药敏试验方法1
药敏试验实验报告

药敏试验实验报告药敏试验实验报告一、实验目的了解不同药物对细菌的敏感性,为临床选择合适的药物提供参考依据。
二、实验材料及方法1. 实验材料:试验细菌、各种抗生素药品、琼脂培养基、平板培养基、培养皿、试管等。
2. 实验方法:(1) 细菌培养:取一根无菌的接种棒,沾取细菌液悬浊液,在琼脂平板上划线接种。
(2) 药物敏感性试验:将各种抗生素药品通过滴定法或漏斗法加入琼脂平板培养基中制成不同浓度的培养基,然后滴加在含有细菌的琼脂平板上。
(3) 实验观察:观察不同抗生素对细菌的抑制情况,通过测定菌落直径,判断细菌对该药物的敏感性。
三、实验结果及分析根据实验结果,我们发现不同细菌对不同抗生素药物表现出不同的敏感性。
对于某些细菌,某种抗生素可能具有很好的抑制效果,而对于另一些细菌则无效。
这表明细菌的敏感性是多种因素相互作用的结果。
四、实验总结通过本次药敏试验,我们获得了一些细菌对不同抗生素药物的敏感性信息。
在临床应用中,我们可以根据该信息选择合适的抗生素进行治疗,提高治疗效果。
实验中发现不同细菌对不同抗生素的敏感性差异很大,这与细菌的生物特性、遗传变异、环境因素等有关。
因此,在临床应用中,我们应该充分了解细菌的敏感性情况,并结合患者的具体情况,选择适合的抗生素进行治疗。
需要注意的是,药敏试验结果只是一种参考,我们不能单纯地根据结果选择抗生素。
在实际应用中,我们还需要综合考虑患者的病情、用药历史、并发症等因素,综合评估选择合适的抗生素方案。
继续深入研究细菌对抗生素的敏感性是必要的,只有通过进一步的研究,我们才能更好地了解细菌的抗药性机制,指导合理使用抗生素,避免抗生素滥用导致的抗药性问题。
五、参考文献1. XXX,XXX,XXX. 药敏试验在临床中的应用和意义[J]. 中国抗生素杂志,2020,35(4).2. XXX,XXX,XXX. 不同细菌对抗生素的敏感性研究进展[J]. 临床药学杂志,2019,15(2).。
药物敏感试验判断标准 mic

药物敏感试验判断标准 mic药物敏感性试验判断标准Mic是药物敏感性试验中常用的标准之一。
它代表着最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration),即能抑制菌株生长的最低浓度。
药物敏感性试验是评估细菌、真菌或其他微生物对某种抗生素或抗真菌药物的敏感性的常用方法之一,用于指导临床上的抗感染治疗。
本文将详细介绍Mic的定义、测定方法以及其在药物治疗中的意义。
一、Mic的定义Mic是指药物在试验条件下能够抑制细菌生长的最低浓度。
在药物敏感性试验中,通常使用微量稀释法来测定Mic。
微量稀释法是一种常用的半定量方法,通过逐渐稀释药物溶液来确定能够抑制菌株生长的最小药物浓度。
Mic的值越小,意味着细菌对药物的敏感性越高。
二、Mic的测定方法1. 罗氏法(Broth dilution method):将不同浓度的药物加入含有培养基的试管中,接种细菌,培养一定时间后观察细菌生长情况。
通过观察菌落的形成与否来确定Mic。
2. 珠光法(E-test):将含有药物梯度的试纸片放置在含有细菌的琼脂平板上,培养一定时间后观察试纸片上的菌落生长与否。
根据试纸片上药物浓度梯度的一侧出现菌落的最后一个点,结合标尺上的数值,确定Mic。
3. 剂量杯法(Cup method):将不同浓度的药物加入含有琼脂基质的杯中,接种细菌,培养一定时间后观察细菌生长情况。
通过观察药物浓度对细菌生长的抑制效果来确定Mic。
以上三种Mic测定方法各有优缺点,临床上根据具体情况选择合适的方法进行药物敏感性试验。
三、Mic的临床意义Mic值是临床上选择合适药物进行治疗的重要指标之一。
根据Mic值的不同,通常将药物分为以下几个分类:1. 敏感:当Mic值较低时,说明细菌对药物敏感,拟合适的治疗药物。
2. 中介:当Mic值介于敏感和耐药之间时,表示细菌对药物的敏感性较差,治疗时需慎重考虑。
3. 耐药:当Mic值较高时,说明细菌对药物耐药,该药物对细菌已失去或极低的抑菌作用,应避免使用。
35药敏试验(1)

35药敏试验:K-B法(1)1,M-H琼脂平板厚度:正常应为4mm,当它太厚时,会引起假性耐药,抑菌圈变小。
当它太薄时,出现假性敏感,圈变大。
直径90 mm平板可注入25—30 ml的M—H肉汤,制造好后于4度可保存一周。
2,M-H琼脂平板的PH值:正常应为7.2—7.4,当PH升高时,使青霉素、四环素类的抑菌圈变小,大环内脂类的抑菌圈变大。
当PH降低时,使青霉素、四环素类的抑菌圈变大,氨基糖苷类和大环内脂类的抑菌圈变小。
3,M-H琼脂平板中有胸腺密啶或核苷类物质,当它们的含量增多时,抑菌圈变大。
4,M-H琼脂平板中有钙、镁离子,当它们的含量过高时,引起抑菌圈变小。
当它们的含量过低时,引起抑菌圈变大。
5,纸片含药量:饱和法应为20微克,半饱和法应为10微克。
含药量大则抑菌圈小。
纸片的含药量与纸片的重量、吸水性、直径有关。
纸片的含药量应是每一张都相同。
纸片的PH值应为中性。
纸片的厚度应为1厘米,过厚则抑菌圈变小,过薄则抑菌圈变大。
纸片的直径应为6—6.35 mm,过大引起药物浓度变小,故则抑菌圈变小。
过小,则抑菌圈变大。
纸片于零下20度保存,使用时应室温平衡10分钟以上再打开,注意防潮。
纸片保存不当,引直药量损失,可引起能生长的菌增多,故出现抑菌圈变大。
6,标准菌液的浓度:应为0.5个麦氏浊管,相当于1.5*108CFU/ml,当过浓时,引起抑菌圈变小。
过稀时,抑菌圈变大。
7,加菌液后,应在15分钟内加药片,不能超过15分钟,否则引起抑菌圈变小。
因细菌已过多的渗透入琼脂中。
8,贴纸片时:纸片间的间距应不小于24 mm,距平板边缘应不小于15 mm。
90mm的平板,要加5片:可防不同药物的相互干扰,防抑菌圈边缘交叉,保持纸片周围浓度相对恒定。
加了一个纸片后,应高温灼烧镊子,再冷却后取下一个纸片。
药敏试验

判定标准
清晰无细菌生长的试管对应的药物浓度为该药
的MIC;
以MIC前2支试管液体涂培养基
培养 菌落少于5个的试管对应的药物浓度为该 药的MBC。
试 材
试管、移液管、营养琼脂和营养肉汤
方 法
(1)制备药液、菌液、培养基; (2)向第1支试管中加入0.9mL营养肉汤、其 余各试管中加入0.5mL; (3)向第1支试管中加0.1mL药液 取0.5mL 加到第2支试管中……至13支试管,取0.5mL涂 平板 向1-14试管中各加0.5mL菌液 培养。
耐药:直径<10mm液、牛津杯、钢管放置器、陶瓦盖 步 骤 (1)制备菌液:106-7 (2)制备药液:1280μg/mL (3)制备培养基 (4)涂菌液 (5)放置牛津杯 (6)加菌液 (7)盖陶瓦盖 (8)培养 (9)量直径
三、液体试管二倍稀释法
药敏实验
一、药敏纸片法
试 材
培养皿、培养基、菌种(病料)、药敏片、 培养箱
方 法
(1)制备药敏片 (2)制备培养基:营养琼脂、营养肉汤 (3)涂菌:菌液105 CFU (4)贴药敏片 (5)培养:37℃ 24小时 (6)量直径:
判定标准
敏感:直径>15mm
中度敏感: 10~15mm
支原体药敏试验操作方法

支原体药敏试验操作方法
支原体药敏试验是对支原体细菌进行敏感性测试,以确定它们对不同抗生素的敏感程度。
操作方法如下:
1. 支原体细菌的筛选:首先选择纯化的支原体细菌株,应当检查其纯度和生长状态。
2. 制备试验用平板:使用Mycoplasma agar制备支原体药敏试验的平板,其中包含需要测试的抗生素。
将平板温度调节在35~37之间。
3. 制备菌液:从培养基中收集支原体细菌并转入到PBS缓冲溶液中,用垫头过滤以去除未破裂的细胞。
4. 稀释菌液:将菌液根据需要的浓度逐渐稀释,通常为10^5~10^6 CFU /ml,以便于试验处理。
5. 接种平板:将菌液滴入含有抗生素的药敏试验平板中,用琼脂种培养。
6. 培养:将培养皿放入条件恰当的恒温孵化箱或培养箱中,恒温为35~37,将培养皿培养约3~5天。
7. 判断:在生长完全的区域观察菌落数量、生长状态等信息,根据指南判断其
敏感性和耐药性。
8. 结论:根据支原体所产生的菌落数量和生长状态,分析支原体对药物的敏感性或耐药性。
注意事项:
1. 操作过程中应保证操作环境的无菌性。
2. 需要严格按照试剂及培养基的说明书进行操作。
3. 在菌液制备及接种过程中要严格注意细菌的数量及浓度。
4. 抗生素在试验过程中的使用必须符合相关法律法规。
药敏试验操作方法

药敏试验根据美国临床标准委员会 ( NCCLS )推荐的 K-B 琼脂法进行,药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片,试验所选择药物必须包括下列抗生素:氨苄西林 ( AMP ),阿莫西林/克拉维酸 ( AMC ),头孢噻吩 ( CFT ),头孢噻肟 ( CTX ),庆大霉素 ( GEN ),萘啶酸( NAL ),诺氟沙星( NOR),四环素( TBT),利福平 ( RFA),复方新喏明( SMZ )。
(1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板,37℃培养 16~18小时,然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落,悬于 3ml 生理盐水中,混匀后与菌液比浊管比浊。
以有黑字的白纸为背景,调整浊度与比浊管( 0.5麦氏单位)相同。
(2)用无菌棉拭子蘸取菌液,在管壁上挤压去掉多余菌液。
用棉拭子涂布整个 M-H 培养基表面,反复几次,每次将平板旋转 60度,最后沿周边绕两圈,保证涂均匀。
(3)待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。
用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面,纸片一贴就不可再拿起。
每个平板贴5张纸片,每张纸片间距不少于24mm ,纸片中心距平皿边缘不少于15mm。
在菌接种后15分钟内贴完纸片。
(4)将平板反转,孵育18~24小时后取出,用游标卡尺测量抑菌圈直径,从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录(附表 5 )。
抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。
有的菌株可出现蔓延生长,进入抑菌环,磺胺药在抑菌环内出现轻微生长,这些都不作为抑菌环的边缘。
结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。
(1)制备 MH 琼脂平板应用直径 90mm 平皿,在水平的实验台上倾注。
琼脂厚为4±0.5mm(约 25-30ml 培养基),琼脂凝固后塑料包装放4℃保存,在 5日内用完,使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。
倾注平皿前应用 pH 计测 pH 值是否正确(pH 应为7.3)。
pH 过低会导致氨基糖苷类,大环内酯类失效,而青霉素活力增强。
第4章抗菌药物敏感试验

第4章抗菌药物敏感试验一、需氧菌和兼性厌氧菌的体外抗菌药物敏感试验1.扩散法(K-B法)(1)原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在接种有待检菌的琼脂平板上,该点称为抗菌药源。
药物向周围扩散,形成了随着药源距离增加,琼脂中药物浓度递减的浓度梯度。
在药源周围可抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制,形成无菌生长的透明圈即抑菌圈,其大小可以反映待检菌对测定药物的敏感性,并与该药对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
(2)实验材料①培养基:采用水解酪蛋白(M-H)琼脂,pH为7.2,琼脂厚度4mm。
对生长条件要求高的细菌,如链球菌属细菌需加入5%脱纤维羊血,嗜血杆菌属细菌需加入1%血红蛋白(含Ⅴ因子)和1%Ⅹ因子复合物。
②抗菌药物纸片:选用直径为6.35mm,吸水量20μl的专用药敏纸片。
制备时取灭菌药敏纸片,经加样或浸泡药物溶液后冷冻干燥,置4℃保存备用,在有效期内使用。
③接种菌液挑取平板上形态相同的菌落4~5个,接种于3~5ml M-H肉汤中,于35℃中培养2~8h。
嗜血杆菌属和链球菌属细菌需用加血肉汤培养过夜。
用生理盐水或肉汤校正菌液至0.5麦氏比浊标准(相当于1.5×109/ml的含菌量)后在15min内接种。
(3)试验方法以无菌棉拭蘸取已制备好的菌液(其浊度为0.5麦氏比浊标准),在M-H琼脂表面均匀涂布接种3次,每次平板旋转60°,最后沿平板内缘涂抹1周。
平板置室温干燥3~5min,后用无菌镊子或专用纸片分配器将含药纸片贴于琼脂表面。
纸片应贴得均匀,各纸片中心相距>24mm,纸片距平板内缘>15mm。
直径为90mm的平板可贴6张纸片。
纸片贴牢后应避免再移动。
平板室温放置15min后倒置于35℃培养箱中培养16~18h后读取结果。
(4)结果解释平板置黑色背景上,从背面量取包括纸片直径在内的抑菌圈直径,单位为mm。
培养基中如果加有血液须打开皿盖从正面测量抑圈菌。
医学检验药敏实验报告

一、实验名称药敏试验二、实验目的1. 了解本次实验所选细菌对多种抗生素的敏感性。
2. 为临床合理用药提供依据。
三、实验原理药敏试验是指在体外条件下,测定抗生素对细菌的抑制作用,以判断细菌对某一种或几种抗生素的敏感性。
实验原理主要基于抗生素对细菌生长的抑制作用,通过观察细菌生长情况,确定抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。
四、实验材料1. 细菌菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素:氨苄西林、头孢噻肟、阿莫西林、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星等。
3. 琼脂平板、无菌棉签、移液器、酒精灯、培养箱等。
五、实验方法1. 将细菌菌种接种于琼脂平板上,培养至适宜生长。
2. 在琼脂平板上均匀涂布抗生素纸片,用无菌镊子轻轻压紧。
3. 将平板倒置放入培养箱,培养24小时。
4. 观察并记录细菌生长情况,确定抗生素的抑菌圈直径。
六、实验步骤1. 菌种培养:将细菌菌种接种于琼脂平板,培养24小时。
2. 药敏纸片制备:将抗生素纸片用无菌镊子取出,均匀涂布于琼脂平板上。
3. 观察与记录:将平板倒置放入培养箱,培养24小时后观察并记录抑菌圈直径。
七、实验结果1. 大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感。
2. 金黄色葡萄球菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为耐药。
3. 肺炎克雷伯菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感。
八、讨论与分析1. 本次实验结果显示,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌对多种抗生素的敏感性存在差异。
2. 大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感,提示这些抗生素可以作为治疗大肠杆菌感染的首选药物。
3. 金黄色葡萄球菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为耐药,提示金黄色葡萄球菌感染需选用其他抗生素。
4. 肺炎克雷伯菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感,提示这些抗生素可以作为治疗肺炎克雷伯菌感染的首选药物。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
药敏试验方法:K-B法:1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上(血平板),挑出单个菌落,直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。
2 在15分钟内,用无菌棉拭子蘸取调好的菌液,在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次,以从中挤出过多的菌液。
3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种,再重复操作两次,每次将平板转动60度,每次接种都应保证接种物均匀分布,最后用棉拭子涂抹平板的边缘。
4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。
每个纸片都应压一下,以保证与平板表面完全接触。
每个纸片中心间距24mm。
纸片一旦与平板接触,不应再移动。
5 贴完纸片后,应在15分钟内放入35度孵箱。
嗜血杆菌属,链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。
6 孵育24小时以后,测量各药敏纸片抑菌圈直径,与NCCLS手册比较,作出结果判断。
说明:细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准,所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作,否则将失去意义。
链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法.肺炎链球菌胶乳凝集测定法1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。
2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidexpneumo-kit)于室温。
3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂,在另外一滴上滴加R2试剂,用搅拌棒混匀。
4 轻轻晃动玻片2分钟,观察结果。
5 2分钟内,如R1出现凝集为阳性;如R1和R2均未出现凝集为阴性。
注:R3为阳性对照。
药敏纸片的选择1、革兰阴性杆菌(肠杆菌科)头孢噻肟(CTX)头孢唑林(CZ)头孢他定(CAZ)氨苄西林(AM)哌拉西林(PIP)阿米卡星(AN)头孢噻吩(CF)环丙沙星(CIP)头孢呋辛(CXM)庆大霉素(GM)头孢噻肟/棒酸(CTX/CA)头孢他定/克拉维酸(CAZ/CA)羧苄青霉素(CB)奥格门丁(AMX/CA)哌拉西林/三唑巴坦(PIP/TZ)亚安培南头孢匹肟(FEP)头孢克罗(CEC)2、铜绿假单孢菌/不动杆菌妥布霉素(TM)阿米卡星(AN)安曲南(AZT)头孢哌酮(CFP)哌拉西林(PIP)头孢匹肟头孢噻肟(CTX)环丙沙星(CIP)头孢他定(CAZ)左旋氧氟沙星(OFL)亚安培南哌拉西林/三唑巴坦3、金黄色葡萄球菌苯唑西林(OX)青霉素G(P)头孢唑林(CZ)阿米卡星(AN)红霉素(E)头孢噻肟(CTX)环丙沙星(CIP)万古霉素奥格门丁(AMX/CA)哌拉西林/三唑巴坦头孢噻吩(CF)4 、肠球菌氨苄西林(AM)万古霉素环丙沙星(CIP)庆大霉素(GM)红霉素(E)氧氟沙星(OFL)5、除肺炎链球菌外链球菌氨苄西林(AM)头孢噻肟(CTX)万古霉素红霉素(E)氧氟沙星(OFL)克林霉素(CM)肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测MH培养基上贴头孢他定,头孢他定/克拉维酸,头孢噻肟/棒酸,安曲南。
如头孢他定的抑菌圈<22mm,安曲南<27mm,头孢噻肟<27mm,意味可能有ESBLS产生。
如头孢他定/克拉维酸与头孢他定,头孢噻肟/棒酸与头孢噻肟的差值≥5mm,则确证ESBLS产生。
耐药机制。
一代头孢对普通变形杆菌、枸橼酸杆菌、肠球菌、假单孢菌属、沙雷氏菌属、拟杆菌属无效。
第二代头孢对假单孢菌属、不动杆菌属、沙雷氏菌属、肠球菌无效;肠球菌对头孢类天然耐药。
氨基糖甙类抗生素阿米卡星与庆大霉素不完全交叉耐药。
红霉素类、四环素类等抗生素内部有相互交叉耐药。
金黄色葡萄球菌耐万古霉素、无乳链球菌耐青霉素和氨苄青霉素、无乳链球菌和D群链球菌耐万古霉素和替拉考宁为不可能的表型。
洋葱伯克霍德菌对氨基糖甙类、亚安培南天然耐药。
除表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌外,替拉考宁耐药的凝固酶阴性的葡萄球菌不常见。
金黄色葡萄球菌对复方新诺明耐药为罕见表型。
氨苄青霉素对非发酵类不宜应用。
对于葡萄球菌,苯唑西林耐药,青霉素敏感是不可能的。
NCCLS关于细菌药敏实验的说明总评论:1、头孢噻吩可以代表头孢噻吩、头孢匹林、头孢拉定、头孢氨苄、头孢克洛、和头孢羟氨苄。
但是,头孢唑林、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢丙烯应单独测试,因为某些对这些药物敏感的菌株对头孢噻吩是耐药的。
2、利福平不能单独用于化疗。
肠杆菌科1对于沙门菌属和志贺菌属只有氨苄西林、喹诺酮、和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑可用于常规试验与报告。
初此之外,对于沙门菌属和志贺菌属的肠道外分离株,应测试并报告氯霉素和一种三代头孢菌素。
2、克雷伯菌属和大肠艾希菌的产ESBLS株对青霉素、头孢菌素类或安曲南临床治疗可显耐药性,尽管在体外药敏试验对其中某些抗生素敏感。
对于所有产ESBLs株,应报告为耐所有青霉素类、头孢菌素及安曲南。
3、随着3代头孢菌素的治疗,肠杆菌属、枸橼酸菌属和沙雷菌属可发展其耐药性。
最易敏感的菌株在开始治疗3-4天就可变为耐药,因此要反复测试这些菌株。
葡萄球菌1、青霉素敏感的葡萄球菌对FDA批准的用于葡萄球菌感染的其他青霉素类、头孢菌素和碳青烯类也是敏感的。
青霉素耐药而苯唑西林敏感的菌株对β-内酰胺酶不稳定的青霉素是耐药的,但对其他β-内酰胺酶稳定的青霉素、β-内酰胺酶抑制剂复合药、相关的头孢类和卡巴陪南是敏感的。
苯唑西林耐药的葡萄球菌对现在可用的所有β-内酰胺类抗生素是耐药的。
因此仅测试青霉素和苯唑西林就可以推知一大批β-内酰胺类抗生素的敏感性与耐药性,不必常规测试其他青霉素类、β-内酰胺类抑制剂复合药、头孢类和卡巴陪南类。
2、绝大多数的MRS对多种抗生素耐药。
包括β-内酰胺类、氨基糖甙类、大环内酯类、克林霉素和四环素。
观察到多重耐药应该是对甲氧西林可能耐药的线索。
3、长期应用喹诺酮类治疗的过程中葡萄球菌可发展其耐药性,因此应重复测试耐药性。
肠球菌1、对于肠球菌属,头孢菌素、氨基糖甙类(除了筛选高水平耐药性)、克林霉素和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑在体外可能有活性,但临床无效,因此不能报告细菌对这些药物敏感。
2、青霉素敏感性可以用于不产β-内酰胺酶的肠球菌对氨苄西林、阿莫西林、酰基氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林以及哌拉西林/三唑巴坦的敏感性3、氨苄西林是氨苄西林和阿莫西林类的代表药。
氨苄西林的结果可用来判断不产β-内酰胺酶的肠球菌对阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦的敏感性。
4、青霉素的结果可预测不产β-内酰胺酶的肠球菌对氨苄西林、阿莫西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦的敏感性。
5、对于血和脑脊液分离株需用头孢硝噻吩β-内酰胺酶试验,阳性提示对青霉素耐药,同时对酰胺基、羧基和脲基青霉素耐药。
细菌鉴别要点1、革兰阳性球菌所有革兰阳性球菌第一步为触酶试验。
通常触酶阳性为葡萄球菌和微球菌,阴性为链球菌科。
但不排除例外,气球菌为弱阳性。
粪肠球菌偶有阳性。
操作触酶试验应尽量避免用铂金取菌环(针)在H2O2 上涂菌,而应先涂菌,在滴H2O2,步骤不能颠倒。
因为铂金可以和H2O2产生假阳性反应。
H2O2必须新鲜,若放置过久或暴露于光线下容易分解,必须保存于4℃冰箱。
实验所用菌须大量,不可挑到琼脂,会产生假阳性。
对触酶阳性的革兰阳性球菌,应继续做玻片法血浆凝固酶试验,此为检出葡萄球菌,如阳性一般为金黄色葡萄球菌;如阴性应做试管法凝固酶实验确证,玻片法仅为筛选实验。
血浆凝固酶实验用血浆须用兔或猪血浆,新鲜血浆不稳定,可能发生自我凝集或形成颗粒产生浑浊或产生沉淀而导致判度错误;不可使用人血浆,其含有抑制物质回干扰实验结果。
触酶阴性为链球菌科,根据菌落溶血进行下一步鉴定。
а溶血:草绿色链球菌;肺炎链球菌;肠球菌в溶血:A群链球菌;B群链球菌,部分D群链球菌肠球菌也有不溶血菌落,不能根据溶血判断肠球菌。
链球菌主要实验:胆汁七叶苷,七叶苷,菊糖,CAMP ,杆菌肽,高盐,奥朴托辛,胆盐溶解。
肠球菌为致病菌,且肠球菌与非肠球菌耐药机制不同,应进行鉴别,肠球菌分为粪肠球菌和屎肠球菌;非肠球菌分为牛链球菌和马链球菌。
肠球菌对青霉素耐药,非肠球菌对青霉素敏感。
肠球菌的药敏注意高耐氨基糖甙的细菌,如高耐氨基糖甙则意味氨基糖甙与в内酰胺类药物合用无协同作用。
肺炎链球菌与草绿色链球菌鉴别:肺炎链球菌奥朴托辛、菊糖、胆盐溶解实验皆为阳性。
但这3个实验都非特异,需联合应用方为最佳。
肺炎链球菌的青霉素药敏实验应注意,当青霉素(K-B法)的抑菌圈直径大于或等于19mm时为敏感,当小于19mm时不能确定是否中敏或耐药,应做MIC稀释确证。
2、革兰阴性杆菌包括肠杆菌科、非发酵菌和弧菌科。
第一步实验为氧化酶实验。
氧化酶阴性为肠杆菌科;阳性为非发酵菌和弧菌科。
肠杆菌科包括大肠杆菌、变形杆菌、普罗菲登斯菌及摩根菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属。
非发酵菌包括铜绿假单孢菌、黄单孢菌、不动杆菌等。
氧化酶实验注意事项:①需用铜绿假单孢菌做阳性对照。
②60秒内判读结果有效,而以10秒内最佳。
③不要用含微量铁的取菌环或针,可用棉棒替代。
革兰阴性杆菌的鉴定以API系列为国标,其他生化管仅为常规鉴定。