIK细胞。
它既可以促进DC细胞的成熟，更能促进CIK细胞的增殖，并增强其抗肿瘤活性。
1. CIK 细胞治疗技术流程白细胞采集→淋巴细胞→CIK细胞＋DC细胞＋细胞因子→共培养、添加IL-2扩增→DC-CIK细胞→质量检测→质量合格→静脉回输入患者体内→疗效评估2. CIK 细胞的抗肿瘤机制CIK细胞是一种异质细胞，是混合的细胞群体。
主要细胞成分为CD3+CD56+细胞，主要的效应细胞是CD3+CD8+细胞。
外周血单核细胞经多种细胞因子如IL-1、IL-2、IFN-y、CD3mAb等刺激诱导，并通过体外培养两周左右，细胞数量便可扩增上千倍。
其中CD3+CD56+CIK细胞达到70%以上，这是抗肿瘤作用的主要细胞亚群。
并且在回输到患者体内后，经细胞因子IL-2的诱导仍能进行扩增，这种机能保证了患者体内免疫细胞的数量和活性。
CIK细胞作用于肿瘤细胞主要有5种途径:(1)引发毒性颗粒依赖性溶细胞作用，致使靶细胞死亡。
(2)CIK细胞与T细胞抗原受体结合，参与免疫过程。
T细胞合成并释放毒性颗粒，作用于靶细胞，造成靶细胞溶解。
(3)CIK细胞自身可分泌细胞因子。
细胞因子作用于靶细胞或反作用于效应细胞，提高其活性。
(4)C I K 细胞群中的CD3+CD56+可以合成并释放穿孔蛋白，溶解靶细胞。
(5)CIK细胞能够激活靶细胞的凋亡基因，使凋亡基因转录并表达。
DCCIK细胞简介
DCCIK细胞简介
CIK（cytokines -induced killer cell，细胞因子诱导的杀伤细胞）细胞：是将人体外周血单个核细胞（PBMC）在体外模拟人体内环境，用多种细胞因子（如CD3McAb、IL-2、IFN-γ、IL-1α等）共同培养增殖后获得的一群异质细胞。
其中CD3+CD56+双阳性细胞是CIK细胞群体中主要的效应细胞。
CIK细胞兼具有T细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性的广谱杀瘤、抗病毒活性。
所以，CIK又被称为具有NK细胞作用的T淋巴细胞。
DCCIK细胞：是DC细胞在体外培养扩增，再与CIK共培养后联合用于肿瘤的治疗，可以起到增强及互补作用：一、诱导抗原特异性CTL反应。
携带肿瘤特异性抗原信息的树突状细胞可有效地激活T淋巴细胞，增强T细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤作用。
二、增加CIK细胞的扩增倍数。
三、增强CIK细胞肿瘤杀伤效力。
临床治疗适应症：适用于各种不同病程阶段肿瘤的治疗（Ｔ细胞淋巴瘤除外）l头颈部肿瘤：鼻咽癌、喉癌和舌癌等
l呼吸系统：肺癌（小细胞肺癌、鳞癌、腺癌）等
l消化系统：食管癌、肝癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等
l泌尿系统：肾癌、肾上腺癌、膀胱癌等
l生殖系统：乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌等
l血液系统：急慢性白血病、淋巴瘤（除T细胞淋巴瘤）等
l其他肿瘤：恶性黑色素瘤、脑胶质瘤、骨肉瘤等
CIK细胞光镜图。
DC_CIK细胞的生物学活性及抗淋巴瘤细胞的作用_魏绪仓
第28卷第3期2007年6月西安交通大学学报(医学版)Jour nal of Xi 'an Jiaotong University (Medical Scie nces )Vol.28No.3Jun.2007DC -CIK 细胞的生物学活性及抗淋巴瘤细胞的作用魏绪仓,连小云,赵文理,杨娣娣,韩秀蕊,邢佩霓,李梅生(陕西省人民医院血液病研究室,陕西西安 710068)摘要:目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK )与树突状细胞(DC )共培养后DC -CIK 细胞的体外增殖能力、免疫表型变化、分泌细胞因子水平以及抗淋巴瘤细胞活性。
方法 正常人外周血单个核细胞诱导DC 和CIK 细胞,将DC 与CIK 共培养,以CIK 细胞单独培养为对照。
用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,M T T 法测定杀伤活性,流式细胞术分析免疫表型,EL ISA 双抗体夹心法检测分泌干扰素-γ(IF N -γ)、白细胞介素-12(I L -12)的水平。
结果 DC -CIK 细胞增殖能力明显高于CIK 细胞(P <0.05);DC 、CIK 细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+双阳性细胞比率较同条件下CIK 细胞组显著增多(P <0.05);共培养3d ,DC -CIK 细胞上清液中IL -12、I NF -γ的分泌量均比CI K 细胞单独培养的分泌量高(P <0.01,P <0.05);在5∶1-40∶1的效靶比范围内,DC -CIK 细胞对淋巴瘤细胞的杀伤率显著高于CIK 细胞(P <0.05),且杀伤率与效靶比呈正相关。
结论 DC -CIK 细胞的增殖能力、分泌细胞因子水平、抗淋巴瘤细胞活性均高于CIK 细胞,为DC -CIK 细胞免疫治疗提供了实验和理论依据。
关键词:CIK 细胞;DC -CIK 细胞;生物学活性;抗淋巴瘤中图分类号:R733.7 文献标识码:A 文章编号:1671-8259(2007)03-0283-03The biological activity and anti -tumor effect againstlymphoma cells in DC -CIK cellsWei Xucang ,Lian Xiaoyun ,Zhao Wenli ,Yang Didi ,H an Xiurui ,Xing Peini ,Li M eisheng (Depar tment of Hematolo gy ,Shaanxi Provincial People 's Ho spital ,Xi 'an 710068,China )ABSTRAC T :Objective To investigate the prolife ra tion activities ,phenotype cha nges ,level of se cretor ycytokines and anti -tumor activity against lymphoma cells of DC -CIK cells in co -c ultur e of cytokine -induced kille r (CI K )cells with dendritic cells (DC ).Methods DC and CI K wer e prepar ed fr om healthy human peripher al blood mononuclear cells.They were co -culture d per ipher ally.CI K cells wer e culture d alone as controls.I ncre ased num be r of cells wer e c ounted by tapan -blue sta ining ,killing activity was detected by M TT assa y ,cells phenotypes wer e analyzed by flow cytom etry ,secre tions of INF -γand I L -12wer e de term ined by ELISA.R esults The pr olifer ationactivity of DC -CI K ce lls was significantly higher than that of CI K cells (P <0.05).Under the same condition ,the ra tio of CD 3+CD 56+and C D 3+CD 8+double positive cells in CI K cells was signif ic antly enhanced by c o -culture with DC (P <0.05).I n DC -CIK ce lls ,the level of I L -12and I NF -γin cultur e super natants was incr eased noticeably on da y 3compar ed to CI K cells wh ich wer e cultured alone (P <0.01,P <0.05).At the ef fec tor -tar get r atio f rom 5∶1to 40∶1,the anti -tumor e ffe ct of DC -CIK cells was m uch higher than tha t of CI K cells (P <0.05),and this eff ect was positively related with the ef fector -target ra tio.Conclusion The pr olifer ation activity ,level of se cretor ycytokines ,and anti -tumor e ff ect against lym phoma ce lls of DC -CI K cells wer e significantly higher th an those of CIK cells.The resear ch pr ovides theor etical and e xper iment al basis f or the immunother apy of DC -CI K cells.KEY W ORDS :cytokine -induced killer cell ;dendritic cells -cytokine induced killer cell ;biological a ctivity ;anti -lym -phom a收稿日期:2006-11-07 修回日期:2006-01-16基金项目:陕西省“三五人才工程”专项基金资助项目作者简介:魏绪仓(1962-),男(汉族),副研究员,主要从事血液病实验诊断与研究. 细胞因子诱导的杀伤细胞(cy tokine -induced killer cells ,CIK )是一种体外增殖能力强、杀瘤活性高及对多重耐药肿瘤细胞较敏感的广谱抗瘤免疫活性细胞[1]。
CIK 细胞
CIK 细胞的免疫生物学特性细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine2induced killer ,CIK) , 是由多种细胞因子如IL-2(白细胞介素-2)、IFN（干扰素）和CD3 单克隆抗体等诱导而成的对多种肿瘤具有杀伤活性的细胞毒性T细胞, 其溶瘤活性具有非MHC（人类主要组织相容性复合体）限制性。
（CD3 单克隆抗体可诱导淋巴细胞增殖,IL-2 具有激活杀伤细胞、促进T 细胞增殖并加强T 细胞的细胞毒作用,以及IFN2γ具有加强细胞毒活力）。
它比LAK 细胞具有更强大的肿瘤杀伤活性且较LAK（淋巴因子激活杀伤细胞）、TIL（肿瘤浸润淋巴细胞）及CD3AK（抗CD3 单克隆抗体激活的杀伤细胞）具有更强的增殖能力,有明确的杀瘤细胞作用,容易在体外培养,而且需要的IL2量较少,患者应用时的毒副反应小。
CIK细胞中CD3 + CD56 +双阳性细胞增殖最快,细胞毒活性最强。
由于其同时表达T 淋巴细胞的标志CD3 分子和自然杀伤细胞（NK) 标志CD56 分子,因此,CD3 +CD56 + 双阳性细胞又被称为NK细胞样T 淋巴细胞(natural killer T cells ,NKT) ,兼具有T 淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC 限制性杀瘤优点。
CIK 细胞的抗肿瘤作用机制还未完全明了, 目前认为CIK 细胞可被淋巴细胞功能相关抗原-1( LFA-1) 有关识别结构激活, 导致胞浆毒性颗粒释放而杀伤肿瘤细胞; CIK 细胞也可因表面CD3 受体结合而激活, 导致胞浆毒性颗粒释放而产生溶瘤作用; CIK 细胞可产生大量炎性细胞因子实现对肿瘤细胞的抑制或杀伤; CIK 细胞也可诱导肿瘤细胞凋亡,因CIK 细胞能活化肿瘤细胞凋亡基因, 使得FLIP、Bcl2、BclxL、DAD1 和sur viv in 基因表达上调。
CIK 细胞能促使FasL 的合成, 研究发现CIK 细胞培养上清中含有具有生物学活性的可溶性的FasL。
dccik细胞介绍原理
dccik细胞介绍原理
DCCIK细胞是一种治疗肿瘤的免疫细胞疗法，其全称为外周血
单个核细胞诱导的细胞因子诱导杀伤细胞（Dendritic Cell-Cytokine Induced Killer Cell）。
DCCIK细胞疗法的原理主要包
括以下几个方面：
1. 采集外周血单个核细胞，首先，从患者的外周血中采集单个
核细胞，这些细胞包括单核细胞、淋巴细胞等。
2. 体外培养和激活，采集到的外周血单个核细胞经过体外培养
和激活，通常是通过加入细胞因子和抗原等物质，使其分化为具有
杀伤肿瘤细胞能力的DCCIK细胞。
3. 输注治疗，经过培养和激活后的DCCIK细胞被输回患者体内，这些细胞可以识别和杀伤肿瘤细胞，从而发挥抗肿瘤作用。
DCCIK细胞疗法的原理基于患者自身的免疫系统，通过增强免
疫细胞的活性，提高其对肿瘤细胞的识别和杀伤能力，从而达到治
疗肿瘤的目的。
这种疗法相对于传统的肿瘤治疗方法，具有针对性强、副作用小等优点，因此在临床上备受关注。
总的来说，DCCIK细胞疗法通过激活和增强患者自身免疫系统的能力来对抗肿瘤细胞，是一种具有前景的肿瘤治疗方法。
希望这个回答能够满足你的要求。
CIK 细 胞 治 疗 知 情 同 意 书
医师陈述：
我已经告知患者（患方）有关CIK细胞治疗的目的、方法、治疗可能存在的不良反应以及治疗费用等事项，解答了关于治疗相关的问题。并已明确告知本次住院期间同样的治疗，视为患者同意，不再签署知情同意书，如有异议请事先声明。
回输在化疗或放疗的间歇期进行，次数由医生根据病人的病情决定，每次间隔一周或更长。
三、CIK治疗的副作用：
目前尚未见由于CIK治疗引起的明显不良反应或导致死亡的病例报道。
治疗后，可见自限性发热，偶见头痛，恶心，头晕，瘙痒及心动过速等症状，主要原因是机体免疫系统被活化引起。若感觉不适需及时告知医生或护士，医生将根据情况对症处理。
XXXXXXX医院
CIK细胞治疗知情同意书
姓名
性别
年龄
住院号
签署日期
疾病介绍和治疗建议：
医师已告知我目前诊断为，根据我的病情，需要行CIK细胞回输治疗。
一、CIK治疗的目的：
本项目是一项细胞免疫治疗，其目的是结合放、化疗对肿瘤患者进行治疗。另外对放、化疗治疗效果不理想的，目前没有明确的有效治疗方法的肿瘤患者也提供了一种新的可能有效的治疗方法。CIK（Cytokine Induced Killer，CIK）是细胞因子诱导的杀伤免疫细胞的简称，可结合放、化疗，提高治疗效果，对肿瘤患者提高生活质量和生存率等方面的具有一定的作用。
医师签名
患者的知情选择：
医师已告知我有关CIK细胞治疗的目的、方法、治疗可能存在的不良反应以及治疗费用等事项，并解答了关于治疗相关的问题。我已详细阅读并充分了解以上内容，我同意接受CIK治疗，并愿意承担可能出现的医疗风险及相应经济负担。
患者签名：
CIK细胞
CIK细胞CIK细胞，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)是一种新型的免疫活性细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作用强，具有一定的免疫特性。
由于该细胞同时表达 CD3 和 CD56 两种膜蛋白分子，故又称为NK 细胞（自然杀伤细胞）样 T 淋巴细胞，兼具有 T 淋巴细胞强大的抗瘤活性，和 NK 细胞的非 MMC 限制性杀瘤优点。
该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强，如同“ 细胞导弹” ，能精确“ 点射” 肿瘤细胞，但不会伤及“ 无辜” 的正常细胞。
尤其对手术后或放化疗后患者效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止癌细胞扩散和复发，提高机体免疫力，因此， CIK 细胞被认为是新一代的肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。
CIK细胞的特点1、增殖能力强，主要效用细胞CD3+CD56+ 可增殖1000倍；2、杀伤活力强，远优于传统的LAK细胞和细胞因子γ干扰素、白细胞介素2等；3、杀瘤谱广，不受MHC限制，具有广谱杀肿瘤和病毒的作用，对多重耐药肿瘤细胞仍敏感，啥瘤活性不受环孢素A（CsA）和FK506等免疫抑制剂的影响，能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡。
4、毒副作用小，无严重不良反应。
CIK细胞治疗技术的优势1、可有清除手术、放化疗后残余的癌细胞及微小病灶，预防肿瘤的复发和转移；2、可与放、化疗联合使用，能降低放化疗的毒副作用的感染率，提高放化疗的疗效；3、可用于放、化疗无效的患者，或对化疗药物产生耐药性的患者的治疗；4、对于失去手术机会或已复发转移的晚期肿瘤患者，能迅速缓解其临床症状，延长生存期；大部分患者出现瘤体减小甚至消失或长期带瘤生存的治疗效果；5、由于CIK细胞具有免疫调节和体细胞修复作用，在治疗肿瘤的同时，大部分患者尤其是放化疗后的患者，可出现消化道症状减轻或消失，皮肤有光泽，黑斑淡化，静脉曲张消失，脱发停止甚至头发生长或白发变黑等“年轻化”表现，及精神状态或体力明显恢复等现象，从而提高肿瘤患者的生存质量，延长生存期。
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DC-CIK联合化疗治疗晚期胃癌的近期疗效观察【摘要】目的探讨树突状细胞（dendritic cell，DC）共培养细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）联合化疗治疗晚期胃癌患者的近期疗效。
方法选取28例确诊的晚期胃癌患者采用DC-CIK联合化疗为联合治疗组，选取临床资料相近的同期进行单纯化疗的28例的晚期胃癌患者为对照组，观察两组患者治疗前后外周血中T细胞亚群,细胞因子及卡氏评分（Karnofsky KPS）的变化，临床疗效，并记录其不良反应。
结果联合治疗组患者治疗后CD3+,CD4+,CD56+和CD4+/CD8+的比例无明显变化（P＞0.05），对照组CD3+,CD4+和CD4+/CD8+的比例治疗后明显下降（P<0.05）；联合治疗组的细胞因子IL-12和IFN-γ的水平治疗后有所上升（P<0.05），治疗组IL-2, IL-12和TNF-α的水平治疗后有所下降（P<0.05）。
联合治疗组的疾病控制率为78.6%，与对照组的53.6%差别有统计学意义（P<0.05），KPS评分总提高率为82.14%，与对照组的57.14%差别有统计学意义（P<0.05），结论DC-CIK联合化疗与对照组比能提高患者的免疫功能及生活质量，DC-CIK免疫治疗联合化疗可望成为胃癌有效的过继免疫治疗方法。
【关键词】树突状细胞;细胞因子诱导的杀伤细胞;胃癌;过继免疫治疗Short-term curative efficacy of DC-CIK cell-therapy combined with chemotherapy on patients with advanced gastric cancer【Abstract】Objective To investigate clinical effects of dendritic cells(DC) co-cultured with cytokine induced killer cells(CIK) combined with chemotherapy on patients with advanced gastric cancer.Methods twenty-eight patients with advanced gastric cancer were treated with DC-CIK combined with chemotherapy were taken as the combined treatment group,another twenty-eight patients who were treated with chemotherapy alone during the same period were taken as control. T lymphocyte subtypes ，intra-cellular cytokines in peripheral blood of the patients and Performance Status (KPS) were compared between the two groups.The clinical effects were analysed. The safety were observed. Results The ratios of CD3+,CD4+,CD56+andCD4+/CD8+ were not change obviously in combined treatment group and decreased in control group after treatment, which showed significant statistical difference (P<0.05) .The IL-12 and IFN-γwere increased after treatment in combined treatment group, (P<0.05). The IL-2, IL-12 and TNF-αwere decreased in control group after treatment, (P<0.05). The disease control rate (DCR) of combined therapy group and control group were 78.6%and 53.6%respectively showing significant difference (P<0.05).The effective rate of KPS were 82.14%and 57.14%respectively showing significant difference (P<0.05). Conclusion:DC-CIK cells combined with chemotherapy can improve immune functions and elevate life quality of the patients. DC-CIK cells combined with chemotherapy is likely to be an effective adoptive immunotherapy for gastric cancer【key words】dendritic cells; cytokine induced killer cells; gastric cancer我国胃癌病人诊断时85%处于晚期[1]，手术、化疗、放疗等传统治疗方法取得一定成效，60%的病人术后会出现局部复发和转移[2]，其5 年生存率仍仅为25%[3]，新的治疗手段显得尤为重要。
免疫治疗既能直接杀死肿瘤细胞又能增加机体免疫功能[4]，无明显毒副反应，已成为肿瘤治疗的第4个主要治疗方法[5]。
DC和CIK共培养（DC-CIK）可促进CIK的增殖和成熟，增强CIK的细胞毒活性，CIK也能促进DC的成熟，并且使其分泌大量IL-2[6],所获得的DC-CIK细胞由于细胞毒活性强及安全可靠成为该领域极具发展前景的免疫细胞。
我们自2009年2月至2013年2月，通过将DC与CIK共培养后联合化疗，单纯化疗分别治疗晚期胃癌患者，对比观察其近期疗效、不良反应、对免疫功能、生活质量的影响。
1 材料与方法1.1 一般资料选取2009年2月至2013年2月，病理学方法确诊为晚期胃癌并给予DC-CIK联合化疗的患者28例为联合治疗组，选择同期临床资料相近的28例接受单纯化疗的晚期胃癌患者为对照组，详见表1。
入选标准：重要脏器功能正常，无自身免疫疾病，卡氏评分>60分，预计生存期超过6个月，治疗前心、肝、肾功能大致正常。
患者或家属签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会批准。
表1 两组病人的临床资料情况Table 1 Distribution of demographic and clinical characteristics in two groups临床特征例数分组ｘ2P联合治疗组（%）对照组（%）性别男43 21(75.0) 22(78.6) 0.1 ＞0.05 女13 7(25.0) 6(21.4)中位年龄（岁）59（36~79）62（41~77）58（36~79）胃癌部位贲门部21 10（35.7）11（39.2）胃体部23 13（46.4）10（35.7）0.772 ＞0.05 胃窦部12 5（17.9）7（25.0）病理类型低分化腺13 7（25.0）6（21.4）中分化腺36 17 （60.7）19（67.9）0.331 ＞0.05 粘液腺7 4（14.3）3（10.7）术后复发转移/晚期（例）30/26 17/11 13/15转移部位肝9 4（14.3）5（17.9）腹腔7 4 （14.3）3（10.7）肺7 3 （10.7）4（14.3）0.486 ＞0.05 盆腔 5 2 （7.1）3（10.7）骨7 3（10.7）4（14.3）治疗方式首治/单纯手术17 8 9一线化疗18 11 7 1.56 ＞0.05 二线或以上化疗21 9 12放疗 5 2 3治疗前KPS评分56 74.64±8.81 74.28±8.36 ＞0.051.2 DC-CIK 细胞培养1.2.1 DC细胞的体外培养和扩增DC的体外培养化疗前2天采集患者自体外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell, PBMC），用生理盐水洗涤4次，然后使用RPMI 1640培养基（加拿大维森特公司）调节细胞密度至2.5×106～3×106个/ml，将细胞接种于6孔培养板，置37℃、5%CO2培养箱孵育90 min后吸取未贴壁细胞（peripheral blood lymphocyte，PBL），于孔中加入DC诱导培养液（含5%自体血浆、100ng/ml rhGM-CSF、50ng/ml rhIL-4），置37℃、5%CO2培养箱中诱导，第3天进行1/3换液，第5天收获未成熟DC（imDC），加入终浓度为20ng/ml IL-1β、5 µg/ml PGE-2、20 ng/ml TNF-α，诱导DC成熟，第7天收获成熟DC（mDC）。
1.2.2 CIK的体外培养PBMC贴壁培养后收获PBL，重悬于5％自体血浆RPMI 1640培养液中，调整细胞密度至2.5×106/ml，铺入预先包被有anti-CD3 mAb的75cm2培养瓶中，添加IFN-γ（1000 U/ml），置于37℃、5% CO2培养箱中孵育，第二天添加IL-1α（终浓度10 ng/ml）、IL-2（终浓度250 U/ml），继续培养；第3天用含5%自体血浆RPMI 1640培养液进行添液，此后实时观察细胞状态适当添液或扩瓶1.2.3 DC与CIK共培养CIK培养至第7天，将细胞合并至一瓶，将收获的mDC加入CIK细胞悬液中，同时补充自体血浆浓度至10%，添加IL-2至终浓度250 U/ml，轻轻吹打混匀，按照每瓶60ml 平均分配到75cm2培养瓶中，置于37℃、5% CO2培养箱中继续培养，共培养2-3天后至细胞达到回输数量可启动回输。
1.2.4 DC-CIK质量控制每次治疗前24 h和治疗前2h，对DC-CIK细胞取样，按照《中华人民共和国药典》2010版方法进行细胞活率、内毒素和革兰氏染色等检测，细胞活率大于90%，待检测结果均为阴性后收集9-13d诱导扩增后获得的DC-CIK细胞，0.9%氯化钠溶液洗涤3次后配成100ml 液体静脉回输，每天输1次，回输（5.0±0.5）×108细胞/次，连续5次为一个疗程。