铁皮石斛试管种苗产业化生产的技术因素分析
铁皮石斛繁育、种植、中药制剂开发高新技术产业化项目建设投资可行性研究报告

目录第一章总论 ................................................................................................ 错误!未定义书签。
第一节企业概况.................................................................................... 错误!未定义书签。
第二节项目概况.................................................................................... 错误!未定义书签。
第三节可行性研究报告编制的依据和范围........................................ 错误!未定义书签。
第四节可行性研究的主要结论与建议................................................ 错误!未定义书签。
第二章项目所在地概况及建设条件 ........................................................ 错误!未定义书签。
第一节项目所在地概况........................................................................ 错误!未定义书签。
第二节建设条件.................................................................................... 错误!未定义书签。
第三章项目背景和投资意义 .................................................................. 错误!未定义书签。
铁皮石斛组培快繁技术的研究分析

铁皮石斛组培快繁技术的研究分析摘要:铁皮石斛的种子极为细小、无胚乳,自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发,因此自然繁殖率很低,不易获得实生苗;而传统的分株、杆插等方式的繁殖率极低,加上人为的过度采挖和破坏生境,其资源已濒临灭绝,被国家列为重点保护的药用植物之一。
文章基于此,对铁皮石斛组培快繁技术进行综述性分析。
关键词:铁皮石斛;组培快繁;技术研究植物组织培养技术是20世纪初,以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术。
植物组织培养是指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养,使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。
目前,植物组织培养技术己经在科学研究以及实际生产上得到非常广泛的应用。
该技术不仅具有缩短育种年限、加快繁殖过程,改良品质,节省空间,减少劳力,并可全年进行生产,不受季节、气候等自然条件限制等特点,而且组培苗的体积不大,方便运输和资源交流。
在促进农林业现代化方面展现出了巨大的经济、社会和生态效益,被认为是一项很有潜力的高新技术。
铁皮石斛种子细如粉尘,一个果实内所含种子达100万粒之多,由于缺乏胚乳,种子需与真菌共生才能正常萌发,自然条件下萌发率非常低。
因此,虽然分布广,但生活环境狭窄,产量还不能满足目前药用需求,利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。
铁皮石斛的组织培养中有几个关键的时期:原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。
根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件,我国研究人员在铁皮石斛组培快繁技术方面的研究取得了一定的进展。
在20世纪70年代谭文澄等就进行铁皮石斛组织培养研究并获得完整植株;何静波等尝试通过种胚培养繁殖铁皮石斛;左春芳等于1985年开始研究铁皮石斛的组织培养,并取得进展。
1外植体的选择在植物组织培养中,外植体的选择是十分关键的因素,不同的取材部位和时期,培养的结果也不一样。
目前,诱导铁皮石斛原球茎采用的外植体主要有种子种子、无菌苗幼苗茎段、根尖、不定芽、幼叶,及人工种子等。
铁皮石斛组培苗工厂化生产技术关键问题探讨

理过程中 , 各 阶段 的培 养基 选 择 、 培 养 室 温 光 管 理、 污染控制 、 出 瓶 苗 炼 苗 技 术 是 影 响铁 皮 石 斛 种 苗 生 产 收 益 的 几 个 关 键 因 素 。 笔 者 在 本 所 石 斛 种 苗 生产技 术 的基 础上 , 对 铁 皮 石 斛 种 苗 工 厂 化 生 产 过 程 中 的关 键 问题 进 行 分 析 和 总结 , 报 道 如下 。
能促进种子 萌发 , 缩 短 萌 发 时 间[ 4 1 。 在 种 胚 萌 发 产
生大量的原球茎后 , 即可转入增殖培养阶段 。 在增 殖 培 养 过 程 中 , 宜 采 用 添 加 有 马铃 薯 和 香
目前 , 用 于 铁 皮 石 斛 组 织 培 养 的 外 植 体 主要 有 种子 、 原球 茎 、 幼 苗茎段等 , 其 中 以 种 子 作 为 外 植 体 在 铁 皮 石 斛
Ab s t r a c t : As a v a l u a b l e me d i c i n a l p l a n t , t h e r e i s g r e a t d e ma n d o f De n d r o h i u m o f f i c i n a l e i n t h e ma r k e t . Ho we v e r , h o w t o s o l v e t h e
南 种植 面 积 已达 到 1 3 3 8 h m , 遍及全省2 4个 县 市
。
1 培 养 基 选 择
目前 , 用 于 石 斛 组 织 培 养 的培 养 基 类 型 主要 有 N 6、 B 5、 M S ( 1 / 2 MS、 3 / 4 MS ) 等, 其 中 MS 培 养 基 在 工
铁皮石斛无土栽培技术的探讨

每两 周喷 淋一 次 叶面肥 ( 0 . 0 5~0 . 1 %K H 2 P O4。 栽培基质 栽 培基 质 是无 土栽 培 的关 键 ,铁皮 石 斛的生 物 特性 要 求 栽培基 质 既有 良好 的保 水性 又 要有 较好 的透 气性 。本实
铁皮石斛因对其生长环境条件的苛求 ,使生产发展受
试验材料为本文作者培养的铁皮石斛 ( D e n d r o b i u m
o f i c i n a l e K i mu r a e t Mi g o) 试 管 苗 :试管 苗 经复 壮 培养 获 得 完 整 植 株 后 ,移 栽 前 得 进 行 1 5 d左右 的 炼 苗 ,即将 组培完整植株瓶苗移至炼苗棚 ,使其在 自然环境中逐渐适
Mi g o) 为微子 目,兰科石斛属多年生附生草本植物 ;茎 直 立 ,圆 柱形 ,高 9 ~ 3 5 c m ,粗 2 ~4 mm ;萼 片和 花 瓣 黄 绿 色 ,近 相似 ,长 圆 状 披 针 形 :花 期 4 ~ 6月 。铁
皮 石斛 喜温 暖湿 润气 候和 半荫 半 I ; E t A 9 环 境 ,适 宜于 凉爽 、
湖南环境生物职业技术学院 谢树云 ,1 9 6 2年 8月 出生 ,湖南衡南县人 ,男 ,大学毕业 ,高级工程 师,研究方 向 :花卉栽培 。
本文以铁皮石斛 ( De n d r o b i u m o ic f i n a l e K i mu r a e t Mi g o) 试管苗 为栽培植株 :以木屑 、松树 皮、碎石 为栽培基质 ; 以喷施营养液为肥源 。 试验结果发现 :以木屑 、 松树皮 、 碎石 ( 3 : 2 : 1 ) 混合基质 为栽培基质 ,试管苗不仅成活率高 , 且茎粗 、
验栽培基质设为 :①松树皮 ;②松树皮 +碎石 ( 1 : 1 ); ③木屑 +碎石 +松树皮 ( 3 : 2 : 1 );其中松树皮碎成 3 c m 左右片段 ,碎石为 1 c a 左右的颗粒 :盆底垫一层 5 c m 左
铁皮石斛产品质量影响因素分析及发展对策

引种后铁皮石斛在生长过程中就存在一定的差异ꎬ
如引种到山东会出现休眠期加长、成活率低、产量低
等特点 [13] ꎮ 另外ꎬ同一种源移栽到不同地区 [14] 、不
同种源引种到同一地区 [15] 其化学成分组成相似ꎬ但
相对比例及含量存在显著差异ꎮ 铁皮石斛产量、品
石斛不同种质资源与其生态环境是历史适应性的选
究表明抗寒性顺序为浙江种源 > 江西种源 > 福建
式
[10]
种质资源是历史演化的沉淀ꎬ区域性进化表明铁皮
择ꎮ 刘海等
[11]
对比研究浙江、贵州、云南 3 个省份 4
个种源的组培苗及移栽苗ꎬ发现其茎长、茎粗、重量
等表型性状存在显著差异ꎮ 魏刚等
[12]
基于 HPLC 特
录 [2] ꎬ具有益胃生津ꎬ 滋阴清 热、 抗 癌 防 老 等 功 效ꎮ
早在« 神农本草经» 中铁皮石斛药材就被列为上品ꎬ
道家医学经典« 道藏» 将其列为“ 中华九大仙草” 之
首ꎬ民间称之为“ 救命仙草” ꎮ 现代药理研究表明铁
收 稿 日 期:2019 - 06 - 19ꎬ录用日期:2019 - 07 - 03
第 38 卷第 5 期
2019 年 10 月
Vol. 38 No. 5
October. 2019
中国野生植物资源
Chinese Wild Plant Resources
doi:10. 3969 / j. issn. 1006 - 9690. 2019. 05. 016
铁皮石斛产品质量影响因素分析及发展对策
产品品质检验不力ꎬ严重影响产品质量ꎬ混乱的产品
价格直接影响消费者对产品的认可ꎮ 研究表明ꎬ品种
铁皮石斛生产栽培及产业化可行性调研报告样本

老式珍稀中草药铁皮石斛生产栽培及产业化可行性调研报告一、铁皮石斛概况铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo) (干品称铁皮枫斗)又名铁吊兰(兰科),属国家二级保护植物,是中药石斛中贵重品种之一,因表皮呈铁绿色而得名;其重要成分具备独特保健与药用价值,被道家养生典型著作《道臧》誉为“中华九大仙草之首”。
在国内,自然分布于浙江、安徽、福建、湖南、广西、四川和云南等地人迹稀少,悬崖峭壁背阴处石缝里,长年饱受云雾雨露滋润,生长期为3-5年,自然产量很少。
是一种及其名贵、药食同源滋阴补品。
因其生存生态条件十分特殊、苛刻,自然繁殖率极低,人间难得一见,兼以饱吸天地日月云雾雨露之精华,有着起死回生神奇功能,故有“救命仙草”之称。
自古以来,皇宫贵族、达观贵人都以铁皮枫斗作为养生长寿极品。
古语云:“北有人参,南有枫斗”,除此之外,铁皮石斛尚有“药中黄金”、“药界大熊猫”“救命仙草”等美誉,足见其在人们心目中地位。
曾经,越共中央主席胡志明病危,在周总理亲子批示下,国内派出了最强医疗专家组前去救治,医疗队当时就携带了名贵中药铁皮枫斗;国内知名数学家陈景润因帕金森病长卧不起,生活不能自理,经服用铁皮石斛,病情曾明显得到好转;1958年京剧大师梅兰芳曾祈求安徽省关于部门代购铁皮石斛,知名梅戏演员严凤英常服用铁皮枫斗以保嗓音。
当代医学和中医药理研究表白,铁皮石斛有效成分重要为石斛碱、石斛多糖、氨基酸等生物活性成分,能明显提高机体免疫功能,具备滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗衰老、防治肿瘤、治疗糖尿病和萎缩性胃炎等多重功能,对烟酒、劳累、夜生活、用眼用脑过度人群及声带嘶哑者有恢复作用。
二.发展铁皮石斛种植符合国家产业政策铁皮石斛是附生兰,生长在树干上或附生在石头上,生境特殊,同步它种子非常细小,没有胚乳,不含可供种子萌发和幼苗生长营养成分,在自然界普通不会萌发,因而繁殖率极低。
长期来铁皮石斛药材靠野生采集,无节制采挖导致自然资源枯竭,故野生铁皮石斛已成为濒危野生药材品种。
铁皮石斛育种方案

铁皮石斛育种方案简介铁皮石斛(Dendrobium officinale)是一种名贵的药用植物,被广泛应用于中药材市场。
然而,由于自然生长的限制和野生资源的枯竭,如何进行高效的铁皮石斛育种成为了亟待解决的问题。
本文将介绍一种铁皮石斛育种方案,以帮助农民和研究人员提高铁皮石斛的产量和质量。
1. 选择亲本在铁皮石斛育种中,选择合适的亲本非常重要。
首先,选取具有高产和高品质特征的优良品种作为亲本,这将有助于提高后代植株的质量。
同时,还可以通过亲本的杂交组合,遗传基因的不同组合可能导致新品种的改良。
2. 杂交交配铁皮石斛的杂交交配是育种的关键步骤之一。
在进行杂交交配时,应注意选择适当的花序和花粉。
通常,选择花序完全开放但未脱落的花,用较软的画笔收集花粉,并将其涂抹在柱头上。
根据花粉和柱头的亲和性,可以通过人工授粉的方法来实现。
3. 实施灭胚处理在铁皮石斛的育种中,实施灭胚处理可以有效地提高幼胚的发育率。
灭胚处理可以采用胰蛋白酶、过氧化氢或其他适当的处理方法。
通过合理的灭胚处理,可以显著提高种子的形成率和发芽率,从而提高育苗的效率。
4. 利用组织培养组织培养是铁皮石斛育种中的重要技术手段之一。
可以通过离体培养的方法,将铁皮石斛的不同组织进行快速繁殖和繁育。
利用组织培养技术,可以大幅提高育苗的效率,缩短育苗期,同时也有助于筛选出具有优良性状的新品种。
5. 选择最佳栽培条件为了实现铁皮石斛的高产和高质量,选取最佳的栽培条件非常重要。
首先,要选择合适的种植基质,提供充足的营养和水分供给。
其次,要注意铁皮石斛的光照和温度条件,根据其生长习性进行调整。
此外,还需要合理施肥,及时疏除杂草和防治病虫害,以确保良好的生长环境。
6. 优化采收和加工铁皮石斛的采收和加工环节对最终产品的质量影响很大。
要选择合适的采收时机,一般在花朵即将开放的阶段采摘。
采摘后,应迅速进行加工,将铁皮石斛进行烘干或其他适当的处理,以保持其药用成分的完整性和稳定性。
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化

14 数 据分 析 .
在分别观察试管苗鲜重 、 假鳞茎 、 颜色 、 株高和根系生长状况 的基础上 , 给每个指标赋值( 满分为 l 0 分) 然后根据性状的重要性 , , 给每个指标赋予一定的权重( 鲜重 3 %、 5 假鳞茎 2 %、 0 颜色 1 %、 5 株高 1% 、 5 根系 1%)最后将每个处理所得总分进行汇总 , 5 , 对不 同处理所得总分进行 比较. 数据运用 D S I 软件进行
基上 , 每瓶接种 5株, 一个处理组合共接种 1 , O瓶 各 处理重复 2次. 培养 9 后 观察统计试 管苗 的鲜 0d
重 、 势和根 系生 长状 况. 长 13 培 养条 件 . 每升 培养基添加 琼脂, 调至 4 g p H ・ ・
原球茎增殖 、 分化和壮苗生根的培养条件均为: 光照强度 10 , 50I 光照时间 1 d 培养温度 (5 x 2h・ ~, 2
do/ cniu E a an epat f m f s e h,psuo u ,cl r d t n o ,ters t so e a e rb m ddm. vl t gt l s r ehw i t eedb l o u ,h g ,adr t h eu s hw d t th u a u i h n o r g b o h os l h t
Ab ta t h rto n fD n rba , 6 a dDed o /m 口 d c n ev dfr5y asw r sd a emaeih o e sr c :T epoo m o e d o b n l 如 n n rbu c n 矗 帆 o s re o o e r eeue 8t tta frt h h
第1 期
李璐等 : 春石斛 和铁皮 石斛试管苗壮苗生根条件 的优化
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月增殖 系数
苗平均 高度
/ cm
苗生长状况
1160 3122 苗有黄化现象
1165 3125 苗有黄化现象
1185 3115 苗有黄化现象
1190 2180 苗有黄化现象
3155 3165 正常
1195 2110 苗有黄化现象 ,矮生
1185 3120 苗有黄化现象
1190 3145 苗有黄化现象
3125 3150 正常
黄芩为典型的阳生植物 ,对光照的适应性较强 ,
强光和弱光均可有效利用 。栽培黄芩宜选择光照条 件好的地块 ,并适当加大种植密度 ,提高黄芩产量 。
参考文献
[ 1 ] 金则新 ,等 1云锦杜鹃叶片光合作用日变化特征 1植物 研究 , 2004, 24 (4) : 44724521
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112 培养基配方 初代培养基为 M S或 N6 添加 62苄基 氨 基 嘌 呤 ( 62BA ) 、萘 乙 酸 (NAA ) 、椰 子 汁 (CM ) 、活性碳 (CA ) 。增殖培养基为 N6 添加 62BA、 NAA、CM、土豆提取物 ( Pt) 。生根培养基为 1 /2M S 添加 Pt、香蕉提取物 (Bn) 。培养基均加入卡拉胶 017% , pH 514,常规灭菌 。培养的条件为 25 ±1℃、 1800 lux 12 h。 113 试管苗移栽 将生根试管苗移栽于基质 :水 苔 、松树皮与碎石 、蛇木与碎石 、花生壳与碎石 。常
表 4
不同配方原球茎增殖情况
培养基 代号
激素及添加物组成
原球茎 平均初 重 / ( g)
原球茎 平均终 重 / ( g)
增长率 / (%)
ZA6
6 2BA 210
2180 4176
70
ZA7
62BA015 + NAA110
2165 5183
120
ZA9
62BA012 + NAA015 + CM 10%
表 3
不同培养基的丛芽增殖效果
培养基 代号
ZA1 ZA2 ZA3 ZA4 ZA5 ZA6 ZA7 ZA8 ZA9
ZA10
激素及添加物组成
62BA012 +NAA012 62BA015 +NAA015 62BA110 +NAA015 62BA210 +NAA015 62BA210 +NAA015 + CM 10% 6 2BA 210 62BA015 +NAA11 +NAA015 + CM 10% 62BA012 +NAA015 + CM 10% + Pt5%
是短缩的芽 ,对兰科植物的快速繁殖具有重要的意
义 ,其繁殖速度是丛芽增殖方式的几十倍 。由于原
球茎的聚集成团很难计数 ,采用称重的方法来判断
原球茎的增殖情况 。从表 4 显示 , ZA9 的原球茎增
长率达 260% ,以较低激素浓度表现较好的效果 ,添
加椰子汁对原球茎的增殖有重要作用 ,而加入马铃
薯汁却起抑制作用 。
常明显地表现出 :在未加椰子汁的各培养基 ,丛芽月
增殖系数维持在 116 ~1195 之间 ,且苗出现黄化现
象 ,部分基部叶片脱落 。凡加入椰子汁 ( ZA5、ZA9、 ZA10) ,不会发生黄化现象 ,并且月增殖系数维持在
312~3155的较高增殖水平 ,苗的生长也明显优于 其它配方 ,以 ZA5表现出的效果最理想 。
试验还观察到遮光有利于胚的萌发 。胚萌动 时 ,可见颗粒状的细胞块 ,应该尽早转入光条件下培 养 ,使萌动的胚由浅黄色转为绿色 ,以促进芽分化或 者原球茎增殖 ,否则胚萌发后易出现白化现象而导 致死亡 。
表 2 不同培养基上铁皮石斛种胚萌发情况
培养基 代号
激素组成
萌发 时间 (天 )
萌发 情况
原球茎 比例
陶汉之 [ 5 ]对茶树的光合作用的研究发现 ,净光 合速率和气孔导度的变化没有平行关系 ,不呈明显 正相关 。梁红柱 [ 6 ]等人研究证明 ,砂仁叶片净光合 速率与气孔导度的变化一致 ,呈正相关 ,与胞间 CO2 浓度呈负相关 。本研究表明 ,自然条件下 ,黄芩净光 合速率与光合有效辐射 、蒸腾速率 、气孔导度呈正相 关 ,与胞间 CO2 浓度呈负相关 ,与相对湿度的相关 性不显著 。 4 小结
关键词 铁皮石斛 ;种胚 ;茎段 ;组织培养 ;产业化生产 中图分类号 : R28212 文献标识码 : B 文章编号 : 100124454 (2006) 0620533203
铁皮石斛为珍贵的野生药用植物 ,附生在高海 拔的悬崖峭壁 ,或林内树干上 ,自然产量极少 ,更因 长期采挖 ,致使野生资源濒临绝种 。目前 ,必须通过 人工育苗和种植才能满足国内外市场的需要 。采用 组织培养技术已有报道 ,但是真正运用于生产 ,能够 产生规模效益的却为数不多 。主要是因为铁皮石斛 试管种苗移植成活率太低 ,成为种苗产业化生产的
·533·
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111 外植体建立 取温室盆栽的铁皮石斛一年生 茎段 ,清水冲洗 ,摘去叶片及膜质叶鞘 ,用少量加酶 洗衣粉水浸泡约 30 m in,清水冲洗后 ,再经 70%酒 精 1 m in→5% ~10%次氯酸钠 8~10 m in→无菌水 冲洗三次 →无菌滤纸吸干 。将脱菌后的茎段切成 1 ~2 cm 的带节茎段接种于初代培养基 。种胚外植 体建立程序 :成熟蒴果 →清水冲洗 →70%酒精 8 m in →稍干 →切开蒴果均匀播种于初代培养基 。
规管理 ,湿度保持 75~90% ,先高湿后低湿 ;光照控
制 1800~5000 lux,先弱光后强光 。
2 结果与分析
211 外植体茎段及初代培养 茎段芽在不同的培
养基上萌发及不定芽再生见表 1。不添加激素的配
方无论是否添加椰子汁 (CA1、CA2) ,芽的萌发时间
明显长于添加激素的配方 ( CA3 ~CA9 ) ,苗的生长
“瓶颈 ”。本文报道铁皮石斛试管苗的生产多年研 究结果 。 1 材料与方法
铁皮石斛 D ed robium cand idum W all1 ex L indl母 本引自浙江天台市 ,种植于温室花盆内 。用于组织 培养的茎段为一年生茎 ;蒴果则取自人工异株授粉 后培育的成熟果实 。
基金项目 :广东省 2005年社会发展科技资助项目 ;汕头市 2005年科技资助项目 作者简介 :廖俊杰 ,男 ,副研究员 , Email: junjie 33 @ golgy. edu. cn。 3 通讯作者 :李进进 中药材第 29卷第 6期 2006年 6月
铁皮石斛试管种苗产业化生产的技术因素分析
廖俊杰 1 ,许继勇 2 ,李进进 13 ,麦瑜玲 2 ,徐清华 1 ,周爱芳 1 (11广东轻工职业技术学院食品与生物工程系 ,广东广州 510300; 21汕头市中蔬花卉有限公司 ,广东汕头 515041 )
摘要 目的 :研究铁皮石斛组织培养及栽培过程中的重要技术因素 。方法 :用铁皮石斛的茎段及种胚组织培 养物 ,测定试管苗的分化 、生根与生长状况 。结果 :通过胚培养了原球茎产生 ,通过茎段培养获得了丛生芽 ;在适当 激素配比的基础上 ,椰子汁对促进芽的分化 、丛芽及原球茎的增殖 ,香蕉提取物对促进苗的生根与生长起到重要的 作用 。结论 :掌握铁石皮斛组织培养的关键技术要素可实现种苗产业化生产 。
[ 3 ] 许大全 ,等 1光合作用的限制因素 1见 :余叔文 、汤章城 编 1植物生理学和分子生物学 (第二版 ) 1北京 :科学出 版社 , 1999, 26222761
[ 4 ] 宋建民 ,等 1 中午强光胁迫下高蛋白小麦旗叶的光合 特性 1 植物生理学报 , 1999, 25 (3) : 20922131
速度也较慢 ;加入不同浓度的 62BA 和 NAA 后 ,促进
了茎段萌发 ,且随着 62BA 浓度升高 ,侧芽萌发时间
显著 缩 短 , 芽 的 数 量 增 加 , 62BA 的 浓 度 增 加 至
2 mg /L时 (CA4) ,虽然芽的数量增加但萌发的时间
推迟 ,只有在增加 62BA 浓度的同时配合 NAA 达到
境 ,是典型的阳生植物 。 312 光合作用是植物十分复杂的生理过程 。关于 产生光合“午休 ”的原因 ,有研究者认为 ,在中午时 分 ,气温高 、蒸腾速率强 ,叶片水分减少 ,气孔关闭 , 造成光合作用原料即胞间 CO2 浓度降低 ,净光合速 率下降 [ 2 ] ;也有认为 ,可能是在睛天长时间高光强 下 ,发生光抑制 [ 3 ]和光呼吸加强 [ 4 ] ,从而导致净光 合速率下降 。黄芩出现光合“午休 ”现象是生态环 境因子综合作用的结果 。
3120 3155 正常
中药材第 29卷第 6期 2006年 6月
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
214 原球茎增殖 由种胚产生的原球茎 ,实际上
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212 无菌播种与有性胚的萌发 无菌播种是建立 外植体的另一个方法 。成熟蒴果 ,播种于培养基上 , 30天统计种胚萌发及及其原球茎发生比例 (见表 2) 。以 62BA 或椰子汁的加入会缩短胚的萌发时 间 ,提高胚的萌发率 ,尤以 SA5 培养基的萌发时间 短 、萌发率高 。在自然条件下兰科植物的胚很难萌 发 ,必须借助共生菌提供营养和产生的激素才能顺 利萌发 。从表中还可以看出 ,胚萌发后 ,有的胚直接 出芽成苗 ,有的胚则分化出原球茎 。添加 62BA 及 NAA 会促进原球茎的分化 ,但椰子汁对原球茎的分 化作用更大 。原球茎的获得对铁皮石斛在较短时间 内的组培扩繁更有意义 。