狂犬病诊断标准及处理原则
狂犬病的实验室诊断
以提取的RNA为模板，进行逆转录聚合酶链式 反应（RT-PCR），扩增病毒特异性基因片段， 从而判断标本中是否存在狂犬病毒。
标本保存和运输要求
低温保存
标本应保存在-70℃以下的超低 温冰箱中，以确保病毒的活性 和稳定性。
避光保存
避免标本长时间暴露在光线下 ，以免影响病毒活性。
密封运输
02
预防和控制狂犬病需要政府、社会和个人的共同努力，包括加
强疫苗接种、提高公众认知、加强动物管理等措施。
通过有效的预防和控制措施，可以保护人类和动物的健康，维
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护社会公共卫生安全。
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实验室诊断方法概述
实验室诊断目的和意义
确诊狂犬病感染
通过实验室诊断方法，可以准确检测狂犬病病毒的 存在，从而确诊狂犬病感染，为临床治疗提供依据 。
实验室空气、表面和水源等也 应定期进行消毒处理，以减少 环境中病原体的传播风险。
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血清学检测方法
酶联免疫吸附试验
原理
将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行， 通过洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后根据酶作用于底物后显色来判断结果。
应用
ELISA法可用于检测狂犬病病毒抗原、抗体等，具有灵敏度高、特异性强、操作简便、 可批量检测等优点。
注意事项
操作过程中需注意避免交叉污染，设置阴阳性对照，严格控制反应条件等。
荧光抗体技术
原理
用荧光物标记抗体，与待测标 本中的相应抗原或抗体结合， 形成带荧光的抗原抗体复合物 ，在荧光显微镜下观察荧光以 判断结果。
应用
荧光抗体技术可用于狂犬病病 毒的快速诊断和病原学研究， 具有灵敏度高、特异性强、直 观快速等优点。
狂犬病应急处置技术处理方案
狂犬病应急处置技术方案（试行）1. 前言狂犬病是由狂犬病毒引起的人畜共患传染病， 是迄今为止人类病死率最高的急性传染病。
近年 以来，我国狂犬病疫情呈上升趋势，病死率高居各类法定报告传染病首位。
目前我省狂犬病疫情、 疫区有所扩大， 疫情形势十分严峻， 我市近几年也是有疫情发生， 对群众的生命安全构成严重威胁， 为了加强应急控制工作，特制定本方案。
2. 诊断标准见《传染病诊断标准汇编》 3. 分级标准根据狂犬病发生的病例数、流行的范围和趋势， 将狂犬病疫情划分为四级， 即：一般（ IV 级）、 较大（ III 级）、重大（ II 级）和特别重大（ I 级），具体分级标准如下：3.1 一般疫情 （IV 级 ）：1 个月内，本市范围内出现狂犬病疫情 2-3 例，或发生动物间狂犬病疫 情。
3.2较大疫情（川级）:1个月内，本市范围内出现狂犬病疫情 镇 （乡、街道 ）。
3.3重大疫情（H 级）:1个月内，本市范围内出现狂犬病疫情 例，但扩散至毗邻县 （市、区 ）。
3.4 特别重大疫情 （I 级）: 1 个月内，本市范围发生狂犬病疫情 势。
4. 应急措施按照《咸阳市疾病预防控制中心突发公共卫生事件应急预案》要求，分级进行应急处置。
4.1 报告4.1.1 接报:实行“首接负责制” ，接报时详细填写《突发公共卫生事件报告记录卡》 。
4.1.2 报告:按照《咸阳市疾病预防控制中心突发公共卫生事件应急预案》 “内部报告”和“对 外报告”的要求进行疫情报告。
4.1.3 网络报告⑴医疗机构收治的确诊病例、临床确诊病例、疑似病例，由医疗机构负责网络直报;病例调查登记表》等。
4.2.2 采样检测物品：酒精棉球、消毒棉签、灭菌玻璃瓶、一次性注射器、螺口试管、一次性 手套、止血4-5 例，或疫情波及 3 个及以上 6-10 例，或发病数虽未达到 1020 例以上，并有进一步扩散趋⑵现场流行病学调查过程中发现的确诊病例、 直报;⑶经现场流行病学初步调查确认为暴发疫情后， 络报告。
狂犬病的实验室检测与诊断技术
狂犬病的实验室检测与诊断技术武汉生物制品研究所基因工程室严家新研究员一、狂犬病实验室检测与诊断技术的用途1. 狂犬病人存活期内的实验室诊断：目前尚无实验室方法可确认处于潜伏期的狂犬病人。
对可能感染狂犬病毒而尚未发病（即处于潜伏期）的人应尽快接种狂犬病疫苗，必要时还要同时接种抗血清。
国外文献上比较可靠的研究结果已证明，狂犬病的潜伏期可能超过6年。
狂犬病疫苗在暴露后接种越快越好，但只要是在发病前，接种疫苗都会有保护作用，补种疫苗可以说没有时间限制。
狂犬病人一旦发病，其死亡率为100%。
病人在发病后最初几天，检测狂犬病毒的抗原一般是敏感的，常可在其唾液、角膜印片、尿液或皮肤中检出病毒抗原。
检测抗原可用荧光抗体（FA）法检查。
但是，FA阳性标本在发病的后期更常见。
皮肤活组织检查最好从颈背部取含有末稍神经的带有毛囊的标本。
出现早期症状时检测抗原，仅有25-50%的患者为阳性；随着病情的进展阳性率也增加。
而脑脊液及血清中的病毒中和抗体常常趋向于在病后7—10天才出现。
但在国内护理条件下，狂犬病人发病后，很少能维持生命7天以上。
2. 动物和人狂犬病的死后诊断：可用抗原检测、病毒分离、病毒鉴定等方法进行死因确诊和病毒来源、演化分析。
3. 测定狂犬病毒的抗体:主要用于确定人或动物接种狂犬病疫苗是否成功。
W H O狂犬病专家委员会认为大于或等于0.5 IU/ml的抗体水平表示免疫接种成功，能得到有效的保护。
前段时间国内因狂犬病疫苗假冒伪劣产品猖獗，而狂犬病疫苗的质量又是性命攸关的事，疫苗接种者主动要求在疫苗接种后测抗体的越来越多，这是可以理解的。
但只要疫苗的质量和供货渠道（包括保存条件）可靠，通常并不要求每个接种者都检测抗体。
因为除非接种者本身可能有免疫功能方面的异常，合格疫苗的抗体阳转率应为100%。
二、狂犬病的实验室检测与诊断的必要性典型的狂犬病的临床表现十分典型，但也有约40%的狂犬病例属瘫痪型，其表现并不典型，很容易与其他疾病混淆，所以实验室检测手段对狂犬病的确诊非常必要。
狂犬病应急处置技术方案(试行)
***狂犬病应急处置技术方案（试行）1.总则1.1背景狂犬病是由狂犬病毒引发的人畜共患传染病，是迄今为止人类病死率最高的急性传染病。
近年以来，我国狂犬病疫情呈上升趋势，病死率高居各类法定报告传染病首位。
目前我县狂犬病疫情、疫点、疫区有所扩大，疫情形势十分严峻，特制定本应急处理技术方案。
1.2目的为确保本县一旦发生狂犬病暴发疫情，能迅速查清疫源，并及时采取有效措施控制和扑灭疫情。
1.3工作原则狂犬病暴发疫情的应急处理工作，应贯彻“预防为主”的方针，坚持“统一指挥，依法管理，分级负责，科学应对，快速处置”原则。
1.4编制依据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》、卫生部《狂犬病暴露后处置工作规范（试行）》、《狂犬病诊断标准及处理原则（GB17014-1997）、《狂犬病防治手册》、《消毒技术规范（第三版）》、《全国狂犬病监测方案》和《浙江省狂犬病监测方案》1.5适用范围本方案适用于本县区域涉及狂犬病暴发、流行、控制与处理的各项工作。
2.分级判定I级（红色预警））：1个月内，有2个以上县（乡镇）发生狂犬病疫情20例以上，或发病水平超过过去5年同期平均水平2倍以上的；Ⅱ级（橙色预警））：1个月内，同一县（乡镇）内发生狂犬病10例及以上，或发病数虽未到20例，但扩散至毗邻县；Ⅲ级（黄色预警））：1个月内，1个县（乡镇）发生狂犬病3例及以上，或同一县内超过2个乡、镇发生疫情，病例数在10例以下的，或发生动物间狂犬病疫情的。
Ⅳ级（蓝色预警））：1个月内，1个县（乡镇）发生狂犬病少于3例的或发生动物间狂犬病疫情。
3.应急响应县疾控中心根据狂犬病疫情提出预警报告，报请县卫生局研究决定，由县卫生局报请县政府研究决定，启动应急响应。
依据有关法律法规，报请省卫生厅，统一向社会发布疫情信息。
应急响应的变更与终止程序与启动程序相同。
3.1分级响应3.1.1 Ⅰ级（红）的响应（1）由省卫生厅或省政府成立指挥部，统一负责狂犬病应急疫情控制工作的组织、指挥、协调。
狂犬病诊断标准
狂犬病诊断标准1．流行病学史有被犬、猫或其他宿主动物舔、咬、抓伤史。
2．临床症状2．1愈合的咬伤伤口或周围感觉异常、麻木发痒、剌痛或蚁走感。
出现兴奋、烦躁、恐惧，对外界刺激如风、水、光、声等异常敏感。
2．2“恐水”症状，伴交感神经兴奋性亢进（流涎、多汗、心律快、血压增高），继而肌肉瘫痪或颅神经瘫痪（失音、失语、心律不齐）3．实验室检查3．1免疫荧光抗体法检测抗原：发病第一周内取唾液、鼻咽洗液、角膜印片、皮肤切片，用荧光抗体染色，狂犬病病毒抗原阳性。
3．2存活一周以上者做血清中和试验或补体结合试验检测抗体、效价上升，曾接种过疫苗者其中和抗体效价需超过1：5000。
3．3死后脑组织标本分离病毒阳性或印片荧光抗体染色阳性或脑组织内检到内基氏小体。
4．病例分类4．2确诊病例:具备加3.3的任一条.狂犬病知识热点问答什么是狂犬病?狂犬病是由狂犬病毒引起的一种急性传染病，人兽都可以感染，又称恐水病、疯狗病等。
狂犬病毒主要在动物间传播。
该病主要是通过动物咬人时牙齿上带的唾液中的狂犬病病毒侵入人体而受到感染。
狂犬病一旦发病，其进展速度很快，多数在3-5天，很少有超过10天的，病死率为100%。
被狂犬咬伤，就肯定要得狂犬病吗？答：不一定，有学者统计发现就是被真正的狂犬或其它疯动物咬伤，且没有采取任何预防措施，结果也只有30%－70%的人发病。
被狂犬咬伤后是否发病有很多影响因素：1.要看进入人体的狂犬病毒的数量多少，如果疯狗咬人时处于发病的早期阶段，它的唾液中所带的狂犬病毒就比处于发病后期时少；2.咬伤是否严重也影响被咬的人是否发病。
大面积深度咬伤就比伤口很小的浅表伤容易发病；3.多部位咬伤也比单一部分咬伤容易发病，且潜伏期较短。
4.被咬伤后正确及时的处理伤口，是防治狂犬病的第一道防线，如果及时对伤口进行了正确处理，和抗狂犬病暴露后治疗，则可大大减少发病的危险。
5.通过粘膜感染发病较咬伤皮肤感染发病难，而且病例较多呈抑郁型狂犬病。
狂犬病的诊断与治疗
狂犬病的诊断与治疗⏹2007年，在国际狂犬病控制联盟的倡议下，世界卫生组织、世界动物卫生组织及美国疾病预防控制中心等共同发起了“世界狂犬病日”，各国纷纷开展相应宣传活动，“共同努力，使狂犬病成为历史”。
概述⏹狂犬病是由狂犬病毒引发的急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，是人畜共患的急性传染病。
因其有恐水特征，故又名恐水症，它是目前病死率最高的疾病。
⏹1881年法国巴斯德认为本病的病原体是极小的生物，1903年Negri在狂犬病人尸脑部发现了包涵体，并命名为Negri小体，直至现在仍然是诊断狂犬病的标准之一。
病原学⏹狂犬病毒于1962年首次在电镜下被发现，一年后，对其形态结构进行了描述。
随后在鸡胚组织、神经组织中增殖成功。
⏹狂犬病毒属弹状病毒科拉沙病毒属，大小约75×180nm，病毒中心为单股负链RNA，狂犬病毒是拉沙病毒属的典型种。
从感染动物或病人中发现的狂犬病毒称野毒株或街毒，街毒经过系列传代称固定毒。
⏹根据对不同毒株的血清学反应和单克隆抗体分析，将狂犬病毒分为5个血清型：⏹1血清Ⅰ型：为典型的狂犬病毒标准攻击毒株；⏹2血清Ⅱ型：拉哥斯蝙蝠病毒，从非洲分离到，包括6个亚型；⏹3血清Ⅲ型：马可拉原型株，在非洲分离出，包括5个亚型；⏹4血清Ⅳ型：杜文海格原型株，首先从南非分离到，以后从南非和中欧的蝙蝠中分离到，含有8个亚型；⏹5血清Ⅴ型：欧洲蝙蝠狂犬病毒。
流行病学(一)传染源⏹病犬仍是狂犬病的主要传染源，其它传染源还有猫、狼、狐、獾、熊、臭鼬、蝙蝠等动物。
近年来对世界上54个国家和地区狂犬病报告的综合分析表明，因犬所致的狂犬病占57％，野生动物所致占33％，因蝙蝠所致占10％。
⏹国内由狂犬传播者约占80％一90％，其次是猫、猪及牛、马等家畜和野兽如狼、狐、狗獾等温血动物。
狂犬病的主要传染源⏹区域主要宿主⏹亚洲狗，猫，猫鼬，⏹非洲狗，豺，猫鼬，狐狸⏹拉丁美洲狗，蝙蝠⏹北美洲臭鼬，浣熊，狐狸，蝙蝠⏹加勒比海地区猫鼬⏹西欧狐狸，蝙蝠⏹东欧狐狸，狗几乎所有的温血动物都可以感染狂犬病。
《狂犬病暴露预防处置工作规范(2023年版)》解读课件
疫苗使用中的常见问题及处理方法
常见问题
如接种后仍发生狂犬病暴露，或出现过敏反应等。
处理方法
如发生再次暴露，可在医生的指导下进行加强针接种；如出现过敏反应，应 立即就医，遵医嘱进行抗过敏治疗。
05
规范实施与监督
规范实施方案
确定目标
规范实施的目标是确保狂犬病暴露预防处置工作的标准化和规范化，以降低狂犬病的发生 风险。
狂犬病的传播途径
动物咬伤或抓伤
狂犬病病毒可通过动物咬伤或抓伤人类皮肤或粘膜而传播，这是 最常见的传播途径。
唾液污染伤口
狂犬病病毒可在唾液中保持活性，当人类皮肤或粘膜有伤口或破 损时，若接触到被狂犬病病毒污染的唾液，可能被感染。
其他传播方式
狂犬病病毒还可通过其他途径传播，如通过污染的器械、使用污 染的血液制品以及母婴传播等。
制定实施细则
根据《狂犬病暴露预防处置工作规范(2023年版)》的要求，制定具体的实施细则，包括诊 断标准、处置流程、疫苗接种方案等。
培训与宣传
开展对医务人员和公众的培训和宣传工作，提高他们对狂犬病暴露预防处置工作的认识和 重视程度。
监督与评估
01
监督机制
建立监督机制，对狂犬病暴露预防处置工作进行全程监督，确保规范
01
卫生部关于印发《狂犬病预防控制技术指南(2016版)》的通知
02
农业部关于印发《犬产地动物疫病强制免疫方案(2021版)》的
通知
国家质检总局关于印发《出入境动物检疫采样管理办法》的通
03 知
THANKS
谢谢您的观看
3
尽管有治疗手段，但预防是更为重要的控制措 施。
暴露预防处置工作的重要性
暴露预防处置工作是防止狂犬病传播的关键环节 。
狂犬病诊断标准（WS281-2008）
狂犬病诊断标准（WS281-2008）狂犬病诊断标准（WS281-2008）1范围本标准规定了狂犬病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级医疗卫生机构及其工作人员对狂犬病的诊断、报告。
2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
2.1狂犬病街毒street virus自然状态下从感染动物或患者中发现的狂犬病病毒。
2.2 狂犬病实验室固定毒 fixed virus狂犬病街毒株经过动物或细胞系列传代适应特定宿主后，其致病性减弱。
3诊断依据3.1流行病学史有被犬、猫、野生食肉动物以及食虫和吸血蝙蝠等宿主动物咬伤、抓伤、舔舐黏膜或未愈合伤口的感染史。
3.2临床表现3.2.1狂躁型狂躁型是我国最常见的类型。
主要表现有：在愈合的伤口及其神经支配区有痒、痛、麻及蚁走等异常感觉，以后出现高度兴奋、恐水、怕风、阵发性咽肌痉挛和交感神经兴奋症状如流涎、吐沫、多汗、心率加快、血压增高等。
逐渐发生全身弛缓性瘫痪，最终因呼吸、循环衰竭而死亡。
3.2.2麻痹型麻痹型在我国较为少见。
临床表现为：前驱期多为高热、头痛、呕吐及咬伤处疼痛等，无兴奋期和恐水症状，亦无咽喉痉挛和吞咽困难等表现。
前驱期后即出现四肢无力、麻痹症状，麻痹多开始于肢体被咬处，然后里放射状向四周蔓延。
部分或全部肌肉瘫痪，咽喉肌、声带麻痹而失音，故称“哑狂犬病”。
3.3实验室检查3.3.1 直接荧光抗体法(dFA)（见A．1）或ELISA（见A．2）检测患者唾液、脑脊液或颈后带毛囊的皮肤组织标本中狂犬病毒抗原阳性，或用RT-PCR(见A．3)检测狂犬病病毒核酸阳性。
3.3.2细胞培养方法（见A．4）从患者唾液、脑脊液等标本中分离到狂犬病病毒。
3.3.3脑组织检测尸检脑组织标本，用直接荧光抗体法(dFA)（见A．1）或ELISA （见A．2）检测狂犬病病毒抗原阳性、RT-PCR(见A．3)检测狂犬病病毒核酸阳性、细胞培养方法（见A．4）分离到狂犬病病毒。
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《狂犬病诊断标准及处理原则》内容简介：补充水电解质及热量，纠正酸碱平衡失调；对烦躁不安、痉挛者轮流使用各种镇静剂，如安定、苯巴比妥、水合氯醛及冬眠药物等。
有脑水肿给脱水剂。
防止呼吸肌痉挛导致窒息，必要时作气管切开，间歇正压给氧。
有心动过速、心律失常、血压升高时，可用β-受体阻滞剂或强心剂。
《狂犬病诊断标准及处理原则》内容预览：A2 伤口处理
立即用20%的肥皂水或清水彻底清洗所有伤口和搔伤处，反复冲洗至少20min,再用75%乙醇或2%碘酒涂擦。
如创伤深广、严重或发生在头、面、手、颈等处，皮试阴性后可在创伤处做高效免疫血清浸润注射。
伤口在数日内暂不缝合。
也可酌情应用抗生素及破伤风抗毒素。
A3 疫苗接种
目前，我国所应用的人用狂犬病疫苗为狂犬病固定毒（aG）适应株，接种于原代地鼠肾单层细胞，培养后收获病毒液，加入甲醛溶液灭活后经浓缩3——5倍，再加氢氧化铝制成。
A3.1 接种对象
凡被狂犬病或其他疯动物咬伤、抓伤时，应及时注射本疫苗。
A3.2 用法
A3.2.1 一般咬伤者于0（第1天，注射当天）、3（第4天，以下类推）、7、14、30天各注射疫苗1安瓿（液体疫苗2mL,冻干疫苗1mL或2mL），儿童用量相同。
严重咬伤者，除按上述方法注射疫苗并应于0、3天注射加倍量疫苗，并于0天注射疫苗的同时合用抗狂犬病血清（伤口处理已述）。
凡联合使用抗狂犬病血清者必须在全程疫苗注射完毕后再注射2——3针加强针，即在全程注射后第15、75或10、20、90天加强。
A3.2.2 在三角肌注射。
A4 抗狂犬病免疫血清的应用
A4.1 凡已知确系狂犬或其他患狂犬病动物舔咬者必需在注射疫苗的同时注射抗狂犬病血清或特异性免疫球旦白。