红细胞比容测定实验报告
医学临床实验—血细胞比容测定
血细胞比容测定
【目的】
掌握血细胞比容的温氏测定法。
【原理】
将定量的抗凝血液灌注于温氏管中，经过一定的速度和时间离心沉淀后，观察压紧红细胞层占全血体积的比值。
【实验器材或试剂】
1 器材：温氏比积管、毛细吸管、离心机。
2 试剂：按EDTA-K223.5mg/每试管（或肝素钠0.2mg/每试管）标准，将抗凝剂分装于小试管中干燥。
【操作步骤】
1、抽取静脉血2.0ml，立即注入装有抗凝剂的抗凝管中并混匀。
2、用细长毛细滴管吸取混匀的抗凝血，插入温氏比积管底部，然后将血液缓慢注入至10cm 刻度处，避免产生气泡。
3、将加好血液的比积管置于水平离心机，以3000r/min的速度离心30min，读取压实红细胞层柱高的毫米数，然后再以同样速度离心10min至红细胞层高度不再下降为止。
【结果计算】
血细胞比容＝红细胞层柱高的毫米数×0.01
【注意事项】
1、所用器材必须清洁干燥，以防溶血，如遇溶血现象应加以注明。
2、不能使用影响红细胞体积的抗凝剂。
3、离心速度和时间要规范化，否则血细胞比容的误差很大。
【临床意义】
1、参考范围：男性：0.40~0.50
女性：0.37~0.48
2、增高或降低
A、血细胞比容增高：见于各种原因所致的血液浓缩或红细胞绝对性增多。
临床上测定脱水病人的血细胞比容，作为计算补液量的参考。
B、血细胞比容减低：见于各类贫血。
3.1 红细胞比容的测定
[实验目的]
学习和掌握用温氏分血管测定红细胞比容的方法。
[实验原理]
将定量的抗凝血灌注于特制的、具有刻度的比容管内，定时、定速离心后,有形成分和血浆分离，上层淡黄色液体是血浆，中间一薄层白膜是白细胞和血小板（或栓细胞），下层不透明的暗红色部分为红细胞，彼此压紧而不改变细胞的正常形态。
根据红细胞柱及全血高度，可计算出红细胞在全血中的容积比值，即为红细胞比容（压积）。
[主要仪器与器械]
温氏分血管，普通离心机，长针头，干棉球等。
[实验方法与步骤]
1.取血
2.离心
3000r·min-1，30min。
3.读数
注意事项
☐选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。
本实验采用柠檬酸钠抗凝。
☐血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。
☐温氏分血管内壁必须清洁干燥。
血液进入分血管内的刻度读数要精确，血柱中不得有气泡。
思考题
☐在哪些情况下，红细胞的比容明显增加？
☐测定红细胞比容时，常出现的误差来源是什么？☐测定红细胞比容的实际意义是什么？。
实验九 红细胞比容的测定
1）液体透明红色，不分层： 完全溶血（最大渗透抵抗力或最小渗透脆性）
2）上层透明红色，下层浑浊红色： 部分溶血（最小渗透抵抗力或最大渗透脆性）
3）上层无色，下层浑浊红色： 无红细胞溶解
结果：
0.42～0.46 ％ NaCl 溶液：部分溶血 0.32％～0.34％ 细胞沉降率测定 （示教）
记录血凝时间
观察项目
（1）正常 （2）少许棉花放入试管底部 （3）用石蜡油润滑整个试管内表面 （4）放在水浴槽中 （5）竹签搅拌血液（烧杯） （6）加肝素8单位 （7）放草酸钾 1～2ml
(8) 放组织液 0.1ml
实验报告： 目的，结果，讨论，结论
放血入肝素抗凝烧杯内 3）吸取10ml抗凝血入离心管，以3000rmp离心
30min 4）读数，计算红细胞比容（％）
结果：
男：40～50％ 女：37～48％
实验十 红细胞渗透脆性（示教）
目的：学习测定红细胞渗透脆性 步骤：
1）配置各种低渗盐溶液（0.7％～0.25％ NaCl） 2）每试管内加抗凝血1滴，与盐溶液充分混合 3）室温下放置1h，观察试管内液体分层
目的： 用惠氏法测定红细胞沉降率 步骤：
1）取抗凝血至惠氏沉降管0刻度，擦拭外面血迹 2） 将沉降管固定在固定架上 3） 1h 末读取红细胞下沉的毫米数
结果：男性 0~15 mm/h; 女性 0～20 mm/h
实验十五 血液凝固
目的：了解血液凝固的基本过程及
加速或延缓血凝的因素
步骤：
1） 家兔以乌拉坦（1g/kg，i.v.）麻醉、背位固定 2） 颈总动脉插管（近心端用动脉夹夹住） 3） 试管或烧杯内放血 2 ml 左右, 每30秒观察一次，
实验9 红细胞比容测定 （示教） 实验10 红细胞渗透脆性 （示教） 实验11 红细胞沉降率测定（示教） 实验15 血液凝固
红细胞比容血红蛋白测定
• 血液与抗ห้องสมุดไป่ตู้剂混合、注血时应避免动作剧 烈引起红细胞破裂。
• 温氏分血管内壁要充分干燥。血液进入毛 细管内的刻度读数要精确，血柱中不得有 气泡。
二、血红蛋白的测定
• 目的 掌握用比色法测定动物的血红蛋白的含量。
• 原理 血红蛋白的颜色常与氧的结合量多少有关。 但当用一定的氧化剂将其氧化时，可使其转变为 稳定、棕色的高铁血红蛋白，而且颜色与血红蛋 白（或高铁血红蛋白）的浓度成正比。可与标准 色进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每升血液 中含血红蛋白克数（g·L-1）。
离心后血液分层
layer after blood centrifugated
方法与步骤
改进的温氏分血管比容法 • 采血（加入抗凝剂肝素钠，抗凝血） • 用移液器取1 ml抗凝血，放入EP管中。 • 离心：将分血管以3000 r/min离心30 min，
取出分血管，读取红细胞柱的高度。
[注意事项] • 选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、
具体测定方法如下：
①用滴管加5～6滴，0.1 mol·L-1 HCl到刻度 管内,(约加到管下方刻度”2”或多或10%处)。
②用微量采血管吸血至20μl，仔细揩去吸管外 的血液。
③将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部， 再吸上清液洗吸管3次。操作时勿产生气泡,以 免影响比色。用细玻棒轻轻搅动，使血液与盐 酸充分混合，静置10 min，使管内的盐酸和血 红蛋白完全作用，形成棕色的高铁血红蛋白。
方法与步骤
沙里氏血红蛋白计测定 • 沙里氏比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成棕色的高铁
血红蛋白，然后和标准比色板进行比色。 • 沙里血红蛋白计 主要具有标准褐色玻璃比色箱和1只方
血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定
血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定实验一：血液的组成和红细胞比容的测定一、实验目的：1.了解血液的组成和各组成部分的功能。
2.掌握红细胞比容的测定方法及其临床意义。
二、实验原理：血液是由血浆和血细胞组成的混合物，其中血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
红细胞在血液中占有较大比例，其主要功能是运输氧气和二氧化碳。
红细胞比容是指红细胞在血液中所占的容积百分比，是反映血液中红细胞数量及血液浓度的指标之一。
三、实验步骤：1.准备实验材料：5ml移液管、10ml离心管、离心机、电子天平、称量纸、记号笔、标签纸、移液器、生理盐水、抗凝剂。
2.取5ml全血样本，用移液管准确加入10ml生理盐水中，摇匀制成混合液。
3.用电子天平称量混合液的总重量，并记录。
4.将混合液转移至离心管中，加入抗凝剂，标记好标签，放入离心机中，以3000r/min的速度离心5分钟。
5.离心结束后，将离心管取出，用移液器将上层血浆移出，称量剩余的血细胞及血浆重量，并记录。
6.根据公式计算红细胞比容：红细胞比容=血细胞重量/（血细胞重量+血浆重量）×100%。
四、实验结果：1.混合液的总重量为（）g。
2.离心后的血细胞及血浆重量为（）g。
3.根据公式计算得到红细胞比容为（）%。
五、实验总结：通过本实验，我们了解了血液的组成和各组成部分的功能，掌握了红细胞比容的测定方法及其临床意义。
通过观察和测量全血样本中的红细胞比容，可以反映血液中红细胞的相对数量及血液的浓度，对于了解患者的血液循环状态、指导临床治疗具有一定的参考价值。
此外，实验过程中需要注意操作的规范性和准确性，以保证实验结果的可靠性。
例如，在称量血细胞及血浆重量时，需确保样品已经完全转移至称量纸上，避免误差的产生。
同时，在计算红细胞比容时，还需注意单位的换算和公式的正确使用。
六、注意事项：1.实验前需对实验材料进行充分的准备和检查，确保实验所需的试剂、仪器等均符合要求。
血液的组成和红细胞比容的测定
血液的组成和红细胞比容的测定[实验目的]：1、了解血液的组成，区别血浆、血清、血细胞及纤维蛋白。
2、测定红细胞比容。
[实验对象]：家兔[实验用品]：兔手术器械、动脉插管、试管、小烧杯、离心机、抗凝剂（肝素钠等）。
[方法与步骤]：1.兔颈动脉采血，徐徐注入试管A、B、C、D （肝素处理），F（未经肝素处理），封口膜封闭试管口,3000r/min离心30min。
取出，读取前4支试管血细胞柱刻度及全血刻度；再次离心5min,若血细胞柱刻度不变，取前4支试管血细胞压积的平均值，即为此家兔的血细胞压积值。
血细胞压积=血细胞柱刻度/全血刻度2.观察A、B、C、D、F试管中血液，分析其不同。
[实验结果]：1． A、B、C、D试管上层为血浆，下层为红细胞，中间一白色薄层为白细胞和血小板；而试管F中，上层为血清。
2．家兔血细胞比容测定：编号血细胞柱长度(cm) 全血柱长度(cm) 红细胞比容(%)ABCD此家兔红细胞比容为[分析讨论]:血液、血浆、血细胞比容血清、血浆[结论]：1、2[思考题]：1.测定红细胞比容的实际意义是什么？血液凝固及其影响因素[实验目的]：1、了解血液凝固的基本过程及加速或延缓血液凝固的因素。
2、学会兔颈部手术的基本操作。
[实验对象]：家兔[实验器材]：哺乳动物手术器械、兔手术台、动脉插管、动脉夹、气管插管、注射器、小试管8支、小烧杯2个、竹签、恒温水浴槽、冰块、棉花。
[药品]：25%乌拉坦溶液、石蜡油、肝素、草酸钾、肺组织浸液。
[实验步骤]：1．麻醉与固定仰卧位固定在兔台上，用１%普鲁卡因溶液局部麻醉。
2．手术颈动脉插管3. 观察项目(1) 观察加速或延缓血液凝固的因素，比较内源性凝血和外源性凝血将8支试管准备好（1，对照管；2，放棉花少许；3，蜡油润滑内表面；4，置于37℃水浴槽中；5，置于冰水浴槽中；6，加肝素8单位；7，加草酸钾1~2mg；8，加肺浸液1ml），打开动脉夹，每管加入血液2ml，即刻开始计时（6,7,8号试管加入血液后轻轻摇匀，使血液与试剂充分混合），每隔15s，将试管倾斜一次，至血液不再流动为止。
开放性实验血细胞比容测定（温氏法）（多媒体）
开放性实验血细胞比容测定（温氏法）（多媒体）【要求】了解血细胞比容测定的原理及方法，掌握血细胞比容参考值及其临床意义。
【原理】抗凝全血经离心沉淀后，可测出下沉的血细胞在全血中所占体积的百分比，即血细胞比容。
【试剂】EDTA-K2或双草酸盐抗凝剂。
1.5ml注射器、试管。
2.毛细滴管长约12cm，口径不大于2mm。
3.温氏（Wintrobe）管上以1mm为间隔，刻有0～100mm的刻度（图1-5）。
【操作】1.试管内加入抗凝剂，每管内加EDTA-K2或双草酸盐溶液0.5ml，烤干备用。
2.静脉采血2ml，立即注入抗凝管中，混匀。
3.用细长的毛细滴管取摇匀的抗凝血，从温氏管底部徐徐注入血液，随血液平面上升而渐渐向上抽提毛细滴管，直到血液至“100”刻度处，切勿产生气泡。
4.将注入血液的温氏管置水平离心机中，以相对离心力2264g（即有效半径22.5cm），即300rpm速度离心30min，读取红细胞层高度，然后再离心10min至红细胞不再下降为止，离心后血液分为5层，从上至下依次是：血浆层；白色乳糜层（主要为血小板）；灰红色层（主要为白细胞和有核细胞）；暗红色层（主要为被血细胞代谢还原的还原血红蛋白）；鲜红色层（为含习红细胞）。
5.读取以暗红色红细胞层为准的红细胞柱高的毫米数，乘以0.01报告（或以百分比报告）。
【注意事项】1.所有器材必须清洁干燥，以防溶血。
2.抗凝剂与血液要充分混合，防止部分血液发生凝固，出现小凝块。
3.离心力大小直接影响结果，本试验一定要在达2264g的条件下进行离心。
4.采血后应尽快试验，最好不超过3h。
【参考值】男性 0.42～0.49(42%～49%)女性 0.37～0.48(37%～48%)【临床意义】1.血细胞比容减少见于各种贫血。
2.血细胞比容增多见于，①呼种原因所致的血液浓缩，如大量呕吐、腹泻、失水、大面积烧伤等；②真性红细胞增多症有时血细胞比容可高达0.80左右；③继发性红细胞增多症，如新生儿、高原居民及慢性心肺疾患。
诊断学实验报告
实验诊断学实验报告红细胞计数试验实验目的：通过红细胞计数实验1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。
2、掌握血细胞计数板的结构试验器材：血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、生理盐水实验原理：一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下计数一定容积内的细胞，再换算成每升标本的细胞数报告。
操作步骤： 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。
2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。
6、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域：中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。
计数原则：数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算：红细胞数/l=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106 或红细胞数/l=5个中方格内红细胞数÷100×1012 式中×5 5个中方格换算成1个大方格×10 1个大方格容积为0.1ul，换算成1.0 ul。
×201 血液的稀释倍数×106 由u1换算成l数据处理： rbc: ×l0/l12参考值男:(4～5.5)×10/l 12 女：（3.5～5）×10/l12 新生儿：（6～7）×10/l 12 答案不唯一，言之有理即可注意事项： 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝块应重新采血。
2充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。
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红细胞比容测定实验报告
实验目的：
1.了解红细胞比容的概念和意义；
2.掌握红细胞比容测定的方法和技巧；
3.分析不同因素对红细胞比容的影响。
实验原理：
1.取一定量的血液样本，加入抗凝剂进行抗凝处理；
2.用离心机进行离心，使血液离心沉积，红细胞沉积到底部形成红细胞柱；
3.读取红细胞柱的体积，即为红细胞比容。
实验仪器和试剂：
1.离心机；
2.采血器；
3.抗凝剂（例如EDTA）；
4.离心管；
5.读数尺。
实验步骤：
1.用采血器采集一定量的患者血液样本；
2.加入适量的抗凝剂进行抗凝处理；
3.将抗凝后的血液样本转移到离心管中；
4.将离心管放入离心机中，进行高速离心；
5.离心结束后，取出离心管，观察离心后血液的形态变化；
6.用读数尺读取红细胞柱的高度，即为红细胞比容。
实验结果和数据处理：
通过实验测得的红细胞比容数值可以用来判断机体的贫血程度。
正常
人的红细胞比容数值一般在37%~54%之间，如果低于37%，则表明机体存
在贫血。
实验探究：
在实验中，还可以通过改变不同因素来观察对红细胞比容的影响。
例如，可以观察不同抗凝剂对红细胞比容的影响，不同离心速度对红细胞比
容的影响等。
通过这些观察和比较，可以得出一些关于红细胞比容的规律。
实验总结：
红细胞比容测定是一种简单而常用的实验方法，可以用来评估机体的
贫血程度。
通过实验，我们不仅了解了红细胞比容的概念和意义，还掌握
了测定红细胞比容的方法和技巧。
同时，通过观察和比较不同因素对红细
胞比容的影响，我们也对红细胞比容这一指标有了更深入的了解。